細(xì)胞的簡單染法_第1頁
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文檔簡介

細(xì)菌的簡單染色法宋國麗1、學(xué)習(xí)微生物涂片、染色的基本技術(shù)，掌握細(xì)菌的簡單染色法。2、初步認(rèn)識細(xì)菌的形態(tài)特征。3、學(xué)習(xí)訓(xùn)練顯微鏡及無菌操作技術(shù)。實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

簡單染色是利用單一染料對細(xì)菌進(jìn)行染色的一種方法適用于菌體一般形狀和細(xì)菌排列的觀察。

常用堿性染料進(jìn)行簡單染色，因?yàn)樵谥行?、堿性或弱酸性溶液中，細(xì)菌細(xì)胞通常帶負(fù)電荷，而堿性染料在電離時，其分子的染色部分帶正電荷，因此堿性染料的染色部分很容易與細(xì)菌結(jié)合使細(xì)菌著色，經(jīng)染色后的細(xì)菌細(xì)胞與背景形成鮮明的對比，在顯微鏡下更易于識別。實(shí)驗(yàn)原理

常用作簡單染色的染料有：美藍(lán)、結(jié)晶紫、堿性復(fù)紅等。當(dāng)細(xì)菌分解糖類產(chǎn)酸使培養(yǎng)基pH下降時，細(xì)菌所帶正電荷增加，此時可用伊紅、酸性復(fù)紅或剛果紅等酸性染料染色。實(shí)驗(yàn)原理(continued)

細(xì)菌細(xì)胞微小，透明，不易觀察，需染上顏色。利用單一染料對細(xì)菌進(jìn)行染色，使經(jīng)染色后的菌體與背景形成明顯的色差，從而能更清楚地觀察到其形態(tài)和結(jié)構(gòu)。染料按其電離后所帶電荷的性質(zhì)可分為以下類型：1.酸性染料：如酸性復(fù)紅、剛果紅、伊紅、藻紅、苯胺黑等。2.堿性染料：一般有堿性復(fù)紅、中性紅、孔雀綠、番紅、結(jié)晶紫、美蘭、甲基紫等，細(xì)菌易被堿性染料染色。3.中性（復(fù)合）染料：如伊紅、美蘭等，Wright染料和Gimsa染料等（常用于細(xì)胞核染色）。4.單純?nèi)旧哼@類染料的化學(xué)親和力低，大多是偶氮化合物，不溶于水，但溶于脂肪溶劑中，如蘇丹類（Sudanb)的染料。1、菌種枯草芽孢桿菌12～18h培養(yǎng)物金黃色葡萄球菌24h培養(yǎng)物大腸桿菌12-18h培養(yǎng)物2、染色劑草酸銨結(jié)晶紫染液實(shí)驗(yàn)材料

3、其他物品

顯微鏡、載玻片、香柏油、擦鏡紙、接種環(huán)、生理鹽水。涂片干燥固定染色水洗干燥鏡檢無菌操作操作步驟

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