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菌種保藏機構(gòu)的任務(wù):廣泛收集實驗室和生產(chǎn)菌種、菌株(包括病毒株以及動、植物細(xì)胞株和質(zhì)粒等)的基礎(chǔ)上,使之達(dá)到不死、不衰、不亂以及便于研究、交換和使用的目的。常用的菌種保藏機構(gòu):
中國微生物菌種保藏委員會(CCCCM)
美國的典型菌種保藏中心(ATCC)1、微生物菌種的保藏類型傳代培養(yǎng)保藏:常用的有瓊脂斜面、半固體瓊脂柱及液體培養(yǎng)等冷凍保藏:采取速凍的方法,產(chǎn)生的冰晶小而減少對細(xì)胞的損傷干燥保藏法:沙土管保存和冷凍真空保藏冷凍真空保藏:干燥、缺氧及低溫,目前使用最普遍、最重要的微生物保藏方法幾種常用菌種保藏方法的比較方法名稱主要措施適宜菌種保藏期評價冰箱保藏法(斜面)冰箱保藏法(半固體)石蠟油封藏法*沙土保藏法冷凍干燥法低溫低溫低溫、缺氧干燥、無營養(yǎng)干燥、無氧、低溫、有保護(hù)劑各大類細(xì)菌、酵母菌各大類**產(chǎn)孢子微生物各大類3~6月
6~12月1~2年
1~10年5~15年以上簡便簡便簡便簡便有效簡便有效2、微生物的退化與復(fù)壯
衰退:在微生物的生長過程中,由于變異的存在,使原有的優(yōu)良性狀發(fā)生負(fù)變,即菌種的衰退。
復(fù)壯:狹義的復(fù)壯是指在菌種已發(fā)生衰退的情況下,通過純種分離和生產(chǎn)性能測定等方法,從衰退的群體中找出未衰退的個體,以達(dá)到恢復(fù)該菌原有典型性狀的措施;廣義的復(fù)壯是指在菌種的生產(chǎn)性能未衰退前就有意識的經(jīng)常、進(jìn)行純種的分離和生產(chǎn)性能測定工作,以期菌種的生產(chǎn)性能逐步提高。實際上是利用自發(fā)突變(正變)不斷地從生產(chǎn)中選種。食品微生物菌種衰退現(xiàn)象和原因衰退現(xiàn)象菌落和細(xì)胞形態(tài)改變生長速度緩慢,產(chǎn)孢子越來越少生產(chǎn)性能下降生長環(huán)境適應(yīng)能力下降衰退原因自發(fā)突變環(huán)境條件雜菌污染防止菌種衰退的方法控制傳代的次數(shù)(一般在DNA的復(fù)制過程中,堿基的錯配率是5x10-4,自發(fā)突變的頻率為10-8~10-9,采用良好的菌種保藏方法,可以減少移種和傳代的次數(shù))創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件利用不同類型的細(xì)胞進(jìn)行接種傳代:對絲狀微生物而言,通常采用穩(wěn)定的單核孢子進(jìn)行接種。采用有效的菌種保藏方法菌種的復(fù)壯措施純種分離菌落純的分離方法(平板表面涂布法,平板劃線分離法,瓊脂培養(yǎng)基澆注法)細(xì)胞純的分離方法(分離小室進(jìn)行單細(xì)胞分離,顯微操縱器進(jìn)行單細(xì)胞分離,菌絲尖端切割法進(jìn)行單細(xì)胞分離)通過宿主體內(nèi)生
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