河北省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布商品肉雞傳染性法氏囊病防治技術(shù)規(guī)程本標準附錄A、附錄B為規(guī)范性附錄。本標準由河北省畜牧局提出。本標準起草單位：河北科技師范學(xué)院。本標準主要起草人：李佩國、張建文、李蘊玉、楊宗澤、張艷英、張香齋、史秋梅、曹旺斌。1本標準適用于肉雞飼養(yǎng)場和動物診療單位對肉雞傳染性法氏囊病的防治。的修改單(不包括勘誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。NY5035無公害食品肉雞飼養(yǎng)獸藥使用準則NY/T5038無公害食品肉雞飼養(yǎng)管理準則中華人民共和國動物防疫法(第八屆全國人大常委會1997年7月3日頒布)高，出現(xiàn)免疫抑制現(xiàn)象，是目前危害商品肉雞業(yè)的一種重要疫病之一。4.1流行特點主要發(fā)生于2周齡以上的雛雞，以3周齡～6周齡時最易感。衛(wèi)生條件、應(yīng)激因素、防治措施等方面的因素直接相關(guān)。一般易感雞群發(fā)病率可達80%～100%,病死率一般為20%～30%。4.1.3傳染途徑4.2臨診癥狀a)該病潛伏期為2d～3d,易感雞群感染后發(fā)病突然，病程7d～8d,典型發(fā)病雞群的死亡曲線2泌物或黃色干酪樣物，水腫、出血嚴重者常呈紫從死亡或撲殺臨床癥狀出現(xiàn)后1d～3d(最好未經(jīng)藥物治療)的肉仔雞，采取法氏囊、脾臟作病料。若病料送到實驗室需要6h以上時，應(yīng)將其置冰瓶中運送，采集或收到的病料來不及處理時將病料剪碎后置于盛有滅菌砂粒的乳缽中研磨，用生理鹽水或0.5%濃度的水解乳蛋白液配成混懸液，3000r/min離心沉淀30min,取上清液用20%氯仿處理，加入青、鏈霉素各1000IU/ml,置4取經(jīng)處理且無菌檢驗合格的樣品，以0.2ml每胚的量絨毛尿囊膜(CAM)途徑接種9日齡~11日齡無特定病原(SPF)雞胚，每個樣品接種4個~5個雞胚，于37℃環(huán)境中孵育，每日照蛋?；?qū)悠芬钥诜?、滴眼方式接種于24日齡~35日齡肉仔雞。a)感染雞胚常于接種后3d~5d死亡，7d以后死亡者極少，主要出現(xiàn)以下肉眼病變：3)肝有斑駁狀壞死和出血(晚期);3b)肉仔雞接種后主要出現(xiàn)以下肉眼病變：1)法氏囊感出現(xiàn)水腫和出血，體積和重量增大約兩倍，第3d-4d體積開始縮小，第5d恢復(fù)到原來的重量，以后迅速萎縮，至第8d時僅為原來重量的1/3左右，感染后第2d~3d法氏囊的漿膜上蓋有淡黃色膠樣滲出物，表面上的縱行條紋變得明顯，法氏囊由白色變?yōu)槟逃忘S色，在萎縮過程中變成深灰色。感染的法氏2)脾輕度增大，表面上有均勻散布的小壞死灶；取經(jīng)4.4.2.1方法收獲的樣品，差速離心處理后，以磷鎢酸或醋酸鈾負染，進行電鏡觀察。若在淋巴細胞和異嗜性白細胞的胞漿中靠近細胞核處見有卵圓形的包涵體，在包涵體中有許多直徑為20nm～62nm,呈晶格狀排列，近似六角形，二十面體對稱結(jié)構(gòu)等典型法氏囊病病毒特按附錄A規(guī)定的病毒瓊脂擴散試驗方法和附錄B規(guī)定的免疫熒光抗體試驗方法進行測定。取經(jīng)4.4.2.1收獲的樣品感染仔雞，當出現(xiàn)4.2和4.3所述臨診癥狀、病理剖檢及組織學(xué)病變則可作出診斷。5.1.1每批雞出欄后應(yīng)對雞舍、籠具及用具進行清洗、消毒，消毒劑的選擇應(yīng)符合《中華人民共和國獸藥典》及相關(guān)法規(guī)的規(guī)定。5.1.2清理完畢到下次進雞前應(yīng)空舍至少2周。5.1.3應(yīng)實行全進全出制飼養(yǎng)，同一養(yǎng)殖場不能飼養(yǎng)其他禽類。5.1.4最好采用網(wǎng)上平養(yǎng)，對地面散養(yǎng)雞舍要及時清除潮濕的墊料和糞便，并在固定地點高溫堆肥5.1.5育雛舍的溫度要恒定，飼養(yǎng)密度要合理，保持舍內(nèi)通風(fēng)良好。4當瓊脂擴散試驗陽性率在50%以下時，首次免疫時間應(yīng)在7日齡～14日齡進行，間隔1周～2周后進行第2次免疫；當瓊脂擴散試驗抗體陽性率在50%以上時，首免時間在21日齡進行，間隔1周~2周后，進行第2次免疫。疫苗可采用中等毒力株活疫苗。劑和金屬離子，在飲水中加入2%的脫脂奶粉，停水時間要合適(春夏季4h,秋冬季6h內(nèi)，最多不超過1h飲完。生產(chǎn)日期，治療時間、劑量、療程、療效及停藥時間。記錄應(yīng)在清群后保存2年以上。按十字形挖兩條溝，溝長2.6m,寬0.6m,深0.5m。在兩溝交叉處坑底堆5附錄A(規(guī)范性附錄)A.1試劑a)瓊脂、氯化鈉、苯酚、碳酸氫鈉(分析純);b)法氏囊標準陽性抗原、法氏囊標準陽性血清、法氏囊標準陰性血清、蒸餾水(雙蒸)。A.2待檢抗原取4.4.1采集的病料，按4.4.2.1方法處理過的上清液即為待檢抗原。d)分析天平(感量0.001g)。A.4步驟A.4.1瓊脂板制備稱取瓊脂1g,氯化鈉8g,量取苯酚0.1ml,蒸餾水100ml加入250ml錐形瓶中，水浴溶化后用板，冷卻后置4℃冰箱內(nèi)保存。A.4.2打孔用針頭挑出。A.3.3抗原及血清的添加點樣前在裝有瓊脂的平皿上貼上膠布或用瓊脂墨水寫上日期及編號，中央孔7加入標準陽性血清0.02ml,1、4孔加入標準陽性抗原，2、3、5、6孔各中液體吸干后將平皿倒置。在37℃條件下培育72小時判定結(jié)果。A.5.1陽性成沉淀線，或者陽性抗原的沉淀線末端向毗鄰的待檢抗原孔