第1節(jié)重組DNA技術(shù)的基本工具題組一基因工程的概念和工具酶1．玉米的PEPC酶固定CO2的能力較水稻的強(qiáng)60倍。我國(guó)科學(xué)家正致力于將玉米的PEPC基因?qū)胨局校蕴岣咚井a(chǎn)量。下列有關(guān)該應(yīng)用技術(shù)的敘述，不正確的是()A．該技術(shù)是在DNA水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的B．該技術(shù)的操作環(huán)境是生物體內(nèi)C．該技術(shù)的原理是基因重組D．該技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是定向產(chǎn)生人類需要的生物類型2．科學(xué)家把兔子血紅蛋白基因?qū)氪竽c桿菌細(xì)胞中，在大腸桿菌細(xì)胞中合成了兔子的血紅蛋白。下列關(guān)于這一先進(jìn)技術(shù)的理論依據(jù)，不正確的是()A．所有生物共用一套遺傳密碼B．基因能控制蛋白質(zhì)的合成C．兔子血紅蛋白基因與大腸桿菌的DNA都是由四種脫氧核苷酸構(gòu)成，都遵循相同的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則D．兔子與大腸桿菌有共同的原始祖先3．據(jù)圖所示，有關(guān)工具酶功能的敘述不正確的是()A．限制性內(nèi)切核酸酶可以切斷a處B．DNA聚合酶可以連接a處C．解旋酶可以使b處解開(kāi)D．DNA連接酶可以連接c處4．限制酶和DNA連接酶是基因工程的工具酶，下列有關(guān)說(shuō)法正確的是()A．DNA連接酶能將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段上形成磷酸二酯鍵B．限制酶只能切割雙鏈DNA片段，不能切割煙草花葉病毒的核酸C．E.coliDNA連接酶既能連接黏性末端，也能連接平末端D．限制酶主要從原核生物中分離純化而來(lái)，所以也能剪切自身的DNA5．限制酶是一種核酸切割酶，可辨識(shí)并切割DNA分子上特定的脫氧核苷酸序列。如圖所示為四種限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ以及BglⅡ的識(shí)別序列，箭頭表示每一種限制酶的特定切割位點(diǎn)，切割出來(lái)的DNA片段末端可以互補(bǔ)黏合的是__________(限制酶)，其正確的末端互補(bǔ)序列應(yīng)該為()A．BamHⅠ和EcoRⅠ；末端互補(bǔ)序列為AATT—B．BamHⅠ和HindⅢ；末端互補(bǔ)序列為GATC—C．EcoRⅠ和HindⅢ；末端互補(bǔ)序列為AATT—D．BamHⅠ和BglⅡ；末端互補(bǔ)序列為GATC—6．(2023·江蘇南京高二期中)下列關(guān)于如圖所示黏性末端的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是()A．DNA連接酶能催化磷酸基團(tuán)和脫氧核糖之間形成化學(xué)鍵B．甲、乙黏性末端是由不同的限制酶切割而成的C．切割甲的限制酶也能識(shí)別由甲、乙片段形成的重組DNA分子D．甲、乙黏性末端可形成重組DNA分子題組二“分子運(yùn)輸車”——載體7．質(zhì)粒是基因工程中常用的載體。下列有關(guān)質(zhì)粒的說(shuō)法，正確的是()A．質(zhì)粒上的基因表達(dá)不遵循中心法則，所以可用作外源DNA分子的載體B．具有某些標(biāo)記基因，以便為目的基因的表達(dá)提供條件C．質(zhì)粒上的抗生素合成基因可作為標(biāo)記基因D．作為外源DNA分子的載體，質(zhì)粒需具有限制酶能夠切割的位點(diǎn)8．(2023·河北秦皇島高二期末)下列有關(guān)基因工程中載體的說(shuō)法，正確的是()A．基因工程中使用的載體只有質(zhì)粒B．質(zhì)粒是細(xì)胞質(zhì)中能夠自我復(fù)制的環(huán)狀DNA分子C．噬菌體可以作為動(dòng)物基因工程的載體D．天然質(zhì)粒均可以直接作為載體將目的基因送入受體細(xì)胞9．如表列舉了幾種限制酶的識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)(箭頭表示相關(guān)酶的切割位點(diǎn))。如圖是酶切后產(chǎn)生的幾種末端。下列有關(guān)說(shuō)法正確的是()A．BamHⅠ切割的是氫鍵，AluⅠ切割的是磷酸二酯鍵B．Sau3AⅠ和BamHⅠ切割的序列產(chǎn)生的片段能夠相連，連接后的片段還能被Sau3AⅠ切割C．DNA連接酶能連接②⑤，不能連接②④D．E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶都能連接①③，且連接效率低10．某線性DNA分子含有5000個(gè)堿基對(duì)(bp)，先用限制酶a切割，再把得到的產(chǎn)物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如表。限制酶a和b的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)如圖所示。下列有關(guān)敘述不正確的是()a酶切割產(chǎn)物(bp)b酶再次切割產(chǎn)物(bp)2100；1400；1000；5001900；200；800；600；1000；500A.a酶與b酶切斷的化學(xué)鍵相同B．a(chǎn)酶與b酶切出的黏性末端能相互連接C．a(chǎn)酶與b酶切割該DNA分子位點(diǎn)分別有3個(gè)和5個(gè)D．限制酶將一個(gè)DNA分子片段切成兩個(gè)片段需消耗兩個(gè)水分子11．下列有關(guān)限制性內(nèi)切核酸酶的敘述，正確的是()A．用限制酶酶切獲得一個(gè)外源基因時(shí)得到兩個(gè)切口，有2個(gè)磷酸二酯鍵被斷開(kāi)B．限制酶識(shí)別序列越短，則該序列在DNA中出現(xiàn)的概率就越大C．—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制酶切出的黏性末端可用DNA連接酶連接D．只有用相同的限制酶處理含目的基因的片段和質(zhì)粒，才能形成重組質(zhì)粒12．(2023·福建泉州高二期末)如表為常用的限制性內(nèi)切核酸酶(限制酶)及其識(shí)別序列和切割位點(diǎn)，由此推斷以下說(shuō)法，正確的是()限制酶名稱識(shí)別序列和切割位點(diǎn)限制酶名稱識(shí)別序列和切割位點(diǎn)BamHⅠKpnⅠEcoRⅠSau3AⅠHindⅡSmaⅠ注：Y＝C或T，R＝A或G。A．限制酶SmaⅠ切割后形成的末端可用E.coliDNA連接酶連接B．Sau3AⅠ限制酶的切割位點(diǎn)在識(shí)別序列的外部C．BamHⅠ和Sau3AⅠ兩種限制酶切割后形成不同的黏性末端D．一種限制酶一定只能識(shí)別一種核苷酸序列13.根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問(wèn)題：(1)限制酶切割DNA分子后產(chǎn)生的DNA片段，其末端類型通常有________________________和__________________。(2)質(zhì)粒載體用限制酶X(識(shí)別的序列由6個(gè)核苷酸組成)切割后產(chǎn)生的片段如下：eq\b\lc\\rc\(\a\vs4\al\co1(AATTC……G,G……CTTAA))該酶識(shí)別的序列為_(kāi)_________________，切割的部位是________________________________。(3)為使切割后的載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用限制酶X切割外，還可用限制酶Y切割，兩種酶共同的特點(diǎn)是______________________________________________________________________________________________________________________________。(4)按其來(lái)源不同，基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類，即________DNA連接酶和________DNA連接酶，其中后者只能連接一種末端。(5)基因工程中除質(zhì)粒外，______________和______________也可作為載體。14．(2021·全國(guó)乙，38節(jié)選)用DNA重組技術(shù)可以賦予生物以新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人類需要的生物產(chǎn)品。在此過(guò)程中要使用多種工具酶，其中4種限制性內(nèi)切核酸酶的切割位點(diǎn)如圖所示?；卮鹣铝袉?wèn)題：(1)常用的DNA連接酶有E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶，題圖中__________________酶切割后的DNA片段可以用E.coliDNA連接酶連接，題圖中________________________切割后的DNA片段可以用T4DNA連接酶連接。(2)DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是__________________。(3)DNA重組技術(shù)中所用的質(zhì)粒載體具有一些特征，如質(zhì)粒DNA分子上有復(fù)制原點(diǎn)，可以保證質(zhì)粒在受體細(xì)胞中______________；質(zhì)粒DNA分子上有_____________________________，便于外源DNA的插入；質(zhì)粒DNA分子上有標(biāo)記基因(如某種抗生素抗性基因)，利用抗生素可篩選出含質(zhì)粒載體的宿主細(xì)胞，方法是_____________________________________