血清降鈣素原檢測(cè)在肺部感染診斷中的意義

鈣原（pct）由116個(gè)氨基酸組成的糖蛋白，相對(duì)分子量為14。5.103，cacl-1的編碼代碼。氨基酸序列157為n-殘段，60.91為鈣ct，96.116為鈣獻(xiàn)。在正常生理狀態(tài)下,PCT由甲狀腺C細(xì)胞分泌,在特異性蛋白酶作用下經(jīng)過細(xì)胞內(nèi)蛋白水解產(chǎn)生具有生物活性的降鈣素,是血清降鈣素的前肽物質(zhì),無激素活性,可產(chǎn)生多種生物效應(yīng)。正常情況下,循環(huán)血清中的PCT水平低于0.1ng/mL,在感染性休克時(shí),血清PCT水平可以升高到30~1000ng/mL。認(rèn)為其是比C反應(yīng)蛋白更好的預(yù)測(cè)指標(biāo)。最新研究表明,PCT作用于中性粒細(xì)胞,起到促炎作用,但不能抑制細(xì)菌內(nèi)毒素在體外應(yīng)答的誘導(dǎo)。也有研究指出,在病毒感染時(shí),干擾素大量產(chǎn)生,將會(huì)抑制PCT的激活及產(chǎn)生。因此,病毒感染時(shí)PCT的濃度會(huì)保持在較低水平。臨床上,PCT可用于細(xì)菌感染與病毒感染的早期鑒別診斷。1儀器與檢測(cè)方法1.1一般資料該院2010年3~7月ICU病房及呼吸科住院患者中確診的肺部感染60例,其中男37例,女23例。健康對(duì)照組30例,均為體檢合格者,且血象和胸片檢查無異常。1.2儀器與試劑SYSMEX-2100全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀及配套試劑,日本西斯美康株式會(huì)社提供。miniVIDAS熒光免疫分析儀以及降鈣素原測(cè)定試劑盒,法國生物梅里埃有限公司提供。1.3方法取急性期感染患者靜脈血2mL置EDTA-K2真空抗凝管中,輕輕顛倒混勻,盡快送檢,進(jìn)行全血細(xì)胞分析檢測(cè),使用SYSMEX-2100儀器檢測(cè)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)與百分比。同時(shí)取靜脈血3mL置肝素真空抗凝管中,3000r/min離心15min,取上清液200μL,加入PCT檢測(cè)反應(yīng)板,雙抗體夾心法檢測(cè)PCT抗原,30min后讀取結(jié)果。參考范圍設(shè)定PCT<0.05ng/mL。追蹤病例胸片及痰培養(yǎng)細(xì)菌鑒定結(jié)果。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用兩樣本均值比較的t檢驗(yàn),用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì),結(jié)果以(xˉ±s)(xˉ±s)表示。2結(jié)果2.1表1顯示了兩組pct和白細(xì)胞分類的百分比2.2表2顯示了兩組pct和白細(xì)胞分類的結(jié)果2.3圖1和圖2顯示了pct和中性細(xì)胞之間的比例相對(duì)于傷口的圖1和圖22.4圖3顯示了pct與中性細(xì)胞數(shù)量之間的關(guān)系2.51圖4顯示了在治療膿毒癥的過程中pct水平的變化與白細(xì)胞總數(shù)之間的關(guān)系3影像學(xué)檢測(cè)及pct水平檢測(cè)自1993年國外首次報(bào)道血清降鈣素原與細(xì)菌感染有關(guān)以來,PCT被認(rèn)為是細(xì)菌感染和膿毒血癥的良好標(biāo)志物,成為臨床診斷中的重要工具。PCT水平的增高反映了從健康狀態(tài)到細(xì)菌感染最嚴(yán)重后果(膿毒血癥、嚴(yán)重膿毒癥、膿毒性休克)的持續(xù)發(fā)展,呈正相關(guān)性。臨床上全身炎性反應(yīng)綜合征(systemicinflammatoryresponse,SIRS)的表征無特異性,很多非膿毒癥的患者也會(huì)出現(xiàn)該表征。臨床診斷:體溫大于38℃或小于36℃;心率大于90/min;呼吸急促大于20min;白細(xì)胞計(jì)數(shù)大于12000或小于4000×109/L。對(duì)于感染診斷的金標(biāo)準(zhǔn):病原培養(yǎng),微生物學(xué)對(duì)感染的檢測(cè)通常是陰性,或需要較長(zhǎng)時(shí)間才獲得結(jié)果。不但細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng),且不一定能反映全身炎性的主體反應(yīng)或器官機(jī)能障礙的出現(xiàn)。而PCT在敗血癥發(fā)生時(shí)以1.1ng/mL為臨界敏感性達(dá)81%,特異性達(dá)72%。合并SIRS時(shí),可以分別提高到100%和86%。因此,PCT以其高敏感性、高特異性、實(shí)驗(yàn)快速等特點(diǎn),受到臨床的重視。本研究選取ICU和呼吸科確診為肺部感染的患者為研究對(duì)象?；颊哂忻黠@肺實(shí)變體征、濕性啰音、呼吸道癥狀嚴(yán)重,出現(xiàn)膿性痰。83%患者胸部X線顯示片狀、斑片狀浸潤性陰影或間質(zhì)性改變,伴或不伴胸腔積液,影像學(xué)診斷為肺部感染?；颊咴谘仔约毙云诹羧√禈?biāo)本進(jìn)行細(xì)菌學(xué)培養(yǎng),62%標(biāo)本于3d后呈陽性結(jié)果。所有患者同時(shí)取靜脈血進(jìn)行白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)和PCT定量檢測(cè),此前關(guān)于PCT的文獻(xiàn)報(bào)道多集中于半定量固相免疫測(cè)定方法檢測(cè),準(zhǔn)確度和靈敏度都有待提高。本研究采用雙抗體夾心熒光定量檢測(cè),所有檢測(cè)可在30min內(nèi)完成?；颊呓MPCT濃度(3.94±1.81)ng/ml明顯高于健康對(duì)照組(<0.05ng/mL)?；颊呓MWBC計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞百分比(13.27±8.20)%和數(shù)量(11.47±2.82)×109/L均顯著高于健康對(duì)照組[(7.25±4.37)%和(5.25±1.98)×109/L]。而患者組其他類型白細(xì)胞百分比和計(jì)數(shù)則顯著低于健康對(duì)照組。本研究選取的60例肺炎患者標(biāo)本中,PCT水平范圍為0.11~48.28ng/mL,對(duì)應(yīng)的中性粒細(xì)胞變化范圍集中在75%~100%,其中中性粒細(xì)胞百分比變化超過參考值(50%~75%)的患者占91.6%。此外全部60例患者中,淋巴細(xì)胞百分比完全集中在20%以下,低于參考值(20%~40%)。進(jìn)一步證明了PCT水平可以鑒別細(xì)菌感染與病毒感染。PCT水平升高與中性粒細(xì)胞百分比上升呈正相關(guān),相關(guān)系數(shù)r=0.296。PCT水平與細(xì)菌內(nèi)毒素釋放是否相關(guān)還有待進(jìn)一步研究。為了更直觀探討PCT檢測(cè)對(duì)臨床肺部感染的診斷及治療意義,本研究還選取了其中1例77歲女性肺感染患者,追蹤其治療過程。在肺部感染確診后的治療期間,該患者第1周入院血常規(guī)WBC總數(shù)21.97×109/L,PCT0.65ng/mL,同時(shí)留取痰標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng),3d后細(xì)菌鑒定結(jié)果為銅綠假單胞菌,臨床采用頭孢地塞鈉粉注射,1周后復(fù)查血常規(guī)與PCT,分別下降至13.50×109/L和0.35ng/mL。同時(shí)留取痰標(biāo)本細(xì)菌培養(yǎng),3d后藥敏結(jié)果提示為銅綠假單胞菌,阿米卡星中介,其余耐藥。換用哌拉西林舒巴坦鈉以及硫酸異帕米星注射,于第2周復(fù)查血常規(guī)WBC總數(shù)8.03×109/L,PCT0.22ng/mL。第3周復(fù)查PCT已經(jīng)小于0.05ng/mL,WBC降到5.52×109/L。整個(gè)治療過程中發(fā)現(xiàn)PCT水平的下降與白細(xì)胞總數(shù)的下降呈正相關(guān)(r=0.995),且胸片檢查顯示肺部感染灶呈減小趨勢(shì),說明PCT能夠明確表明炎性反應(yīng)的降低及感染灶清除過程,指導(dǎo)臨床用藥,提示預(yù)后及療效觀察,與病程正相關(guān),適用于臨床肺部細(xì)菌感染的診斷與治療,配合細(xì)菌學(xué)鑒定,指導(dǎo)抗生素使用。綜上所述,PCT定量檢測(cè)以其快速與臨床常規(guī)檢驗(yàn)及細(xì)菌鑒定、影像學(xué)診斷一致性的特點(diǎn),成為感染早期診斷的重要標(biāo)志物。臨床上對(duì)于病毒感染與細(xì)菌感染的鑒別診斷及細(xì)菌感染嚴(yán)重程度的判斷十分重要,它影響著抗生素的合理使用,關(guān)系到危重患者的有效救治。而PCT的定量檢測(cè)可有效解決這一問題。由于PCT僅在促炎性細(xì)胞因子作用下(尤其是細(xì)菌激發(fā)所引起的促炎性反應(yīng))呈現(xiàn)特異性升高,在病毒感染、慢性炎性反應(yīng)機(jī)能紊亂或自身免疫性疾病中不明顯;在嚴(yán)重細(xì)菌感染、敗血癥及多器官衰竭中,PCT通常特異性升高。因此,PCT的定性檢測(cè)可初步判定感染類型,PCT的定量檢測(cè)則使感染檢測(cè)的靈敏度及準(zhǔn)確度更高。PCT與血液常規(guī)檢測(cè)和炎性標(biāo)志物檢測(cè)的聯(lián)合使用又為臨床鑒別診斷和治療提供更全面的依據(jù)。在肺部感染治療中,臨床確定是否使用抗生素及合理的用量,何時(shí)停藥等問題,PCT定量檢測(cè)都可給予指導(dǎo)。對(duì)于臨床評(píng)價(jià)認(rèn)為需要抗生素治療但其PCT值較低(<0.25ng/mL)的患者,建議不應(yīng)使用抗生素。對(duì)于有極低PCT值(