PerformanceguidelineforcollectionandpreservationofanimalsamplesinzoosI 2 2 2 2 2 4 6 8 本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定1動(dòng)物園動(dòng)物樣本采集和保存操作指南本文件適用于臨床化驗(yàn)、病理檢查、微生物檢測(cè)和遺GB/T36195畜禽糞便無(wú)害化處理技術(shù)規(guī)范NY/T541動(dòng)物疫病實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)采樣方法NY/T561動(dòng)物炭疽診斷技術(shù)SN/T3592實(shí)驗(yàn)室化學(xué)藥品和樣本廢棄物處WS/T224真空采血管及其添加劑WS/T225臨床化學(xué)檢驗(yàn)血液標(biāo)本的收集與處理取自動(dòng)物體內(nèi)外的，通過(guò)檢測(cè)反映動(dòng)物個(gè)體或群體有關(guān)4.1.1人員要求4.1.1.1操作人員具備必要的專(zhuān)業(yè)技術(shù)知識(shí)，應(yīng)熟練掌握樣本采集工作程序、所用試劑特性以及器材24.1.1.2操作人員應(yīng)對(duì)所從事操作的潛在風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行預(yù)判，并采取必要的安全防護(hù)措施，避免被動(dòng)物咬4.1.2生物安全4.1.3化學(xué)品安全防護(hù)應(yīng)建立危險(xiǎn)化學(xué)品安全防護(hù)管理和培訓(xùn)制度，定期組織培訓(xùn)和演練。操作人員應(yīng)能按照GB182184.2有效性和便利性規(guī)律，提高動(dòng)物的福利提供具體研究對(duì)象。樣本有明確的信息，采集操作過(guò)程符合宜在籠舍內(nèi)設(shè)計(jì)安裝不傷害動(dòng)物的相關(guān)設(shè)施或器具，便4.3保障動(dòng)物福利b)宜通過(guò)動(dòng)物行為觀察，掌握動(dòng)物生理活動(dòng)規(guī)律，采集相關(guān)動(dòng)物樣本。c)在滿(mǎn)足樣本采集要求的前提下，宜優(yōu)d)樣本采集時(shí)宜選擇合理的保定方式，減少動(dòng)物因樣本采集造5.1基本要求5.1.3樣本編號(hào)應(yīng)是每個(gè)樣本唯一的編號(hào)，各單位在設(shè)計(jì)本單位樣本編號(hào)時(shí)保持統(tǒng)一性和持續(xù)性。可5.2操作步驟35.2.1.2根據(jù)采集樣本的目的，選擇正確的方法、器材及采樣部位，并準(zhǔn)備適于樣本保存的容器、試5.2.2.1應(yīng)有相應(yīng)的樣本采集記錄表。宜包括并不局限于以下內(nèi)容：檢測(cè)目的、樣本來(lái)源單位、采集5.2.2.2在樣本采集、處置后，宜采用不干膠專(zhuān)用樣本標(biāo)簽貼于保存容器外壁，使用防水標(biāo)記筆記錄5.2.3.1樣本記錄及裝箱：將樣本與采集記錄表、樣本標(biāo)記等記錄內(nèi)容進(jìn)行核對(duì)，核對(duì)無(wú)誤后，宜將5.2.3.2根據(jù)樣本的用途、檢測(cè)指標(biāo)和方法來(lái)選擇運(yùn)送條件和方式，并將所采集的樣本，以最快最直5.2.3.3根據(jù)不同的檢測(cè)目的選擇相應(yīng)的保存條件。樣本采集、保存和運(yùn)送要求采血后立即運(yùn)送樣本進(jìn)行血常規(guī)或臨床化學(xué)檢測(cè)。如不能立即檢測(cè)，宜2℃~8℃保存4宜明確個(gè)體信息。采用化學(xué)法做隱血試驗(yàn)的受試動(dòng)物宜提前3含絮狀物的液狀糞便的采集量為2mL～5mL；成形糞便至少取5g，從表面、深處等多點(diǎn)位采集樣本；糞便量少于2g，宜取全量。樣本放于糞便采集盒、袋、管等容器內(nèi)。采集肛拭子時(shí)，宜去掉過(guò)大的糞便0.5cm放入保存液。糞便常規(guī)檢測(cè)樣本1h內(nèi)常溫保存，如延遲檢測(cè)1h以上，宜2℃~8℃保存，且不超過(guò)24h。寄生蟲(chóng)檢測(cè)樣本2℃~8℃保存、運(yùn)送時(shí)間不宜超過(guò)24h。隱血試驗(yàn)樣本宜0.5h內(nèi)送檢，常溫或2℃~8℃準(zhǔn)備采集工具，清潔地面或相關(guān)設(shè)施和器具，直接采集，或從地面吸取，或從相關(guān)設(shè)施、器具中采集，應(yīng)采集新鮮無(wú)污染的尿尿液樣本宜在采集后2h內(nèi)完成檢測(cè)；如不能完成檢測(cè)，宜置于2℃~8℃條件下保存與運(yùn)送，且采精前對(duì)動(dòng)物體表進(jìn)行清潔。用1:1000苯扎溴銨消毒尿道口后用無(wú)菌紗布拭干。如需現(xiàn)場(chǎng)操作的精液樣本宜分裝，其他精液樣本宜保存在37℃水浴中運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室，具體時(shí)間由5宜在動(dòng)物死亡6h內(nèi)進(jìn)行內(nèi)臟組織樣本采集，如夏季氣溫高，采樣制備快速冰凍處理、OCT樣本，每塊組織單邊長(zhǎng)不小于0.5cm10%福爾馬林溶液固定的樣本，常溫保存；2.5%戊二醛固定的樣本常溫保存或2℃~8℃保存一不能立即送檢的樣本于4℃保存，并于2h內(nèi)培養(yǎng)檢測(cè)。2℃~8℃運(yùn)送。動(dòng)物自然排便后，選取膿血、粘液部分不少于2g，液體糞便取絮狀物不少于2mL2℃~8℃運(yùn)送。封閉性膿腫，用醫(yī)用酒精棉消毒采樣部位，用無(wú)菌注射器抽取膿液密封開(kāi)放性膿瘡，用無(wú)菌生理鹽水沖洗瘡面，用棉拭子取瘡口深處的分泌物后放入滅菌不能立即送檢的樣本4℃保存，24h內(nèi)檢測(cè)。2℃~8℃運(yùn)送。不能立即送檢的組織樣本放入無(wú)菌袋4℃保存，24h內(nèi)檢測(cè)。2℃~8℃運(yùn)送。采集前不宜使用抗生素或類(lèi)固醇類(lèi)藥物，如不可停藥，宜推遲采樣或詳細(xì)記錄用藥情對(duì)不能立即檢測(cè)的樣本，2℃~8℃保存運(yùn)送。與樣本直接接觸的采樣器材提前高壓滅菌或使用前用酒精擦7量，以全血樣本提取，鳥(niǎo)類(lèi)采集宜不少于30c)拭子樣本：主要為動(dòng)物的咽拭子和肛拭子。采集后拭子頭部放入含有抗生素的等滲d)毛發(fā)樣本：取指定部位的帶毛囊的毛發(fā)，鳥(niǎo)類(lèi)翼下次級(jí)飛羽不少于2根，其他24h內(nèi)送檢的樣本保存于4℃,對(duì)送檢時(shí)間超過(guò)24h的樣本，液氮或干冰運(yùn)送。與樣本直接接觸的采樣器材提前高壓滅菌或使用前用酒精擦拭后再火焰消毒。選擇滅菌、無(wú)RNA酶a)全血樣本：采集新鮮血液，根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇抗凝劑并區(qū)分采血量，宜A.1.1糞便采集盒：容積15mL、20mL、40mL，內(nèi)附棉簽或采集匙。A.1.2尿液收集杯：容積20mL、40mL、60mL，螺旋A.1.4集精杯：不銹鋼內(nèi)膽或玻璃內(nèi)膽保溫。A.1.5采樣杯：容積100mL、200A.1.6血培養(yǎng)瓶：標(biāo)準(zhǔn)需氧瓶、標(biāo)準(zhǔn)厭氧瓶、樹(shù)脂需氧瓶、樹(shù)脂厭氧瓶、兒童樹(shù)脂瓶、含溶血素厭氧瓶、含溶血素分支桿菌/真菌瓶，在2℃~25℃環(huán)境中貯存。A.1.10量杯：量程10mL～200mA.1.11移液器：量程100μA.1.12接種針、接種環(huán)。A.1.13酒精燈。A.1.14離心管。A.1.15離心機(jī)。A.1.17一次性使用末梢血采血管：具備量程10μL、20μL。A.1.18一次性使用無(wú)菌采血針：全長(zhǎng)40mA.1.19無(wú)菌注射器：具備量程1A.1.21無(wú)菌棉簽、無(wú)菌棉球、無(wú)菌紗布。A.1.25護(hù)目鏡。A.2.2磷酸鹽平衡生理鹽水：0.01mol/LpH9.0磷酸9A.2.5精液保存液：保護(hù)劑或自主配方保護(hù)劑，以糖類(lèi)、鹽類(lèi)、抗生素、抗氧化劑及其他保護(hù)劑為主A.2.7血培養(yǎng)基：含5%脫纖維羊血的營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基。療1234注4：采樣量