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戴安娜

凝膠卡式血型配血系統(tǒng)李曉榮血庫卡式配血講座內(nèi)容臨床輸血歷史的簡單回顧紅細(xì)胞血型血清學(xué)檢測技術(shù)簡介如何保證臨床輸血配型相符DianaGel凝膠卡式檢測法的工作原理、特點以及方法學(xué)評價DianaGel凝膠卡式檢測法的臨床應(yīng)用回顧總結(jié)卡式配血講座臨床輸血歷史的簡單回顧1667年法國御醫(yī)Jean用羊血治療精神病患者卡式配血講座臨床輸血歷史的簡單回顧1818年英國產(chǎn)科醫(yī)生James首次用人血輸治患者卡式配血講座臨床輸血歷史的簡單回顧1900、1940年奧地利科學(xué)家Landsteiner等人先后發(fā)現(xiàn)了ABO和RH血型系統(tǒng)，使輸血治療有了牢固的科學(xué)基礎(chǔ)，從而極大地提高了臨床輸血的安全性1937年世界上第一個血庫在芝加哥CockCounty醫(yī)院建立，標(biāo)志著輸血開始成為臨床醫(yī)學(xué)的重要組成部分和常規(guī)治療手段現(xiàn)在輸血已經(jīng)發(fā)展成一門涉及多學(xué)科的獨立的邊緣學(xué)科——輸血學(xué)，今天我要講的免疫血液學(xué)檢測技術(shù)只是其中一部分卡式配血講座紅細(xì)胞血型血清學(xué)檢測技術(shù)簡介鹽水凝集法低離子強度鹽水法酶技術(shù)凝聚胺技術(shù)抗人球蛋白檢測法凝膠卡式檢測法卡式配血講座一、鹽水凝集法紅細(xì)胞和抗血清在鹽水溶液中直接反應(yīng)特點是操作簡便，設(shè)備簡單，缺點是影響因素多，靈敏度低卡式配血講座二、低離子強度鹽水法通過降低介質(zhì)溶液的離子強度，減少紅細(xì)胞外圍離子云的強度，促進IgG分子在兩個紅細(xì)胞間橋聯(lián)，而促進凝集特點是縮短抗原抗體反應(yīng)時間，提高反應(yīng)靈敏度卡式配血講座三、酶技術(shù)利用木瓜酶或菠蘿酶破壞紅細(xì)胞表面唾液酸，使紅細(xì)胞失去電荷，縮小細(xì)胞間距離同時改變紅細(xì)胞膜表面結(jié)構(gòu)，使某些隱蔽的抗原暴露，從而增強凝集反應(yīng)主要用于一些不完全抗體的檢測卡式配血講座四、凝聚胺技術(shù)利用多聚季胺鹽在介質(zhì)溶液中產(chǎn)生大量正電荷中和紅細(xì)胞表面的負(fù)電荷，減少紅細(xì)胞間排斥，促進凝集卡式配血講座五、抗人球蛋白檢測法—Coombs試驗在鹽水凝集法或低離子強度鹽水法的基礎(chǔ)上，加入抗人球蛋白抗體，通過抗人球蛋白抗體的特異性橋連作用，促進紅細(xì)胞的凝集卡式配血講座六、凝膠卡式檢測法是微柱凝膠技術(shù)與上述所有技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物1986年由法國人Dr.YvesLappierre發(fā)明1994年獲得美國FDA認(rèn)證，目前在許多發(fā)達(dá)國家已經(jīng)作為常規(guī)技術(shù)應(yīng)用于臨床卡式配血講座如何保證輸血配型相符?掌握準(zhǔn)確的病人信息：了解病人的輸血史和實驗室檢查結(jié)果選用最可靠的實驗方法：盡可能采用靈敏度和特異性最高的實驗技術(shù)避免人為錯誤：實現(xiàn)自動化，減少人為錯誤的發(fā)生引入全面質(zhì)量控制的觀念：實驗室所有操作程序要標(biāo)準(zhǔn)化，要有質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)（如引進GMP和ISO9000質(zhì)量控制體系）卡式配血講座戴安娜凝膠卡式檢測法的

工作原理凝膠微柱：試管上端、柱體過濾介質(zhì)：顆粒直徑26-103nm的葡聚糖100凝膠，凝膠間縫隙只允許游離紅細(xì)胞通過緩沖液：LISS（加或不加抗血清）卡式配血講座戴安娜凝膠卡式檢測法的

工作原理將紅細(xì)胞和抗血清加在凝膠上部反應(yīng)，離心后觀察凝集的紅細(xì)胞，被阻擋在小柱中凝膠的上部或中央，證明發(fā)生凝集反應(yīng)，判斷凝集反應(yīng)陽性游離的紅細(xì)胞，被擠過裝有過濾介質(zhì)的小柱，而到達(dá)小柱的底部，證明未發(fā)生凝集，判斷凝集反應(yīng)陰性

卡式配血講座結(jié)果判讀模式卡式配血講座靈敏度和準(zhǔn)確性高，重復(fù)性好不需要清洗紅細(xì)胞自動化程度高

可以實現(xiàn)全自動操作實驗全過程標(biāo)準(zhǔn)化

標(biāo)準(zhǔn)化的孵育時間、離心時間以及結(jié)果判讀

消除了主觀因素對弱反應(yīng)結(jié)果的判讀，減少了人為錯誤的發(fā)生實驗結(jié)果客觀性強，而且穩(wěn)定，可以長期保存獲得ISO9000\CE認(rèn)證戴安娜凝膠卡式檢測法的特點卡式配血講座凝膠抗人球試驗

—凝膠凝集試驗與抗人球技術(shù)結(jié)合

事先在凝膠微柱中的LISS緩沖液中加入AHG,實驗中,將紅細(xì)胞與抗血清加入凝膠上部,離心后觀察如果抗體能結(jié)合在紅細(xì)胞表面,那么通過凝膠內(nèi)AHG橋聯(lián),紅細(xì)胞發(fā)生凝集,判斷凝集實驗陽性如果抗體未能結(jié)合在紅細(xì)胞表面,那么紅細(xì)胞不能凝集,判斷凝集實驗陰性卡式配血講座凝膠酶試驗

—凝膠技術(shù)與酶技術(shù)結(jié)合在凝膠上層加入酶試劑，利用木瓜酶或菠蘿酶減小紅細(xì)胞間阻力，促進紅細(xì)胞凝集卡式配血講座凝膠卡式檢測法的方法評價——

卡式檢測法與低離子強度鹽水法、手工凝聚胺法的比較

1990年，卡式檢測法的發(fā)明人Dr.YvesLapierre等用低離子強度鹽水法（試管法）、聚凝胺試驗（試管法）和卡式檢測法（凝膠）研究了400例已知抗體的樣本。血清與細(xì)胞的比例是按照試管法標(biāo)準(zhǔn)配置。結(jié)果為：卡式檢測法檢出359例（檢出率為90%）聚凝胺試驗檢出301例（檢出率為75%）低離子強度鹽水法檢出243例（檢出率為61%）卡式配血講座結(jié)論靈敏度高凝膠卡式檢測法靈敏度比低離子鹽水法、凝聚胺法都高；與Coombs法相近，但是在實驗的標(biāo)準(zhǔn)化、重復(fù)性方面具有更大優(yōu)勢，更適合常規(guī)的紅細(xì)胞血型血清學(xué)檢測避免了試管法中必須清洗紅細(xì)胞的煩瑣步驟方法容易掌握，易于標(biāo)準(zhǔn)化塑料卡可以長期保存，也容易銷毀卡式配血講座凝膠卡式配血的臨床應(yīng)用簡單地講，凝膠卡式檢測法就是利用實驗中紅細(xì)胞在凝膠微柱中的移動，來指示肉眼所不能見的紅細(xì)胞與相應(yīng)抗體發(fā)生的血清學(xué)反應(yīng)，因此只需要更換不同的試劑卡，就能廣泛地應(yīng)用在：

紅細(xì)胞血型鑒定交叉配血抗體篩查新生兒溶血病的檢測卡式配血講座

戴安娜卡式配血的優(yōu)點靈敏度好

特別是做抗體篩查和交叉配血時，能捕捉到十分微弱的抗原抗體反應(yīng)特異性強

許多實驗中都加入了抗人球，大大促進了紅細(xì)胞的特異性凝集重復(fù)性好

采用標(biāo)準(zhǔn)定量操作，最大限度地減少了操作人員的隨意性簡化操作

實驗中不用清洗紅細(xì)胞，檢測結(jié)果可以較長