第四章

自動生化分析技術第四章

自動生化分析技術1自動生化分析技術是指機械化的儀器設備模仿代替手工操作，即把生化分析過程中的加樣、加試劑、混合、保溫反應、檢測、結(jié)果計算、數(shù)據(jù)處理和打印報告，以及實驗后的清洗等步驟自動化的分析檢測技術。特點靈敏準確快速節(jié)約標準化自動生化分析技術是指機械化的儀器設備模仿代替手工操作，即把生2

自20世紀50年代，第一臺生動生化分析儀問世→管道式自動生化分析儀第一節(jié)自動生化分析儀的類型自20世紀50年代，第一臺生動生化分析儀問世→管道式3根據(jù)儀器自動化程度

全自動化半自動化

半自動分析儀：分析過程中的部分操作需手工進行，而其他部分操作可由儀器自動完成。分析速度慢，適用于樣品數(shù)量少、檢驗項目少的小型醫(yī)院。

全自動分析儀：指從加樣至打印結(jié)果的全過程，均由儀器程序控制自動完成。適用于樣品數(shù)量多、檢測項目多、而且復雜的綜合性大醫(yī)院的臨床生化檢驗室應用。自動生化分析儀分類根據(jù)儀器自動化程度全自半自半自動分析儀：分析過4根據(jù)儀器結(jié)構和原理連續(xù)流動式（管道式）

離心式

分立式

干片式

根據(jù)儀器結(jié)構和原理連續(xù)流動式（管道式）離心式分立式干片5

連續(xù)流動式：各個樣品與試劑在同一管道內(nèi)連續(xù)流動時完成反應、顯色、比色、檢測過程，樣品間以氣泡、緩沖液或試劑空白相分隔。

分立式：各個樣品與試劑在各自反應杯內(nèi)完成反應、顯色、比色、檢測過程。

離心式：在離心力的作用下，各待測樣品幾乎同時與試劑混合、反應、檢測，屬于同步分析。

干片式：將測定一個項目所需的試劑固定在固相載體上，加上定量血清后，干片的背面即產(chǎn)生顏色反應，用反射光度計檢測便可進行定量分析。連續(xù)流動式：各個樣品與試劑在同一管道內(nèi)連續(xù)流動6根據(jù)儀器的測定速度小型自動生化分析儀中型自動生化分析儀

大型自動生化分析儀

超大型自動生化分析儀

根據(jù)儀器的測定速度小型自動生化分析儀中型自動生化分析儀大7根據(jù)開放程度封閉系統(tǒng)開放系統(tǒng)根據(jù)開放程度封閉系統(tǒng)開放系統(tǒng)8屬光學分析儀器，檢測原理基于物質(zhì)對光的選擇性吸收，一般工作波長340nm800nm，屬紫外-可見分光光度法。自動生化分析儀的工作原理自動生化分析儀的工作原理9一、半自動生化分析儀結(jié)構特點與設計原理

特點：體積小，結(jié)構簡單，靈活性大，價格便宜；一般不受試劑、方法的限制。工作原理：連續(xù)流動式分析，其流動管道中的特定位置有一微型比色杯稱為流動比色杯，無不同比色杯之間的吸光度差異。一、半自動生化分析儀結(jié)構特點與設計原理10注意事項：1.由于檢測所加試劑及樣品量都很少，要特別注意取樣和加試劑的準確性；2.使用過程中，嚴禁吸入強酸試劑；3.每次使用完畢，必須用蒸餾水沖洗比色杯和管道；4.做酶動力學檢測時，要特別注意起始的吸光度值，如果很低應考慮底物耗盡

注意事項：115.如反復多次吸入蒸餾水后，不能調(diào)整零點或吸光度不穩(wěn)，應使用清潔液浸泡比色池后再用水清洗；6.儀器若長時間不使用，應在一個月內(nèi)至少通電一次。5.如反復多次吸入蒸餾水后，不能調(diào)整零點或吸光度不穩(wěn)，應使用12二、全自動生化分析儀一、分立式分析儀目前臨床實驗室所用的大部分分析儀都屬于分立式，具有結(jié)構簡單、檢測速度快等優(yōu)點。日立7180型分析儀二、全自動生化分析儀一、分立式分析儀日立7180型分析儀13

吸樣加入第一試劑

攪拌

保溫

測試杯空白

清洗反應杯

數(shù)據(jù)處理

打印結(jié)果

比色分析加入第二試劑

攪拌

保溫全自動生化分析儀工作流程圖吸樣加入第一試劑攪拌14

分立式自動生化分析儀的結(jié)構包括：樣品盤（架）、取樣裝置、試劑室（瓶）、取液裝置、反應盤、混勻裝置、溫控裝置、光學監(jiān)測系統(tǒng)、清洗系統(tǒng)和計算機控制系統(tǒng)等。試劑盤2試劑盤1試劑針2試劑針1樣品針樣品盤反應盤攪拌器清洗裝置分立式自動生化分析儀的結(jié)構包括：樣品盤（架）、151.樣品盤或樣品架

樣品盤：放置一定數(shù)量的樣品，通過樣品盤的轉(zhuǎn)動來控制不同樣品的進樣。

樣品架：由步進馬達控制移動，以樣品架上的條形碼或底部編碼孔識別樣品架及樣品位置號。傳送條帶狀樣品架圓盤狀樣品架1.樣品盤或樣品架傳送條帶狀樣品架圓盤狀樣品架162.取樣裝置：由注射器、傳動泵、加樣臂和樣品探針等組成，能定量吸取樣品并加入到反應杯中。取樣容量：一般2μl-35μl交叉污染：在吸取不同樣品時可產(chǎn)生攜帶交叉污染防止措施：對樣品針內(nèi)外壁進行水沖洗2.取樣裝置：由注射器、傳動泵、加樣臂和樣品探針等組成，能定173.試劑室：存儲試劑，大多數(shù)試劑室具有冷藏裝置，條形碼檢測系統(tǒng)。（1）試劑轉(zhuǎn)盤式：放置一定形狀試劑瓶，數(shù)量不等，試劑盤轉(zhuǎn)動可使某個試劑瓶到達特定的試劑吸取位置。3.試劑室：存儲試劑，大多數(shù)試劑室具有冷藏裝置，條形碼檢測系18①③試劑②④條碼閱讀器（2）試劑架形式：放置大容量任意形狀的試劑瓶，由每個試劑瓶內(nèi)引出一條試劑管路及其噴嘴，不同試劑間無交叉污染①③試劑（2）試劑架形式：放置大容量任意形狀的試劑瓶，由每個194.取液裝置：用于定量吸取試劑加入反應杯。取試劑量：一般為20-380μl交叉污染：吸取不同試劑時可產(chǎn)生攜帶交叉污染防止措施：對樣品針內(nèi)外壁進行水沖洗特殊功能：液面感應防碰撞裝置預熱試劑4.取液裝置：用于定量吸取試劑加入反應杯。205.反應盤：由100只或更多的反應杯圍成一圈組成，有的分析儀具有兩圈反應杯

反應盤作恒速圓周運動，轉(zhuǎn)動到某些特定位置時短暫停止，在反應杯中加入樣品、試劑或進行攪拌混勻反應杯：是樣品與試劑進行化學反應的場所

由透光性好的硬質(zhì)玻璃或石英玻璃制成5.反應盤：由100只或更多的反應杯圍成一圈組成，有的分析儀216.混勻裝置：反應杯里的樣品與試劑需要混勻（1）混勻方式：攪拌混勻：用攪拌棒，多數(shù)超聲混勻：可杜絕攜帶污染，極大程度較少泡沫產(chǎn)生防交叉污染：水洗6.混勻裝置：反應杯里的樣品與試劑需要混勻227.恒溫裝置：反應杯需浸浴在恒溫環(huán)境中，一般固定在37℃，溫度波動不能大于±0.1℃。溫浴方式：（1）空氣浴恒溫：升溫速度快，不穩(wěn)定，受環(huán)境溫度影響大。（2）水浴循環(huán)恒溫式：溫度穩(wěn)定，需加防腐劑保持水潔凈，并要定期更換循環(huán)水。（3）恒溫液循環(huán)間接加熱式：兼具空氣和水浴的優(yōu)點，用一種無污染、惰性的不蒸發(fā)液體，用很小縫隙的空氣把比色杯與恒溫液隔開。7.恒溫裝置：反應杯需浸浴在恒溫環(huán)境中，一般固定在37℃，溫23自動生化分析技術--課件248.清洗系統(tǒng)（1）樣品針、試劑針和攪拌棒的隨時清洗在用于下一個樣品、試劑或反應杯前需清洗一次，多數(shù)為去離子水沖洗（2）反應杯的隨時清洗多數(shù)全自動生化分析儀具有反應杯清洗裝置一個反應杯內(nèi)的化學反應和吸光度檢測結(jié)束后該反應杯就被沖洗系統(tǒng)及時沖洗沖洗過程：吸液針吸去廢液→排液針注入清洗液1（堿性）→吸去廢液→水洗并吸干→注入清洗液2（酸性）→吸去廢液→水洗并吸干→擦干→吸光度檢查8.清洗系統(tǒng)25自動生化分析儀.wmv自動生化分析儀.wmv26二、連續(xù)流動式分析儀

測定項目相同的各待測樣品與試劑混合后的化學反應，均在同一管道中經(jīng)流動過程完成，又稱管道式分析儀。單通道管道式自動分析儀結(jié)構示意圖

二、連續(xù)流動式分析儀單通道管道式自動分析儀結(jié)構示意圖27第二節(jié)自動生化分析儀的參數(shù)設置

儀器的參數(shù)就是儀器工作的指令，參數(shù)的正確設置和合理使用是儀器正常工作的前提條件。

封閉式生化分析儀的參數(shù)及開放式生化分析儀的有些參數(shù)由廠家提供無需設定。開放式生化分析儀的部分參數(shù)，應在使用前根據(jù)各自實驗室及各自使用儀器不同，正確設置。第二節(jié)自動生化分析儀的參數(shù)設置儀器的參數(shù)就28（一）基本參數(shù)設置1.試驗名稱：指測定項目的標示符，常以項目的英文縮寫來表示。2.方法類型：

常用的方法一點終點法、兩點終點法、固定時間法、連續(xù)監(jiān)測法等。根據(jù)被測物質(zhì)的檢測方法原理選擇其中相應的分析方法。（一）基本參數(shù)設置293.反應溫度：自動生化分析儀通常設有25℃、30℃、37℃三種溫度，為了使反應的溫度與體內(nèi)溫度一致，一般選用37℃。4.測定波長：①單波長：當測定體系中只有一種組分或混合溶液中待測組分的吸收峰與其他共存物質(zhì)的吸收峰無重疊時，可用單波長檢測。②自動生化分析儀常用雙波長或多波長。主波長：被測物質(zhì)反應產(chǎn)物最大吸收峰作為主波長次波長：干擾物主波長的吸收與次波長吸光度越接近越好，測定時主波長的吸光度減去次波長的