專題10生物技術與工程第3講植物細胞工程課程標準要求核心素養(yǎng)解讀1.闡明植物組織培養(yǎng)是在一定條件下，將離體植物器官、組織和細胞在適宜的培養(yǎng)條件下誘導形成愈傷組織，并重新分化，最終形成完整植株的過程2.概述植物體細胞雜交是將不同植物體細胞在一定條件下融合成雜合細胞，繼而培育成新植物體的技術科學思維通過建立植物組織培養(yǎng)、植物體細胞雜交流程圖，理解植物體細胞雜交的原理科學探究探究植物細胞工程的應用課程標準要求核心素養(yǎng)解讀3.舉例說明植物細胞工程利用快速繁殖、脫毒、次生代謝產物生產、育種等方式有效提高了生產效率社會責任正確看待植物細胞工程在生產生活中的應用續(xù)表基礎知識自查1.細胞工程(1)概念(2)分類：植物細胞工程和動物細胞工程。夯實必備知識原理、方法細胞生物學、分子生物學和_____________等操作水平_______、細胞或組織水平目的獲得特定的細胞、_______、________、個體或其產品發(fā)育生物學細胞器組織器官2.植物組織培養(yǎng)(1)原理——細胞的全能性離體的植物器官、組織或者細胞完整植株完整生物體(2)流程簡圖①脫分化：在一定的激素和營養(yǎng)等條件的誘導下，__________的細胞，失去其特有的結構和功能，轉變成_______的細胞的過程。②再分化：__________重新分化形成芽、根等器官的過程。已經分化未分化愈傷組織(3)實例——菊花的組織培養(yǎng)①原理：植物細胞的全能性。②方法步驟流水酒精無菌水次氯酸鈉0.5~1cm1/3~1/2愈傷組織封口膜18~22℃生芽生根封口膜培養(yǎng)基消過毒生長3.植物體細胞雜交技術(1)概念：將_______來源的植物體細胞，在一定條件下融合成____________，并把雜種細胞培育成____________的技術。(2)操作流程不同雜種細胞新植物體①去壁：對應圖中______過程，即去除________，獲得具有活力的原生質體，用到的酶是________________________。②誘導融合：對應圖中______過程，即原生質體的融合。③培養(yǎng)：過程d是________________，其原理是______________________。(3)意義：在打破___________，實現______雜交育種，培育植物新品種等方面展示出獨特的優(yōu)勢。a細胞壁纖維素酶和果膠酶b細胞膜具有流動性電融合法離心法聚乙二醇（PEG）融合法高Ca2+-高pH融合法再生出細胞壁植物組織培養(yǎng)植物細胞的全能性生殖隔離遠緣4.植物細胞工程的實際應用(1)植物繁殖的新途徑(2)作物新品種的培育：單倍體育種、________的利用。突變體(3)細胞產物的工廠化生產①次生代謝物：是一類________有機化合物，在植物抗病、抗蟲等方面發(fā)揮作用，也是很多藥物、香料和色素等的重要來源。②細胞產物的工廠化生產：人們利用________________來獲得目標產物，這個過程就是細胞產物的工廠化生產。③原理——植物細胞培養(yǎng)：是指在________條件下對單個植物細胞或細胞團進行培養(yǎng)使其________的技術。④過程小分子植物細胞培養(yǎng)離體增殖【易錯易混自糾】(1)培養(yǎng)基添加生長素和細胞分裂素后，愈傷組織一定能發(fā)育成完整的植株。()提示：培養(yǎng)基添加生長素和細胞分裂素后，要有合適的生長素和細胞分裂素的比例，還要有光照條件才能發(fā)育成完整的植株。(2)植物的每個細胞在植物體內和體外都能表現出全能性。()提示：在植物體體內，在特定的時間和空間條件下，細胞中的基因會選擇性表達，所以并不是所有的細胞都能表現出全能性?！痢?3)在愈傷組織培養(yǎng)中加入細胞融合的誘導劑，可獲得染色體加倍的細胞。()提示：在植物細胞融合之前必須用纖維素酶和果膠酶去掉細胞壁。(4)同一株綠色開花植物不同部位的細胞經組織培養(yǎng)獲得的植株基因都是相同的。()提示：不一定。如果取的都是體細胞，那么基因都是相同的；如果取的是花粉，就會形成單倍體，基因可能不同。(5)單倍體育種和突變體培育的遺傳學原理是一致的。()提示：單倍體育種的原理是染色體變異，突變體培育的原理主要是基因突變。×××基礎知識自查跟教材學長句1.(選擇性必修3P35)從繁殖方式上看，植物組織培養(yǎng)屬于哪種繁殖方式？為什么？____________________________________________________________________________________________________________。2.（選擇性必修3P35）植物組織培養(yǎng)離體的細胞能表達全能性的原因是_________________________________，若不離體這些細胞在母體上發(fā)生_________________而分化。

無性繁殖。植物組織培養(yǎng)是在細胞有絲分裂和細胞分化的基礎上實現的，此過程并沒有生殖細胞的產生，所以是無性繁殖

離體細胞含有本物種全部的遺傳信息

基因選擇性表達3.(選擇性必修3P40正文拓展)脫毒苗與抗毒苗有何區(qū)別？作物脫毒時應選取哪里的組織進行組織培養(yǎng)？原因是什么？_________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。①脫毒苗是選擇植物的分生區(qū)如莖尖(剛形成，不含有病毒)進行組織培養(yǎng)而獲得的，屬于細胞工程的范疇。一般選取根尖或莖尖的分生區(qū)；植物的分生區(qū)病毒極少，甚至無病毒，用分生區(qū)細胞進行組織培養(yǎng)，就能得到大量的脫毒苗。②抗毒苗是把某抗病毒基因導入受體細胞中，并通過一定的方法培養(yǎng)形成的，屬于基因工程的范疇教材拾遺1.(選擇性必修3P35探究·實踐)在菊花組織培養(yǎng)過程中，誘導外植體脫分化形成愈傷組織的培養(yǎng)基所需的碳源為什么一般用蔗糖，而不用葡萄糖？_____________________________________________________________________________________________________________________。2.(選擇性必修3P41相關信息)初生代謝是_________________________________，因此在整個生命過程中它一直進行著。初生代謝物有_____、______、_______和核酸等。次生代謝不是生物生長所必需的，一般在_____________________中，并在____________________條件下才進行。蔗糖既可提供充足的碳源，又可維持相對適中的滲透壓，而葡萄糖在與蔗糖提供相同數量碳源的前提下，其造成的滲透壓可能過高

生物生長和生存所必需的代謝活動糖類脂質蛋白質

特定的組織或者器官一定的環(huán)境和時間考點

植物細胞工程考點植物細胞工程素養(yǎng)全面提升1.植物組織培養(yǎng)的關鍵(1)條件：離體，一定營養(yǎng)物質，激素(生長素、細胞分裂素)等。(2)培養(yǎng)基狀態(tài)：固體培養(yǎng)基(有誘導愈傷組織的培養(yǎng)基、有誘導生根的培養(yǎng)基及誘導生芽的培養(yǎng)基)。(3)體內細胞未表現全能性的原因：基因的表達具有選擇性。(4)光照的應用：脫分化階段一般不需要給予光照；再分化階段需要給予光照，以利于葉綠素的形成。2.植物激素對植物組織培養(yǎng)的影響(1)按照不同的順序使用激素，會得到不同的實驗結果使用順序實驗結果先使用生長素，后使用細胞分裂素有利于細胞分裂，但細胞不分化先使用細胞分裂素，后使用生長素細胞既分裂也分化同時使用分化頻率提高(2)當同時使用這兩類激素時，兩者用量的比例影響植物細胞的發(fā)育方向生長素/細胞分裂素植物細胞的發(fā)育方向高有利于根的分化、抑制芽的形成低有利于芽的分化、抑制根的形成適中促進愈傷組織的形成3.植物體細胞雜交和有性雜交的辨析4.植物組織培養(yǎng)與植物體細胞雜交的區(qū)別與聯系名稱植物組織培養(yǎng)植物體細胞雜交原理細胞的全能性細胞膜具有一定的流動性和細胞的全能性過程續(xù)表名稱植物組織培養(yǎng)植物體細胞雜交選材選取根尖、莖尖、形成層部位最容易誘導脫分化不同種的植物體細胞融合后形成雜種細胞技術操作脫分化、再分化等除脫分化、再分化外，還要用酶解法去除細胞壁，用一定的方法誘導原生質體融合關系植物組織培養(yǎng)是植物體細胞雜交的基礎，植物體細胞雜交所用的技術更復雜1.(2024·北京一模)某科學小組探索長壽花組織培養(yǎng)過程中外植體的消毒條件，實驗結果如下表。下列分析不正確的是()熱點考向點撥考向1結合植物組織培養(yǎng)，考查科學思維2%次氯酸鈉處理時間/min8101275%酒精處理時間/min203040203040203040污染率/%25.621.113.322.216.712.22017.88.9褐化率/%008.905.614.47.816.716.7注：褐化是指培養(yǎng)材料在組培過程中向培養(yǎng)基中釋放褐色物質，并變褐死亡的現象。A.消毒處理時間越長，組織培養(yǎng)成功率越高B.消毒處理時間越長，外植體的污染率越低C.誘導培養(yǎng)外植體脫分化為愈傷組織的過程中一般不需要光照D.組織培養(yǎng)過程中提高生長素與細胞分裂素的比例有助于生根答案：A考向2結合植物體細胞雜交過程，考查科學思維和科學探究2.(2024·海南期末)從紫草(2N＝14)中提取的紫草寧能抗葡萄球菌、枯草桿菌及某些真菌，并能抑制流感病毒，可用于治療皮炎、牛皮癬等。青蒿素是從黃花蒿(2N＝18)莖葉中提取的一種代謝產物，主要用于間日瘧、惡性瘧的癥狀控制。某科研小組為培育能生產紫草寧的黃花蒿，進行了不對稱體細胞雜交，如圖為培育過程。根據所學知識回答下列問題：(1)過程①的處理為______________。過程②可采用的方法是____________(答出1點)。能產生紫草寧的黃花蒿植株的遺傳信息來源是_______________。(2)圖中雜種細胞形成的標志是________________。過程③④所用培養(yǎng)基中需要添加的植物激素為___________________。圖中②③④過程所利用的原理是__________________________________。在圖中愈傷組織中提取不到青蒿素，需將其培養(yǎng)成黃花蒿植株后從葉片中提取，根本原因可能是____________________。(3)與從紫草植株幼苗中提取紫草寧相比，利用植物細胞培養(yǎng)生產紫草寧的優(yōu)點有___________________________________________(答出2點)。去除細胞壁PEG融合法黃花蒿和紫草細胞壁的再生生長素和細胞分裂素細胞膜的流動性、植物細胞的全能性

基因的選擇性表達不占用耕地，幾乎不受季節(jié)、天氣等的限制3.(2024·湖南一模)(不定項)為獲得利福平和鏈霉素雙抗的黃色短桿菌菌株，科研人員用現有的甲、乙兩種菌株進行細菌細胞融合(基本過程與植物體細胞雜交一致)。菌株甲抗利福平(Rifr)但對鏈霉素敏感(StrS)，菌株乙抗鏈霉素(Strr)但對利福平敏感(RifS)。下列敘述正確的是()A.過程①中需要用纖維素酶和果膠酶處理細菌甲和細菌乙B.為避免原生質體失水而影響融合，應將制備好的原生質體置于低滲環(huán)境中C.融合子有3種，可用含利福平和鏈霉素的固體培養(yǎng)基進行篩選D.過程②體現了細胞膜的流動性，PEG同樣也可以誘導動物細胞融合答案：CD【解析】CD細菌細胞融合與植物體細胞雜交的基本過程一致，首先都是要去除細胞壁，細菌細胞壁的主要成分是肽聚糖，不能使用纖維素酶和果膠酶來處理，A錯誤；失去細胞壁保護的原生質體更容易受到外界環(huán)境的影響，在低滲環(huán)境中很容易吸水漲破，因此制備好的原生質體應該置于等滲環(huán)境中，B錯誤；形成的兩兩融合的融合子共有3種，分別是菌株甲互融、菌株乙互融、菌株甲與菌株乙互融，其中只有菌株甲與菌株乙互融形成的融合子才是所需要的雙抗菌株，可用含有利福平和鏈霉素的固體培養(yǎng)基進行篩選，C正確；過程②是原生質體甲、乙相互融合的過程，該過程體現了細胞膜的流動性，PEG是常用的細胞融合誘導劑，除此之外還可以誘導動物細胞融合以及植物細胞的融合，D正確?？枷?圍繞植物細胞工程的應用，考查理論與實踐相結合4.(2024·山東一模)紫草寧是從紫草細胞中提取的一種藥物和色素，具有抗菌、消炎和抗腫瘤等活性。利用植物細胞培養(yǎng)生產紫草寧的基本過程如下圖所示。下列敘述正確的是()A.為提高愈傷組織的誘導速率，誘導時應給予適當時間和強度的光照B.懸浮振蕩培養(yǎng)前，需用胰蛋白酶從愈傷組織中分離出具活性的單個細胞C.植物細胞培養(yǎng)時易發(fā)生突變，需篩選出高產突變體才能用來制備生物反應器D.紫草寧是紫草細胞的初生代謝物，是紫草細胞基本生命活動所必需的產物答案：C【解析】C光照不利于愈傷組織形成，因此形成愈傷組織的過程中不需要光照，A錯誤。在動物細胞培養(yǎng)過程中，需用胰蛋白酶將組織分散成單個細胞，制成細胞懸液，防止接觸抑制，在植物細胞培養(yǎng)時不用胰蛋白酶，B錯誤。組織培養(yǎng)過程中，愈傷組織易受到培養(yǎng)條件和外界環(huán)境的影響而發(fā)生突變，進而發(fā)育成為新品種，所以可通過從中篩選獲得高產的突變體制備生物反應器，C正確。紫草寧是從紫草細胞中提取的一種藥物和色素，具有抗菌、消炎和抗腫瘤等活性。紫草寧屬于次生代謝產物，D錯誤。5.(2024·天津一模)植物細胞工程在農業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)等方面有著廣泛的應用。下圖列舉了幾項成果。下列敘述錯誤的是()A.三種成果的獲得過程中，都發(fā)生了基因的選擇性表達B.①過程獲得脫毒苗是因為該過程發(fā)生了基因突變產生了抗病毒基因C.②過程可以提高隱性性狀的出現概率D.③主要利用了細胞增殖的原理答案：B【解析】B愈傷組織之后發(fā)生了再分化，細胞分化的實質是基因的選擇性表達，A正確；切取一定大小的莖尖進行組織培養(yǎng)，再生的植株就有可能不帶病毒，從而獲得脫毒苗，B錯誤；若單倍體植株只含有一個染色體組，染色體加倍后隱性性狀容易出現，C正確；植物細胞培養(yǎng)：指在離體條件下對單個植物細胞或細胞團進行培養(yǎng)使其增殖的技術，原理為細胞增殖，D正確。6.(2024·黑龍江模擬)水果紅提中富含槲皮素，槲皮素具有抗氧化、抗癌等多種生物活性。科研人員利用二倍體紅提和植物F，采用多種途徑嘗試培育不同品種，培育途徑如圖所示，其中①～⑤表示過程。請回答下列問題：(1)圖中過程________(填序號)均采用了植物組織培養(yǎng)技術，細胞主要經過了________和________過程，最終發(fā)育為完整植株。(2)在過程③中，對愈傷組織進行細胞培養(yǎng)，可實現槲皮素的工廠化生產，這是因為愈傷組織具有______________________的特點。(3)途徑丁采用____________________技術培育紅提—F雜種植物，其中過程④需要先用________________________處理獲得原生質體，再用一定方法誘導，多次篩選后，得到雜種細胞。誘導細胞融合的常用化學方法有___________________________________________(至少答出1種)。(4)圖中植物A～F中，屬于四倍體植物的有__________________。①③⑤脫分化再分化未分化，分裂能力強植物體細胞雜交纖維素酶和果膠酶聚乙二醇(PEG)融合法或高Ca2+—高pH融合法植株E、植株G【解析】(1)圖中①為花藥離體培養(yǎng)，②為人工誘導染色體加倍，③為植物組織培養(yǎng)，④為植物體細胞融合，⑤是植物組織培養(yǎng)，因此圖中過程①③⑤均采用了植物組織培養(yǎng)技術，細胞主要經過了脫分化和再分化過程，最終發(fā)育為完整植株。(2)槲皮素的工廠化生產是因為愈傷組織是未分化的細胞，分裂能力強，常采用植物細胞培養(yǎng)技術，進行擴大培養(yǎng)后再提取。(3)途徑丁采用植物體細胞雜交技術培育紅提—F雜種植物，其中過程④需要先用纖維素酶和果膠酶處理形成原生質體，再用一定方法誘導，多次篩選后，才能獲得融合的雜種細胞。誘導植物細胞融合的常用化學方法有聚乙二醇(PEG)融合法或高Ca2+—高pH融合法等。(4)植株A是有性生殖產生的二倍體，植株B是單倍體，植株C是單倍體育種獲得的純合二倍體，植株D是植物組織培養(yǎng)技術獲得的二倍體，植株E是多倍體育種獲得的四倍體，植株G是植物體細胞雜交技術獲得的四倍體，因此屬于四倍體植物的有植株E、植株G。1.（2024·甘肅卷）蘭州百合栽培過程中易受病毒侵染，造成品質退化。某研究小組嘗試通過組織培養(yǎng)技術獲得脫毒苗，操作流程如下圖。下列敘述正確的是()A.①為脫分化過程，1號培養(yǎng)基中的愈傷組織是排列規(guī)則的薄壁組織團塊B.②為再分化過程，愈傷組織細胞分化時可能會發(fā)生基因突變或基因重組C.3號培養(yǎng)基用于誘導生根，其細胞分裂素濃度與生長素濃度的比值大于1D.百合分生區(qū)附近的病毒極少，甚至無病毒，可以作為該研究中的外植體真題引領知新高考真題體驗D【解析】D在脫分化過程中，1號培養(yǎng)基中的愈傷組織是排列不規(guī)則的薄壁組織團塊，A錯誤；愈傷組織細胞分化時可能會發(fā)生基因突變，但基因重組發(fā)生在減數分裂過程中，B錯誤；3號培養(yǎng)基用于誘導生根，其細胞分裂素濃度與生長素濃度的比值應該小于1，C錯誤；百合分生區(qū)附近的病毒極少，甚至無病毒，因此可以作為該研究中的外植體，D正確。2.(2024·吉林卷)迷迭香酸具有多種藥理活性。進行工廠化生產時，先誘導外植體形成愈傷組織，再進行細胞懸浮培養(yǎng)獲得迷迭香酸，加入誘導劑茉莉酸甲酯可大幅提高產量。下列敘述錯誤的是()A.迷迭香頂端幼嫩的莖段適合用作外植體B.誘導愈傷組織時需加入NAA和脫落酸C.懸浮培養(yǎng)時需將愈傷組織打散成單個細胞或較小的細胞團D.茉莉酸甲酯改變了迷迭香次生代謝產物的合成速率B【解析】B迷迭香頂端幼嫩的莖段生長旺盛，分裂能力較強，適合用作外植體，A正確；誘導愈傷組織時需加入NAA和細胞分裂素，B錯誤；懸浮培養(yǎng)時需將愈傷組織打散成單個細胞或較小的細胞團，獲得更多的營養(yǎng)物質和氧氣，使得其可以進一步分裂，C正確；加入誘導劑茉莉酸甲酯可大幅提高產量，推測茉莉酸甲酯改變了迷迭香次生代謝產物(不是植物生長所必需的)的合成速率，D正確。3.（2024·安徽卷）植物細胞懸浮培養(yǎng)技術在生產中已得到應用。某興趣小組嘗試利用該技術培養(yǎng)胡蘿卜細胞并獲取番茄紅素，設計了以下實驗流程和培養(yǎng)裝置(如圖)，請同學們進行評議。下列評議不合理的是()A.實驗流程中應該用果膠酶等處理愈傷組織，制備懸浮細胞B.裝置中的充氣管應置于液面上方，該管可同時作為排氣管C.裝置充氣口需要增設無菌濾器，用于防止雜菌污染培養(yǎng)液D.細胞培養(yǎng)需要適宜的溫度，裝置需增設溫度監(jiān)測和控制設備答案：B【解析】B裝置中的充氣管應置于液面下方，以利于培養(yǎng)液中的溶氧量的增加，該管不能同時作為排氣管，B錯誤。4.（2024·山東卷)(不定項）下列關于植物愈傷組織的說法，正確的是()A.用果膠酶和膠原蛋白酶去除愈傷組織的細胞壁獲得原生質體B.融合的原生質體需再生出細胞壁后才能形成愈傷組織C.體細胞雜交獲得的雜種植株細胞中具有來自親本的2個細胞核D.通過愈傷組織再生出多個完整植株的過程屬于無性繁殖BD5.(2024·湖北卷)植物甲抗旱、抗病性強，植物乙分蘗能力強、結實性好。科研人員通過植物體細胞雜交技術培育出兼有甲、乙優(yōu)良性狀的植物丙，過程如下圖所示。下列敘述錯誤的是()A.過程①中酶處理的時間差異，原因可能是兩種親本的細胞壁結構有差異B.過程②中常采用滅活的仙臺病毒或PEG誘導原生質體融合C.過程④和⑤的培養(yǎng)基中均需要添加生長素和細胞分裂素D.可通過分析植物丙的染色體，來鑒定其是否為雜種植株答案：B【解析】B酶解是為了去除植物細胞的細胞壁，過程①中酶處理的時間不同，說明兩種親本的細胞壁結構有差異，A正確；過程②為原生質體的融合，常用PEG誘導原生質體融合，滅活的仙臺病毒可誘導動物細胞融合，不能用于植物，B錯誤；過程④脫分化和⑤再分化的培養(yǎng)基中均需要添加生長素和細胞分裂素，但在兩個過程中比例不同，C正確；植物丙是植物甲和植物乙體細胞雜交形成的個體，應具備兩者的遺傳物質，因此可通過分析植物丙的染色體，來鑒定其是否為雜種植株，D正確。6.(2024·浙江6月選考改編)植物體在干旱、蟲害或微生物侵害等脅迫過程中會產生防御物質，這類物質屬于次生代謝產物。次生代謝產物在植物抗蟲、抗病等方面發(fā)揮作用，也是藥物、香料和色素等的重要來源。次生代謝產物X的研發(fā)流程如下：篩選高產細胞→細胞生長和產物X合成關系的確定→發(fā)酵生產X回答下列問題：(1)獲得高產細胞時，以X含量高的植物品種的器官和組織作為________，經脫分化形成愈傷組織，然后通過液體振蕩和用一定孔徑的篩網進行_____獲得分散的單細胞。外植體過濾(2)對分離獲得的單細胞進行________培養(yǎng)，并通過添加過量的胸苷或營養(yǎng)缺陷培養(yǎng)方法獲取細胞周期同步、遺傳和代謝穩(wěn)定、來源單一的細胞群。為進一步提高目標細胞的X含量，將微生物菌體或其產物作為誘導子加入培養(yǎng)基中，該過程模擬了____________的脅迫。擴大微生物侵害(3)在大規(guī)模培養(yǎng)高產細胞前，需了解植物細胞生長和產物合成的關系。培養(yǎng)細胞生產次生代謝產物的模型分為3種，如圖所示。若X只在細胞生長停止后才能合成，則X的合成符合圖______(填“甲”“乙”或“丙”)，根據該圖所示的關系，從培養(yǎng)階段及其目標角度，提出獲得大量X的方法：________________________________________________________________________。丙

將細胞培養(yǎng)至穩(wěn)定期(即停止生長時期)一定時間后，通過分離提純獲得大量X(4)多種次生代謝產物在根部合成與積累，如人參、三葉青等藥用植物，可通過______的水培養(yǎng)替代細胞懸浮培養(yǎng)生產次生代謝產物。隨著基因組測序和功能基因組學的發(fā)展，在全面了解生物體合成某次生代謝產物的______________和______________的基礎上，可利用合成生物學的方法改造酵母菌等微生物，利用________________工程生產植物的次生代謝產物。根

相關基因組成基因表達過程基因工程和發(fā)酵真題引領知新新情境新命題(2024·山東期末)多肉植物因其觀賞性和耐旱易栽培的特點受到越來越多人的喜愛。研究人員以葉插繁殖能力強的多肉植物長壽花為實驗材料，通過使用改良的“切—浸—芽”(CDB)方法實現了多肉植物的遺傳轉化和基因編輯，為多肉植物的遺傳改良開辟了新途徑。圖甲、圖乙分別表示利用常規(guī)轉化法和CDB法對長壽花進行基因改造的一般流程?；卮鹣铝袉栴}：(1)無菌操作是圖甲操作成功的關鍵，誘導愈傷組織的固體培養(yǎng)基分裝后應采用_________________________法滅菌。當①過程的培養(yǎng)基中細胞分裂素和生長素的比例大于1時，有利于誘導______(填“生根”或“生芽”)；該過程還需要提供光照，目的是________________________________________。高壓蒸汽滅菌(濕熱滅菌)生芽

誘導形成葉綠素，使試管苗能夠進行光合作用(2)方法檢測對象檢測目標檢出比例PCR擴增基因組DNAbar基因a1分子雜交①bar基因轉錄產物a2②總蛋白質bar基因翻譯產物a3③幼苗抗除草劑幼苗a4

為測試圖乙CDB方法能否對長壽花實現遺傳轉化，研究人員用攜帶綠色熒光蛋白基因(EGFP)和除草劑抗性基因(bar)的農桿菌K599侵染外植體B，再將被侵染的外植體放入充滿濕潤土壤的培養(yǎng)箱中培