美麗的海醫(yī)校園細(xì)胞病理學(xué)檢驗(yàn)根底知識(shí)—

海南醫(yī)學(xué)院熱帶醫(yī)學(xué)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院臨床檢驗(yàn)學(xué)教研室吳榮泉脫落細(xì)胞學(xué)課程設(shè)計(jì)脫落細(xì)胞學(xué)概念〔臨床細(xì)胞學(xué)、細(xì)胞病理學(xué)、細(xì)胞診斷學(xué)〕是人體各部位，組織器官脫落細(xì)胞或?qū)Σ∽兤鞴偌澳[物通過采集，針吸的方法獲得細(xì)胞，經(jīng)染色后，在鏡下觀察這些細(xì)胞的形態(tài)，從而作出診斷的一門臨床檢驗(yàn)學(xué)科。脫落細(xì)胞學(xué)檢查的局限性，比方，假陰性〔20%-30%〕，假陽性性〔5%-10%〕，因此腫瘤的診斷應(yīng)配合影像學(xué)、腫瘤標(biāo)志物等檢查信息進(jìn)行綜合分析作出診斷惡性腫瘤的診斷：以病理組織學(xué)檢查結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)。什么是脫落細(xì)胞學(xué)？脫落細(xì)胞學(xué)的研究內(nèi)容

教學(xué)目標(biāo)：

※了解不同來源標(biāo)本的采集方法

※掌握脫落細(xì)胞標(biāo)本的制片、固定方法和目的

※掌握常用瑞氏、巴氏、HE染色原理與方法

※熟悉脫落細(xì)胞學(xué)鏡撿的要求，細(xì)胞觀察分析方法

脫落細(xì)胞學(xué)檢驗(yàn)

標(biāo)本采集——多由臨床醫(yī)師采集

標(biāo)本來源

1、自然排除物尿液、痰液、乳頭溢液、精液、前列腺液陰道分泌物等。2、體腔抽出物胸腔，腹腔積液、心包積液、腦脊液等3、細(xì)針穿刺液淋巴結(jié)、乳腺、甲狀腺、肝、肺、胰腺等?！魳?biāo)本采集采集方法：擦取、蘸取、刷取、擦去、刮取、灌洗等◆涂片制備：因標(biāo)本而異直接涂片、離心沉渣涂片、推片、壓拉制片、印片、液基細(xì)胞學(xué)制片等?！艄潭ㄅc染色固定的目的，固定的方法〔乙醇，甲醇，〕染色：巴氏染色、HE染色、瑞氏染色等◆鏡下觀察方法與細(xì)胞分析：采集〔檢驗(yàn)前〕標(biāo)本采集本卷須知制片固定和染色〔檢驗(yàn)中〕鏡下觀察分析報(bào)告書寫及發(fā)放〔檢驗(yàn)后〕正確采集標(biāo)本是細(xì)胞學(xué)診斷的關(guān)鍵和根底在病變區(qū)準(zhǔn)確直接采取細(xì)胞必須保持標(biāo)本新鮮，及時(shí)送檢，固定、制片。防止血液、粘液等干擾物混入標(biāo)本采集方法應(yīng)簡便，操作應(yīng)輕柔，減少病人痛苦，防止并發(fā)癥的發(fā)生和腫瘤擴(kuò)散。

標(biāo)本采集的方法灌洗法標(biāo)本采集：以生理鹽水對空腔進(jìn)行沖洗，收集脫落細(xì)胞的方法。比方，胃，腸等摩擦法：用摩擦工具在病變處摩擦，取擦取物直接涂片。常用工具有線網(wǎng)套、氣囊、海綿球摩擦法等?？蓪Ρ茄什?、食管和胃等組織器官針穿抽吸法：〔細(xì)針穿刺〕對組織器官的積液或某些實(shí)質(zhì)器官穿刺吸取細(xì)胞作涂片檢查。如淋巴結(jié)、乳腺、甲狀腺、肝、肺、皮下腫塊等涂片制作要求

標(biāo)本要新鮮：取材后盡快制片。操作要輕柔：防止擠壓損傷細(xì)胞。涂片均勻、厚薄適度。玻片要清潔：硫酸洗滌浸泡、沖洗，再用75％乙醇浸泡。涂片要牢固：含蛋白質(zhì)的標(biāo)本；缺乏蛋白質(zhì)的標(biāo)本，涂片前先在玻片上涂一薄層粘附劑。涂片數(shù)量：每位患者的標(biāo)本至少要涂4張(編號(hào))涂片制備方法涂片的固定固定：保持細(xì)胞的自然形態(tài)，防止細(xì)胞自溶和細(xì)菌導(dǎo)致腐敗——固定液能凝固和沉淀細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)和破壞細(xì)胞內(nèi)的溶酶體，保持細(xì)胞自然形態(tài)，使細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰，易于著色。固定愈及時(shí)，標(biāo)本愈新鮮，細(xì)胞結(jié)構(gòu)愈清晰，染色效果愈好。常用固定劑：95%乙醇常用固定液固定液1、乙醚乙醇固定液：滲透性強(qiáng)，固定效果好。適于一般細(xì)胞學(xué)常規(guī)染色。2、氯仿乙醇固定液〔carnoy固定液〕：同乙醚乙醇固定液。95％乙醇固定液：制備簡單，但滲透作用差，適用于大規(guī)模防癌普查。固定方法〔1〕帶濕固定：用于比較粘稠的標(biāo)本。涂片尚未枯燥即固定如痰液，精液，前列腺液，陰道分泌物該法固定細(xì)胞染色鮮艷，結(jié)構(gòu)清楚，選用巴氏染色、HE染色、瑞氏染色等?！?〕枯燥固定：涂片枯燥后再固定，如，尿液，腦脊液、穿刺液、漿膜腔積液等適于瑞氏-吉姆薩氏染色。較稀薄標(biāo)本常用。固定時(shí)間固定液不同，固定時(shí)間不同。15-30min.標(biāo)本不同，固定時(shí)間不同?！惨话?5min〕稀薄標(biāo)本，固定時(shí)間可酌情縮短。痰液，食管拉網(wǎng)及陰道分泌物因含粘液較多，固定時(shí)間應(yīng)適當(dāng)延長。細(xì)胞成份較少者，固定時(shí)間可酌情縮短；細(xì)胞成份較多者，固定時(shí)間可應(yīng)適當(dāng)延長。巴氏染色法：所染細(xì)胞具有多色性，色彩鮮艷多樣。涂片染色的透明性好，細(xì)胞核結(jié)構(gòu)清晰，細(xì)胞質(zhì)顆粒清楚。

蘇木素－伊紅染色蘇木素－伊紅染色〔HE〕：H是陽離子染料，核染成藍(lán)紫色，Eosin是陰離子染料，胞質(zhì)和膠原纖維染成粉紅色。瑞－吉氏染色瑞氏－吉姆薩氏染色同白細(xì)胞分類染色。細(xì)胞較為鮮艷，細(xì)胞核染成紫紅色，細(xì)胞質(zhì)根據(jù)發(fā)育程度染成藍(lán)色或紅色。細(xì)胞病理學(xué)診斷要點(diǎn)與質(zhì)量管理收集各類信息，進(jìn)行綜合分析，結(jié)合細(xì)胞形態(tài)作出明確診斷〔患者信息，其他檢測結(jié)果〕細(xì)胞學(xué)診斷：1.明確細(xì)胞來源、觀察主體細(xì)胞數(shù)量和背景細(xì)胞2.單個(gè)細(xì)胞與群體細(xì)胞的關(guān)系，群體細(xì)胞形態(tài)特征3.細(xì)胞核的特征與改變是判定腫瘤細(xì)胞的重要依據(jù)4.細(xì)胞質(zhì)的改變，提供判斷細(xì)胞來源，類型依據(jù)5.鏡撿要求、人為影響：主觀與客觀影響6.細(xì)胞學(xué)診斷的優(yōu)點(diǎn)和局限性〔假陰性，假陽性〕液基細(xì)胞學(xué)自動(dòng)制片、涂片，染色，與TBS報(bào)告系統(tǒng)

第二節(jié)正常細(xì)胞形態(tài)學(xué)復(fù)層鱗狀上皮脫落細(xì)胞形態(tài)示意圖各層鱗狀上皮細(xì)胞(巴氏染色)表層角化細(xì)胞表層角化前細(xì)胞

角化前與中層細(xì)胞內(nèi)底層,外底層細(xì)胞

中、表層鱗狀上皮細(xì)胞基底層鱗狀上皮細(xì)胞成團(tuán)脫落的纖毛柱狀上皮細(xì)胞聚集成堆，細(xì)胞界線不清，胞核互相堆疊，形成核團(tuán)，核周圍胞質(zhì)融合成胞質(zhì)帶。細(xì)胞團(tuán)邊緣可見有纖毛。纖毛柱狀上皮細(xì)胞正常態(tài)、炎性變形態(tài)特征11纖毛柱狀上皮細(xì)胞

粘液柱狀上皮細(xì)胞--腺細(xì)胞

呈蜂窩狀結(jié)構(gòu)，胞質(zhì)內(nèi)富含粘液，多有大空泡細(xì)胞較大，可見印戒樣細(xì)胞間皮細(xì)胞：胸腹水中常見間皮細(xì)胞細(xì)胞損傷、修復(fù)和再生細(xì)胞死亡〔凋亡〕1，細(xì)胞的程序性自然死亡稱為細(xì)胞凋亡。細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯退化變性2，細(xì)胞壞死：病理性、理化因素刺激引起，如細(xì)胞的急性壞死、慢性增生等細(xì)胞損傷特征1，細(xì)胞的炎性變，核變性，多樣變。2，細(xì)胞的化生變化。上皮細(xì)胞類型的轉(zhuǎn)化化生是由長期慢性病理性因素刺激，導(dǎo)致一種成熟上皮組織逐漸演變成另一類成熟上皮組織的過程。容易引起細(xì)胞基因突變發(fā)生惡性改變。細(xì)胞凋亡鱗狀細(xì)胞化生細(xì)胞的修復(fù)和再生非腫瘤性細(xì)胞學(xué)形態(tài)1.化生在病理因素刺激下，一種上皮細(xì)胞逐漸轉(zhuǎn)化為另一種成熟上皮細(xì)胞的過程。多見鱗狀細(xì)胞變?yōu)橹鶢罴?xì)胞〔鱗化〕2.增生、〔多由長期慢性刺激引起〕見于慢性刺激引起的細(xì)胞的數(shù)量和增次增加，組織器官的體積也有所增大的現(xiàn)象。3萎縮：包括病理性的，和生理性的，由組織學(xué)來確定4炎性變：急性壞死，慢性增生，肉芽腫等，由組織學(xué)確定脫落上皮細(xì)胞的退化變性與炎性變腫脹性退變細(xì)胞水腫主要是細(xì)胞內(nèi)水鈉潴留，細(xì)胞腫脹，體積增大，胞漿內(nèi)出現(xiàn)空泡變性，胞核也可腫大，有時(shí)胞核被擠壓向一邊呈印戒樣，染色質(zhì)成淡藍(lán)色云霧狀，核增大變形，最后細(xì)胞膜破裂，形成裸核?！捕嘁娭鶢钌掀ず椭械讓喻[狀上皮細(xì)胞〕固縮性退變細(xì)胞脫水因細(xì)胞脫水或缺乏營養(yǎng)，細(xì)胞體積變小，細(xì)胞核固縮、濃染，胞質(zhì)內(nèi)可見蛋白質(zhì)顆?；蚣?xì)菌。表層細(xì)胞多表現(xiàn)為固縮性退變

鱗狀細(xì)胞炎性變形態(tài)：腫脹性變、固縮性變、炎性核異質(zhì)、畸形改變等A：表層嗜堿或嗜酸性細(xì)胞B：萎縮型細(xì)胞，核固縮腦神經(jīng)細(xì)胞萎縮

柱狀上皮細(xì)胞：炎癥性變化核腫脹與核固縮脫落上皮細(xì)胞的退化變性脫落細(xì)胞退變腫脹性退變

病毒感染上皮細(xì)胞形態(tài)改變單純皰疹病毒感染：分為兩型

Ⅰ型：主要經(jīng)口和呼吸道傳播

Ⅱ型：主要通過性器官傳播。細(xì)胞核中、重度腫大呈弱嗜堿性不透明毛玻璃樣外觀，偶見核空泡?？梢姸嗪司藜?xì)胞，細(xì)胞核中心出現(xiàn)大的嗜酸性包涵體，包涵體周圍有亮?xí)灒诉吳宄藜?xì)胞病毒感染：主要侵犯嬰幼兒。細(xì)胞體積增大，20－40um，胞質(zhì)與胞核內(nèi)可見包涵體包涵體周圍有亮?xí)灐?/p>

單純皰疹病毒感染的細(xì)胞學(xué)改變

挖空細(xì)胞或核周孔穴細(xì)胞人乳頭狀瘤病毒有關(guān)的細(xì)胞學(xué)改變

核周孔穴細(xì)胞各類炎癥脫落細(xì)胞特征急性炎癥和亞急性炎癥：涂片中退變細(xì)胞、壞死細(xì)胞多見，中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、吞噬細(xì)胞易見。肉芽腫性炎癥：〔以結(jié)核病為例〕類上皮細(xì)胞：由組織細(xì)胞吞噬結(jié)合桿菌后變形而形成。細(xì)胞呈多邊形或梭形，15－25um，胞質(zhì)豐富淡紅色，細(xì)胞邊界不清。核為圓形或卵圓形，常見核變狹長，呈鞋底狀或黃瓜狀，兩端鈍圓。核邊薄，染色質(zhì)疏松呈細(xì)顆粒狀?？梢?－2核仁。類上皮細(xì)胞成堆并伴有干酪樣壞死時(shí)，更具有診斷意義。朗罕式細(xì)胞：結(jié)核巨細(xì)胞朗罕氏細(xì)胞多個(gè)類上皮細(xì)胞融合而成。細(xì)胞體積大，達(dá)200－300um,呈不規(guī)那么圓形，有十幾個(gè)至幾十個(gè)核，核排列在細(xì)胞周邊部，呈馬蹄形或環(huán)形。僅朗罕細(xì)胞診斷結(jié)核意義不可靠，需同時(shí)見類上皮細(xì)胞和干酪樣壞死，才具有診斷意義。干酪樣壞死：無結(jié)構(gòu)紅染的顆粒狀物，壞死較徹底，在背景上難以找到細(xì)胞核碎片。其附近出現(xiàn)類上皮細(xì)胞，那么更支持結(jié)核的診斷四、標(biāo)本中非上皮細(xì)胞包括紅細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、吞噬細(xì)胞、組織細(xì)胞、多核巨細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、間皮細(xì)胞等．壞死物、黏液及異物．如細(xì)菌，寄生蟲等非上皮細(xì)胞〔背景細(xì)胞〕血管內(nèi)皮細(xì)胞少量出現(xiàn)意義不大，組織損傷時(shí)可增多淋巴細(xì)胞；免疫性疾病，慢性疾病可增加吞噬細(xì)胞或組織細(xì)胞細(xì)菌，病毒感染，寄生蟲病可增加血細(xì)胞〔紅細(xì)胞、各種白細(xì)胞〕紅細(xì)胞增多有較大意義，白細(xì)胞與炎癥有密切關(guān)系背景細(xì)胞的數(shù)量，類型，形態(tài)的變化對臨床診斷有重要的提示意義

核異質(zhì)和角化不良細(xì)胞形態(tài)核異質(zhì)(dyskaryosis):是指細(xì)胞核的異常，表現(xiàn)為核形態(tài)、大小及染色質(zhì)分布異常，核邊增厚，核邊界不整齊等，胞質(zhì)的質(zhì)和量的分化正常。核異質(zhì)細(xì)胞介于良性和惡性細(xì)胞之間，又稱為不典型細(xì)胞或增生不良細(xì)胞。輕度核異質(zhì)細(xì)胞和重度核異質(zhì)細(xì)胞角化不良〔包括早熟角化和假角化〕又稱異常角化、不成熟角化：是指細(xì)胞質(zhì)發(fā)育過度成熟是指鱗狀上皮非角化層細(xì)胞出現(xiàn)個(gè)別散在的胞漿內(nèi)角化。第三節(jié)惡性腫瘤細(xì)胞形態(tài)惡性腫瘤細(xì)胞的一般形態(tài)特征〔一〕惡性腫瘤細(xì)胞核的異型性表現(xiàn)〔二〕惡性腫瘤細(xì)胞質(zhì)異的型性表現(xiàn)〔三〕單個(gè)散在癌細(xì)胞與癌細(xì)胞團(tuán)的關(guān)系〔四〕涂片中背景成分〔五〕惡性腫瘤細(xì)胞與核異質(zhì)細(xì)胞的鑒別〔一〕惡性腫瘤細(xì)胞核異型性表現(xiàn)1．核增大，大小不等2．核染色質(zhì)增多粗糙3.核深染4．核畸形5．胞核與胞質(zhì)比例失常6．核仁增大數(shù)目增多7．核異常分裂及多核6．巨癌細(xì)胞和多核巨瘤細(xì)胞9．惡性裸核及低分化癌細(xì)胞，未分化癌惡性腫瘤細(xì)胞質(zhì)異型性表現(xiàn)

〔細(xì)胞質(zhì)的多少，形態(tài)及特征性分化反映了腫瘤細(xì)胞的分化程度和惡性程度〕1．高分化惡性腫瘤：胞質(zhì)豐富骨有特征性分化2．低分化惡性腫瘤：腫瘤細(xì)胞分化愈差，其胞質(zhì)愈少，惡性程度越高3．惡性腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)為嗜堿性略呈藍(lán)色4．腫瘤細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)有時(shí)可見吞噬的異物〔封入細(xì)胞〕癌細(xì)胞的吞噬成團(tuán)癌細(xì)胞特征

上皮細(xì)胞組織發(fā)生的惡性腫瘤稱為癌，

①具有上皮組織特點(diǎn)，即成巢向。

②多見成團(tuán)脫落的癌細(xì)胞。

③癌細(xì)胞團(tuán)：大小不等，排列不齊，形態(tài)不一、界限不清，極性紊亂?？沙疏偳痘蚨询B狀。間葉組織發(fā)生的惡生腫瘤稱肉瘤。如纖維肉瘤，骨肉瘤腫瘤細(xì)胞相對一致，散在分布，無成巢傾向如惡性淋巴瘤。惡性腫瘤細(xì)胞與核異質(zhì)細(xì)胞的鑒別細(xì)胞結(jié)構(gòu)惡性腫瘤細(xì)胞核異質(zhì)細(xì)胞核大小不一，畸形顯著輕至中度核邊明顯增厚且薄厚不均輕度增厚染色質(zhì)結(jié)構(gòu)不規(guī)則結(jié)塊或粗顆粒狀，其間有透明間隙，有時(shí)呈墨水滴狀多呈細(xì)顆粒狀，少數(shù)染色質(zhì)結(jié)塊，無墨水滴狀改變核仁可多個(gè)，有時(shí)巨大，可達(dá)4um以上1－2個(gè)，輕度增大病理性核分裂有無胞質(zhì)細(xì)胞形態(tài)不一，大小不等，胞質(zhì)嗜堿性染色胞質(zhì)的質(zhì)和量尚正常核質(zhì)比顯著增大輕度至中度增大三種常見類型癌細(xì)胞形態(tài)特征癌是最常見的惡性腫瘤，病理上分為鱗狀細(xì)胞癌，腺癌和未分化癌三個(gè)主要類型，多數(shù)涂片中根據(jù)癌細(xì)胞形態(tài)可以分型，在癌細(xì)胞分化差或涂片中癌細(xì)胞很少時(shí)，那么分型困難，列為分類不明或未分類。根據(jù)細(xì)胞的分化程度和形態(tài)又分為：1鱗癌2腺癌3未分化癌高分化鱗癌低分化鱗癌高分化腺癌低分化腺癌大細(xì)胞性未分化癌小細(xì)胞性未分化癌鱗狀細(xì)胞癌〔squamouscarinoma〕來源于鱗狀上皮或柱狀上皮鱗狀化生后癌變。1．分化較好的鱗癌細(xì)胞涂片中以相當(dāng)于表層的癌細(xì)胞為主。特征性形態(tài)：形似蝌蚪；纖維狀癌細(xì)胞；癌性角化珠。2．分化差的鱗癌細(xì)胞涂片中只見相當(dāng)于中層和底層的癌細(xì)胞。多為圓形或不規(guī)那么形，散在或成團(tuán)分布。成團(tuán)脫落的癌細(xì)胞呈堆疊狀，胞質(zhì)較少。嗜堿性染色。胞核居中，畸形,染色質(zhì)呈粗顆粒狀，分布不均，有時(shí)可見核仁。高分化鱗癌細(xì)胞低分化鱗癌細(xì)胞高分化肺鱗癌細(xì)胞低分化肺鱗癌細(xì)胞鱗狀細(xì)胞癌典型的癌細(xì)胞巢，其中兩個(gè)癌巢中央形成同心圓狀的角化珠

鱗狀細(xì)胞癌

腺癌

分化較好的腺癌細(xì)胞：癌細(xì)胞體積較大，呈圓形、卵圓形、成排脫落者可呈不規(guī)那么的柱狀。胞質(zhì)豐富略嗜堿染色，胞質(zhì)內(nèi)可見粘液空泡。胞核常偏于癌細(xì)胞的一側(cè)，癌細(xì)胞核為圓形或卵圓形、略畸形，染色質(zhì)豐富，略深染，呈粗塊或粗網(wǎng)狀，核邊不規(guī)那么，常見1-2個(gè)增大核仁。見印戒細(xì)胞。高分化腺癌：腺癌細(xì)胞呈腺腔樣排列〔×1000〕2．分化差(低分化)的腺癌細(xì)胞：癌細(xì)胞體積較小，癌細(xì)胞團(tuán)呈桑椹狀或腺腔樣。胞質(zhì)少，嗜堿性染色，胞核呈圓形，半月形或不規(guī)那么