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文檔簡(jiǎn)介
第1-2周植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)基礎(chǔ)第3-4周環(huán)境因素對(duì)植物含水量和組織水勢(shì)的影響第5-6周光和K+
對(duì)氣孔運(yùn)動(dòng)的調(diào)節(jié)第7-8周硝酸還原酶(NR)活性的測(cè)定第9-10周葉綠體色素和光合效率的測(cè)定和分析第11-12周種子呼吸對(duì)溫度的響應(yīng)第13-14周幾種種子活力快速測(cè)定方法的比較第15-16周生長(zhǎng)激素作用的空間和濃度效應(yīng)比較分析、激素檢測(cè)方法第17-18周逆境脅迫下植物細(xì)胞膜透性及脯氨酸含量的變化分析
除第1個(gè)實(shí)驗(yàn)自學(xué)外,第3周開(kāi)頭支配8個(gè)實(shí)驗(yàn),占70分(平常實(shí)驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)報(bào)告成果),期末考試成果30分.實(shí)驗(yàn)題目
實(shí)驗(yàn)?zāi)康募霸?/p>
實(shí)驗(yàn)步驟
結(jié)果與分析
本實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)
思考題植物生理學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告(獨(dú)立完成,交學(xué)委)
注意事項(xiàng):
合理、平安、在老師指導(dǎo)下使用實(shí)驗(yàn)器材;實(shí)驗(yàn)前分組查看器皿;實(shí)驗(yàn)后徹底清洗、按實(shí)驗(yàn)前擺放器皿;一旦損壞物品,準(zhǔn)時(shí)到C1017室登記;嚴(yán)禁將任何器皿插入洗液瓶中;每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后由班長(zhǎng)支配3-4位同學(xué)整體清潔打掃
一、植物組織含水量的測(cè)定
二、植物組織水勢(shì)的測(cè)定實(shí)驗(yàn)二環(huán)境因素對(duì)植物水分狀態(tài)的影響(p105-112)
一、植物組織含水量的測(cè)定目的:植物組織含水量與組織水勢(shì)的關(guān)系;植物組織某種成分單位干重水平上的含量比較;原理:x100組織鮮重-組織干重組織鮮重=組織含水量(%)器材:小白菜(新奇葉片,高溫貯藏萎蔫葉片);打孔器、橡膠墊;稱樣鋁盒;烘箱、搪瓷盆、棉布手套;天平鋁盒號(hào)123456鋁盒重量W1W2W3W4W5W630片葉圓片(避開(kāi)大葉脈)鮮葉鮮葉鮮葉干葉干葉干葉鮮重(盒+葉圓片,下同)FW1FW2FW3FW4FW5FW6干重(70-80℃下烘干2h后至恒重)DW1DW2DW3DW4DW5DW6含水量(%)(FWn-DWn)/(FWn–Wn)x100步驟:二、小液流法測(cè)定植物組織水勢(shì)1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康?)因陋就簡(jiǎn)測(cè)定植物組織水勢(shì);2)與含水量進(jìn)行比較,分析二者關(guān)系將植物組織分別放在一系列梯度濃度溶液中,①植物組織的水勢(shì)﹤?cè)芤旱臐B透勢(shì),組織吸水而使溶液濃度變大;②植物組織的水勢(shì)﹥?nèi)芤旱臐B透勢(shì),組織水格外流而使溶液濃度變??;③植物組織的水勢(shì)=溶液的滲透勢(shì),外部溶液濃度不變。2.實(shí)驗(yàn)原理
在滲透系統(tǒng)中,水總是從水勢(shì)高處流向水勢(shì)低處。
當(dāng)某一濃度的溶液與植物之間水分保持動(dòng)態(tài)平衡時(shí)③,該濃度為此植物組織的等滲溶液,組織水勢(shì)等于該溶液的滲透勢(shì)用溶液的滲透勢(shì)(ψπ)代表植物水勢(shì)(ψw)。
ψw=ψπ=-iCRT(單位:兆帕,MPa)i:解離系數(shù)(蔗糖=1.00;CaCl2=2.60;NaCl=1.80)C:等滲濃度(mol/L)R:氣體常數(shù)0.008314L·MPa/(mol
·
K)T:肯定溫度(273+攝氏溫度)
材料:小白菜(新奇葉組和萎蔫葉組)儀器設(shè)備:注射針頭打孔器,橡膠墊刻度試管(15mlx12支),小試管(12支)試劑:1M蔗糖,純水,甲烯藍(lán)粉3.材料、儀器設(shè)備與試劑新奇葉片萎蔫葉片刻度試管管號(hào)123456789101112配制一系列濃度的蔗糖溶液于刻度試管中,體積為10ml
蔗糖溶液c(mol/L)0.10.20.30.40.50.60.10.20.30.40.50.6隨機(jī)取相同葉位葉圓片各10片放入小試管中、從刻度試管中取2ml蔗糖溶液移入小試管中,并使葉圓片完全浸沒(méi)于溶液中小試管管號(hào)123456789101112液滴動(dòng)態(tài)(可能)4.實(shí)驗(yàn)步驟隨機(jī)取相同葉位葉圓片各10片、從刻度試管中取2ml蔗糖溶液,分別放入和移入小試管中,并使葉圓片完全浸沒(méi)于溶液中。30分鐘后,回型針尖沾少許甲烯藍(lán)入小試管,混勻,然后用清潔注射針頭依次取小試管中的藍(lán)色液體,伸入相應(yīng)標(biāo)號(hào)刻度試管溶液中部,注滴同時(shí)觀察并記錄液滴動(dòng)態(tài)。4.實(shí)驗(yàn)步驟取小試管中的藍(lán)色液體輕捏吸管,放入刻度試管深化溶液中部,擠出小液滴取出吸管觀察液滴升降蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動(dòng)方向C=0.3mol/L5.結(jié)果分析蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動(dòng)方向錯(cuò)誤結(jié)果蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動(dòng)方向C≈(0.3+0.4)/2mol/L蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動(dòng)方向錯(cuò)誤結(jié)果蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動(dòng)方向嚴(yán)重萎蔫葉片的C可能>0.6幼嫩新奇葉片的C可能<0.1蔗糖溶液濃度(mol/L)0.10.20.30.40.50.6液滴移動(dòng)方向1.計(jì)算新奇和萎焉葉片的含水量,并進(jìn)行比較分析;2.記錄不同濃度溶液中的液流方向;3.計(jì)算兩組葉片的水勢(shì),并結(jié)合各自含水量比較分析。
蔗糖溶液濃度(mol·L-1)
0.10.20.30.40.50.6ψw(MPa)新奇葉萎蔫葉思考題:
1)增加或削減蔗糖溶液中葉圓片數(shù)目是否會(huì)影響水勢(shì)測(cè)定結(jié)果,為什么?2)在小液流法測(cè)定植物組織水勢(shì)的實(shí)驗(yàn)中,哪些步驟會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果?拭干葉表水分和泥漬避開(kāi)大的葉脈打葉圓片,混合均勻移液管取溶液和純水配制的蔗糖溶液要混勻潤(rùn)洗移液管和針頭(放回原液)葉圓片浸入溶液中室溫下浸泡30分鐘后再染色盡量少加甲烯藍(lán)輕壓膠管使針筒少量吸入染色溶液滴入后,停止擠壓或放松膠管6.注意事項(xiàng)液相平衡法:小液流法、稱重法、質(zhì)壁分離法壓力平衡法:壓力室法
氣相平衡法:露點(diǎn)法
植物組織水勢(shì)和滲透勢(shì)的測(cè)定方法:水勢(shì)測(cè)定冰點(diǎn)降低法滲透勢(shì)蒸氣壓滲透壓計(jì)法三、壓力室法測(cè)定植物組織水勢(shì)(如果有時(shí)間則講解)
植物葉片通過(guò)蒸騰作用不斷向環(huán)境散失水分,產(chǎn)生蒸騰拉力。導(dǎo)管中的水分由于“內(nèi)聚力”的作用而形成連續(xù)的水柱。因此,對(duì)于蒸騰著的植物,其導(dǎo)管中的水柱由于蒸騰拉力的作用,承受著肯定的張力或負(fù)壓,使水分連貫地向上運(yùn)輸(圖A)。
當(dāng)葉片或枝條被切斷時(shí),木質(zhì)部中的液流由于張力解除飛快縮回木質(zhì)部(圖B)。
將葉片裝入壓力室鋼筒,葉柄切口朝外,逐漸加壓,直到導(dǎo)管中的液流恰好在切口處顯露時(shí),所施加的壓力正好抵償了完整植株導(dǎo)管中的原始負(fù)壓。這時(shí)所施加的壓力值(通常稱為“平衡壓”)將葉片中的水勢(shì)提高到相當(dāng)于開(kāi)放大氣中導(dǎo)管中液體滲透勢(shì)ψs(sap)的水平(圖C)。
由于通過(guò)導(dǎo)管周圍完整活細(xì)胞半透膜進(jìn)入木質(zhì)部導(dǎo)管的汁液,其滲透勢(shì)常接近于零(活性溶質(zhì)含量很低)。因此,下式成立:
P+ψw=ψs≈0→ψw=﹣P
式中:
P—平衡壓(正值);
ψw—葉片或枝條的水勢(shì)(負(fù)值);
ψs—木質(zhì)部汁液的滲透勢(shì)。植物材料:梧桐枝條操作步驟1.裝樣時(shí)螺旋環(huán)套不要擰得太緊,以免壓傷植物
組織。
2.加壓速度不能太快,接近葉片水勢(shì)時(shí)加壓速度
要放慢,否則會(huì)影響測(cè)量精度。
3.注意平安,加壓時(shí)不要使臉部處于鋼筒頂蓋正
上方。
4.高壓鋼瓶有危險(xiǎn),搬運(yùn)或使用時(shí)要注意。注意事項(xiàng):思考題:壓力室法測(cè)定水勢(shì)時(shí),加壓速度過(guò)快對(duì)結(jié)果有何影響?四、冰點(diǎn)滲透壓計(jì)測(cè)定植物水勢(shì)實(shí)驗(yàn)原理:水溶液的冰點(diǎn)下降值與溶液的摩爾濃度成正比。
1mol的任何非電解質(zhì)溶液溶解于1kg的水中,則使水的冰點(diǎn)由0攝氏度降至-1.875攝氏度。因此已知某溶液的冰點(diǎn)下降值,即可由以下公式計(jì)算出其滲透勢(shì):
Os=t/1.875
式中:OS為1000克水中所溶解的溶質(zhì)顆粒數(shù)目,即重量摩爾滲透濃度(osmolarity);△t為冰點(diǎn)下降數(shù)值(度);1.857為水的摩爾冰點(diǎn)下降常數(shù)。被測(cè)樣品的
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