技術(shù)指導(dǎo)原則(試行) 3 3 3 4 4 5 5 5 5 6 7 7 2017年，原國家食品藥品監(jiān)督管理總局發(fā)布《細(xì)胞治療產(chǎn)品研究與評(píng)價(jià)技本指導(dǎo)原則主要為按照藥品管理相關(guān)法規(guī)進(jìn)行研發(fā)和注冊(cè)申報(bào)的人源干細(xì)胞本身具備體內(nèi)生存、增殖和/或分化、細(xì)胞間相互作用等能力。干細(xì)胞產(chǎn)品的要求，樣品的制備應(yīng)符合《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范-臨床試驗(yàn)用藥品附錄》的要類產(chǎn)品的生物學(xué)活性研究，應(yīng)根據(jù)各類干細(xì)干細(xì)胞復(fù)雜的制備工藝、長(zhǎng)時(shí)間的細(xì)胞傳代和離體操作2）干細(xì)胞產(chǎn)品中可能殘留未分化細(xì)胞、非預(yù)期分化細(xì)胞、惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞、突變3）細(xì)胞培養(yǎng)過程中的遺傳和表觀遺傳變異/不穩(wěn)定性4）基因修飾可能引件以及基因/病毒載體插入所導(dǎo)致的致癌基因活化或抑癌基因失活等。為了控制ESCs/iPSCs衍生細(xì)胞治療產(chǎn)品可能因少量殘留的多能干細(xì)胞以及持續(xù)增殖細(xì)胞特性，在合適階段對(duì)過程樣品或終產(chǎn)品進(jìn)行遺傳和表觀遺傳的穩(wěn)定性評(píng)估與任何特定病例的風(fēng)險(xiǎn)/利益和患者人數(shù)進(jìn)行權(quán)衡。某些情況下，干細(xì)胞產(chǎn)品的性、脫靶編輯、轉(zhuǎn)導(dǎo)/轉(zhuǎn)染用載體的殘留量以及病毒復(fù)制能力回復(fù)突變等進(jìn)行深干細(xì)胞產(chǎn)品具備其他細(xì)胞治療產(chǎn)品相關(guān)的共性質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)因素，比如1）非凍存的新鮮制劑，產(chǎn)品有效期短。（5）產(chǎn)品批次數(shù)據(jù)積累有限，關(guān)鍵工藝參（1）生產(chǎn)環(huán)境方面，建立清場(chǎng)和隔離操作規(guī)范，并盡量采用連續(xù)、密閉式（2）原材料方面，持續(xù)進(jìn)行供者材料和細(xì)胞庫的資格鑒定及適用性評(píng)估，品的穩(wěn)定性研究。對(duì)其他原材料供應(yīng)商進(jìn)行評(píng)估、審核，對(duì)不得不用的人源/動(dòng)（3）生產(chǎn)工藝和過程控制方面，建立完善的可追溯系統(tǒng)，同時(shí)關(guān)注生產(chǎn)過研究，充分表征細(xì)胞形態(tài)、活性、遺傳穩(wěn)定性、成瘤性/致瘤性、細(xì)胞表型特征（5）穩(wěn)定性方面，采用代表性批次和樣品開展研究，穩(wěn)定性研究中設(shè)置敏序和標(biāo)準(zhǔn)對(duì)防范病毒污染、組織排異、相關(guān)疾和輻射暴露等。供者篩查還需區(qū)別自體供者和品的特性以及臨床適應(yīng)癥等，適當(dāng)調(diào)整篩查項(xiàng)病毒或其他外源性因子傳播給自體受者以外原體；對(duì)于無血源篩查試劑情況下，可采用已應(yīng)經(jīng)過適用性確認(rèn)，關(guān)注檢測(cè)方法靈敏度對(duì)的檢測(cè)方法或產(chǎn)品，可以采用經(jīng)過全面方法學(xué)供者的ABO血型、Rh血型、HLA-I類和和臨床應(yīng)用要求等考慮供者與受者的組織配型原性高的情況下，應(yīng)臨床檢測(cè)組織配型相容性如臍帶干細(xì)胞供者的檢測(cè)對(duì)象建議擴(kuò)展到包括適當(dāng)時(shí)間間隔內(nèi)的母親外周血和考ICH《Q5D：用于生物技術(shù)產(chǎn)品及生物制品生產(chǎn)的細(xì)胞基質(zhì)的來源和鑒定》、傳代穩(wěn)定性研究的條件應(yīng)能代表實(shí)際臨床/商業(yè)化生產(chǎn)工藝，重點(diǎn)關(guān)注遺傳），建立細(xì)胞庫分級(jí)管理的基本原則。需對(duì)輔助細(xì)胞來源、培養(yǎng)和建系/庫過程清楚源/動(dòng)物源病毒的檢驗(yàn)。應(yīng)結(jié)合輔助細(xì)胞的特性和功能等，考察不同代次的輔助要求生產(chǎn)。如果對(duì)未按照GMP生產(chǎn)的試劑是否具備足夠高的質(zhì)量應(yīng)用于人體存能力或功能，特別是因?yàn)樽儺惖募?xì)胞可能會(huì)在培養(yǎng)中存在生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)。因此,工藝程進(jìn)行合理的過程控制，包括明確的工藝參數(shù)和中控標(biāo)準(zhǔn)，以確保其質(zhì)量(一致別、生物學(xué)活性以及純度和雜質(zhì)等。全面識(shí)別各類變更對(duì)產(chǎn)品安全性、有效性、質(zhì)量可控性的潛在影響，科學(xué)合理地制定變更策略和研究方案。可以參考ICH干細(xì)胞產(chǎn)品在生產(chǎn)過程中，可能會(huì)引入或產(chǎn)生非細(xì)胞雜質(zhì)（如理化雜質(zhì)）、應(yīng)在工藝中予以去除，在質(zhì)量研究中予以檢測(cè)，并進(jìn)行定性/定量控制。需要特4.1生物學(xué)安全性：包括由干細(xì)胞產(chǎn)品自身生物學(xué)特性所決定的和誘發(fā)受微生物（細(xì)菌、真菌、支原體和病毒等）、微生物代謝產(chǎn)物/衍生物（如細(xì)菌內(nèi)療活性或預(yù)期的生物學(xué)效應(yīng)，開發(fā)能夠代表產(chǎn)品作用機(jī)制的定量生物學(xué)活性/功化學(xué)和/或分子屬性來提供廣泛的產(chǎn)品表征數(shù)據(jù)。采用的分析測(cè)定法應(yīng)開展替代/或不完全清晰的作用機(jī)理或具有多種生物學(xué)活性，細(xì)胞生物學(xué)功能表征須結(jié)合俱進(jìn)。比如目前來看，間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）的生物學(xué)活性主要包括誘導(dǎo)分化如，ESCs/iPSCs衍生細(xì)胞的生物學(xué)活性是基于分化細(xì)胞特殊的生物學(xué)功能的檢（如目的細(xì)胞比例）、生物學(xué)活性（如分化效率、定量/半定量功能測(cè)定、標(biāo)志及其表達(dá)產(chǎn)物的功能、脫靶編輯、轉(zhuǎn)導(dǎo)/轉(zhuǎn)染用載體的殘留量等進(jìn)行控制。對(duì)于的特殊要求，比如1）在細(xì)胞基質(zhì)鑒定和檢測(cè)中使用更先進(jìn)方法和技術(shù)改進(jìn)敏度和精密度至少與現(xiàn)有方法相當(dāng)。（2）有關(guān)生物標(biāo)志物的分析方法驗(yàn)證應(yīng)規(guī)范開展，特別關(guān)注陽性對(duì)照的設(shè)計(jì)與驗(yàn)證。（3）需盡可能采取多種正交的分析性組分之間潛在的非累加效應(yīng)，例如干擾效應(yīng)或協(xié)同效應(yīng)。（4）干細(xì)胞產(chǎn)品可目的細(xì)胞和非目的細(xì)胞群，方法研究時(shí)應(yīng)特別關(guān)注對(duì)照的設(shè)置與驗(yàn)證。（5）原則上應(yīng)依據(jù)現(xiàn)行版藥典中的生物制品無菌和支原體檢查法進(jìn)行干細(xì)胞終產(chǎn)品的相關(guān)指導(dǎo)原則,充分考慮選用代表性污染陽性對(duì)照品。在未能充分驗(yàn)證新型方法法。（6）對(duì)于經(jīng)基因修飾的干細(xì)胞產(chǎn)品，如果從最終產(chǎn)品中去除了外源遺傳物分析檢測(cè)方法中可能使用參比品/對(duì)照品，鼓勵(lì)開發(fā)建立細(xì)胞參比品用于干細(xì)胞產(chǎn)品的質(zhì)量控制。用于分析的參比品/對(duì)照品需品/對(duì)照品標(biāo)定（含量標(biāo)定和活性標(biāo)定），并對(duì)產(chǎn)品開發(fā)各個(gè)階段使用的參考品胞密度和體積范圍等）應(yīng)可代表實(shí)際情況。試驗(yàn)條件應(yīng)充分考慮新鮮細(xì)胞和凍包裝及密封容器系統(tǒng)的適用性評(píng)估對(duì)象是指直接接觸產(chǎn)品的包裝容器和密）：）：）：）：界常通過注射干細(xì)胞到免疫功能缺陷的小鼠體內(nèi)的方法,驗(yàn)證所產(chǎn)生的畸胎瘤包[1]國家食品藥品監(jiān)督管理總局.細(xì)胞治療產(chǎn)品研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則(試行).2017.[2]國家藥典委員會(huì).《中華人民共和國藥典》(2020年版)[M].2020.[3]國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)與國家食品藥品監(jiān)督管理總局.干細(xì)胞制劑質(zhì)量控制及臨床前研究指導(dǎo)原則(試行).2015.[4]衛(wèi)生部.人的體細(xì)胞治療及基因治療臨床研究質(zhì)控要點(diǎn).1993.[5]衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2000]184號(hào)《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》.[6]科技部和衛(wèi)生部.人胚胎干細(xì)胞研究倫理指導(dǎo)原則.2003.[7]衛(wèi)生部.涉及人的生物醫(yī)學(xué)研究倫理審查辦法.2016.[8]國家食品藥品監(jiān)督管理局.藥物臨床試驗(yàn)倫理審查工作指導(dǎo)原則.2010.[9]ISSCRGuidelinesforStemCellResearchandClinicalTranslation.2021.[10]FDA.GuidanceforFDAReviewersandSponsors.ContentandReviewofChemistry,Manufacturing,andControl(CMC)InformationforHumanSomaticCellTherapyInvestigationalNewDrugApplications(INDs).2008.[11]FDA.Chemistry,Manufacturing,andControl(CMC)InformationforHumanGeneTherapyInvestigationalNewDrugApplications(INDs).2020.[12]FDA.DeviationReportingforHumanCells,Tissues,andCellularandTissue-basedProductsRegulatedSolelyUnderSection361ofthePublicHealthServiceActand21CFRPart1271.2017.[13]FDA《GuidanceforIndustry；PotencyTestsforCellularandGeneTherapyProducts》.2011.[14]EMA.Reflectionpaperonstemcell-basedmedicinalproducts.2011.[15]PMDA.ヒトES細(xì)胞加工醫(yī)薬品等の品質(zhì)及び安全性の確保につ[16]ICHGuidanceonQualityofBiotechnological/BiologicalProducts:DerivationandCharacterizationofCellSubstratesUsedforProductionofBiotechnological/BiologicalProducts,(63FR50244,September21,1998).[17]