ICS11.100.10

CCSC44YY

中華人民共和國醫(yī)藥行業(yè)標準

YY/T1183—2024

代替YY/T1183—2010

酶聯(lián)免疫吸附法檢測試劑盒

Detectionreagentkitforenzyme-linkedimmunoabsorbentassay

2024-09-29發(fā)布2025-10-15實力總

國家藥品監(jiān)督管理局發(fā)布

YY/T1183—2024

刖百

本文件按照GB/T1.1-2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件代替YY/T1183-2010《酶聯(lián)免疫吸附法檢測試劑（盒）》，與YY/T1183—201C相比，除結(jié)

構(gòu)調(diào)整和編輯性改動外，主要技術(shù)變化如下：

一增加了"分析特異性"刪除了"內(nèi)包裝"叩他裝（銷售包裝）""標識""批""批號""計量學(xué)溯源

性""準確度""回收""檢測限""測量系統(tǒng)的線性""重復(fù)性""失效期""穩(wěn)定性""臨界值"的術(shù)語

和定義（見3.3,2010年版的3.3-3.16）；

一刪除了分類（見201。年版的第4章）；

一更改了定量檢測的準確度的要求及相應(yīng)的檢測方法（見4.1.3和5.1.3,2010年版的5.1.3和

6.1.3）；

一更改了定量檢測的檢測限的要求及相應(yīng)的檢測方法（見4.1.4和5.1.4,2010年版的5.1.4和

6.1.4）；

一更改了定量檢測的線性的要求及相應(yīng)的檢測方法（見4.1.5和5.1.5,2010年版的5.1.5和

6.1.5）;

一增加了定量檢測的分析特異性的要求及相應(yīng)的檢測方法（見4.1.6和5.1.6）;

一更改了定量檢測的重復(fù)性的要求及相應(yīng)的檢測方法（見4.1.7和5.1.7,2010年版的5.1.6和

6.1.6）；

一更改了定量檢測的批間差的要求及相應(yīng)的檢測方法（見4.1.8和5.1.8,2010年版的5.1.7和

6.1.7）;

—更改了定量檢測的穩(wěn)定性的要求及相應(yīng)的檢測方法（見4.L9和5.1.9,2010年版的5.L8和

6.1.8）；

一更改了定性檢測的陰性參考品符合率的要求及相應(yīng)的檢測方法（見4.2.2和5.2.22010年版

的5.2.2和6.2.2）；

一更改了定性檢測的陽性參考品符合率的要求及相應(yīng)的檢測方法（見4.2.3和5.2.3,2010年版

的5.2.3和6.2.3）；

一增加了定性檢測的分析特異性的要求及相應(yīng)的檢測方法（見4.2.4和5.2.4）;

一更改了定性檢測的檢出限的要求及相應(yīng)的檢測方法（見4.2.5和5.2.5,2010年版的5.2.4和

6.2.4）;

一更改了定性檢測的重復(fù)性的要求及相應(yīng)的檢測方法（見4.2.6和5.2.6,2010年版的5.2.5和

6.2.5）；

一更改了定性檢測的批間差的要求及相應(yīng)的檢測方法（見4.2.7和5.2.7,2010年版的5.2.6和

6.2.6）；

一更改了定性檢測的穩(wěn)定性的要求及相應(yīng)的檢測方法（見4.2.8和5.2.8,2010年版的5.2.7和

6.2.7）；

一更改了標識、標簽和使用說明（見第6章,2010年版的第7章）；

一更改了包裝、運輸和貯存（見第7章，2010年版的第8章）。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。

本文件由國家藥品監(jiān)督管理局提出。

I

YY/T1183—2024

本文件由全國醫(yī)用臨床檢驗實驗室和體外診斷系統(tǒng)標準化技術(shù)委員會(SAC/TC136)歸口0

本文件起草單位：北京市醫(yī)療器械檢驗研究院(北京市醫(yī)用生物防護裝備檢驗研究中心)、北京市醫(yī)

療器械審評檢查中心、中國海關(guān)科學(xué)技術(shù)研究中心、北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司、鄭州安圖生物工

程股份有限公司。

本文件主要起草人:李瀟、徐松雁、趙強、王藝凱、劉鑫、史巧云、靳林丹。

本文件于2010年首次發(fā)布,本次為第一次修訂。

n

YY/T1183—2024

酶聯(lián)免疫吸附法檢測試劑盒

1范圍

本文件規(guī)定了酶聯(lián)免疫吸附法檢測試劑盒的要求、標識、標簽和使用說明、包裝、運輸和貯存，描述

了相應(yīng)的試驗方法。

本文件適用于在醫(yī)學(xué)實驗室以酶聯(lián)免疫吸附法為原理進行檢驗的定量或定性檢測試劑盒（以下簡

稱詡J盒“）?

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文

件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于

本文件。

GB/T191包裝儲運圖示標志

GB/T21415體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準品和控制物質(zhì)賦值的計量學(xué)溯

源性

GB/T29791.2體外診斷醫(yī)療器械制造商提供的信息（標示）第2部分:專業(yè)用體外診斷試劑

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

酶聯(lián)免疫吸附法enzyme-linkedimmunoabsorbentassay;ELISA

以酶作為標記指示物，以抗原抗體反應(yīng)為基礎(chǔ)，通過色原呈色程度進行結(jié)果判斷的固相吸附測試方

法o呈色程度用吸光度（A）值表示，所測吸光度（A）值與待測亢原或抗體的水平呈相關(guān)關(guān)系.

注：固相載體包括微孔扳、管、磁顆粒、微珠、塑料珠等載體。

3.2

酶聯(lián)免疫吸附法檢測試劑盒detectionreagentkitforenzyme-linkedimmunoabsorbentassay

用于以酶聯(lián)免疫吸附法為原理完成特定體外診斷檢驗的一組組分。

注：包含有包被的固相載體、抗冰、抗原、生物索結(jié)合物、的結(jié)合物、緩沖液、顯色系統(tǒng)、稀稀液、校準品、質(zhì)控品等.

3.3

分析特異性analyticalspecificity

檢測程序在樣品中有其他量存在時只檢測或測量被測量存在的能力。

[來源：GB/T29791.1—2013,A.2.6]

4要求

4.1對酶聯(lián)免疫吸附法定量檢測試劑盒的要求

4.1.1外觀

外觀應(yīng)符合如下要求：

1

YY/T1183—2024

a）試劑盒各組分齊全、完整，液體無滲漏；

b）標識清晰，易識別。

4.1.2溯源性

制造商應(yīng)根據(jù)GB/T21415及有關(guān)規(guī)定提供所用校準品的來源、賦值過程以及不確定度等內(nèi)容。

4.1.3準確度

準確度應(yīng)符合如下要求之一.如適用，優(yōu)先采用相對偏差的方法。

a）相對偏差：使用可用于評價常規(guī)方法的有證參考物質(zhì)（CRM）或其他公認的參考物質(zhì)年為樣品

進行測定，其測量結(jié)果的相對偏差在±15%范圍內(nèi)。

b）回收率在85.0%~115.0%范圍內(nèi)。

c）比對試驗:用已上市試劑盒或參考方法進行比對試驗，在制造商聲稱的樣品濃度覆蓋區(qū)間

內(nèi)，相關(guān)系數(shù)（r）大于或等于0.975。偏差要求符合制造商聲稱。

4.1.4檢出限

應(yīng)符合制造商聲稱.

4.1.5線性

在制造商規(guī)定的線性范圍內(nèi)，試劑盒的相關(guān)系數(shù)（r）應(yīng)不小于0.9900。

4.1.6分析特異性

檢測含有一定濃度/水平的交叉反應(yīng)物/降解產(chǎn)物/雜質(zhì)的陽性樣品3次，測試結(jié)果應(yīng)符合其聲

稱值。

4.1.7重復(fù)性

分別用高、低濃度/水平的參考品/樣品各重復(fù)檢測10次，測定結(jié)果的變異系數(shù)（CV）應(yīng)不高

于10%O

4.1.8批間精密度

用3個批號試劑盒檢測高、低濃度/水平的參考品/樣品各10次，批間變異系數(shù)（CV）應(yīng)不高

于15%o

4.1.9穩(wěn)定性

可對效期穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性進行驗證。

a）效期穩(wěn)定性試驗

制造商應(yīng)規(guī)定試劑盒的有效期。取到有效期后一定時間內(nèi)的試劑盒，檢測其準確度、檢出限、線性、

分析特異性、重復(fù)性，結(jié)果應(yīng)符合4.1.3~4.1.7的要求。

b）熱穩(wěn)定性試驗

取有效期內(nèi)的試劑盒，根據(jù)制造商所聲稱的熱穩(wěn)定性條件,檢測其準確度、檢出限、線性、分析特異

性、重復(fù)性，結(jié)果應(yīng)符合4.1.3~4.1.7的要求。

注1：熱穩(wěn)定性試驗不能用于推導(dǎo)產(chǎn)品有效期，除非是采用基于大量的穩(wěn)定性研究數(shù)據(jù)建立的推導(dǎo)公式.

注2：一般地，有效期為1年時選擇過有效期后不超過1個月的產(chǎn)品，有效期為半年時選擇過有效期后不超過半個

月的產(chǎn)品，以此類推.但如超過規(guī)定時間，產(chǎn)品符合要求時也能接受.

2

YY/T1183—2024

注3:根據(jù)產(chǎn)品特性選擇4.1.9a）、4.L9b）方法的任意組合,但所選用方法需驗證產(chǎn)品的穩(wěn)定性，以保證在效期內(nèi)產(chǎn)

品性能符合標準要求.

4.2對酶聯(lián)免疫吸附法定性檢測試劑盒的要求

4.2.1外觀

外觀應(yīng)符合如下要求：

a）試劑盒各細分齊全、完整，液體無滲漏；

b）標簽清晰，易識別。

4.2.2陰性參考品符合率

分別檢測用于評價試劑陰性符合率的不同參考品/樣品各1次,檢測結(jié)果應(yīng)均為陰性,

陰性參考品的設(shè)置遵循以下原則（以病原微生物為例）：

a）陰性參考品/樣品包括相對于待檢測對象而言為陰性的正常人群的多份樣品，以及與該病原體

感染途徑相似或相同的其他病原體感染者樣品；

b）陰性參考品/樣品是被確定過的和（或）公認方法檢測的和（或）經(jīng)臨床確認的陰性樣品o宜使

用國家參考品，如果是制造商臼行配制的，需明確基質(zhì)、配制方法及賦值方法。

4.2.3陽性參考品符合率

分別檢測用于評價試劑陽性符合率的不同參考品/樣品各1次，檢測結(jié)果應(yīng)均為陽性.

陽性參考品的設(shè)置遵循以下原則（以病原微生物為例）。

a）陽性參考品為對被檢測對象而言確診為該病原體感染的多份樣品，陽性參考品選擇時需能代

表我國主要流行的病原微生物型別，包括不同基因型/血清型的病原體或抗體O

b）陽性參考品/樣品是被確定過的和（或）公認方法檢測的和（或）經(jīng)臨床確認的陽性樣品.宜使

用國家參考品，如果是制造商自行配制的，需明確基質(zhì)、配制方法及賦值方法。

4.2.4分析特異性

檢測含有一定濃度/水平的交叉反應(yīng)物/降解產(chǎn)物/雜質(zhì)的陰性參考品/樣品3次，檢測結(jié)果應(yīng)不出

現(xiàn)陽性。

有明確的交叉反應(yīng)物的被測物試劑盒應(yīng)適用，其設(shè)置遵循以下原則。

a）交叉反應(yīng)物及其濃度的選擇科學(xué)合理，并且其有可能存在于待測樣品中。交叉反應(yīng)可接受的

程度，主要取決于被測物和交叉反應(yīng)物在人體內(nèi)的相對含量.

b）陰性參考品/樣品是被確定過的和（或）公認方法檢測的和（或）經(jīng)臨床確認的陰性樣品。如果

是制造商自行配制的，明確基質(zhì)、配制方法及賦值方法。

注：如在“陰性/陽性參考品符合率"對交叉反應(yīng)物已有相關(guān)要求，此項不適用（如病原微生物檢測試劑盒）.

4.2.5檢出限

制造商應(yīng)規(guī)定試劑盒的檢出限水平.分別檢測不同濃度/水平梯度的參考品/樣品，結(jié)果應(yīng)滿足制

造商聲稱。

參考品/樣品的濃度/水平設(shè)置及配制遵循以下原則。

a）參考品/樣品涵蓋臨界值兩側(cè)的Cs、C95附近濃度/水平。

b）臨界值及灰區(qū)的設(shè)置考慮是否符合臨床實際診斷意義，同一被測物對于篩查試劑和確認試劑

等不同臨床應(yīng)用情形可以依據(jù)靈敏度/特異度需求分別設(shè)置不同的臨界值。

c）灰區(qū)內(nèi)參考品/樣品的檢測結(jié)果可陰可陽，高于C”檢測結(jié)果為陽，低于G檢測結(jié)果為陰。

3

YY/T1183—2024

d）如果使用的參考品/樣品是制造商自行配制的，需明確基質(zhì)、配制方法及賦值方法。

注：如被測物確實不能用常規(guī)濃度、活度單位進行賦值，采用自定義的濃度/活度賦值方式（如"滴度""效價"等）并

提供其賦值的合理性。

4.2.6重復(fù)性

檢測已明示濃度/水平的陰性及弱陽性參考品/樣品至少10次，陰陽性結(jié)果符合率均應(yīng)為95%.

重復(fù)性濃度/水平設(shè)置及結(jié)果判定遵循以下原則。

a）陰性及弱陽性參考品/樣品宜選擇C5、C95附近濃度/水平。

b）關(guān)于“95%"舉例：如測20次，至少19次符合;如測10次,10次均符合。

4.2.7批間精密度

抽取3個批次的試劑盒，各批分別檢測已明示濃度/水平的陰性及弱陽性參考品/樣品至少10

次，陰陽性結(jié)果符合率均應(yīng)為100%。

4.2.8穩(wěn)定性

可對效期穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性進行驗證。

a）效期穩(wěn)定性試驗

制造商應(yīng)規(guī)定試劑盒的有效期。取到有效期后一定時間內(nèi)的試劑盒，檢測其陰性參考品符合率、陽

性參考品符合率、分析特異性、檢出限、重復(fù)性，結(jié)果應(yīng)符合4.2.2~4.2.6要求。

b）熱穩(wěn)定性試驗

取有效期內(nèi)的試劑盒，根據(jù)制造商所聲稱的熱穩(wěn)定性條件,檢測其陰性參考品符合率、陽性參考品

符合率、分析特異性、檢出限、重復(fù)性，結(jié)果應(yīng)符合4.2.2~4.2.6要求。

注1：熱穩(wěn)定性試驗不能用于推導(dǎo)產(chǎn)品有效期，除非是采用基于大量的穩(wěn)定性研究數(shù)據(jù)建立的推導(dǎo)公式.

注2：一股地，有效期為1年時選擇過有效期后不超過1個月的產(chǎn)品，有效期為半年時選擇過有效期后不超過半個

月的產(chǎn)品，以此類推,但如超過規(guī)定時間，產(chǎn)品符合要求時也能接受。

注3:根據(jù)產(chǎn)品特性選擇4.2.8a）、4.2.8b）方法的任意組合,但所選用方法需驗證產(chǎn)品的穩(wěn)定性，以保證在效期內(nèi)產(chǎn)

品性能符合標準要求.

5試驗方法

5.1對酶聯(lián)免疫吸附法定量檢測試劑盒的試驗方法

5.1.1外觀

在自然光下以矯正視力目視檢查。

5.1.2溯源性

由制造商提供溯源性資料。

5.1.3準確度

準確度可選擇如下試驗方法之一.如適用，優(yōu)先采用相對偏差的方法。

a）相對偏差：將可用于評價常規(guī)方法的有證參考物質(zhì)（CRM）或其他公認的參考物質(zhì)配制成試劑

盒線性范圍內(nèi)高、低濃度的準確度樣品進行檢測，每個樣品測試3次，根據(jù)公式（1）計算相對偏

差。如果3次結(jié)果都符合規(guī)定，即判為合格；如果大于或等于2次的結(jié)果不符合，即判為不合

格；如果有1次結(jié)果不符合規(guī)定，則應(yīng)重新連續(xù)測試20次，分別計算相對偏差，如果大于或等

4

YY/T1183—2024

于19次測試的結(jié)果符合規(guī)定，即判為合格o

X—T

8=——X100%................................(1)

式中：

B—相對偏差；

X.——樣品的實測濃度；

T—標定濃度。

b)回收率將濃度已知的準確定值的高水平待測物A加入低濃度的血清(或其他體液成分)

B中，所加待測物與詆值樣品B之間的體積比例為不大于1:9,重復(fù)測3次取均值，根據(jù)公

式(2)計算。

八CX(V-FV)-CXV

R=-----------;->TV—T；------(-1------(lx100%............................(2)

VX

式中：

R—回收率；

C一樣品B液加入A液后的檢測濃度；

Vo一樣品B液的體積；

V一樣品A液的體積；

Co一樣品B液的濃度；

Cs一樣品A液的濃度。

注：低濃度的血清為正常人的血清。

c)比對試驗：用不少于40個在檢測濃度范圍內(nèi)不同濃度的人源樣品，與已上市的試劑盒或參考

方法進行比對.每份樣品按待測試劑盒及比對方法的要求分別進行檢測，每份樣品至少測試

1次，用線性回歸方法對2組結(jié)果進行線性擬合，得到2組結(jié)果的相關(guān)系數(shù)(r)。

5.1.4檢出限

根據(jù)制造商提供的測定試劑盒的空白限、檢出限及參考區(qū)間等信息，對5份濃度近似檢出限的低值

樣品進行檢測，每份樣品檢測5次，對檢測結(jié)果按照大小進行聿序，符合如下條件，即可認為制造商提供

的空白限和檢出限的設(shè)置基本合理。

a)低于制造商提供的空白限數(shù)值的檢測結(jié)果的數(shù)量小于或等于3個。

b)如適用，無高于制造商聲稱的參考區(qū)間下限的檢測結(jié)果。

5.1.5線性

將接近線性范圍上限的高值樣品按一定比例稀釋為至少5種濃度，其中低值濃度樣品應(yīng)接近線性

范圍的下限。按試劑盒說明書進行操作，將每一濃度樣品重復(fù)檢測3次，計算其濃度的平均值，將結(jié)果

平均值和稀釋比例用最小二乘法進行直線擬合，并計算線性相關(guān)系數(shù)(r)。特殊情況下，如稀釋會引起

其結(jié)合改變的結(jié)合態(tài)和游離態(tài)測定項目，不宜采用稀釋線性檢測。

5.1.6分析特異性

檢測含已明示濃度/水平的交叉反應(yīng)物/降解產(chǎn)物/雜質(zhì)的陰性樣品3次.

5.1.7重復(fù)性

用至少2個濃度水平的掛品(樣品應(yīng)包含醫(yī)學(xué)決定水平附近的濃度范圍)各重復(fù)檢測1。次，計算

10次測量濃度結(jié)果的平均值(X)和標準差(SD)，根據(jù)公式(3)得出變異系數(shù)(CV)。

5

YY/T1183—2024

SI)

CV==X100%...............................(3)

X

5.1.8批間精密度

用3個批號試劑盒分別檢測至少2個濃度/水平的掛品(樣品包含醫(yī)學(xué)決定水平附近的濃度范

國)，各重復(fù)10次，計算30次測量濃度值結(jié)果的平均值(X)和標準差(SD),根據(jù)公式(3)得出變異系數(shù)

(CV).

5.1.9穩(wěn)定性

5.1.9.1效期穩(wěn)定性

試劑盒按照4.1.9a)規(guī)定的條件保存后，按照5.1.3~5.1.7方法進行檢測。

5.1.9.2熱穩(wěn)定性

取有效期內(nèi)試劑盒，根據(jù)制造商所聲稱的熱穩(wěn)定性條件，按照5.1.3-5.1.7的方法進行檢測。

5.2對酶聯(lián)免疫吸附法定性檢測試劑盒的試驗方法

5.2.1外觀

在自然光下以矯正視力目視檢查。

5.2.2陰性參考品符合率

檢測陰性參考品各1次。

5.2.