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文檔簡介
第1-2周植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)基礎(chǔ)第3-4周環(huán)境因素對植物含水量和組織水勢的影響第5-6周光和K+
對氣孔運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)第7-8周硝酸還原酶(NR)活性的測定第9-10周葉綠體色素和光合效率的測定和分析第11-12周種子呼吸對溫度的響應(yīng)第13-14周幾種種子活力快速測定方法的比較第15-16周生長激素作用的空間和濃度效應(yīng)比較分析、激素檢測方法第17-18周逆境脅迫下植物細(xì)胞膜透性及脯氨酸含量的變化分析
除第1個(gè)實(shí)驗(yàn)自學(xué)外,第3周開頭支配8個(gè)實(shí)驗(yàn),占70分(平常實(shí)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)報(bào)告成果),期末考試成果30分.實(shí)驗(yàn)題目
實(shí)驗(yàn)?zāi)康募霸?/p>
實(shí)驗(yàn)步驟
結(jié)果與分析
本實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
思考題植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告(獨(dú)立完成,交學(xué)委)
注意事項(xiàng):
合理、平安、在老師指導(dǎo)下使用實(shí)驗(yàn)器材;實(shí)驗(yàn)前分組查看器皿;實(shí)驗(yàn)后徹底清洗、按實(shí)驗(yàn)前擺放器皿;一旦損壞物品,準(zhǔn)時(shí)到C1017室登記;嚴(yán)禁將任何器皿插入洗液瓶中;每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后由班長支配3-4位同學(xué)整體清潔打掃
一、植物組織含水量的測定
二、植物組織水勢的測定實(shí)驗(yàn)二環(huán)境因素對植物水分狀態(tài)的影響(p105-112)
一、植物組織含水量的測定目的:植物組織含水量與組織水勢的關(guān)系;植物組織某種成分單位干重水平上的含量比較;原理:x100組織鮮重-組織干重組織鮮重=組織含水量(%)器材:小白菜(新奇葉片,高溫貯藏萎蔫葉片);打孔器、橡膠墊;稱樣鋁盒;烘箱、搪瓷盆、棉布手套;天平鋁盒號123456鋁盒重量W1W2W3W4W5W630片葉圓片(避開大葉脈)鮮葉鮮葉鮮葉干葉干葉干葉鮮重(盒+葉圓片,下同)FW1FW2FW3FW4FW5FW6干重(70-80℃下烘干2h后至恒重)DW1DW2DW3DW4DW5DW6含水量(%)(FWn-DWn)/(FWn–Wn)x100步驟:二、小液流法測定植物組織水勢1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?)因陋就簡測定植物組織水勢;2)與含水量進(jìn)行比較,分析二者關(guān)系將植物組織分別放在一系列梯度濃度溶液中,①植物組織的水勢﹤?cè)芤旱臐B透勢,組織吸水而使溶液濃度變大;②植物組織的水勢﹥?nèi)芤旱臐B透勢,組織水格外流而使溶液濃度變??;③植物組織的水勢=溶液的滲透勢,外部溶液濃度不變。2.實(shí)驗(yàn)原理
在滲透系統(tǒng)中,水總是從水勢高處流向水勢低處。
當(dāng)某一濃度的溶液與植物之間水分保持動(dòng)態(tài)平衡時(shí)③,該濃度為此植物組織的等滲溶液,組織水勢等于該溶液的滲透勢用溶液的滲透勢(ψπ)代表植物水勢(ψw)。
ψw=ψπ=-iCRT(單位:兆帕,MPa)i:解離系數(shù)(蔗糖=1.00;CaCl2=2.60;NaCl=1.80)C:等滲濃度(mol/L)R:氣體常數(shù)0.008314L·MPa/(mol
·
K)T:肯定溫度(273+攝氏溫度)
材料:小白菜(新奇葉組和萎蔫葉組)儀器設(shè)備:注射針頭打孔器,橡膠墊刻度試管(15mlx12支),小試管(12支)試劑:1M蔗糖,純水,甲烯藍(lán)粉3.材料、儀器設(shè)備與試劑新奇葉片萎蔫葉片刻度試管管號123456789101112配制一系列濃度的蔗糖溶液于刻度試管中,體積為10ml
蔗糖溶液c(mol/L)0.10.20.30.40.50.60.10.20.30.40.50.6隨機(jī)取相同葉位葉圓片各10片放入小試管中、從刻度試管中取2ml蔗糖溶液移入小試管中,并使葉圓片完全浸沒于溶液中小試管管號123456789101112液滴動(dòng)態(tài)(可能)4.實(shí)驗(yàn)步驟隨機(jī)取相同葉位葉圓片各10片、從刻度試管中取2ml蔗糖溶液,分別放入和移入小試管中,并使葉圓片完全浸沒于溶液中。30分鐘后,回型針尖沾少許甲烯藍(lán)入小試管,混勻,然后用清潔注射針頭依次取小試管中的藍(lán)色液體,伸入相應(yīng)標(biāo)號刻度試管溶液中部,注滴同時(shí)觀察并記錄液滴動(dòng)態(tài)。4.實(shí)驗(yàn)步驟取小試管中的藍(lán)色液體輕捏吸管,放入刻度試管深化溶液中部,擠出小液滴取出吸管觀察液滴升降蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動(dòng)方向C=0.3mol/L5.結(jié)果分析蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動(dòng)方向錯(cuò)誤結(jié)果蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動(dòng)方向C≈(0.3+0.4)/2mol/L蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動(dòng)方向錯(cuò)誤結(jié)果蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動(dòng)方向嚴(yán)重萎蔫葉片的C可能>0.6幼嫩新奇葉片的C可能<0.1蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動(dòng)方向1.計(jì)算新奇和萎焉葉片的含水量,并進(jìn)行比較分析;2.記錄不同濃度溶液中的液流方向;3.計(jì)算兩組葉片的水勢,并結(jié)合各自含水量比較分析。
蔗糖溶液濃度(mol·L-1)
0.10.20.30.40.50.6ψw(MPa)新奇葉萎蔫葉思考題:
1)增加或削減蔗糖溶液中葉圓片數(shù)目是否會(huì)影響水勢測定結(jié)果,為什么?2)在小液流法測定植物組織水勢的實(shí)驗(yàn)中,哪些步驟會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果?拭干葉表水分和泥漬避開大的葉脈打葉圓片,混合均勻移液管取溶液和純水配制的蔗糖溶液要混勻潤洗移液管和針頭(放回原液)葉圓片浸入溶液中室溫下浸泡30分鐘后再染色盡量少加甲烯藍(lán)輕壓膠管使針筒少量吸入染色溶液滴入后,停止擠壓或放松膠管6.注意事項(xiàng)液相平衡法:小液流法、稱重法、質(zhì)壁分離法壓力平衡法:壓力室法
氣相平衡法:露點(diǎn)法
植物組織水勢和滲透勢的測定方法:水勢測定冰點(diǎn)降低法滲透勢蒸氣壓滲透壓計(jì)法三、壓力室法測定植物組織水勢(如果有時(shí)間則講解)
植物葉片通過蒸騰作用不斷向環(huán)境散失水分,產(chǎn)生蒸騰拉力。導(dǎo)管中的水分由于“內(nèi)聚力”的作用而形成連續(xù)的水柱。因此,對于蒸騰著的植物,其導(dǎo)管中的水柱由于蒸騰拉力的作用,承受著肯定的張力或負(fù)壓,使水分連貫地向上運(yùn)輸(圖A)。
當(dāng)葉片或枝條被切斷時(shí),木質(zhì)部中的液流由于張力解除飛快縮回木質(zhì)部(圖B)。
將葉片裝入壓力室鋼筒,葉柄切口朝外,逐漸加壓,直到導(dǎo)管中的液流恰好在切口處顯露時(shí),所施加的壓力正好抵償了完整植株導(dǎo)管中的原始負(fù)壓。這時(shí)所施加的壓力值(通常稱為“平衡壓”)將葉片中的水勢提高到相當(dāng)于開放大氣中導(dǎo)管中液體滲透勢ψs(sap)的水平(圖C)。
由于通過導(dǎo)管周圍完整活細(xì)胞半透膜進(jìn)入木質(zhì)部導(dǎo)管的汁液,其滲透勢常接近于零(活性溶質(zhì)含量很低)。因此,下式成立:
P+ψw=ψs≈0→ψw=﹣P
式中:
P—平衡壓(正值);
ψw—葉片或枝條的水勢(負(fù)值);
ψs—木質(zhì)部汁液的滲透勢。植物材料:梧桐枝條操作步驟1.裝樣時(shí)螺旋環(huán)套不要擰得太緊,以免壓傷植物
組織。
2.加壓速度不能太快,接近葉片水勢時(shí)加壓速度
要放慢,否則會(huì)影響測量精度。
3.注意平安,加壓時(shí)不要使臉部處于鋼筒頂蓋正
上方。
4.高壓鋼瓶有危險(xiǎn),搬運(yùn)或使用時(shí)要注意。注意事項(xiàng):思考題:壓力室法測定水勢時(shí),加壓速度過快對結(jié)果有何影響?四、冰點(diǎn)滲透壓計(jì)測定植物水勢實(shí)驗(yàn)原理:水溶液的冰點(diǎn)下降值與溶液的摩爾濃度成正比。
1mol的任何非電解質(zhì)溶液溶解于1kg的水中,則使水的冰點(diǎn)由0攝氏度降至-1.875攝氏度。因此已知某溶液的冰點(diǎn)下降值,即可由以下公式計(jì)算出其滲透勢:
Os=t/1.875
式中:OS為1000克水中所溶解的溶質(zhì)顆粒數(shù)目,即重量摩爾滲透濃度(osmolarity);△t為冰點(diǎn)下降數(shù)值(度);1.857為水的摩爾冰點(diǎn)下降常數(shù)。被測樣品的
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