抗PLA2R抗體在原發(fā)性腎小球腎炎診療作用PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第1頁原發(fā)性腎小球腎炎介紹流行病學(xué)致病機(jī)制診療方法血清學(xué)檢測指標(biāo)：抗PLA2R抗體主要內(nèi)容PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第2頁膜性腎小球腎炎–分類原發(fā)性MN抗PLA2R抗體特發(fā)性（查無本身抗體或已知繼發(fā)病因）繼發(fā)性MN（可參見KDIGO列表）病原體感染（比如HBV、HCV、梅毒和瘧疾）本身免疫性疾?。ū热珙愶L(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、干燥綜合征和類天皰瘡）癌癥其它疾?。ū热珑牋罴?xì)胞貧血、格林-巴利綜合征）藥品誘導(dǎo)（比如非甾體類抗炎藥，黃金，水銀和青霉胺）PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第3頁原發(fā)性膜性腎小球腎炎（primarymembranousglomerulonephritis;pMGN），也被稱為特發(fā)性膜性腎?。╥diopathicmembranousnephropathy;IMN）是最常見以腎病綜合征（nephriticsyndrome；NS）為特點腎臟疾病?？梢娪趲缀跞糠N族和性別，更易出現(xiàn)在40歲以上男性和白種人患者。疾病介紹PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第4頁pMGN是原發(fā)性膜性腎病，與繼發(fā)性膜性腎病不一樣。繼發(fā)性膜性腎病是一個感染、藥品治療、濫用、吸毒、膠原病或其它本身免疫病以及腫瘤繼發(fā)?。úl(fā)癥），并可伴隨潛在疾病治療而改進(jìn)。pMGN是作為一個獨立疾病治療，尤其是對伴有腎病綜合征和高滲性pMGN。疾病介紹PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第5頁約80%pMGN患者含有腎病綜合征；有時胳膊和眼皮出現(xiàn)嚴(yán)重水腫，體重減輕，排尿降低；約20%pMGN患者含有蛋白尿，不過無其它任何癥狀。尿沉渣檢驗常見脂肪粒、滴、管；約50%pMGN患者含有顯微鏡血尿，蛋白尿與糖尿；約70%pMGN患者在發(fā)病早期血壓與腎功效正常。pMGN臨床表現(xiàn)腎病綜合征：由各種病因引發(fā)，以腎小球基底膜通透性增加為特征，表現(xiàn)為大量蛋白尿、低蛋白血癥、高度水腫、高脂血癥一組臨床癥候群。PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第6頁流行病學(xué)國內(nèi)pMGN發(fā)病率約占原發(fā)性腎小球疾病9.9%～13.5%，居IgA腎病、系膜增生性腎小球腎炎之后，列第三位。pMGN患者伴隨蛋白尿增加腎衰竭發(fā)病率及死亡率風(fēng)險也在不停升高，這種長久風(fēng)險尤其與血栓和心血管并發(fā)癥相關(guān)。PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第7頁致病機(jī)制本身免疫反應(yīng)造成腎小球免疫球蛋白和補體復(fù)合物沉積，造成這種反應(yīng)抗原主要為M型磷脂酶A2受體（M-typephospholipaseA2receptor,PLA2R），是在成年特發(fā)性膜性腎病患者中發(fā)覺第一個抗原。PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第8頁pMGN臨床診療迷惑怎樣區(qū)分原發(fā)還是繼發(fā)？？？怎樣進(jìn)行判別診療？SLE相關(guān)腎炎乙肝相關(guān)腎炎非膜性腎小球腎炎紫癜性腎小球腎炎……診療方法PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第9頁診療:

腎穿刺

組織學(xué)檢驗

腎臟組織電鏡檢測

新方法學(xué):血清學(xué)檢測

(anti-PLA2R)血清學(xué)檢測特點：減輕病人痛苦節(jié)約時間和成本可定量化Anti-PLA2R陽性pMGN診療診療方法PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第10頁診療方法腎臟穿刺活檢是診療金標(biāo)準(zhǔn)，但也是高風(fēng)險創(chuàng)傷性檢驗伎倆！活檢確定為膜性腎病pMNsMN排查繼發(fā)病因問詢病史體格檢驗試驗室檢測：血清學(xué)、影像學(xué)腎臟活檢：光鏡、免疫熒光、電鏡-+激素+烷化劑治療治療原發(fā)疾病治療方案不一樣KDIGOClinicalPracticeGuidelineforGlomerulonephritis..http://pMN診療主要依賴“排除法診療(exclusionofdiagnosis)”PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第11頁PLA2R結(jié)構(gòu)模式圖：N-terminal

cysteinerich

domain(CysR)，fibronectin

typeIIdomain(FNII),8個

CTLDs,一個跨膜結(jié)構(gòu)(TM)intracellularCterminal

tail(IC).NEnglJMed;361:11-21.PLA2R

PLA2R是在人腎小球足細(xì)胞表面表示，參加調(diào)整細(xì)胞中磷脂酶結(jié)合過程。當(dāng)前PLA2R主要分為兩型（M型與N型），M型PLA2R是本身抗體主要靶抗原。PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第12頁抗PLA2R抗體血清學(xué)檢測抗PLA2RIgG抗體檢測有利于：原發(fā)性與繼發(fā)性膜性腎小球腎炎判別診療疾病活動性評定制訂治療方案治療監(jiān)測PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第13頁標(biāo)準(zhǔn)化ELISA:-試劑通用性,

-溫育時間短-30/30/15min

-半定量檢測（ratioorindex）或

-定量檢測（5個標(biāo)準(zhǔn)品,2–1500RU/ml）Anti-PLA2RRC-IIFT（FA1254-xxxx-50）Anti-PLA2RELISA（EA1254-9601G）HEK

PLA2R

-transfectedHEKcontrol-transfectedintracellulartailtransmembranedomainextracellulartail抗PLA2R抗體檢測產(chǎn)品PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第14頁使用間接免疫熒光法檢測抗PLA2R抗體

PLA2R轉(zhuǎn)染細(xì)胞當(dāng)前，間接免疫熒光（IIFT）是血清學(xué)診療唯一方法(金標(biāo)準(zhǔn)），該方法適于抗PLA2R抗體定性與定量分析。PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第15頁轉(zhuǎn)染細(xì)胞質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞DNA合成編碼PLA2RDNA片段抗原轉(zhuǎn)染細(xì)胞表示抗原間接免疫熒光法檢測抗體將目標(biāo)片段插入質(zhì)粒插入目標(biāo)DNA質(zhì)?；谥亟M細(xì)胞間接免疫熒光法（RC-IFT）PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第16頁含兩個基質(zhì)生物薄片馬賽克:生物薄片:PLA2R轉(zhuǎn)染HEK細(xì)胞對照質(zhì)粒轉(zhuǎn)染HEK細(xì)胞抗PLA2R抗體RC-IFTPLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第17頁基于抗原特異轉(zhuǎn)染細(xì)胞間接免疫熒光法HEK293cellsPLA2R-transfectedAnti-PLA2RRecombinantCellIFT

-BIOCHIPTechnology-PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第18頁敏感度:52% 特異性:100%Cohort

(n=360)nAnti-PLA2R陽性組織學(xué)證實pMGN10052繼發(fā)MGN170非膜性腎小球腎炎900正常人1530Hoxha,Fechner,Stahletal.,NephrologyDialysisTransplantation:26(8);2526-32,

Anti-PLA2RAb

-敏感性和特異性-

PLA2R-AbPLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第19頁JAmSocNephrol22:1137–1143,檢測anti-PLA2R抗體對IMN判別診療有很主要意義（國內(nèi)數(shù)據(jù)）敏感度：81.7%；特異性：89.1%PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第20頁靈敏度和特異性nAnti-PLA2RpositiveIgG

RC-IFTAnti-PLA2RpositiveIgG

ELISAPrimaryMN,beforetreatment,

within8weeksafterbiopsy,

anti-PLA2RRC-IFTpositive200200(100%)193(96.6%)SecondaryMN,beforetreatment,

within8weeksafterbiopsy,

otherunderlyingdiseaseknown,anti-PLA2RRC-IFTnegative2700Otherglomerulonephritides23000Otherautoimmunediseases31500Healthyblooddonors29101Specificity836100%99.9%D?hnrich,Stahl,Schlumbergeretal.,ClinChimActa421,213-218()PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第21頁D?hnrich,Stahl,Schlumbergeretal.,ClinChimActa421,213-218（）抗PLA2R抗體疾病特異性PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第22頁Hoxha,Fechner,Stahletal.,NephrologyDialysisTransplantation:26(8);2526-32,IIFT檢測性能Hoxha,Stahletal;KidneyInt對88例膜性腎病患者進(jìn)行檢測采取歐蒙RC-IFT產(chǎn)品結(jié)果:靈敏度：82% 82%MN患者確認(rèn)為原發(fā)性MN

全部繼發(fā)性MN患者均未檢出抗PLA2R抗體特異性：100%PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第23頁幾乎全部陽性檢出率數(shù)據(jù)均來自于回顧性研究!抗體滴度會伴隨疾病活動性而發(fā)生波動，甚至可能因取樣時發(fā)生以下事件而檢測不出：

自發(fā)性緩解

免疫抑制治療原發(fā)性/特發(fā)性膜性腎病并非單一疾病，可能存在各種靶抗原一些患者可能被誤判為原發(fā)性膜性腎病（實際為繼發(fā)性）為何并非全部pMN患者均能檢出抗PLA2R抗體?PLAR在特發(fā)性膜性腎病診斷中的作用醫(yī)學(xué)知識講解專家講座第24頁Hoxha,Fechner,Stahletal.,NEnglJMed363,496-498()

Anti-PLA2RAb-預(yù)測疾病預(yù)后-

患者腎臟移植前后血清Anti-PLA