頁腳頁腳設(shè)備操作規(guī)程TU-型雙光束紫外可見分光光度計使用、清潔和維護操作規(guī)程修訂人：審核人：批準(zhǔn)人：生效日期：修訂日期：審核日期：批準(zhǔn)日期：頒發(fā)部門：分發(fā)部門：1.目的為規(guī)TU-1901型雙光束紫外可見分光光度計的使用、清潔和維護的操作，特制定本規(guī)程。適用圍適用于TU-1901型雙光束紫外可見分光光度計使用、清潔和維護。引用文件《TU-1901型雙光束紫外可見分光光度計使用說明書》《UVWIM5使用指南》責(zé)任者質(zhì)量控制部工作原理分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度計定性和定量分析的基礎(chǔ)。紫外可見分光光度計的工作原理基于朗伯-比爾定律，即當(dāng)一束平行單色光垂直通過某一均勻非散射的吸光物質(zhì)時,其吸光度與吸光物質(zhì)的濃度及吸收層厚度成正比。具體容操作步驟測量前的準(zhǔn)備打開計算機的電源開關(guān)及顯示屏開關(guān)，進入Windows操作環(huán)境。確認(rèn)樣品室中無擋光物，打開紫外可見分光光度計主機電源開關(guān)。6.1.1.3雙擊聯(lián)機計算機桌面的“UVWin5紫外軟件”快捷方式圖標(biāo)，進入紫外控制程序，出現(xiàn)初始化工作界面，計算機將對儀器進行自檢并初始化，每項測試后，在相應(yīng)的項后顯示“0K”，整個程序需要4分鐘左右，自檢結(jié)束。儀器經(jīng)過預(yù)熱30分鐘后再開始測定。儀器操作光度測量激活光度測量窗口，選擇【測量】菜單下的【參數(shù)設(shè)置】子菜單，打開光度測量參數(shù)設(shè)置窗口。在測量選項卡中，在【波長】編輯框中輸入要測量的波長點，然后點擊【添加】按鈕，即可在下面的波長點列表中添加一個測量波長點，測量波長最多可設(shè)置26個，最少需要設(shè)置一個。如果需要刪除波長點或清除波長列表，可點擊【刪除】按鈕和【清除】按鈕。若在波長列表中選擇了一個波長后，波長編輯框中同樣顯示此波長，這時可以修改波長，然后點擊【修改】按鈕，即可修改列表中相應(yīng)的容。光度測量允許重復(fù)測量，如果不希望重復(fù)測量，選擇【重復(fù)測量】中的【無】。如果需要手動重復(fù)測量，可選擇【手動】，然后在【重復(fù)測量】編輯框中輸入需要重復(fù)的次數(shù)?！咀詣又貜?fù)】功能與手動重復(fù)類似，都是進行重復(fù)測量，但自動重復(fù)測量可自動完成多次重復(fù)測量，無須每次都去按重復(fù)測量鍵，但自動測量需要指定一個測量【時間間隔】。還可以選擇【計算平均值】，這樣每次重復(fù)測量結(jié)束后，系統(tǒng)會自動計算平均值并顯示在測量表格中。6.1.2.1.4依據(jù)測量需要選擇光度模式，可供選擇的光度模式有：Abs（吸光度模式）、T%（透過率模式）、Es（能量模式-樣品光）、Er（能量模式-參比光）、R%（參比透過率-積分球附件專用）。光度測量參數(shù)設(shè)定完畢后，單擊【確定】保存。將空白溶液分別倒入兩個比色皿中，再放入樣品池和參比池中并關(guān)好樣品室蓋，單擊【校零】按鈕或【F8】鍵進行空白校零。將樣品池中的比色皿取出，再放入供試品溶液關(guān)好樣品室蓋，單擊【開始】按鈕或【F9】鍵對供試品進行測量。光譜掃描激活光譜掃描窗口，選擇【測量】菜單下的【參數(shù)設(shè)置】子菜單，即可打開光譜掃描參數(shù)設(shè)置窗口。在測量選項卡中設(shè)置光譜掃描的【光度模式】?？晒┻x擇的光度模式有：Abs（吸光度模式）、T%（透過率模式）、Es（能量模式-樣品光）、Er（能量模式-參比光）、R%（參比透過率-積分球附件專用）。如果選擇了能量方式（Es、Er），還可以點擊【能量】按鈕對能量參數(shù)進行設(shè)置。在顯示圍中設(shè)置光譜掃描圖形中縱坐標(biāo)的圍，在【最大】和【最小】編輯框中輸入相應(yīng)的數(shù)值即可。在掃描參數(shù)中設(shè)置掃描波長的圍、間隔、速度等參數(shù)。【起點】和【終點】構(gòu)成了掃描圍。【速度】表示掃描速度?！鹃g隔】表示掃描的波長間隔。在掃描方式中設(shè)置光譜掃描的重復(fù)掃描模式?！締未螔呙琛勘硎局贿M行一次掃描?！局貜?fù)掃描】表示可進行多次重復(fù)掃描?！局貜?fù)掃描】是根據(jù)選擇的附件樣品池的數(shù)量進行掃描。若選擇了自動掃描，則不需要設(shè)置重復(fù)次數(shù)，只要設(shè)置時間間隔即可。光譜掃描參數(shù)設(shè)定完畢后，單擊【確定】保存。將空白溶液分別倒入兩個比色皿中，再放入樣品池和參比池中并關(guān)好樣品室蓋，單擊【基線】按鈕進行基線校正。將樣品池中的比色皿取出，再放入供試品溶液并關(guān)好樣品室蓋，單擊【開始】按鈕或【F9】鍵對供試品進行光譜掃描。若要終止掃描，可點擊【停止按鈕】或【Esc】鍵。定量測定激活定量測定窗口，選擇【測量】菜單下的【參數(shù)設(shè)置】子菜單，即可打開定量測定設(shè)置窗口。在測量選項卡中對定量測定的測量方法進行設(shè)定，可供選擇的測量方法有：單波長法、雙波長法、雙波長系數(shù)法、三波長法、一次微分法、二次微分法、三次微分法、四次微分法、雙波長二次微分法。選擇單波長法，然后在【主波長】編輯框中輸入測定波長。設(shè)置好后，單擊【確定】保存。6.1.2.3.3在校正曲線選項卡中設(shè)置曲線方程為Abs=f（C），方程次數(shù)為一次，濃度單位（按實驗要求設(shè)置），校正方法為濃度法。將空白溶液分別倒入兩個比色皿中，再放入樣品池和參比池中并關(guān)好樣品室蓋，單擊【校零】按鈕或【F8】鍵進行空白校零。將樣品池中的比色皿取出，再放入標(biāo)準(zhǔn)品溶液關(guān)好樣品室蓋，單擊【開始】按鈕或【F9】鍵會出現(xiàn)一個濃度對話框，在對話框中輸入標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度值，點擊【確定】或按【回車鍵】即可以測量，每一標(biāo)準(zhǔn)樣品重復(fù)操作。測量信息在標(biāo)準(zhǔn)樣品表格中顯示。標(biāo)準(zhǔn)樣品測完后，用純化水洗滌比色皿三次后，倒入供試品溶液，關(guān)好樣品室蓋，將光標(biāo)移至未知樣品表格，點擊【開始】按鈕即可測量，每一供試品溶液重復(fù)操作。測量信息在未知樣品表格中顯示。若標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度輸入正確，未知樣品的濃度可直接顯示，無須計算。也可先不正確輸入標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度，然后將測定的吸光度值記下后再手動計算。時間掃描激活時間掃描窗口，選擇【測量】菜單下的【參數(shù)設(shè)置】子菜單，即可打開時間掃描參數(shù)設(shè)置窗口。在測量選項卡中對【時間掃描光度方式】進行設(shè)定。可供選擇的光度模式有：Abs（吸光度模式）、T%（透過率模式）、Es（能量模式-樣品光）、Er（能量模式-參比光）、R%（參比透過率-積分球附件專用）。如果選擇了能量方式（Es、Er），還可以點擊【能量】按鈕對能量參數(shù)進行設(shè)置。在測量選項卡中對【測量波長點】，【顯示圍】，【時間選項】，【掃描方式】進行設(shè)定，設(shè)定完成后，單擊【確定】保存。將空白溶液分別倒入兩個比色皿中，再放入樣品池和參比池中并關(guān)好樣品室蓋，單擊【校零】按鈕或【F8】鍵進行空白校零。將樣品池中的比色皿取出，再放入供試品溶液并關(guān)好樣品室蓋，單擊【開始】按鈕或【F9】鍵即可開始時間掃描。掃描過程中，系統(tǒng)會將測量結(jié)果以圖形的方式顯示在時間掃描窗口中。若要終止掃描，可點擊【停止按鈕】或【Esc】鍵。6.1.3關(guān)機測量結(jié)束后，選擇【文件】菜單下的【退出】項，退出系統(tǒng)，以便保存必要的操作數(shù)據(jù)。先關(guān)掉紫外可見分光光度計主機電源，然后退出Windows系統(tǒng)并關(guān)掉計算機顯示屏開關(guān)。清潔和維護每月擦拭儀器樣品室及外表面。每月更換浸泡比色皿的75％乙醇。6.3注意事項開機前先檢查樣品室有無擋光物，否則儀器自檢將不能通過。儀器使用前需開機預(yù)熱30分鐘，以保證光源強度的穩(wěn)定。為延長氘燈光源的使用壽命，實驗結(jié)束應(yīng)立即關(guān)機。6.3.4避免在高溫高濕環(huán)境下使用儀器，儀器的使用條件為：室溫15*?35*、濕度45%?80%。如果室溫大于30*，應(yīng)在濕度小于70%的條件下使用。根據(jù)實驗需求，選擇合適厚度的比色皿。樣品測定完畢后應(yīng)及時取出，長時間放置在樣品室中會污染光學(xué)系統(tǒng)，引起性能下降。為了保證儀器在整個波段圍極限的平直度和光度準(zhǔn)確度，每次測量前需進行基線校正或校零。波長定位功能主