綜合性實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)報(bào)告實(shí)驗(yàn)名稱：血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳姓名：指導(dǎo)教師：專業(yè)：生物技術(shù)實(shí)驗(yàn)班級：實(shí)驗(yàn)時間：實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)：實(shí)驗(yàn)樓生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室成績：_________________________________實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆沾姿崂w維薄膜電泳的原理和操作方法。作出清晰合格的人血清蛋白的電泳圖譜。實(shí)驗(yàn)原理1、帶電顆粒在電場的作用下，向著與其電性相反的方向移動，這種現(xiàn)象稱為電泳，采用醋酸纖維薄膜為支持物的電泳方法稱為醋酸纖維薄膜電泳。影響泳動速度的重要因素：①電場強(qiáng)度E②溶液的pH③溶液的離子強(qiáng)度④電滲現(xiàn)象⑤其他影響因素血清蛋白的等電點(diǎn)，分子量與泳動度的關(guān)系蛋白質(zhì)的名稱等電點(diǎn)分子量泳動度（cm2／v·s）清蛋白4.886.9×10?-5.9×10-5α?－球蛋白5.062.0×105-5.1×10-5α?－球蛋白5.063.0×105－4.1×10-5β－球蛋白5.120.9~1.5×105－2.8×10-5γ－球蛋白6.85~7.51.56~3.0×105－1.0×10-5正常人血清蛋白的相對含量：清蛋白54.0~73.0％α?－球蛋白2.8~5.1％α?－球蛋白6.3~10.6％β－球蛋白5.2~11.0％γ－球蛋白12.5~20.0％三、實(shí)驗(yàn)儀器與試劑3.1實(shí)驗(yàn)儀器：醋酸纖維薄膜（2×8㎝）常壓電泳儀點(diǎn)樣器培養(yǎng)皿粗濾紙玻璃板竹鑷白瓷反應(yīng)板3.2.實(shí)驗(yàn)試劑：巴比妥緩沖液1000ml染色液300ml漂洗液2000ml透明液300ml實(shí)驗(yàn)步驟與方法①醋酸薄膜的浸泡（30min左右）②制作濾紙橋③平衡：用平衡裝置使三個電泳槽內(nèi)的緩沖液面處于同一水平④點(diǎn)樣：在毛面距邊界1~1.5cm處點(diǎn)樣⑤電泳：110V電泳60min⑥染色5~10min⑦漂洗四次實(shí)驗(yàn)結(jié)果5.1實(shí)驗(yàn)結(jié)果醋酸纖維薄膜血清蛋白電泳圖譜顯示在濾紙條上從點(diǎn)樣處開始依次為γ－球蛋白、β－球蛋白、α?－球蛋白、α?－球蛋白、清蛋白5.2注意問題：1，薄膜本身的質(zhì)量問題（涂層不均勻等），

2，點(diǎn)樣技術(shù)問題，

3，電壓電流控制問題，

4，樣品本身是否有降解、污染；

5，實(shí)驗(yàn)過程其他可能影響結(jié)果的問題，如平衡時間、浸泡時間、染脫色透明時間等。。參考文獻(xiàn)1、王秀奇秦淑媛高天慧等基礎(chǔ)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)（第二版）2011年12月2、王