中華人民共和國(guó)出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)出口化妝品中黃樟素和6-甲基香豆素的測(cè)定氣相色譜法Determinationofsafroleand62006-04-25發(fā)布2006-04-25發(fā)布中、華人民共，和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局進(jìn)出口化妝品中黃樟素和6-甲基香豆素的測(cè)定氣相色譜法本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了進(jìn)出口化妝品中黃樟素(safrole)和6-甲基香豆素(6-methylcoumarin)的氣相色譜測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于化妝品中黃樟素和6-甲基香豆素的測(cè)定。本標(biāo)準(zhǔn)黃樟素的測(cè)定低限為0.0005%,6-甲基香豆素的測(cè)定低限為0.001%。質(zhì)譜法的確證低限為黃樟素為0.0005%,6-甲基香豆素為0.001%。2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過(guò)本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。GB/T6379測(cè)量方法與結(jié)果的準(zhǔn)確度(正確度與精密度)(所有部分)用甲醇超聲提取化妝品中的黃樟素和6-甲基香豆素，過(guò)濾，濾液注入配有FID檢測(cè)器的氣相色譜儀檢測(cè)，外標(biāo)法定量，采用氣相色譜質(zhì)諧(GC/MSD)進(jìn)行確證。4試劑與材料除另有規(guī)定外，試劑均為分析純。4.1甲醇：憂級(jí)純或者色譜純。4.2無(wú)水硫酸鈉：于650℃灼燒4h,儲(chǔ)于密閉干燥器中備用。4.3標(biāo)準(zhǔn)品：黃樟案：純度≥99,0%,6甲基香豆素：純度≥99,0%。4.4標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：準(zhǔn)確稱取黃樣素，6-甲基香豆素各0.1000g置于100mL容量瓶中，用甲醉定容，振蕩均勻，即得黃樟素、6-甲基香豆素濃度各為1000pg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。儲(chǔ)備液儲(chǔ)存在4℃冰箱中，可使用2個(gè)月。4.5標(biāo)準(zhǔn)工作液：準(zhǔn)確吸取1mL混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(4.4)于10mL.容量瓶中，用甲醇定容，充分搖勻，即的標(biāo)準(zhǔn)工作液于的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶得100pg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液；分別吸取0,5ml,1mL、3mL、5mL、8的標(biāo)準(zhǔn)工作液于的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶10mL容量瓶中定容，即得到5μg/mL,10μg/mL、30pg/mL,50pg/mL,80μg/mL.液，在4℃保存，可使用1周。5.1氣相色譜儀配氫火焰離子化檢測(cè)器(FID)。5.2氣相色譜-質(zhì)譜儀(GC/MSD)。5.3超聲波清洗儀。5.4注射式樣品過(guò)濾器(有機(jī)溶媒型，0.45μm)。25.6容量瓶。6測(cè)定步驟6.1樣品處理稱取化妝品1.0g,精確到0.001g,置于50mL錐形瓶中，準(zhǔn)確加入甲醇6mL混勻，于超聲波清洗儀上超聲20min,溶液轉(zhuǎn)入10mL的容量瓶中，用少量無(wú)水甲醇清洗錐形瓶，洗液轉(zhuǎn)人10mL容量瓶中，用甲醇定容后加入3g無(wú)水硫酸鈉(Na?SO?)脫水，經(jīng)注射式樣品過(guò)濾器(5,4)過(guò)濾，濾液供測(cè)定用。6.2.1氣相色譜(GC/FID)條件a)色譜柱：HP-5毛細(xì)管柱[30m×0.32mm(內(nèi)徑)×0.25μm]或相當(dāng)者；b)柱溫程序：初始溫度為90℃,保持1min后以10℃/min的速率升至210℃,保持5min;c)進(jìn)樣口溫度；200℃;d)檢測(cè)器溫度；200℃;e)載氣：氮?dú)?.0mL/min(純度為99.999%);f)燃?xì)猓貉鯕?0mL/min(純度為99.999%);g)助燃?xì)猓嚎諝?00mL/minth)尾吹N?流量25mL/min;i)進(jìn)樣方式：分流進(jìn)樣，分流比1:5;6.2.2氣相色譜-質(zhì)譜儀(GC/MSD)條件a)色譜柱：HP-5MS柱[30m×0.25mm(內(nèi)徑)×0.25μm]或相當(dāng)者；b)柱溫程序：初始溫度為90℃,保持1min后以10℃/min的速率升至210℃,保持5min;c)進(jìn)樣口溫度；200℃;d)色譜-質(zhì)譜接口溫度；280℃;e)載氣：氮?dú)?.0mL/min;h)測(cè)定方式：總離子流(TIC)方式，參見(jiàn)附錄C;i)監(jiān)視離子范圍(m/z):45~250;j)進(jìn)樣方式：分流方式，分流比1:5,溶劑延遲3.0min;6.2.3定性測(cè)定用氣相色諾-質(zhì)譜儀進(jìn)行樣品定性測(cè)定，如果校出的色譜峰的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)品相一致，并且在扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖中，所選擇的離子均出現(xiàn)，且所選擇的離子比與標(biāo)準(zhǔn)樣品的離子比相一致，則可判斷樣品中存在黃樟素和6-甲基香豆素。6.2.4定量測(cè)定用氣相色諾氫火焰離子化檢測(cè)器進(jìn)行樣品定量測(cè)定。用配制的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液(4.5)分別進(jìn)樣，繪制峰面積對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的五點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，用標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)樣品進(jìn)行定量，樣品溶液中黃樟素和6-甲基香豆素的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器測(cè)定的線性范圍內(nèi)。在上述色諾條件(6.2.1)下，黃棒素和6甲基香豆素的參考保留時(shí)間分別為8.0min和11.4min。黃樟素和6-甲基香豆素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的氣相色諧圖和總離子流圖及質(zhì)諧圖參見(jiàn)附錄A,附錄B和附錄C。6.3平行試驗(yàn)按以上步驟，對(duì)同一試樣進(jìn)行平行試驗(yàn)測(cè)定。 (1)lgr=0.9930lgm?-1.2984 (2)lgr=0.9261lgmy-1.2336 (3) (4) (5)(資料性附錄)(資料性附錄)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)GC/MS總離子流圖(資料性附錄)D.1化妝品中黃樟素添加濃度及平均回收率的試驗(yàn)數(shù)據(jù)：——在添加量為0.0005%時(shí)，同收率為102.4%;——在添加量為0.003%時(shí)，回收率為106.1%;—在深加量為0.005%時(shí)，回收率為104.0%;——在添加量為0.01%時(shí)，回收率為1