第頁DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)與植物有效成分的提取一、單項(xiàng)選擇題1．以下有關(guān)凝膠色譜法的表達(dá)，不正確的選項(xiàng)是〔〕A.凝膠色譜法的原理是不同大小的分子所經(jīng)的路徑不同而得以別離B.目前經(jīng)常使用的凝膠有交聯(lián)葡聚糖、聚丙烯酰胺和瓊脂糖等C.大分子物質(zhì)后被洗脫出來，小分子物質(zhì)先被洗脫出來D.血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法別離過程的監(jiān)測【答案】C2．在血紅蛋白的整個(gè)提取過程中，不斷用磷酸緩沖液處理的目的是〔〕A.防止血紅蛋白被氧化B.血紅蛋白是一種兩性物質(zhì)，需要酸中和C.磷酸緩沖液會加速血紅蛋白的提取過程D.讓血紅蛋白處在穩(wěn)定的pH范圍內(nèi)，維持其結(jié)構(gòu)和功能【答案】D3．以下有關(guān)PCR技術(shù)中引物的表達(dá)，正確的選項(xiàng)是〔〕A.引物是一小段DNA分子或雙鏈RNA分子B.擴(kuò)增一個(gè)DNA分子至少需要的引物數(shù)目等于新合成的DNA子鏈數(shù)目C.兩種引物之間能夠發(fā)生堿基互補(bǔ)配對D.DNA聚合酶只能從引物的5＇端連接脫氧核苷酸【答案】B4．以下有關(guān)基因工程的表達(dá)，正確的選項(xiàng)是〔〕A.DNA連接酶能將堿基對之間的氫鍵連接起來B.目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后，受體細(xì)胞即發(fā)生基因突變C.限制性核酸內(nèi)切酶有多種D.Taq酶是PCR過程中常用的一種耐高溫的DNA連接酶【答案】C5．以下有關(guān)“花菜細(xì)胞中DNA的粗提取〞實(shí)驗(yàn)的表達(dá)，正確的選項(xiàng)是〔〕A.在研磨過程中參加洗滌劑的作用是為了瓦解細(xì)胞壁B.實(shí)驗(yàn)過程中兩次參加蒸餾水的作用相同C.將濾液放在60?75℃下保溫的作用主要是除去濾液中的雜質(zhì)D.在濾液中參加冷卻的等體積分?jǐn)?shù)酒精的原理是DNA可溶于酒精【答案】C6．關(guān)于DNA的實(shí)驗(yàn)，表達(dá)正確的選項(xiàng)是〔〕A.DNA溶液與二苯胺試劑混合，沸水浴后生成藍(lán)色產(chǎn)物B.PCR的每個(gè)循環(huán)一般依次經(jīng)過變性一延伸一復(fù)性三步C.用兔的成熟紅細(xì)胞可提取DNAD.用甲基綠、吡羅紅將細(xì)胞染色，細(xì)胞質(zhì)呈綠色，細(xì)胞核呈紅色【答案】A7．以下關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定〞實(shí)驗(yàn)的表達(dá)，錯(cuò)誤的選項(xiàng)是〔〕A.雞的紅細(xì)胞和菜花均可作為提取DNA的材料，處理方法有所不同B.在切碎的菜花中參加一定量的洗滌劑和食鹽，充分研磨，過濾收集濾液C.將NaCl溶液濃度調(diào)至2mol/L，用單層濾紙過濾獲取析出物D.利用某些蛋白質(zhì)在酒精中的溶解度大于DNA在酒精中的溶解度的原理，可以提純DNA【答案】C8．以下是“肝臟細(xì)胞DNA粗提取〞實(shí)驗(yàn)的兩個(gè)關(guān)鍵操作步驟，相關(guān)表達(dá)錯(cuò)誤的選項(xiàng)是〔〕A.步驟1中，參加檸檬酸鈉緩沖液的目的是維持pH的穩(wěn)定B.步驟1中，冰浴處理的主要原理是低溫下DNA水解酶容易變性C.步驟2中，異戊醇的作用可能是使與DNA結(jié)合的蛋白質(zhì)因變性而沉淀D.步驟2中，離心后應(yīng)取上清液，因?yàn)镈NA在2mol，L-1NaCl溶液中溶解度比擬大【答案】B9．多聚酶鏈?zhǔn)椒错?PCR技術(shù))是體外酶促合成特異性DNA片段的一種方法，其簡要過程如下圖。以下關(guān)于PCR技術(shù)表達(dá)不正確的選項(xiàng)是〔〕A.PCR技術(shù)是在實(shí)驗(yàn)室中以少量DNA制備大量DNA的技術(shù)B.反響中新合成的DNA可以作為下一輪反響的模板C.每擴(kuò)增一次溫度發(fā)生90℃→75℃→55℃變化D.應(yīng)用PCR技術(shù)與DNA分子雜交技術(shù)可以檢測基因突變【答案】C10．以下為形成cDNA過程和PCR擴(kuò)增過程示意圖。據(jù)圖分析，以下說法正確的選項(xiàng)是〔〕A.催化①過程的酶是RNA聚合酶B.④過程發(fā)生的變化是引物與單鏈DNA結(jié)合C.催化②⑤過程的酶都是耐高溫的DNA聚合酶D.③過程需要高溫和ATP供能才能完成【答案】B11．某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分子，其分子大小、電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如下圖。以下表達(dá)正確的選項(xiàng)是〔〕A.假設(shè)將樣品以2023r/min的速度離心10min，假設(shè)分子丁存在于沉淀中，那么分子甲也存在于沉淀中B.假設(shè)用凝膠色譜柱別離樣品中的蛋白質(zhì)，那么分子甲的移動(dòng)速度最快C.將樣品裝入透析袋中透析12h，假設(shè)分子乙保存在袋內(nèi)，那么分子丙也保存在袋內(nèi)D.假設(shè)用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳別離樣品中的蛋白質(zhì)分子，那么分子甲和分子戊形成的電泳帶相距最遠(yuǎn)【答案】C12．鐮刀型細(xì)胞貧血癥是一種由基因突變引起的遺傳病，患者的紅細(xì)胞是彎曲的鐮刀狀。這樣的紅細(xì)胞容易破裂，使人患溶血性貧血，嚴(yán)重時(shí)會導(dǎo)致死亡。某科學(xué)興趣小組方案從血紅蛋白的成分是否變化來開展研究性學(xué)習(xí)。以下是該小組成員獲得純度很高的血紅蛋白的實(shí)驗(yàn)過程，不正確的一項(xiàng)為哪一項(xiàng)〔〕A.對紅細(xì)胞進(jìn)行洗滌，在參加蒸餾水和甲苯使紅細(xì)胞破裂釋放出血紅蛋白后，將混合液靜置一段時(shí)間后分層獲得血紅蛋白溶液B.將血紅蛋白溶液裝入透析袋中透析，可到達(dá)粗別離的目的C.利用凝膠色譜操作對血紅蛋白進(jìn)行純化D.使用SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳法進(jìn)行純度鑒定，以獲得純度很高的血紅蛋白【答案】A13．以下關(guān)于植物芳香油提取技術(shù)的表達(dá)中，正確的選項(xiàng)是〔〕①水蒸氣蒸餾法是植物芳香油提取的常用方法②水蒸氣蒸鎦是利用水蒸氣將揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油攜帶出來③壓榨法是通過機(jī)械加壓，壓榨出果皮中的芳香油④萃取法的實(shí)驗(yàn)原理是使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中，蒸發(fā)掉溶劑就可獲得芳香油A.②③B.①②③④C.①②④D.②③④【答案】B14．以下關(guān)于植物芳香油及其提取的表達(dá)，錯(cuò)誤的選項(xiàng)是〔〕A.玫瑰精油揮發(fā)性強(qiáng)，難溶于水B.橘皮油無色透明，主要成分為檸檬烯C.提取橘皮油的過程中，離心的目的是除去果醋、果膠D.植物的根、莖、葉、花、果實(shí)和種子都可能含有芳香油，真菌也可產(chǎn)生芳香化合物【答案】C15．選擇石油醚作提取胡蘿卜素萃取劑的原因是〔〕A.石油醚不易燃燒B.石油醚揮發(fā)性強(qiáng)C.石油醚不易燃燒D.石油醚的沸點(diǎn)較高【答案】D16．以下不屬于橘皮精油提取中應(yīng)考前須知的是()A.橘皮在石灰水中浸泡時(shí)間為10小時(shí)以上B.橘皮要浸透，從而壓榨時(shí)不會滑脫C.壓榨液的粘稠度要高，從而提高出油率D.為了使橘皮油與水別離，可參加相當(dāng)于橘皮質(zhì)量0.25%的小蘇打和5%的硫酸鈉，并調(diào)節(jié)pH為7～8【答案】C17．對于胡蘿卜素的提取，表達(dá)錯(cuò)誤的選項(xiàng)是〔〕A.養(yǎng)殖巖藻也是工業(yè)上生產(chǎn)胡蘿卜素的方法之一B.為了防止加熱時(shí)有機(jī)溶劑的揮發(fā)，還需要在加熱瓶口安裝冷凝回流裝置C.萃取液的濃縮不可直接使用蒸餾裝置D.在濃縮之前，還要進(jìn)行過濾，除去萃取液中的不溶物【答案】C18．以下關(guān)于有關(guān)胡蘿卜素及其提取的表達(dá)正確的選項(xiàng)是〔〕A.胡蘿卜素是一種化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，溶于水，不溶于乙醇的物質(zhì)B.枯燥過程中，時(shí)間不能太長，溫度不能太高C.層析鑒定胡蘿卜素的操作時(shí)點(diǎn)樣過程應(yīng)快速細(xì)致，形成的小圓點(diǎn)的直徑不大于2cmD.石油醚、丙酮、乙醚均能用于胡蘿卜素的萃取【答案】B19．以下說法不正確的選項(xiàng)是〔〕A.石油醚、醋酸乙酯、乙醚、苯和四氯化碳這幾種有機(jī)溶劑中,石油醚的沸點(diǎn)最高,在加熱萃取時(shí)不易揮發(fā),所以石油醚最適宜用作萃取劑B.乙醇和丙酮不能夠用于胡蘿卜素的萃取,雖然它們也是有機(jī)溶劑,但它們與水混溶C.胡蘿卜素的提取順序是:胡蘿卜→粉碎→枯燥→萃取→過濾→濃縮→胡蘿卜素D.提取胡蘿卜素時(shí)，提取效率與原料顆粒的含水量成正比【答案】D20．胡蘿卜素的紙層析鑒定,正確的選項(xiàng)是〔〕①制備濾紙:取18cm×30cm濾紙條,于距底端2cm處劃基線,取A、B、C、D四個(gè)點(diǎn)。②點(diǎn)樣:用最細(xì)注射器針頭分別吸取標(biāo)準(zhǔn)樣品和提取樣品在A、D和B、C點(diǎn)樣,吹干。③層析:將濾紙卷成筒狀并固定,放到盛有1cm深石油醚的密封容器中層析。④觀察:取出濾紙條,使石油醚充分揮發(fā)后觀察層析帶。⑤注意濾紙條預(yù)先枯燥處理;點(diǎn)樣時(shí)快速細(xì)致、樣點(diǎn)圓點(diǎn)盡量細(xì)小;濾紙筒的豎直邊緣不能接觸;石油醚易揮發(fā),注意層析容器要密封。A.全對B.四項(xiàng)對C.三項(xiàng)對D.二項(xiàng)對【答案】A二、非選擇題〔40分，每格1分〕21．〔8分〕“CTAB法〞和“SDS法〞是提取DNA的常用方法，CTAB提取液含有CTAB、EDTA等成分，SDS提取液含SDS、EDTA等成分。CTAB能破壞膜結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性，提高DNA在提取液中的溶解度；SDS能破壞膜結(jié)構(gòu)，使蛋白質(zhì)變性，EDTA能螯合Mg2+、Mn2+，抑制DNA酶的活性。某科研小組為了尋找提取臘梅DNA的優(yōu)良方法，比擬了兩種提取DNA的方法，主要操作如下：實(shí)驗(yàn)測定結(jié)果如下〔表中OD260反映溶液中核酸的濃度，OD280反映溶液中蛋白質(zhì)的濃度。理論上，純DNA溶液的OD260/OD280為1.8，純RNA溶液的OD260/OD280為2.0〕。CTABSDSOD260OD280OD260/OD28OD260OD280OD260/OD280.0030.0181.8330.0060.0051.200請答復(fù)以下問題?！?〕與常溫下研磨相比，液氮中研磨的優(yōu)點(diǎn)是_________________________________；CTAB法和SDS法提取液中都參加EDTA的目的是______________________?！?〕氯仿一異戊醇密度均大于水且不溶于水，DNA不溶于氯仿一異戊醇，蛋白質(zhì)等雜質(zhì)可溶于氯仿一異戊醇，實(shí)驗(yàn)過程中參加氯仿一異戊醇離心后，應(yīng)?、賍_______加異丙醇〔異丙醇與水互溶〕并離心進(jìn)行純化，利用異丙醇溶液純化DNA的原理是________________?！?〕兩種方法中，________法提取的DNA較多，其可能原因是________________________?！?〕兩種方法中，________法提取的DNA純度較低，其含有的主要雜質(zhì)是________?！敬鸢浮俊?〕研磨充分，低溫抑制酶活性，降低DNA的分解減少DNA水解，提高DNA的完整性和總量〔2〕上清液DNA不溶于異丙醇，而雜質(zhì)能溶于異丙醇〔3〕CTAB〔4〕CTAB提高了DNA在提取液中的溶解度，從而能提取出更多的DNASDS蛋白質(zhì)22．〔6分〕以下圖是將某細(xì)菌的基因A導(dǎo)入大腸桿菌內(nèi)，制備“工程菌〞的示意圖。據(jù)圖答復(fù)：(1)獲得A有兩條途徑：一是以A的mRNA為模板，在_______酶的催化下，合成互補(bǔ)的單鏈DNA，然后在______的作用下合成雙鏈DNA，從而獲得所需基因；二是根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)的______________序列，推測出相應(yīng)的mRNA序列，然后按照堿基互補(bǔ)配對原那么，推測其DNA的_________________序列，再通過化學(xué)方法合成所需基因。(2)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增基因A時(shí)，需要在反響體系中添加的有機(jī)物質(zhì)有______、_______、4種脫氧核糖核苷三磷酸和耐熱性的DNA聚合酶，擴(kuò)增過程可以在PCR擴(kuò)增儀中完成?！敬鸢浮俊?〕逆轉(zhuǎn)錄DNA聚合酶氨基酸〔2〕脫氧核苷酸引物模板(A基因)23．〔10分〕血紅蛋白是人和其他脊椎動(dòng)物紅細(xì)胞的主要組成成分，負(fù)責(zé)血液中O2或CO2的運(yùn)輸。請根據(jù)血紅蛋白的提取和別離流程圖答復(fù)以下問題?！?〕將實(shí)驗(yàn)流程補(bǔ)充完整：A為________，B為________。凝膠色譜法是根據(jù)____________而到達(dá)蛋白質(zhì)別離的有效方法?！?〕洗滌紅細(xì)胞的目的是去除_________，洗滌次數(shù)過少，無法除去_________；離心速度過高和時(shí)間過長會使_______一同沉淀，達(dá)不到別離的效果。洗滌干凈的標(biāo)志是__________。釋放血紅蛋白的過程中起作用的是______________?！?〕在洗脫過程中參加物質(zhì)的量濃度為20mmol/L的磷酸緩沖液〔pH為7.0〕的目的是__________。如果紅色區(qū)帶____________，說明色譜柱制作成功。【答案】〔1〕血紅蛋白的釋放樣品的參加和洗脫相對分子質(zhì)量的大小雜蛋白〔血漿蛋白〕血漿蛋白白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞離心后的上清液中沒有黃色蒸餾水和甲苯準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的生理環(huán)境，保持體外的pH和體內(nèi)一致均勻一致地移動(dòng)24．〔8分〕運(yùn)用所學(xué)知識答復(fù)以下與生物技術(shù)實(shí)踐相關(guān)的問題?！?〕在圖甲所示的兩發(fā)酵瓶中裝入等量的葡萄汁進(jìn)行果酒制作實(shí)驗(yàn)，假設(shè)在A裝置的通氣口補(bǔ)充無菌空氣，那么一段時(shí)間后，能獲得葡萄酒的是___________裝置，發(fā)酵是否成功可用___________對發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行檢驗(yàn)確認(rèn)。〔2〕圖乙是胡蘿卜素提取粗品鑒定結(jié)果示意圖。點(diǎn)加提取樣品的是________________點(diǎn)，點(diǎn)加標(biāo)準(zhǔn)樣品的是___________點(diǎn)，該鑒定實(shí)驗(yàn)的方法叫做_____________________?！?〕微生物培養(yǎng)時(shí)，如果想讓培養(yǎng)基內(nèi)只生長真菌，那么可用含___________的培養(yǎng)基。后期進(jìn)行統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)時(shí)，一般選擇菌落數(shù)在___________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。〔4〕利用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)常比實(shí)際活菌數(shù)量低，原因是___________?！敬鸢浮俊?〕B重鉻酸鉀溶液〔2〕B、CA、D紙層