細菌的分布與消毒滅菌授課人：XXX病原生物學與免疫學教學課件目錄/CONTENTS01細菌的分布02消毒與滅菌細菌種類繁多，在自然界分布廣泛，它們與外界環(huán)境及宿主一起構成相對平衡的生態(tài)體系。大多數(shù)細菌對人體是無害的，即正常微生物群。但有些細菌侵入人體或因某些原因導致人體內微生態(tài)平衡失調時，可引起疾病。細菌的生命活動極易受外界因素的影響。解細菌在自然界和正常人體的分布、掌握細菌與外界環(huán)境的關系、建立無菌觀念、正確使用消毒滅菌方法，對防止醫(yī)院感染、控制傳染病流行及菌群失調的發(fā)生等具有重要意義。第一節(jié)細菌的分布細菌在自然界的分布細菌在正常人體的分布（一）土壤中的細菌土壤具有供細菌生長繁殖的良好條件，因此土壤中細菌的種類和數(shù)量很多，一般在離地面10～20cm的耕作層土壤中，細菌數(shù)量最多。土壤中的細菌多數(shù)為非病原菌，在自然界的物質循環(huán)中起著重要的作用。但土壤中也有一些來自人和動物的排泄物及死于傳染病的人畜尸體的病原菌，多數(shù)細菌在土壤中很容易死亡。一、細菌在自然界的分布（一）土壤中的細菌但有一些能形成芽胞的細菌，如破傷風梭菌、產氣莢膜梭菌、炭疽芽胞桿菌等，它們在土壤中可存活幾年甚至幾十年，并能通過傷口感染。因此，當傷口被泥土污染時，應采取清創(chuàng)等必要的措施進行預防。一、細菌在自然界的分布（二）水中的細菌水也是細菌生存的天然環(huán)境，水中的細菌主要來自土壤、人和動物的排泄物等。水中常含有傷寒沙門菌、痢疾志賀菌、霍亂弧菌等病原菌。水源被污染可引起多種消化道傳染病的流行，因此，保護水源、加強水和糞便的管理是預防和控制腸道傳染病的重要措施。一、細菌在自然界的分布（三）空氣中的細菌空氣中缺乏細菌生長所需的營養(yǎng)物質和水分，且受日光照射，細菌不易繁殖。但由于人和動物呼吸道中的細菌可隨唾液、飛沫散布到空氣中，土壤中的細菌也可隨塵埃飛揚在空氣中，所以空氣中可存在不同種類的細菌。尤其在人口密集的公共場所或醫(yī)院，空氣中細菌的種類和數(shù)量顯著增多。常見的病原菌有金黃色葡萄球菌、鏈球菌、結核分枝桿菌、白喉棒狀桿菌等，可引起傷口或呼吸道感染。一、細菌在自然界的分布（三）空氣中的細菌此外，空氣中的非病原菌?？稍斐缮镏破贰⑺幬镏苿┘芭囵B(yǎng)基的污染。因此，醫(yī)院的手術室、病房、制劑室、實驗室等要經(jīng)常進行空氣消毒，并嚴格按照有關制度進行消毒隔離和無菌操作，以防止疾病的傳播、手術傷口的污染或術后的感染。一、細菌在自然界的分布正常情況下，人體與正常菌群之間、體內微生物與微生物之間相互依存、相互制約，構成機體的一種生態(tài)平衡，其生理意義主要表現(xiàn)在：部位主要菌類皮膚葡萄球菌、類白喉棒狀桿菌、銅綠假單胞菌、非結核分枝桿菌、丙酸桿菌、白假絲酵母菌口腔葡萄球菌、甲型和丙型鏈球菌、肺炎鏈球菌、奈瑟菌、乳桿菌、類白喉棒狀桿菌、螺旋體、放線菌、白假絲酵母菌、類桿菌鼻咽腔葡萄球菌、甲型和丙型鏈球菌、肺炎鏈球菌、奈瑟菌、類桿菌、腺病毒、真菌、支原體外耳道葡萄球菌、類白喉棒狀桿菌、銅綠假單胞菌、非結核分枝桿菌眼結膜葡萄球菌、結膜干燥桿菌、類白喉棒狀桿菌腸道大腸埃希菌、產氣腸桿菌、變形桿菌、銅綠假單胞菌、葡萄球菌、糞鏈球菌、類桿菌、破傷風梭菌、雙歧桿菌、乳桿菌、白假絲酵母菌前尿道葡萄球菌、棒狀桿菌、非結核分枝桿菌、大腸埃希菌、白假絲酵母菌陰道乳酸桿菌、大腸埃希菌、類桿菌、白假絲酵母菌二、細菌在正常人體的分布正常情況下，人體與正常菌群之間、體內微生物與微生物之間相互依存、相互制約，構成機體的一種生態(tài)平衡，其生理意義主要表現(xiàn)在如下幾個方面二、細菌在正常人體的分布正常菌群通過競爭營養(yǎng)或產生細菌素等方式拮抗病原菌，構成一個防止外來細菌侵入與定居的生物屏障。如腸道中大腸埃希菌產生的大腸菌素能抑制痢疾志賀菌的生長。1．拮抗作用（一）正常菌群正常菌群具有免疫原性和促免疫細胞分裂的作用，能刺激機體產生抗體，促進機體免疫系統(tǒng)的發(fā)育和成熟，限制正常菌群本身對宿主的危害，以及抑制或殺滅具有交叉抗原的病原菌。2．免疫作用（一）正常菌群正常菌群參與蛋白質、糖類與脂類的代謝，促進營養(yǎng)物質的吸收，還能合成B族維生素和維生素K等供人體利用。3．營養(yǎng)作用（一）正常菌群腸道中正常菌群中的雙歧桿菌、乳桿菌等具有抗衰老作用，其機制是這類細菌能產生超氧化物歧化酶（SOD），SOD能催化自由基（O2-）歧化，清除O2-的毒性，保護組織細胞免受傷害。此外，正常菌群還有一定的抗癌作用。4．抗衰老作用（一）正常菌群寄居在人體一定部位的正常菌群相對穩(wěn)定，但在特定條件下，正常菌群與宿主之間、正常菌群中各種細菌之間的生態(tài)平衡可被破壞使機體致病，這類在正常條件下不致病，在特殊情況下能引起疾病的細菌，稱為條件致病菌（conditionedpathogen）或機會致病菌（opportunisticpathogen）。（二）條件致病菌如大腸埃希菌從原寄居的腸道進入腹腔、泌尿道等，引起腹膜炎、尿道炎。1．寄居部位改變（二）條件致病菌如大面積燒傷、慢性消耗性疾病及使用大劑量的糖皮質激素或抗腫瘤藥物等，造成機體免疫功能低下時，正常菌群中的某些細菌可引起自身感染而出現(xiàn)各種感染病癥。2．機體免疫功能低下（二）條件致病菌由于某種原因使正常菌群的種類、數(shù)量和比例發(fā)生較大幅度的改變，導致微生態(tài)失去平衡，稱為菌群失調（floradisequilibrium）。由于嚴重菌群失調使宿主發(fā)生一系列臨床癥狀，稱為菌群失調癥。因菌群失調癥往往是在抗菌藥物等治療原有感染性疾病的過程中產生的另一種新感染，故臨床上又稱二重感染。引起二重感染的細菌以金黃色葡萄球菌、革蘭氏陰性菌和白假絲酵母菌多見。患二重感染的患者免疫力低，治療難度大，應避免發(fā)生。對已發(fā)生二重感染的患者，應立即停用原抗菌藥物，并對患者標本中分離的致病菌做藥敏試驗，選用合適的藥物治療。同時，亦可使用微生態(tài)制劑，使之恢復正常菌群的生態(tài)平衡。3．菌群失調（二）條件致病菌第二節(jié)消毒與滅菌消毒與滅菌常用的術語消毒與滅菌的方法消毒與滅菌是用物理、化學或生物的方法抑制或殺死環(huán)境及機體體表的微生物，防止微生物污染或病原微生物傳播的方法。一、消毒與滅菌常用的術語消毒1消毒（disinfection）是指殺死物體上的病原微生物的方法。用于消毒的化學藥品稱為消毒劑。一般消毒劑在常用濃度下，只對細菌的繁殖體有效，要殺滅細菌芽胞需要提高消毒劑的濃度及延長消毒時間。一、消毒與滅菌常用的術語滅菌2滅菌（sterilization）是指殺滅物體上所有微生物（包括病原菌、非病原菌的繁殖體及芽胞）的方法。一、消毒與滅菌常用的術語防腐3防腐（antisepsis）是指防止或抑制微生物生長繁殖的方法。用于防腐的化學藥品稱為防腐劑。許多化學制劑在低濃度時是防腐劑，在高濃度時為消毒劑。一、消毒與滅菌常用的術語無菌及無菌操作4物體上沒有活的微生物存在稱為無菌（asepsis）。防止微生物進入機體或物體的操作技術稱為無菌操作。進行外科手術、醫(yī)療技術操作及微生物學實驗等，均需嚴格無菌操作。一、消毒與滅菌常用的術語（一）物理消毒滅菌法常用的物理消毒滅菌法有熱力、輻射、濾過除菌等。二、消毒與滅菌的方法熱力滅菌法分為濕熱滅菌和干熱滅菌兩大類。（1）濕熱滅菌法①高壓蒸汽滅菌法：高壓蒸汽法是目前應用最廣、滅菌效果最好的方法。使用密閉的高壓蒸汽滅菌器，加熱產生蒸汽，隨著蒸汽壓力的升高，溫度也相應升高。在103.4kPa（1.05kg/cm2）蒸汽壓力下，溫度達到121.3℃，維持15～20分鐘，可殺死所有的細菌繁殖體和芽胞。常用于一般培養(yǎng)基、手術器械、敷料等耐高溫、耐濕物品的滅菌。滅菌時，必須將鍋內冷空氣排盡，并應注意物品不宜放置過緊、過滿，否則會影響滅菌效果。1．熱力滅菌法（一）物理消毒滅菌法（1）濕熱滅菌法②煮沸法：100℃煮沸5分鐘，可殺死細菌繁殖體，主要用于飲用水、食具、一般外科器械的消毒。殺死細菌芽胞則需煮沸1～2小時。若在水中加入2%碳酸氫鈉，可提高沸點到105℃，既可促進殺滅芽胞，又能防止金屬器械生銹。③間歇蒸汽滅菌法：將物品用蒸籠或阿諾蒸鍋加熱至100℃，維持15～30分鐘，可殺死細菌繁殖體，然后將其置于37℃的溫箱中過夜，使芽胞發(fā)育成繁殖體，次日用同樣的方法再蒸一次，如此重復3次，可達到滅菌的目的。間歇蒸汽滅菌法常用于不耐高溫的含糖、牛奶等物質的營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基滅菌。1．熱力滅菌法（一）物理消毒滅菌法（1）濕熱滅菌法④巴氏消毒法：巴氏消毒法因巴斯德創(chuàng)用而得名，此法用較低溫度殺死物品中的病原菌，同時又不影響消毒物品的營養(yǎng)成分及香味。61.1～62.8℃維持30分鐘或71.7℃維持15～30秒即可，常用于牛奶、飲料、酒類等的消毒。1．熱力滅菌法（一）物理消毒滅菌法（2）干熱滅菌法①焚燒和燒灼：焚燒是直接點燃或在焚化爐內焚化，廢棄物品或死于傳染病的人或動物尸體可通過焚燒滅菌。燒灼是直接用火焰滅菌，實驗用的接種環(huán)、試管口等可通過燒灼滅菌。②干烤：干烤是在密閉的電熱干烤箱內利用加熱的空氣進行滅菌。通常加熱至160～170℃維持2小時，可達到滅菌的目的。本法僅適用于高溫下不變質、不損壞、不蒸發(fā)的物品，如玻璃器皿、瓷器、油制劑、粉劑藥品等。1．熱力滅菌法（一）物理消毒滅菌法在同一溫度下，濕熱的滅菌效果比干熱好，其原因包括：①濕熱比干熱穿透力強，能較快提高滅菌物品內部的溫度。②濕熱時細菌易吸收水分，使菌體蛋白更易凝固變性。③熱蒸汽接觸被滅菌物品時變?yōu)橐簯B(tài)，可放出大量的潛熱，能迅速提高滅菌物品的溫度。1．熱力滅菌法（一）物理消毒滅菌法（1）紫外線紫外線的波長在200～300nm時，具有殺菌作用，其中以265～266nm時殺菌力最強。紫外線的殺菌機制主要是破壞DNA的構型，從而干擾DNA的復制與轉錄，導致細菌變異或死亡。紫外線的穿透力弱，普通玻璃、紙張、塵埃等均能阻擋紫外線，故本法只適用于手術室、傳染病房、實驗室等的空氣消毒或物品表面的消毒。殺菌波長的紫外線對人體皮膚、眼睛有損傷作用，使用時應注意防護。2．輻射滅菌法（一）物理消毒滅菌法（2）電離輻射電離輻射包括高速電子、X射線和γ射線等。在足夠劑量時，輻射粒子與某些分子撞擊后，可激發(fā)這些分子產生離子或其他活性分子和游離基，破壞DNA，對各種細菌均有致死作用。本法常用于一次性醫(yī)用塑料制品的消毒，也可用于食品的消毒。2．輻射滅菌法（一）物理消毒滅菌法濾過除菌法是用物理阻留的方法，利用具有微細小孔的濾菌器的篩濾和吸附作用，使帶菌液體或空氣通過濾菌器后成為無菌液體或氣體。本法主要用于不耐高溫的血清、抗毒素、抗生素等液體的除菌。濾菌器的種類很多，目前常用的有蔡氏濾菌器、玻璃濾菌器、薄膜濾菌器及高效顆粒空氣濾菌器四種?，F(xiàn)代醫(yī)院的手術室、燒傷病房、制劑室等已逐步采用高效顆粒空氣濾菌器。3．濾過除菌法（一）物理消毒滅菌法許多化學藥物能影響細菌的化學組成、結構與生理活動，發(fā)揮防腐、消毒甚至滅菌的作用。消毒劑對細菌和人體細胞都有一定的毒性作用，因此主要用于人體體表、醫(yī)療器械及周圍環(huán)境的消毒。（二）化學消毒滅菌法類別名稱常用濃度用途酚類苯酚3%～5%地面、家具、器皿表面的消毒

來蘇爾2%皮膚消毒

氯己定0.01%～0.05%術前洗手、引導沖洗等醇類乙醇70%～75%皮膚、體溫計消毒等重金屬鹽類升汞0.05%～0.1%非金屬器皿消毒

紅汞2%皮膚、黏膜、小創(chuàng)傷消毒

硫柳汞0.01%～0.1%皮膚、手術部位消毒

硝酸銀1%新生兒滴眼、預防淋球菌感染氧化劑高錳酸鉀0.1%皮膚、尿道、水果消毒

過氧化氫3%皮膚、黏膜、創(chuàng)口消毒

過氧乙酸0.2%～0.5%塑料、玻璃器皿、地面、家具表面消毒鹵素及其化合物碘伏0.5%～1%皮膚、傷口消毒

碘酒2%～2.5%皮膚消毒

氯0.2～0.5ppm飲水、游泳池消毒

漂白粉10%～20%地面、廁所、排泄物消毒（二）化學消毒滅菌法類別名稱常用濃度用途表面活性劑苯扎溴銨0.05%～0.1%外科手術洗手、皮膚黏膜消毒、浸泡手術器械

杜滅芬0.05%～0.1%皮膚創(chuàng)傷沖洗，金屬器械、塑料、橡皮類消毒醛類甲醛10%物體表面、空氣消毒

戊二醛2%精密儀器、內鏡等消毒烷化劑環(huán)氧乙烷50mg/L手術器械、敷料等消毒酸堿類醋酸5～10mL/m3空氣消毒

生石灰按1∶4～1∶8

配成糊狀地面、排泄物消毒染料甲紫2%～4%淺表創(chuàng)傷消毒（二）化學消毒滅菌法（1）促使菌體蛋白質變性或凝固,如重金屬鹽類、醇類、醛類、酸類、堿類等。（2）干擾細菌的酶系統(tǒng)和代謝,如某些氧化劑及重金屬鹽類可與細菌酶蛋白中的巰基（—SH）結合，使酶失去活性，引起細菌代謝障礙。（3）改變細菌細胞膜的通透性,有些消毒劑可改變細胞膜的通透性，使細胞內容物溢出，導致細菌死亡。如表面活性劑、酚類、苯扎溴銨等。2．常用消毒劑的作用機制（二）化學消毒滅菌法（1）消毒劑的濃度和作用時間一般情況下，消毒劑的濃度愈大，殺菌作用愈強。但乙醇除外，70%～75%的乙醇消毒效果最好，過高濃度的醇類會使菌體蛋白迅速脫水凝固，影響醇類繼續(xù)向內部滲入，降低殺菌效果。消毒劑在一定濃度下，對細菌的作用時間愈長，消毒效果愈好。3．影響消毒滅菌效果的因素（二）化學消毒滅菌法（2）細菌的種類與生活狀態(tài)不同的細菌對消毒劑抵抗力不同。如細菌的芽胞比繁殖體抵抗力強，有莢膜的細菌抵抗力強，幼齡菌比老齡菌對消毒劑敏感。3．影響消毒滅菌效果的因素（二）化學消毒滅菌法（3