3.1重組DNA的基本工具1.基因是什么？2.基因的功能是什么？基因通過控制蛋白質(zhì)的合成，直接或間接控制生物的性狀。轉(zhuǎn)錄DNAmRNA蛋白質(zhì)翻譯（RNA聚合酶）——體現(xiàn)相關(guān)的生物性狀知識(shí)回顧——基因基因是有遺傳效應(yīng)的DNA片段。①DNA中文全稱:

②組成元素:

③基本單位:

脫氧核糖核酸CHONP脫氧核糖核苷酸=磷酸+脫氧核糖

+含氮堿基脫氧核糖含氮堿基磷酸1′4′3′2′5′ATGC脫氧核苷酸(4種)鳥嘌呤脫氧核苷酸胞嘧啶脫氧核苷酸

胸腺嘧啶脫氧核苷酸腺嘌呤脫氧核苷酸知識(shí)回顧——基因脫氧核糖A磷酸脫氧核糖G磷酸脫氧核糖T磷酸T磷酸脫氧核糖C磷酸脫氧核糖A磷酸脫氧核糖氫鍵磷酸二酯鍵單個(gè)脫氧核苷酸如何連接成脫氧核苷酸鏈的呢？知識(shí)回顧——基因DNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)：5’3’3’5’②

和

交替連接，排列在外側(cè)，構(gòu)成

；

排列在內(nèi)側(cè)。③兩條鏈上的堿基通過

連接成堿基對(duì)，且遵循

。①DNA是由兩條單鏈組成的，這兩條鏈按

方式盤旋成雙螺旋結(jié)構(gòu)。反向平行脫氧核糖磷酸堿基基本骨架氫鍵堿基互補(bǔ)配對(duì)原則知識(shí)回顧——基因

我國是棉花的生產(chǎn)和消費(fèi)大國。在棉花種植過程中常常會(huì)受到一些害蟲的侵襲，其中以棉鈴蟲最常見。大量施用農(nóng)藥×抗蟲基因轉(zhuǎn)基因基因工程

能不能將“殺蟲基因”導(dǎo)入到棉花細(xì)胞，使棉花自身產(chǎn)生抗蟲蛋白來抵抗棉鈴蟲呢？基因工程

指按照人們的愿望，通過轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物制品。從技術(shù)操作層面看，由于基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，因此又叫重組DNA技術(shù)。①操作環(huán)境：②操作水平：③原理：④結(jié)果：⑤意義（優(yōu)點(diǎn)）：DNA分子水平基因重組賦予生物新的遺傳特性，創(chuàng)造出人類需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。定向改造生物性狀；克服遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙。體外環(huán)境基因工程基礎(chǔ)理論的分析【問題1】為什么不同生物的DNA分子能拼接起來？①DNA分子的基本組成單位相同，都是4種脫氧核苷酸；脫氧核糖含氮堿基磷酸DNA平面結(jié)構(gòu)DNA立體結(jié)構(gòu)②空間結(jié)構(gòu)相同，都是規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)。③都遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則【問題2】為什么一種生物的基因可以在另一種生物細(xì)胞內(nèi)表達(dá)？①基因是控制生物性狀的獨(dú)立遺傳單位。相同的遺傳信息在不同生物體內(nèi)表達(dá)出相同的蛋白質(zhì)?；蚬こ袒A(chǔ)理論的分析②遺傳信息的傳遞都遵循中心法則。③生物界共用一套遺傳密碼。從社會(huì)中來

番木瓜容易受番木瓜環(huán)斑病毒的侵襲。當(dāng)番木瓜被這種病毒感染后，產(chǎn)量會(huì)大大下降。

科學(xué)家通過精心設(shè)計(jì)，用“分子工具”培育出了轉(zhuǎn)基因番木瓜，它可以抵御番木瓜環(huán)斑病毒。DNA雙螺旋的直徑只有2nm,對(duì)如此微小的分子進(jìn)行操作，是一項(xiàng)非常精細(xì)的工作，更需要專門的“分子工具”?？茖W(xué)家究竟用到了哪些“分子工具”？這些“分子工具”各具有什么特征呢？轉(zhuǎn)基因番木瓜（左）與非轉(zhuǎn)基因番木瓜（右）從社會(huì)中來轉(zhuǎn)基因番木瓜培育抗番木瓜環(huán)斑病毒的木瓜抗番木瓜環(huán)斑病毒基因提取抗番木瓜環(huán)斑病毒基因與載體DNA連接抗番木瓜環(huán)斑病毒基因?qū)胧荏w細(xì)胞準(zhǔn)確切割DNA分子將DNA片段連接起來將體外重組好的DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞“分子手術(shù)刀”“分子縫合針”“分子運(yùn)輸車”剪接運(yùn)分子工具細(xì)菌細(xì)菌細(xì)菌限制性內(nèi)切核酸酶

限制酶就是細(xì)菌的一種防御性工具。當(dāng)外源DNA入侵時(shí)，它會(huì)利用限制酶來切割外源DNA，使之失效，以保證自身的安全。一、限制性內(nèi)切核酸酶—“分子手術(shù)刀”

能識(shí)別

的特定核苷酸序列，并使每一條鏈中特定部位的磷酸二酯鍵斷開。一、限制性內(nèi)切核酸酶—“分子手術(shù)刀”切割DNA分子的工具是限制性內(nèi)切核酸酶，又稱

。限制酶1.來源：2.種類：主要來自原核生物數(shù)千種限制酶不是一種酶，而是一類酶。3.作用特點(diǎn)：專一性大多數(shù)限制酶識(shí)別序列由6個(gè)核苷酸組成，也有少數(shù)限制酶的識(shí)別序列由4個(gè)、八個(gè)或其他數(shù)量的核苷酸組成。雙鏈DNA分子1’2’3’4’5’

G限制酶1’2’3’4’5’

A磷酸二酯鍵TGCCGTAA5'3'5'3'一、限制性內(nèi)切核酸酶—“分子手術(shù)刀”一、限制性內(nèi)切核酸酶—“分子手術(shù)刀”4.識(shí)別序列EcoRⅠ5’…G-A-A-T-T-C…3’3’…C-T-T-A-A-G…5’SmaⅠ5’…C-C-C-G-G-G…3’3’…G-G-G-C-C-C…5’BamHⅠ5’…G-G-A-T-C-C…3’3’…C-C-T-A-G-G…5’TaqⅠ5’……T-C-G-A……3’3’……A-G-C-T……5’

呈現(xiàn)堿基互補(bǔ)對(duì)稱，無論是6個(gè)堿基還是4個(gè)堿基，都可以找到一條中心軸線，中軸線兩側(cè)的雙鏈DNA上的堿基是反向?qū)ΨQ重復(fù)排列的，稱為回文序列。

在切割部位，一條鏈正向讀的堿基順序與另一條鏈反向讀的順序完全一致。限制酶所識(shí)別的序列的特點(diǎn)是：拓展——限制酶的命名EcoRⅠ屬名Escherichia首字母種名coli前兩個(gè)字母R型菌株從中分離的第一個(gè)限制酶EcoR

Ⅰ：大腸桿菌（Escherichia

coli）R型菌株中分離出的第一個(gè)限制酶；閱讀72頁資料卡“限制酶的命名”，說說EcoRⅠ各個(gè)字母的代表含義。一、限制性內(nèi)切核酸酶—“分子手術(shù)刀”實(shí)例1：EcoRI限制酶能特異性識(shí)別

5'-GAATTC-3'

序列，并在G與A之間切割。5′3′5′3′TACGTACTGAAT5′5′3′3′CT5′3′5′3′TAGCAGATTA中軸線黏性末端（5'AATT-3'）當(dāng)限制酶在它的識(shí)別序列的中心軸線兩側(cè)將DNA分子的兩條鏈分別切開時(shí)，產(chǎn)生的是黏性末端。一、限制性內(nèi)切核酸酶—“分子手術(shù)刀”5.切割結(jié)果:實(shí)例2：SmaI限制酶能特異性識(shí)別5'-CCCGGG-3'序列，并在

C與G之間切割。5′3′5′3′CGCGCGCGCGCG中軸線5′3′5′3′CGCGCGCGCGCG5′3′5′3′平末端當(dāng)限制酶在它的識(shí)別序列的中心軸線處切開時(shí)，產(chǎn)生的是平末端。5.切割結(jié)果:一、限制性內(nèi)切核酸酶—“分子手術(shù)刀”形成黏性末端或平末端1.下面哪項(xiàng)不具有限制酶識(shí)別序列的特征（）A．GAATTC

CTTAAG

B．GGGGCCCC

CCCCGGGG

C．CTGCAG

GACGTC

D．CTAAATC

GATTTAG

D2.下列黏性末端屬于由同種限制酶切割而成的是()

①

②

A.①②

B.①③

C.①④

D.②③③④倒轉(zhuǎn)180°，完全相同則為同一種限制酶切割B【現(xiàn)學(xué)現(xiàn)用】3.寫出下列限制酶切割形成的黏性末端BamHⅠ________EcoRⅠ________HindⅢ________BglⅡ________GATCAATTAGCTGATC思考：同種限制酶切割的黏性末端一定相同嗎？不同種限制酶切出的黏性末端一定不同嗎？①不同DNA分子用同一種限制酶切割形成的黏性末端都相同?！窘馕觯好妇哂袑Ｒ恍裕R(shí)別的序列相同】②不同的限制酶切割可能產(chǎn)生相同的黏性末端。（比如BamHⅠ、BglⅡ）4.結(jié)合右圖，推斷限制酶切一次可斷開

個(gè)磷酸二酯鍵，產(chǎn)生

個(gè)游離的磷酸基團(tuán)，消耗

分子水。

2225.下圖甲是一個(gè)DNA片段，箭頭處代表不同限制酶的切點(diǎn)，據(jù)圖回答：(1)用EcoRⅠ酶切，能得到

種DNA片段；(2)用PstⅠ完全酶切，能得到

種DNA片段；23(3)要想獲得抗病基因必須要用限制酶切

個(gè)切口？可產(chǎn)生

個(gè)黏性(平)末端？24用同種限制酶切割(EcoRⅠ)TGAATTCGACTTAAGCAGAATTCTTCTTAAGA缺口怎么辦完全互補(bǔ)的黏性末端能通過氫鍵暫時(shí)連接在一起，但并不穩(wěn)定。DNA連接酶—“分子縫合針”恢復(fù)被限制酶切開的磷酸二酯鍵想一想：把兩種來源不同的DNA分子進(jìn)行拼接，應(yīng)該怎樣處理呢？1.作用：將兩個(gè)DNA片段連接起來，恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。5′3′TACGTACTGAAT5′3′5′3′CGCGCG5′3′CGCGCG切口切口切口CT5′3′5′3′TAGCAGATTA5′3′5′3′CGCGCGCGCGCG二、DNA連接酶—“分子縫合針”不是連接氫鍵（氫鍵的形成不需要酶的催化）2.種類：種類來源功能縫合

和

；縫合__________和_______________結(jié)果E.coliDNA連接酶T4DNA連接酶恢復(fù)被限制酶切開的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵二、DNA連接酶—“分子縫合針”黏性末端平末端（連接平末端效率遠(yuǎn)低于T4DNA連接酶）黏性末端平末端(效率低)大腸桿菌T4噬菌體二、DNA連接酶—“分子縫合針”3.E·coliDNA連接酶的連接作用注意：兩個(gè)DNA片段要具有互補(bǔ)（相同的）黏性末端才能連接起來4.T4DNA連接酶的連接作用二、DNA連接酶—“分子縫合針”DNA連接酶與DNA聚合酶是一回事嗎？為什么？DNA連接酶DNA連接酶ATAGTCCGAATT連接兩個(gè)DNA片段DNA連接酶作用示意圖：CAATTGAGTATCDNA聚合酶DNA聚合酶作用示意圖：以DNA的一條鏈為模板，連接單個(gè)脫氧核苷酸形成單鏈DNA連接酶與DNA聚合酶的比較DNA連接酶DNA聚合酶相同作用實(shí)質(zhì)化學(xué)本質(zhì)不同點(diǎn)模板底物產(chǎn)物用途都能催化形成磷酸二酯鍵都是蛋白質(zhì) 不需要需要DNA的一條鏈作模板形成完整的重組DNA分子形成DNA的一條鏈基因工程DNA復(fù)制4種游離的脫氧核苷酸具有互補(bǔ)黏性末端或平末端的DNA片段【現(xiàn)學(xué)現(xiàn)用】1.DNA連接酶是重組DNA技術(shù)中常用的一種工具酶。下列相關(guān)敘述正確的是（

）A.能連接DNA分子雙鏈堿基對(duì)之間的氫鍵B.能將單個(gè)脫氧核苷酸加到DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵C.能連接用同種限制酶切開的兩條DNA片段，重新形成磷酸二酯鍵D.DNA連接酶只能連接雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端C磷酸二酯鍵DNA片段也能連接平末端2.以下是幾種不同限制酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列敘述正確的是（

）A.以上DNA片段是由4種限制酶切割后產(chǎn)生的B.②片段是在識(shí)別序列為

的限制酶作用下形成的C.①和④兩個(gè)片段在DNA聚合酶的作用下可形成重組DNA分子D.限制酶和DNA連接酶作用的部位都是磷酸二酯鍵D①和④相同DNA連接酶3.如表列舉了幾種限制酶的識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)(箭頭表示相關(guān)酶的切割位點(diǎn))。如圖是酶切后產(chǎn)生的幾種末端。下列說法正確的是（

）A.BamHⅠ切割的是氫鍵，AluⅠ切割的是磷酸二酯鍵B.Sau3AⅠ和BamHⅠ切割的序列產(chǎn)生的片段能夠相連，連接后的片段還能被Sau3AⅠ切割C.DNA連接酶能連接②⑤，不能連接②④D.T4DNA連接酶能連接①③，且連接效率高B1.作用：將外源基因送入受體細(xì)胞,

在受體細(xì)胞內(nèi)對(duì)目的基因進(jìn)行大量復(fù)制。2.種類：質(zhì)粒動(dòng)植物病毒噬菌體（最常用）質(zhì)粒是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨(dú)立于真核細(xì)胞細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核DNA之外，并具有

能力的

。自我復(fù)制環(huán)狀雙鏈DNA分子它們來源不同，在大小、結(jié)構(gòu)、復(fù)制方式以及可以插入外源DNA片段的大小上也有很大的差別。三、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運(yùn)輸車”復(fù)制原點(diǎn)目的基因插入位點(diǎn)氨芐青霉素抗性基因①能在細(xì)胞中進(jìn)行自我復(fù)制，或整合到受體DNA上，隨受體DNA同步復(fù)制。②有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)EcoR

ⅠSma

Ⅰ...③具有標(biāo)記基因圖1-1④對(duì)受體細(xì)胞無害三、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運(yùn)輸車”3.★作為載體所具備的條件（便于目的基因插入）（便于重組DNA分子的篩選）真正被用作載體的質(zhì)粒，都是在天然質(zhì)粒的基礎(chǔ)上進(jìn)行過人工改造的。三、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運(yùn)輸車”

載體上的標(biāo)記基因一般是某種抗生素的抗性基因，而受體細(xì)胞沒有抵抗該抗生素的能力。將含有某抗生素抗性基因的載體導(dǎo)入受體細(xì)胞，抗性基因在受體細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，受體細(xì)胞對(duì)該抗生素產(chǎn)生抗性。在含有該抗生素的培養(yǎng)基上，導(dǎo)入了載體并成功表達(dá)了的受體細(xì)胞才能夠生存。標(biāo)記基因的篩選原理

思考·討論：請同學(xué)找到兩條片段上EcoRI的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)?！璗ATCGTACGATAGGTACTTAA…ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATAC…GCCGTATG……TCCTAG…AGGATCTTAAGAGCCATACTTAAAATTCTCGGTATGAATTCCATAC…GGTATG…GAGCCATACTTAAAATTCTCGGTATG5′3′5′3′5′3′5′3′三、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運(yùn)輸車”1.剪刀和透明膠條分別代表哪種“分子工具”？剪刀代表限制酶；透明膠條代表DNA連接酶。2.你制作的黏性末端的堿基能不能互補(bǔ)配對(duì)?如果不能，可能是什么原因造成的？

如果制作的黏性末端的堿基不能互補(bǔ)配對(duì)，可能是剪切位點(diǎn)或連接位點(diǎn)選得不對(duì)，也可能是其他原因。3.你插入的DNA片段能稱得上一個(gè)基因嗎？不能。因?yàn)榛虻拈L度一般在100個(gè)堿基對(duì)以上。三、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運(yùn)輸車”4.用EcoRⅠ切下圖含有目的基因的DNA片段，能成功不？雙酶切：用2種酶分別對(duì)目的基因和運(yùn)載體切割?！瑼TCGAATCATCCCGGGCATTAGTG…CCAAGTCTCTGGAATTCACGATTAG……TAGCTTAGTAGGGCCCGTAATCAC…GGTTCAGAGACCTTAAGTGCTAATC…不能…GGGCATTAGTG…CCAAGTCTCTGG……CCCGTAATCAC…GGTTCAGAGACCTTAA…雙酶切產(chǎn)生不同末端：選擇限制酶切割位點(diǎn)的基本原則

切割目的基因時(shí)：

切割質(zhì)粒時(shí)：能切下目的基因且不破壞目的基因至少保留一個(gè)完整的標(biāo)記基因，便于篩選三、基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體——“分子運(yùn)輸車”1.某細(xì)菌質(zhì)粒上有標(biāo)記基因如圖所示，通過標(biāo)記基因可以推知外源基因（目的基因）是否轉(zhuǎn)入成功。外源基因插入的位置不同，細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長情況也不同，如圖所示是外源基因插入位置（插入點(diǎn)有a、b、c）示意圖，請根據(jù)表中提供的細(xì)菌生長情況，推測①②③三種重組后細(xì)菌的外源基因插入點(diǎn)，正確的一組是（

）插入點(diǎn)細(xì)菌在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上的生長狀況細(xì)菌在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上的生長狀況①能生長能生長②能生長不能生長③不能生長能生長A.①是a和b；②是a；③是bB．①是c；②是b；③是aC．①是a和b；②是b；③是aD．①是c；②是a；③是bB【現(xiàn)學(xué)現(xiàn)用】2.(不定項(xiàng))圖甲、乙中的箭頭表示三種限制性內(nèi)切核酸酶的酶切位點(diǎn)，ampr表示氨芐青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性基因。下列敘述正確的是(

)ACA.圖甲中的質(zhì)粒用BamHI切割后，含有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)B.在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，可用PstI和BamHI切割質(zhì)粒和外源DNAC.在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，可用PstI和HindⅢ切割切割質(zhì)粒和外源DNAD.導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌可在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生長（一）實(shí)驗(yàn)原理00.14NaCI濃度（mol/L）DNA溶解度

利用DNA與RNA、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異，提取DNA，去除其他成分。DNA不溶于酒精，但某些蛋白質(zhì)溶于酒精DNA能溶于物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液在一定溫度下，DNA被二苯胺試劑染成藍(lán)色初步分離DNA和蛋白質(zhì)溶解DNA鑒定DNA四、探究?實(shí)踐：DNA的粗提取與鑒定（二）材料用具1.實(shí)驗(yàn)材料的選取

富含DNA的材料，如新鮮洋蔥、香蕉、菠菜和豬肝等材料：【思考】能否選用牛、羊、馬、豬等哺乳動(dòng)物的紅細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)材料？不能哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞中無細(xì)胞核，幾乎不含DNA?！舅伎肌磕芊襁x用雞血細(xì)胞做實(shí)驗(yàn)材料？能雞是鳥類動(dòng)物，成熟的紅細(xì)胞中有細(xì)胞核。四、探究?實(shí)踐：DNA的粗提取與鑒定2.試劑：試劑研磨液體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精二苯胺2mol/L的NaCl溶液

蒸餾水溶解并提取DNA析出DNA溶解DNA鑒定DNA，要現(xiàn)配現(xiàn)用研磨液成分作用SDS使蛋白質(zhì)變性EDTA抑制DNA酶的活性Tris-HCl緩沖液使DNA呈穩(wěn)定狀態(tài)四、探究?實(shí)踐：DNA的粗提取與鑒定（二）材料用具1.通過研磨釋放DNA：稱取30g洋蔥，切碎，然后放入研缽中，倒入10mL研磨液，充分研磨研磨的目的？破碎細(xì)胞，使核物質(zhì)容易溶解在研磨液中注意事項(xiàng)？研磨時(shí)間不宜太長：有條件的可以在材料處理的過程中加入纖維素酶、果膠酶：研磨不宜太用力：思考：若是動(dòng)物細(xì)胞，該如何獲取DNA濾液？動(dòng)物細(xì)胞無細(xì)胞壁，可直接吸水漲破。（三）實(shí)驗(yàn)步驟四、探究?實(shí)踐：DNA的粗提取與鑒定防止研磨時(shí)產(chǎn)生的熱量影響DNA的提取量有利于充分研磨防止DNA被破壞四、探究?實(shí)踐：DNA的粗提取與鑒定過濾能用濾紙代替嗎？不可以，因?yàn)镈NA會(huì)被吸附到濾紙上而大量損失。方法一：在漏斗中墊上紗布，將洋蔥研磨液過濾到燒杯中，在4℃冰箱中放置幾分鐘后，再取上清液。方法二：直接將研磨液倒入塑料離心管中，1500r/min的轉(zhuǎn)速下離心5min，再取上清液放入燒杯中。思考：（1）上清液中除DNA之外，可能含有哪些雜質(zhì)？

可能含有核蛋白、多糖等雜質(zhì)（2）低溫放置幾分鐘有什么作用？

①抑制核酸水解酶的活性，進(jìn)而抑制DNA降解；

②抑制DNA分子運(yùn)動(dòng)，使DNA易形成沉淀析出；

③低溫有利于增加DNA的柔韌性，減少其斷裂。2．去除濾液中的雜質(zhì)方法一：在上清液中加入體積相等的、預(yù)冷的酒精溶液（體積分?jǐn)?shù)為95%），靜置2-3min，溶液中出現(xiàn)的白色絲狀物就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸去上面的水分；思考：（1）攪拌時(shí)應(yīng)輕緩、并沿一個(gè)方向？

減少DNA斷裂，以便獲得較完整的DNA分子（2）酒精預(yù)冷的作用？

①低溫可抑制核酸水解酶的活性，進(jìn)而抑制DNA降解；

②低溫抑制DNA分子運(yùn)動(dòng)，使DNA易形成沉淀析出；

③低溫有利于增加DNA的柔韌性，減少斷裂。方法二：將溶液倒入塑料離心管中，在10000r/min的轉(zhuǎn)速下離心5min，棄上清液，將管底的沉淀物（粗提取的DNA）晾干。3.冷卻酒精析出DNA四、探究?實(shí)踐：DNA的粗提取與鑒定四、探究?實(shí)踐：DNA的粗提取與鑒定4.DNA的鑒定實(shí)驗(yàn)組對(duì)照組水浴加熱取兩支20mL的試管，各加入2mol/L的NaCl溶液5mL。將絲狀物或沉淀物溶于其中一支試管的NaCI溶液中。向兩支試管中各加入4mL的二苯胺試劑。

混合均勻后，將試管置于沸水中加熱5min。待試管冷卻后，比較兩支試管中溶液顏色的變化。藍(lán)色（四）結(jié)果分析①材料中的核物質(zhì)沒有充分釋放出來，如研磨不充分或蒸餾水的量不夠。②加入酒精后搖動(dòng)或攪拌時(shí)過猛，DNA被破壞。③二苯胺最好現(xiàn)用現(xiàn)配，否則二苯胺變成淺藍(lán)色，影響鑒定效果。1.怎么確認(rèn)實(shí)驗(yàn)提取出來的是DNA所含雜質(zhì)較少？若鑒定結(jié)果呈現(xiàn)藍(lán)色比較淺，說明什么問題？觀察提取的DNA的顏色，如果不是白色絲狀物，說明DNA中的雜質(zhì)較多。若鑒定結(jié)果藍(lán)色比較淺，可能是因?yàn)樗崛〉腄NA含量低，或在實(shí)驗(yàn)操作過程中出現(xiàn)了失誤。2.與其他同學(xué)提取的DNA進(jìn)行比較，看看實(shí)驗(yàn)結(jié)果有何不同，分析產(chǎn)生差異的原因。四、探究?實(shí)踐：DNA的粗提取與鑒定以血液為實(shí)驗(yàn)材料時(shí)：每100mL血液中需要加入3g檸檬酸鈉，防止血液凝固。1.（不定項(xiàng)）下列關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是