01.革蘭氏染色的關鍵操作環(huán)節(jié)是：B.50%。B.惠更斯目鏡。

A.結晶紫染色。C.90%oC.補償目鏡。

B.碘液固定。08.用甲醛進行空氣熏蒸消毒的用量是：15.目鏡頭上的"P"字母表達：

C酒精脫色.A.20ml/M\A.平場目鏡。

D.復染。B.6ml/M\B.廣視野口鏡。

02.放線菌印片染色的關鍵操作是：C.Iml/M'oC.平場補償目鏡。

A.印片時不能移動。09.高壓蒸汽滅菌的工藝條件是：16.物鏡頭上的“PL”字母表達：

B.染色。A.12rC/30mino.A.正低相差物鏡。

C.染色后不能吸干。B.HSr/SOmin.B.正高相差物鏡。

D.A-CoC.130C/30min.C.負高相差物鏡。

03.高氏培養(yǎng)基用來培養(yǎng)：10.巴氏消毒的工藝條件是：17.物鏡頭上的"LYL”字母表達。

A.細菌。A.62-63'C/30minoA.無熒光物鏡。

B.真菌。B.71-72C/15min。B.照相物鏡。

C.放線菌。C.A.B.均可。C.相差物鏡。

04.為湯培養(yǎng)基用來培養(yǎng)：11.半固體培養(yǎng)基的重要用途是：18.鏡頭上標有"對X"字母的鏡頭是:

A.酵母菌。A.檢查細菌的運動性。A.相差調整望遠鏡。

B.霉菌。B.檢查細菌的好氧性。B.攝影目鏡。

C.細菌。C.A.B.兩項。C.相差日鏡。

05.無氮培養(yǎng)基用來培養(yǎng)：12.半固體培養(yǎng)基的瓊脂加入量通常19."PA”表達:

A.白生固氮菌。是：A.馬鈴茗培養(yǎng)基。

B.危酸鹽細菌。A.1%0B.高氏培養(yǎng)基。

C.根瘤菌。B.0.5%。C.肉湯培養(yǎng)基。

D.A,B均可培養(yǎng)。C.0.1%,20.無菌室空氣滅菌常用方法是：

E.A,B,C均可培養(yǎng)。13.使用手提式滅菌鍋滅菌的關鍵操作A.甲醛熏蒸。

06.在使用顯微鏡油鏡時，為了提高分是：B.紫外燈照射。

辨九通常在鏡頭和蓋玻片之間滴加：A.排冷氣徹底。C.噴石炭酸。

A.二甲苯。B.保溫時間適當。D.A.B.并用。

B.水。C.滅菌完后排氣不能太快。21.干熱滅菌的關鍵操作是：

C.杏柏油.D.A-CoA.滅菌物不能有水.

07.常用的消毒酒精濃度為：14.目鏡頭上的"K"字母表達：B.保溫過程中不能開箱門。

A.75%。A.廣視野目鏡。C.降溫不能太快。

22.霉菌水浸制片的關鍵操作是：A.消色差物鏡。A.超平場復消色差物鏡。

A.菌紇要分散.B.復消色差物鏡。B.超平場半消色差物鏡。

B.菌絲一方面要用50%的乙醇浸潤。C.半消色差物鏡。C.超平場物鏡。

C.蓋蓋玻片不能有氣泡。28.物鏡頭上的"Ach”字母表達：35.物鏡頭上的“Planapo”表達:

D.A-CoA.平場物鏡.A.超平場物鏡。

B.超平場物鏡。B.平場物鏡。

23.用來染芽胞的染料通常是：

C.消色差物鏡。C.平場復消色差物鏡。

A.孔雀綠。

29.物鏡頭上的“NH”字母表達:36.物鏡頭上的"Plan"字母表達

B.結晶紫。

A.正相差物鏡。A.平場物鏡。

C.復紅。

B.負相差物鏡。B.消色差物鏡。

D.番紅。

C.負高相差物鏡。C.超平場物鏡。

24.復紅法染鞭毛的關鍵操作是：

30.物鏡頭上的“0.17”表達:37.目鏡頭上的飛”字母表達：

A.坂片干凈。

A.規(guī)定的盜玻片厚曳“A.廠視野高眼點補償目鏡。

B.染料新鮮..

B.規(guī)定的載玻片厚度。B.高眼點目鏡。

C.菌體活化適當。

C.鏡頭浸油的深度。C.廣視野目鏡。

D.A.B.C。

31.鏡頭上標有"NK”字母的鏡頭是：38.目鏡頭上的"SWK”字母表達：

25.鍍銀法染鞭毛的關鍵操作是：

A.照相目鏡。A.超廣視野目鏡。

A.坂片干凈。

B.熒光目鏡。B.高眼點補償目鏡。

B.染料無沉淀。

C.相差目鏡。C.平場補償目鏡。

C.加熱適當。

32.目鏡頭上的“PK”字母發(fā)達：39.目鏡頭上的"NHK"字母表達：

I).菌體活化適當。

A.平場目鏡。A.超廣視野目鏡。

E.A~Do

B.補償目鏡。B.廣視野高眼點目鏡。

26.進行簡樸染色使用的染色液通常

C.平場補償目鏡。C.平場補償目鏡。

是：

40.物鏡頭上的“情.L"字母表達:

A.復紅。

A.消色差物鏡。

B.蕃紅。

33.物鏡頭上的"Splan"字母表達：

B.半消色差物鏡。

C.結晶紫。

A.超平場物鏡。

C.復消色差物鏡。

D.孔雀綠。

B.平場物鏡。

E.A-D均可。

C.消色差物鏡。

27.物鏡頭上的"APO"字母代表:

34.物鏡頭上的"SplanAp。"表達:

判斷題

(V)01.無菌吸管上端塞入棉花是為了過濾口中的有由空氣。

(x)02.無菌吸管上端塞入棉花的目的是為了防止菌液吸入口中。

(J)03.稀粹平板測數時,放線菌計數的標準是選擇每皿中菌落數在30-300個之間的稀粹度進行計數。

(V)04.稀釋平板測數時，細菌計數的標準是選擇每皿中菌落數在30-300個之間的稀釋度進行計數。

(X)05.稀釋平板測數時,細菌,放線菌，真菌的計數標準是選擇每皿中菌落數在30-300個的稀釋度進行計數。

(J)06,稀釋平板測數時，真菌的計數標準是選擇每皿中菌落數在10T00個的稀釋度進行計數。

(X)07.稀釋平板測數時,細菌、放線的、真菌的計數標準是選擇每皿中菌落數在10-100個的稀釋度進行計數。

(4)08.用混菌法測微生物活菌數時,每個平皿中的菌液加入量是1ml。

(J)09.用涂抹法測微生物活菌數時,每個平皿中的菌液加入量是0.1mL

(J)10.用油鏡鏡檢時應將聚光器升至最高。

(X)11.使用高倍鏡時，可將聚光器升至最高。

(J)12.為門菌足微生物對微量元素的需要，配制培養(yǎng)基所用的水最佳使用自來水。

(J)13.稀釋測數用的無菌水通常是由自來水滅菌而成。

(X)14.觀測根霉，青霉只需用低倍鏡觀測即可。

(X)15.實驗室通常使用血球計數板測微生物的總菌數。

(X)16.浸油的油鏡頭可用軟的衛(wèi)生紙擦凈。

(X)17.為了節(jié)省時間，可直接在染色涂片上滴加吞柏油后，直接用油鏡觀測。

(J)18.使用油鏡的對的操作環(huán)節(jié)是：

L低倍鏡觀測。

2.高倍鏡觀測。

3.轉出高倍鏡頭,滴加香柏油后用油鏡觀測。

(J)19.在擦拭顯微鏡鏡頭時,應向一個方向擦拭。

(J)20.顯微鏡鏡頭的放大倍數越大,它的數值孔徑值越大，其鏡口角也越大。

(V)21.稀釋平板測數通常是采用十倍稀釋法。

(X)22.稀釋平板測數通常采用的是二倍稀釋法。

(X)23.做稀釋平板測數時，只需一支吸管從頭稀釋到尾即可。

(V)24.做稀釋平板測數時，每做一個稀釋度都必須更換一支無菌吸管。

(X)25.稀粹平板測數時，無論是用混菌法,還是用涂抹法，每個平皿中的菌液加入量都是1ml。

(X)26.稀釋平板測數時，無論是用混菌法,還是用涂抹法，每個平皿中的菌液加入量都是0.1ml。

J)27.實驗室做固體培養(yǎng)基時，常加I.8%的瓊脂作凝固劑,做半固體培養(yǎng)基時,瓊脂加入量通常是0.5%。

x)28.實驗室做固體培養(yǎng)基,常加2%為瓊脂作凝固劑,做半固體培養(yǎng)基時,瓊脂加入量通常是1%。

X)29.E.。?！ń浉锾m氏染色后，菌體呈紅色,它是革蘭氏正反映細菌。

X)30.在光學顯微鏡下，根霉的抱f囊是透明的.

X)31,使用手提滅菌鍋滅菌后，為了盡快排除鍋內蒸汽,可直接打開排氣閥排氣。

X)32.蘇云金桿菌的芽胞在菌體的中央。

X)33.所有真菌菌落的表面干燥，呈絨毛狀。

X)34.所有放線菌菌落表面干燥，呈粉粒狀。

X)35.所有細菌菌落的表面都是光滑濕潤狀。(芽胞菌菌落表面粗糙。).

V)36.鏡臺測微尺每小格的實際長度是10微米。

X)37.目鏡測微尺每小格的實際長度是10unio

X)38.鏡臺測微尺每小格的實際長度是10nm(納米)。

X)39.血球計數板兩邊的平臺比計數區(qū)高0.1cm。

J)40.血球計數板兩邊的平臺比計數區(qū)高0.1mm。

V)41.棉花塞塞入試管的長度應為棉塞全長的2/3。

X)42.棉花塞塞入試管的長度應為棉塞全長的2/3。

X)43.擺斜面的長度應不超過試管長度的2/3。

4)44.擺斜面的長度應不超過試管長度的1/2。

J)45.血球計數板計數區(qū)的面積是Im!1

X)46.用血球計數板計數時,任數5個大方格(80個小格)的菌數即可。

V)47.在使用細菌計數板計數時，為了防止計數偏大,計數區(qū)四周壓線的菌只能數兩邊。

J)48.目鏡測微尺每格的實際長度是未知的，需用長度已知的鏡臺測微尺校正。

X)49.測微生物的細胞大小時，需要校正的是鏡臺測微尺每格的實際長度。

J)50.測微生物細胞大小時,需要校正的是目鏡測微尺每格的實際長度。

;

J)51.血球計數板計數區(qū)每小格的體積是l/4000nuno

2

X)52.血球計數板計數區(qū)共有400個小格,每小格的面積是l/400cmo

J)53.用分裝器將培養(yǎng)基分裝試管時,應建防培養(yǎng)基沾染試管口。

X)54,瓊脂的熔化溫度是90c以上,凝固溫度是45c以下。

J)55.瓊脂的熔化溫度是95℃以上,陵固溫度是45℃以下。

V)50.玻璃瑞材洗凈后在急需時可采用高壓蒸汽滅菌，而不能用T熱滅菌。

J)57.細菌計數板每小格的體積是l/20230mm3o

X)58.血球計數板計數區(qū)每小格的體枳是l/4000cm)

（J）59.無菌室用甲醛熏蒸消毒后可噴級水以減少甲醛的刺激。

填空題

01.霉菌水浸片的制片程序是加一滴水于載玻片中央，用解剖針挑取菌絲少許，將菌絲用50%的酒精浸潤,將菌絲用蒸窗水水洗,

將菌絲放入我破片水滴中并小心分散,蓋上蓋破片。

02.放線菌印片染色的操作程序是印片,干燥，固定，復紅染色2-3分鐘，水洗,脫干。

03.固體培養(yǎng)基常用洋菜（瓊脂）作凝固劑，普通固體培養(yǎng)基的用量一般為1.5-2.0%_,半固體培養(yǎng)基的用量一般為0.5%_o

04.簡樸染色的操作程序是涂片一,干燥,固定，復紅染色1-2分鐘，水洗，晾干。

05.使用手提式滅菌鍋進行滅菌的操作程序是—鍋內加水，滅菌物體裝鍋，對稱上緊密封螺帽將鍋密封上,加熱產溫，排盡鍋內冷

空氣,升溫至滅菌工藝條件（一般為98kpa）,在工藝條件下保壓計時（一般為30分鐘），屆時間后切斷熱源,降溫，出鍋。

06.實驗室配制固體培養(yǎng)基的操作程序是照配方稱取藥品，將藥品溶解在一定量的水中后加熱煮沸,將瓊脂按量稱取后用水浸

濕,將浸濕的瓊脂加入煮沸的營養(yǎng)液中，待瓊脂所有融化后調節(jié)pH值,補充損失的水分,分裝培養(yǎng)基入不同的容器中。

07.有莢膜的細菌用負染色法染色后，莢膜為無色，菌體為一紅色.

08.細菌經革蘭氏染色后,革蘭氏正反映曲呈_紫色,革蘭氏負反映菌呈—紅色。

09.細菌經簡樸染色后呈—所染?染料的顏色

10.顯微鏡的光學系統(tǒng)由一反光鏡,聚光鏡,物鏡，—和目鏡組成。

11.顯微鏡的機械部分涉及一鏡座,鏡臂，載物臺,轉換器,鏡筒,推動器,粗動螺旋,微動螺旋聚光鏡升降螺旋。等九部分組成。

12.高氏培養(yǎng)基通常用來培養(yǎng)—放線菌，其pH值為_7.5-8.0_o

13.P，\培養(yǎng)基通常用來培養(yǎng)真菌菌，其pH值為5-6o

14.牛肉膏、蛋白膝培養(yǎng)基通常用來培養(yǎng)一細菌，其pH值為_、7.0-7.2_o

15.天氮培養(yǎng)基通常用來培養(yǎng)自生固氮菌。其氮源來自一空氣中的N2一。

16.T-熱滅菌的工藝條件是160T70C/2h_。

17.使用顯微鏡低倍鏡觀測時，聚光器應當減少，使用顯微鏡高倍鏡觀測時，聚光器應當適當升高。

18.革蘭氏染色的關鍵操作是酒精脫色一。

19.顯微鏡的倍數越大,焦深越小，調焦應當越小心

20.按培養(yǎng)基的形態(tài),可將培養(yǎng)基分為液體固體」半固體三種類型。

21.配制常規(guī)培養(yǎng)基時通常用.自來.水。

22.熱滅菌通常用來滅菌玻璃器材,培養(yǎng)基的滅菌通常用高壓蒸汽滅菌。

23.細菌稀樣測數通常采用10倍_稀樣法，稀釋用試管無菌水為9_亳刀。

24.配制培養(yǎng)基時常用ImolNaOIk和ImolHCL調節(jié)pH值。

25.按培養(yǎng)基的特殊用途，可將培養(yǎng)基提成—選擇培養(yǎng)基,加富培養(yǎng)基，鑒別培養(yǎng)基等。

26.選擇培養(yǎng)基可用來分離培養(yǎng)我們所需的特殊微生物類群，例如我們要從二填中分離纖維分解菌，可以運用纖維素作唯一碳

源來篩選纖維分.解菌要分離產蛋白酶的微生物,可以運用酪蛋白，作唯一氮源分離.蛋白分解菌

27.革蘭氏染色的操作程序是涂片，干燥，固定，結晶紫桀色1分鐘，水洗,碘液媒染1分鐘，水洗,95%的乙醇脫色25秒,水洗，蕃

紅復染3-5分鐘，水洗，晾干

28.培養(yǎng)基是人工配制的適合不同微生物生長繁殖或積累代謝產物的營養(yǎng)基質。按營養(yǎng)物質的不同來源可分為一天然培養(yǎng)基,合

成培養(yǎng)基，半合成培養(yǎng)基—三大類。

29.高倍鏡頭的數值孔徑通常為_0.65,,放大倍數為_40x_0

30.油鏡頭的數值孔徑通常為1.25,放大倍數為100x或90x.

31.低倍鏡頭的數值孔徑通常是0.25_,放大倍數為」Ox或8x_0

32.穿刺接種使用的接種工具為一接種針,斜面接種使用的接種工具為接種環(huán)

33.進行稀釋測數使用的重.要器材有—酒精燈，1ml無菌吸管,9ml試管裝無菌水,9cm的無菌平板

34.用孔雀綠和復紅作細菌芽胞染色時,可使菌體呈紅色，使芽胞呈—綠色。

35.用日光燈作光源時,通常用一平面反光鏡,用自然光作光源時,通常用凹面一反光鏡

36.無菌室殺菌通常采用紫外燈照射,和噴灑化學藥劑（如酚）相結合的方法。

37.半固體培養(yǎng)基通常用來檢查—細菌的運動性。

38.擺試管斜面的基本操作方法是將擺鼻面用特制木條放在桌面上,將裝有國體培養(yǎng)基的試管趁熱放在特制木條上擺成斜面,斜

面長度不得超過試管長度的"2,將試管棉塞部分用滅菌報紙部上，以防空氣中微生物落到棉塞上引起污染。

39不能加熱滅菌的液體培養(yǎng)基應采用濾法除菌,通常用的器皿有蔡氏細菌過濾濾和膜濾

40.藍細菌的培養(yǎng)可用膜濾培養(yǎng)基。

41.分離酵母菌時為了克制細菌的生長,通常用—膜培養(yǎng)基。

42.從土壤中分離真菌時，通常在培養(yǎng)基中加入.孟加拉紅和一鏈霉素顯.克制細菌的生長。

43.測微生物的大小使用的重要工具是微鏡,鏡臺測微尺和_目鏡測微尺。

44.洌微生物的數量使用的重要工具是一顯微鏡和血球計數板

45.進行細菌的顯微計數時使用的重要工具是顯微鏡和細菌計數板一。

46.普通光學顯微鏡測酵母菌的大小的操作程序是將鏡臺測微尺置載物臺上，調焦找到臺尺,在低倍鏡下校正目避測微尺每格的

長，在高倍鏡F校正目鏡測微尺每格的長，去掉臺尺換上待測樣本片，在高倍鏡下測出十個酵母菌寬和長的格數，將校正值乘入,

算出十個酵母菌的平均寬和平均長，以平均寬x*平均長Y（um）表達酣母菌的大小。

47.顯微計數的操作程序是將待測菌進行適當的稀釋，將計數板宜產載物臺上，在低倍鏡下找到計數區(qū)，將菌液加到計數區(qū)上,

調焦看到菌體，按五點取樣法口數71個大方格的菌數，il算每小格的含菌數，計算山單位體積（如每川1）中的含菌數。

48.莢膜染色法的操作程序是涂片一，風干,加復紅染色3-5分鐘，水洗,晾干,加墨素涂抹,風干。

49.芽胞染色的操作程序是片，干燥,固定,孔雀綠加熱染色15分鐘，水洗,復紅染色2-3分鐘，水洗,晾干。

50.芽胞染色的關鍵操作是孔雀綠加熱染色。

51.放線菌印片染色的關鍵操作是一印片時不能移動_。

52.用負染色法染英膜的關鍵操作是一涂抹黑素要薄.

53.搖床振蕩培養(yǎng)通常用來培養(yǎng)一好氣微生物,亨格特的厭氧操作方法通常用來培養(yǎng)專性厭氧菌

54.革蘭氏染色反映與細菌細胞壁的_結曲—和一組成.有關。在革蘭氏染色過程中，當用95%酒精解決后，就放在顯微鏡下觀測，

革蘭氏陽性菌呈_紫_色,而革蘭氏陰性菌呈—無色。

55.血球計數板與細菌計數板的重要差別是前者計數區(qū)的深度是后者的五倍

56.制霉菌水浸片時加棉蘭染色液可使菌體呈淺蘭色。

57.Anabaenaazo對ica的異型胞通常是一間牛.在光學顯微鏡下它是一透明的，細胞兩端有極節(jié)一它能控制氧氣的進入，保持異型

胞內一低氧分壓，以利于固定分子氮一0

58.配制培養(yǎng)基時，應注意各種營養(yǎng)物質的配比，特別是C:N比（碳氮比）。一般而言，當亡危5:1時，有助于一菌體生長：當

C:Nz5:1時,有助于—積累代謝產物。

59.由于各種微生物對某種化合物如抗生素、染料的敏感性不同，可以運用這一特性來從土壤中分離出不同類群的微生物。如

在培養(yǎng)基中加入青霉素（鏈霉素），會殺死或克制細菌和放線菌的生長而分離出真菌在培養(yǎng)基中加入—結晶紫—，有助于分

離到革蘭氏陰性菌。

60.細菌在革蘭氏染色過程中，最后用落紅夏染的因素是G-細菌經結晶紫染色、碘液媒染、酒精脫色后菌體紫色脫去，故需用

蕃紅復染,這樣在光鏡下才干見到紅色的菌體。

61.高倍鏡卜能看到的物象在油鏡下看不到往往是由于一片皆?反和一菌體著色太淺引起。

62.微生物在培養(yǎng)基中生長時，由于其_新陳代謝而使培養(yǎng)基_pH值發(fā)生改變：所以在配制培養(yǎng)基時，為維持該條件的相對恒定，

常在培養(yǎng)基中加入緩沖物質如一碳酸鹽（CaCO）或磷酸鹽

63.一般而言,微生物在含糖基質上生長,會產一酸一，而使_pH下降」微生物分解蛋白質或雙基酸會產一減一,而使一pH上升.

64.在微生物培養(yǎng)過程中使用的培養(yǎng)皿一方面是被一Petri采用的，因此又稱培養(yǎng)皿為一產““二力s力。Hesse在其妻子的啟發(fā)下，

將固體培養(yǎng)基使用的凝固劑由明膠改為一瓊脂

65.顯微鏡的微動螺旋每轉?圈升降距離為0.1亳米

66.兩個典型的革蘭氏正反映細菌和革蘭氏負反映細菌經革蘭氏染色后都呈陰性反映往往是由于J酉精脫色時間過長和—菌體

培養(yǎng)時間太長引起。

67.檢查乳品和飲料是否具有大腸桿菌位?！ㄈ说饶c道細菌，可采用伊紅一美蘭—培養(yǎng)基，在這種培養(yǎng)基平板上大腸桿菌

（E.會形成具有一金屬—光澤的紫黑色小菌落。

68.細菌鞭毛經鍍銀法染色后呈褐色。

69.細菌鞭毛經李夫森法染色后呈一紅色。

70.由于升汞（HgCLj有腐蝕作用，所以不能用于金屬器皿消毒,特別是一鋁制品。

思考題

0L試述在普通光學顯微鏡下測定微生物細胞大小的基本:

測定微生物細胞的大小重要使用目鏡測微尺。其方法如卜.:

目先用長度已知的鏡臺測微尺校正目鏡測微尺。校正的方法是讓臺尺與目尺重疊，看臺尺的X格正好與目尺的Y格重疊,然后

用計算目尺每格的長.分別校正目鏡測微尺在低倍鏡,高倍鏡及油鏡下每格所代表的實際長度。

國將待測微牛.物制成水浸片或染色涂片置載物臺上，調焦找到微生物后用口鏡測微尺測量其寬幾格，長幾格，然后乘上相應放

大倍數下的校正值。

國一般測10個微生物,然后以平均值表達。

?若是酵母、細菌等單細胞微生物,通常測其寬和長,然后以平均寬x平均長表達,單位為um。

02.以測蘇云金桿菌工業(yè)菌粉中的活菌數為例,試述稀釋平板計數的基本方法。

同測數前先準備好測數用的1ml無菌吸管,9cm無菌平板,9ml試管無菌水和牛肉膏蛋白陳瓊脂培養(yǎng)基。

團稱取10克工業(yè)菌粉加入90ml無菌水中置搖床上或用手振蕩20-30分鐘，讓菌體分散。

團將上述振蕩過的菌液按無菌操作法進行卜倍稀釋直到10Ko

即取9cm無菌平板9套用記號筆在平板底編號，10”編3套，10；編3套，10“編3套。

國用1支1ml的無菌吸管，取1ml10,的稀釋菌液放入編號10’的平板中，如此將三個反復做完.同法取10-7稀釋菌液放入三個

編號為10；平板中.同法取10n稀釋菌液放入三個編號為10*平板中.（均要按無菌操作法做）。

國將牛肉仔蛋白豚瓊脂培養(yǎng)基熔化冷至45-50C后，在酒精燈火焰邊按無菌操作法倒入上述9套平板中，每個加入量大約15-

20ml,邊加邊搖動平板,使培養(yǎng)基與菌液充足混勻。

目待培養(yǎng)基凝固后,將平板倒過來,置28-30C下培養(yǎng)48小時后計數。

03.試述劃線分離的操作方法。

同取9ml尢菌'匕板一套在火焰旁按尢菌操作法倒人15-20ml營養(yǎng)瓊脂，讓其吟聯(lián)成￥板。

團左手拿上述平板,右手拿接種環(huán)在火焰上滅菌后沾取原始分離物在平板上平行劃線三條

國將接種環(huán)在火焰上滅菌,左手平板轉動大約70度,用滅菌接種環(huán)通過第一次劃線的地方作二次劃線,亦劃三條。

?同.上法再作第三次,第四次劃線。

回蓋上平板贏將平板倒過來置28-30C下培養(yǎng)2-4天后觀測結果.劃的好應在第四次劃線處出現(xiàn)單個菌落。

注：本答案也可畫圖說明。

04.試述檢查細菌的運動性的操作方法。

檢查細菌的運動性有兩種方法:

回儻檢法

將待檢樣品制成菌懸液，滴一點菌液于一蓋玻片上，取一凹窩載玻片，將凹窩對準菌懸液蓋在蓋玻片上，然后將蓋玻片和載

破片?起翻轉，讓菌懸液在凹窩上的蓋破片下.然后在顯微鏡下觀測，觀測應找懸液的邊沿.因細菌為了更多地接觸空氣，總向水

滴的邊沿運動，觀測時要注意將細菌的運動與分子的布朗運動區(qū)別開。

團半固體穿刺法

將待檢細菌穿刺接種在半固體試管培養(yǎng)基中，若細菌僅沿穿刺線生長，說明細菌不運動。若細菌沿穿刺線向周邊擴散生長，

說明細菌有運動性。

05.簡述配制培養(yǎng)基的基本原則:

培養(yǎng)基是人工配制的適合不同微生物生長繁殖,或用于枳累代謝產物的營養(yǎng)基質。所以配制培養(yǎng)基時應注意以卜原則：

目根據微生物的不同選用不同的培養(yǎng)基，以滿足微生物對營養(yǎng)物的需要。如自養(yǎng)型微生物所規(guī)定營養(yǎng)較簡樸，而異養(yǎng)型微生物

營養(yǎng)規(guī)定較復雜。培養(yǎng)細菌,放線菌,真菌等各有不同的培養(yǎng)基。

團注意各種營養(yǎng)物質的濃度叮配比。微生物生長所需要的營養(yǎng)物質往往在適當時才生長良好。濃度大往往會克制微生物的生

長。如糖類，各種重金屈鹽類假如濃度太高，也會影響微生物的生長。同時各種營養(yǎng)物質的濃度比也應注意，特別是C/N比。

國注意將培養(yǎng)基的pH值控制在一定范圍內。為了防止因微生物生長繁殖或積累代謝產物后影響培養(yǎng)基pH值，常在其中加入磷

酸鹽,碳酸鹽，以維持培養(yǎng)基pH值的相對恒定。

同同時還應考慮培養(yǎng)基的氧化還原電位及原材料的經濟、易購和來源廣泛的原則。

06.試述配制培養(yǎng)基的基本過程及應當注意的問題。

配制培養(yǎng)星的基本過程是:

同按培養(yǎng)基的配方稱取各種藥品，用量太少的藥品應配制成溶液后再取一定量:加入。

團將各種藥品加水溶解,通常是加所需水量的一半。

國若配固體培養(yǎng)基,按2%的用量稱取瓊脂,用水將瓊脂浸濕一下,用手擠去瓊脂中過多的水分,加入2的溶液中。

回加熱至瓊脂所有溶解，并補足所需的所有水量。

國用ImolNaOH和ImolHCL調節(jié)pH至規(guī)定值。

同用分裝器將培養(yǎng)基分裝入試管或三角瓶中，塞上棉塞并包扎,滅菌后備用。

注意事項;

回配制過程中，在加熱熔化瓊脂時,要不斷攪拌，以防糊底。

團分裝時不要讓培養(yǎng)基沾染試管口或瓶口，以防培養(yǎng)過程中容易污染雜菌。

07.試述顯微計數的基本方法。

顯微計數通常用來測微生物單細胞的數量，大一點的細胞如酵母菌用血球計?數板，小一點的細胞如細菌用細菌十數板。該

測數方法不能區(qū)別死活細胞，測I出的是微生物總的細胞數量。

血球計數板和細菌計數板構造相似，計數區(qū)的面積都是lmm2,兩者的差別在于血球計數板的深度為0.1mm,細菌計數板的

深度為0.02mm。無論是血球計數板還是細菌計數板計數區(qū)都劃為25個大方格，每個大方格乂劃為16個小格。所以每小格的體

積為"4000mm'或"20230mm：計數時,先在顯微鏡下找到計數區(qū),然后將南液稀釋到適當濃度，取少量菌液滴在計數區(qū)上蓋上

特制蓋玻片，亦可先蓋蓋玻片。然后用吸管將菌液從計數板上的溝里加入?？烤旱谋砻鎻埩Τ錆M計數區(qū)。計數時采用五點取

樣法數數，即四角各取一個大方格，再在中央取一個大方格。計數時大方格四周壓線的細胞只數兩邊，以防增長數量。將5個大

方格的函數加起來除以80得出每個小格的菌數，再乘以4000即為1mm'的窗數，再乘上1000即為1ml的菌數，乘上稀粒倍數即

為樣品含菌數。

08.標本片上的某一物象，第一次看到后如何再次找到它?

要做到這一點,一方面取決于顯微鏡的好壞,若顯微鏡上的推動器帶有縱橫標尺，很容易做到這一點。一方面記住標木片放

到推動器上的方向，然后記下觀測某一物體時推動器上的縱橫標尺的數字。如縱3,橫4。當標本片拿下來后，若要反復觀測本

來的物象，只要按原方向將標本片莢在推動器上,將推動器推動到第一次觀測該物體的縱,橫標尺數字縱3,橫4,即可看到第一

次觀測過的物體。

09.試述在光學顯微鏡下所看到的Anabaenaazo對ica的重要特性。

Anabaen