2024~2025學(xué)年度第二學(xué)期期末四校聯(lián)考高二生物學(xué)一、單選題（本題共20小題，每題2分，共40分）1.肺炎是由病原微生物、理化因素、免疫損傷、過敏及藥物等因素引起的炎癥，可分為細(xì)菌性肺炎、非典型病原體肺炎（如支原體肺炎等）、病毒性肺炎。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．細(xì)菌、支原體和病毒都含有糖類且都不含有細(xì)胞核B．細(xì)菌、支原體和病毒都屬于原核生物C．細(xì)菌、支原體和病毒都可用普通培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)D．抑制細(xì)胞壁合成的藥物對非典型病原體肺炎有效，對病毒性肺炎無效2.下圖是生物體細(xì)胞內(nèi)部分有機(jī)化合物的概念圖。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A．不同氨基酸的R基一定不同，人體細(xì)胞可合成非必需氨基酸B．宿主細(xì)胞的RNA——蛋白質(zhì)復(fù)合物中的蛋白質(zhì)可能來自病毒C．煙草花葉病毒的遺傳信息儲存在c中，其基本單位是核糖核苷酸D．圖中DNA是多聚體，則構(gòu)成其脫氧核糖的組成元素為C、H、O、N、P3.研究者發(fā)現(xiàn)一種肉眼可見的細(xì)長型異類細(xì)菌，其菌體長度是一般細(xì)菌的5000倍，基因數(shù)量是常規(guī)細(xì)菌的3倍，基因組與核糖體包裹在同一囊泡中，另一個囊泡充滿了水等物質(zhì)，占總體積的73%。下列敘述錯誤的是（）A．囊泡中的水以結(jié)合水為主，是良好的溶劑B．基因組與核糖體的包裹利于基因高效表達(dá)C．菌體細(xì)長利于該細(xì)菌與外界進(jìn)行物質(zhì)交換D．包裹基因組囊泡的發(fā)現(xiàn)為細(xì)胞的演化歷程提供證據(jù)4.下列關(guān)于真核細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能的敘述，正確的是（）A．線粒體能夠通過細(xì)胞骨架移動，其數(shù)目可隨細(xì)胞代謝需求變化B．細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)、線粒體基質(zhì)和葉綠體基質(zhì)中均含有DNA和RNA，種類不完全相同C．胰島B細(xì)胞中粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)比口腔上皮細(xì)胞更發(fā)達(dá)，而高爾基體數(shù)量相對較少D．溶酶體內(nèi)的水解酶由高爾基體合成后，經(jīng)囊泡運(yùn)輸至溶酶體儲存5.脂筏模型被認(rèn)為是對細(xì)胞膜流動鑲嵌模型的重要補(bǔ)充：脂筏是質(zhì)膜上富含膽固醇和鞘磷脂的微結(jié)構(gòu)域，其中的膽固醇就像膠水一樣，對鞘磷脂親和力很高，并特異吸收或排出某些蛋白質(zhì)（如某些跨膜蛋白質(zhì)、酶等），形成一些特異蛋白聚集的區(qū)域。推測下列敘述正確的是（）A．圖中脂筏跨膜蛋白可能代表運(yùn)輸物質(zhì)的蛋白質(zhì)，其跨膜區(qū)段的氨基酸具有較強(qiáng)的親水性B．“脂筏模型”比“流動鑲嵌模型”更能代表生物膜的特性C．脂筏模型表明脂質(zhì)和蛋白質(zhì)在膜上的分布是不均勻的D．脂筏區(qū)域在動植物細(xì)胞中都有廣泛分布6.泡菜、腐乳、米酒和米醋等傳統(tǒng)發(fā)酵食品的制作均依賴特定微生物的作用，下列敘述正確的是（）A．泡菜壇需完全裝滿并密封，以防止乳酸菌代謝產(chǎn)生的氣體導(dǎo)致發(fā)酵液溢出B．腐乳制作過程中，毛霉分泌的蛋白酶可將豆腐中的蛋白質(zhì)分解為小分子肽和氨基酸C．制作米酒時，需將蒸熟的米飯立即與酒曲混合，并在高溫環(huán)境下保溫以加速發(fā)酵D．醋酸菌在無氧條件下可將乙醇轉(zhuǎn)化為醋酸，因此米醋制作需在較低溫度下進(jìn)行7.下列操作能達(dá)到滅菌目的的是（）A．用免洗酒精凝膠擦手 B．制作泡菜前用開水燙洗容器C．在火焰上灼燒接種環(huán) D．防疫期間用石炭酸噴灑教室8.下列有關(guān)“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)”實驗的敘述，錯誤的是（）A．選擇培養(yǎng)基中需添加尿素作為唯一氮源B．配制培養(yǎng)基時，需先進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，再調(diào)節(jié)pH至中性或弱堿性C．平均每克土壤中分解尿素的細(xì)菌數(shù)約為2.2×108個D．實驗需設(shè)置未接種的培養(yǎng)基作對照，以驗證培養(yǎng)基的滅菌效果9.下列關(guān)于細(xì)胞工程的敘述中，錯誤的是（）A．動物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交都能形成雜種個體B．動物體細(xì)胞核移植的難度高于胚胎細(xì)胞核移植C．植物體細(xì)胞雜交包括細(xì)胞融合和植物植物組織培養(yǎng)過程D．動物細(xì)胞培養(yǎng)可用胰蛋白酶進(jìn)行處理獲得單個細(xì)胞10.線粒體DNA突變會導(dǎo)致多種線粒體遺傳病。為了研究線粒體遺傳病的分子機(jī)制，可構(gòu)建永生淋巴細(xì)胞系和轉(zhuǎn)線粒體細(xì)胞系，構(gòu)建過程如圖所示。淋巴細(xì)胞被EB病毒（EBV）感染后能獲得可無限增殖的永生淋巴細(xì)胞，但該細(xì)胞會被BrdU殺死，p°細(xì)胞不會被BrdU殺死，但其在含有尿嘧啶和丙酮酸的培養(yǎng)基中才能生長。下列敘述錯誤的是（）A．誘導(dǎo)細(xì)胞融合時，滅活病毒可使細(xì)胞接觸處的蛋白質(zhì)和脂質(zhì)分子重新排布B．由圖可知，永生淋巴細(xì)胞提供線粒體DNA，P°細(xì)胞提供細(xì)胞核C．為了篩選出轉(zhuǎn)線粒體細(xì)胞，選擇培養(yǎng)基中應(yīng)添加BrdU，不添加尿嘧啶和丙酮酸D．經(jīng)選擇培養(yǎng)基篩選后，還需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測11.右圖為玉米（染色體數(shù)為2n）組織培養(yǎng)的相關(guān)研究，親本植物的基因型為Aa，A、B、C、D表示以親本植物為材料進(jìn)行的四種人工繁殖過程，圖中融合細(xì)胞只考慮兩兩融合。下列敘述正確的是（）A．圖中的部分葉片進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時，需將其先用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒30s后，接著用次氯酸鈉處理30min后，最后用無菌水清洗2~3次B．研究中A、B、C、D的染色體數(shù)分別是1n、2n、2n、4nC．圖中①表示再分化過程，A過程得到的子代植株基因型為AaD．在研究過程中，用顯微鏡可以觀察到愈傷組織的各細(xì)胞形態(tài)大小一致12.土壤鹽漬化是目前制約我國部分地區(qū)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的重要原因之一、我國科學(xué)家利用甲、乙兩種植物培育新品種耐鹽植株的過程如下圖所示，序號代表過程或結(jié)構(gòu)。下列分析錯誤的是（）A．①可以使用物理法或化學(xué)法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合B．由愈傷組織得到④需要脫分化、再分化等過程C．生長素和細(xì)胞分裂素的比值高有利于根的分化D．該過程打破了生殖隔離，實現(xiàn)了遠(yuǎn)緣雜交育種13.植物細(xì)胞工程在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)等方面有著廣泛的應(yīng)用，相關(guān)敘述正確的是（）A．細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)是利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)獲得次生代謝物B．利用植物頂端分生組織培養(yǎng)的脫毒苗具有抗病毒的特點(diǎn)C．利用花藥離體培養(yǎng)獲得玉米幼苗，直接從中選擇出具有優(yōu)良性狀的個體D．快速繁殖花卉的技術(shù)，可以改良植物的性狀14.在體細(xì)胞克隆猴培育過程中，為調(diào)節(jié)相關(guān)基因的表達(dá)，研究人員將組蛋白去甲基化酶Kdm4d的mRNA注入了重構(gòu)胚，同時用組蛋白脫乙酰酶抑制劑（TSA）處理，使胚胎的發(fā)育率和妊娠率提高，具體培育流程如圖所示。下列說法錯誤的是（）A．去核的實質(zhì)是去除卵母細(xì)胞中的紡錘體——染色體復(fù)合物B．胚胎移植前應(yīng)對代孕母猴進(jìn)行同期發(fā)情處理C．將組蛋白去甲基化和去（脫）乙?；欣谥貥?gòu)胚的分裂和發(fā)育D．形成重構(gòu)胚后可加入化學(xué)藥物將其激活，待發(fā)育至桑葚胚或囊胚再進(jìn)行胚胎移植15.CRISPR/Cas9是一種高效的基因編輯技術(shù)，Cas9基因表達(dá)的Cas9蛋白像一把“分子剪刀”，在單鏈向?qū)NA（SgRNA）引導(dǎo)下，切割DNA雙鏈以敲除目標(biāo)基因或插入新的基因。CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)的工作原理如圖所示，下列分析不正確的是（）A．構(gòu)建重組質(zhì)粒時，SgRNA編碼序列需要插入到質(zhì)粒的啟動子的下游B．SgRNA和Cas9蛋白形成復(fù)合體后，其功能類似限制酶C．根據(jù)目標(biāo)DNA設(shè)計相應(yīng)的SgRNA，可實現(xiàn)對目標(biāo)DNA的定點(diǎn)切割D．CRISPR/Cas9識別目標(biāo)DNA序列主要與Cas9蛋白的特異性相關(guān)16.人干擾素（IFN）是機(jī)體免疫細(xì)胞產(chǎn)生的一類細(xì)胞因子。用白細(xì)胞生產(chǎn)干擾素時，每個細(xì)胞最多只能產(chǎn)生100~1000個干擾素分子，而用基因工程技術(shù)改造的大腸桿菌發(fā)酵生產(chǎn)（原理如圖），在1~2天內(nèi)每個菌體能產(chǎn)生20萬個干擾素分子。天然的干擾素在體外保存相當(dāng)困難，如果將干擾素分子上的一個半胱氨酸變?yōu)榻z氨酸，在一定條件下可以延長保存時間。下列說法錯誤的是（）A．本研究中基因工程核心步驟用到的酶有限制酶、DNA連接酶，其作用部位都是磷酸二酯鍵B．將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞時常用Ca2+處理大腸桿菌C．除大腸桿菌外，還可以利用酵母菌做受體菌制備干擾素D．為延長保存時間，需對干擾素的氨基酸序列進(jìn)行直接改造17.下圖表示抗人體胃癌的單克隆抗體的制備過程，有關(guān)敘述不正確的是（）A．圖中實驗小鼠注射的甲是能與抗人體胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原B．利用聚乙二醇、滅活的病毒和電融合等方法均可誘導(dǎo)細(xì)胞融合獲得乙C．用特定的選擇培養(yǎng)基對乙篩選，融合細(xì)胞均能生長，未融合細(xì)胞均不能生長D．丙需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選后可獲得大量能分泌所需抗體的丁18.溫度是影響實驗成功的重要條件之一、下列實驗操作中，所需溫度最低的是（）A．用斐林試劑檢測梨勻漿中的還原糖B．用二苯胺試劑鑒定洋蔥的DNA粗提取物C．觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)的流動D．用PCR儀自動完成延伸步驟閱讀下面的材料，完成問題。利用基因工程對動植物的遺傳物質(zhì)進(jìn)行改造，可制作動植物生物反應(yīng)器，在藥物蛋白，疫苗等的生產(chǎn)上有著廣泛的應(yīng)用，我國在這方面也取得重大進(jìn)展材料一：動物生物反應(yīng)器的研究開發(fā)重點(diǎn)是動物乳腺反應(yīng)器和動物血液反應(yīng)器。我國“動物乳腺生物反應(yīng)器”研究取得重要成果，7只含有人生長激素基因的兔子在深圳培育成功，還有一批已接受轉(zhuǎn)基因胚胎移植的牛和羊等待最后檢測。材料二：我國對植物生物反應(yīng)器研究的成果有：成果1將乙型肝炎病毒包膜的蛋白基因?qū)腭R鈴薯和番茄中，獲得了高效表達(dá)該外源基因的工程植株。成果2已將產(chǎn)毒素大腸桿菌熱敏毒素b亞基及定居因子CS6B抗原蛋白基因?qū)腭R鈴薯中，獲得了高效表達(dá)重組抗原蛋白的轉(zhuǎn)基因馬鈴薯植株。成果3已成功地在煙草葉片中大量表達(dá)出與TMV外殼蛋白融合的多個口蹄疫病毒表面抗原小肽，并成功從煙草葉肉細(xì)胞中提取了該物質(zhì)。成果4建立了農(nóng)桿菌介導(dǎo)的胡蘿卜轉(zhuǎn)化系統(tǒng)，已在胡蘿卜中表達(dá)出了霍亂毒素b亞單位（CTB）。19.下列關(guān)于動植物生物反應(yīng)器的描述正確的是（）A．7只含有人生長激素基因的兔子所含目的基因和人體內(nèi)生長激素基因的啟動子相同B．動物血液反應(yīng)器和動物乳腺反應(yīng)器相比的優(yōu)點(diǎn)是沒有性別和年齡的限制C．制作動物乳腺生物反應(yīng)器需要利用顯微注射法把目的基因?qū)氪婆５娜橄偌?xì)胞中D．農(nóng)桿菌介導(dǎo)的胡蘿卜轉(zhuǎn)化系統(tǒng)中，農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞完成轉(zhuǎn)化20.利用動植物生物反應(yīng)器生產(chǎn)疫苗、藥物蛋白等產(chǎn)品是一個復(fù)雜的過程，下面分析正確的是（）A．植物生物反應(yīng)器生產(chǎn)的乙型肝炎病毒包膜的蛋白、CTB等物質(zhì)屬于單克隆抗體B．動植物生物反應(yīng)器生產(chǎn)多肽、蛋白質(zhì)都一定需核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的參與C．由上述材料可大致推測出不同生物共用一套遺傳密碼D．利用轉(zhuǎn)基因馬鈴薯的塊莖進(jìn)行繁殖，后代會發(fā)生性狀分離二、填空題（本大題共5小題，共60分）21.（每空1分，共12分）材料一：圖1為某病毒的結(jié)構(gòu)示意圖。圖2是該病毒刺突蛋白S的部分片段結(jié)構(gòu)示意圖，刺突蛋白S能與宿主細(xì)胞上的特異性受體結(jié)合并介導(dǎo)病毒入侵細(xì)胞。圖3是該病毒核酸的部分結(jié)構(gòu)示意圖。請回答下列問題：（1）該病毒的囊膜來源于宿主細(xì)胞的細(xì)胞膜，其主要成分是，病毒刺突蛋白S的合成場所在。（2）圖3方框中核苷酸的名稱是，該病毒的遺傳物質(zhì)完全水解可以得到的物質(zhì)有種。圖2所示片段是由種氨基酸脫水縮合而成。材料二：人體血糖維持相對穩(wěn)定對于保障細(xì)胞正常代謝至關(guān)重要，如圖顯示了胰島素調(diào)節(jié)血糖平衡的部分機(jī)理。GLUT-4是一種運(yùn)輸葡萄糖的膜蛋白，僅存在于胰島素敏感的骨骼肌、心肌和脂肪細(xì)胞中。質(zhì)膜上GLUT-4蛋白的數(shù)量受胰島素調(diào)節(jié)。在胰島素作用下，細(xì)胞內(nèi)發(fā)生一系列生理反應(yīng)，使質(zhì)膜上的GLUT-4蛋白增加，進(jìn)而引起血糖濃度下降。（3）圖中的雙層膜的細(xì)胞結(jié)構(gòu)是___________；在蛋白質(zhì)合成分泌過程中，為生命活動提供能量的細(xì)胞器是___________。（4）葡萄糖進(jìn)入脂肪細(xì)胞后可以合成甘油三酯，以甘油三酯為代表的脂質(zhì)對維持人體健康有著重要作用。青少年體內(nèi)脂質(zhì)過少不利于生長發(fā)育，下列解釋合理的________。A．脂肪可以提供能量來源 B．脂肪有維持體溫恒定的作用C．膽固醇可以作為合成性激素的原料 D．膽固醇是質(zhì)膜重要的結(jié)構(gòu)成分（5）圖細(xì)胞的細(xì)胞核中顯示了兩種核酸，含有堿基ATCG的核苷酸有________。A．4種 B．5種 C．7種 D．8種（6）圖中從基因調(diào)控GLUT-4合成，到質(zhì)膜上出現(xiàn)GLUT-4蛋白，需依次經(jīng)歷以下過程：_______。（選擇所需的編號并正確排序）①內(nèi)質(zhì)網(wǎng)加工運(yùn)輸GLUT-4蛋白②核糖體初步合成GLUT-4蛋白③細(xì)胞核相關(guān)基因?qū)⑿畔鬟f到細(xì)胞質(zhì)④高爾基體加工轉(zhuǎn)運(yùn)GLUT-4蛋白⑤GLUT-4蛋白直接整合到質(zhì)膜⑥囊泡包裹GLUT-4蛋白整合到質(zhì)膜（7）科學(xué)家嘗試提取人胰島素的基因，并通過重組DNA技術(shù)連接到酵母菌的基因組上，從而實現(xiàn)人胰島素的規(guī)模化生產(chǎn)。以上過程中運(yùn)用到的生物科學(xué)技術(shù)是________。A．免疫治療技術(shù) B．發(fā)酵工程 C．基因編輯技術(shù) D．生態(tài)學(xué)技術(shù)（8）人胰島素制劑在制造、儲存、運(yùn)輸過程中要特別注意條件控制，以保證胰島素的有效性。下列可能導(dǎo)致胰島素失效的有________。A．制造過程中強(qiáng)堿性物質(zhì)污染，導(dǎo)致胰島素制劑處于強(qiáng)堿環(huán)境中B．儲存設(shè)施內(nèi)部紫外燈意外打開，胰島素制劑接受了過量射線照射C．運(yùn)輸過程中制冷設(shè)施故障，胰島素制劑暴露在過高溫環(huán)境中22.（除標(biāo)注外，每空1分，共15分）甜米酒是我國的傳統(tǒng)酒種，某釀酒廠以無核黃皮果（富含維生素、有機(jī)酸及特殊的香味）為輔料研制出黃皮甜米酒，該酒具有消食、潤肺和清熱解毒等功效。制作黃皮甜米酒的工藝流程如圖1所示?；卮鹣铝袉栴}：（1）生活中，我們也可以利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)來生產(chǎn)食品，比如果酒或果醋。下列關(guān)于果酒和果醋制作的敘述，不正確的是________（多選，2分）。A．果酒和果醋制作分別需要醋酸菌和酵母菌B．制作果醋需要不斷充入氧氣C．果醋是在果酒基礎(chǔ)上，進(jìn)行醋酸發(fā)酵釀制而成D．果酒制作過程中需始終擰緊瓶蓋以防止雜菌污染（2）與現(xiàn)代發(fā)酵技術(shù)相比，傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的特點(diǎn)是________。A．能夠保證食品安全 B．能大規(guī)模生產(chǎn) C．不易控制發(fā)酵過程 D．生產(chǎn)效率較高（3）我國的釀酒技術(shù)歷史悠久，古人在實際生產(chǎn)中積累了很多經(jīng)驗?！洱R民要術(shù)》記載：“世人云：米過酒甜，此乃不解法候。酒冷沸止，米有不消者，便是曲勢盡?！毕铝杏嘘P(guān)敘述不正確的是________。A．“米過酒甜”是因為米中糖類物質(zhì)過量，發(fā)酵停止時仍未被完全消耗B．“酒冷沸止”說明微生物的代謝產(chǎn)熱和釋放CO2逐漸停止C．“曲勢盡”的原因可能是米酒中pH或酒精含量升高D．釀制米酒所用微生物的呼吸類型為兼性厭氧（4）對酒曲微生物進(jìn)行分離純化時，需制備LB（培養(yǎng)細(xì)菌）和YPD（培養(yǎng)真菌）培養(yǎng)基。LB培養(yǎng)基的成分為胰蛋白胨、酵母提取物、NaCl、水，此培養(yǎng)基為________（填寫編號，2分）①合成培養(yǎng)基②天然培養(yǎng)基③液體培養(yǎng)基④半固體培養(yǎng)基⑤固體培養(yǎng)基⑥通用培養(yǎng)基⑦選擇培養(yǎng)基⑧鑒別培養(yǎng)基（5）將不同種酒曲稀釋液涂布于LB和YPD培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，挑取長出的單菌落，轉(zhuǎn)移到相對應(yīng)的新LB和YPD培養(yǎng)基中繼續(xù)分離純化培養(yǎng)，此過程中YPD培養(yǎng)基中需加入一定量的四環(huán)素和鏈霉素，其目的是________。（6）在制作黃皮甜米酒的過程中，為確定黃酒高活性干酵母（YWBY）的添加量及發(fā)酵時間，研究人員進(jìn)行了相關(guān)實驗，實驗結(jié)果如圖2所示。根據(jù)實驗結(jié)果制作黃皮甜米酒時，YWBY的最佳接種量及主發(fā)酵時間分別是________（2分）。YWBY接種量0.12%時，酒精含量最低的原因可能是________。酵母發(fā)酵產(chǎn)生的乙醇除了可以作為我們?nèi)粘５娘嬈?，乙醇也可作為可再生清潔能源，具有良好的?yīng)用前景。酵母菌可利用纖維素生產(chǎn)乙醇，此過程中產(chǎn)生的乙酸等物質(zhì)會抑制酵母菌的生長和發(fā)酵，進(jìn)而影響乙醇的產(chǎn)量。為選擇合適的菌株，提高乙醇產(chǎn)量，科研人員進(jìn)行下列實驗。（7）在現(xiàn)代發(fā)酵工業(yè)中，酵母菌發(fā)酵通常在________中進(jìn)行，在發(fā)酵之前必須采用高壓蒸汽對培養(yǎng)基和附屬設(shè)備等進(jìn)行________。（8）研究員基于前期實驗，獲得兩株高表達(dá)MRP8的酵母菌菌種P1和P2.將菌種________后，分別涂布于不同的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，記錄菌落生長情況，結(jié)果如圖3.實驗結(jié)果表明________。（9）將野生型酵母菌和P2菌分別接種于含4.8g/L乙酸的兩個發(fā)酵裝置中。一段時間后，檢測其中葡萄糖消耗量和乙醇的生成量，結(jié)果如圖4?？蒲腥藛T認(rèn)為：在實際生產(chǎn)中，使用P2菌株比使用野生型菌株更有利于提高乙醇產(chǎn)量，判斷的依據(jù)是________。23.（除標(biāo)注外，每空1分，14分）人心肌細(xì)胞中的肌鈣蛋白由三個結(jié)構(gòu)不同的亞基組成，即肌鈣蛋白T（cTnT）、肌鈣蛋白I（cTnI）和肌鈣蛋白C（cTnC），其中肌鈣蛋白I（cTnI）在血液中含量上升是心肌損傷的特異指標(biāo)。為制備抗cTnI的單克隆抗體，科研人員完成了以下過程。（1）細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在5%的CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是________，為防止有害代謝物的積累，可采用________的方法，以便清除代謝物。多次注射抗原cTnI，取___________內(nèi)的B淋巴組織制成細(xì)胞懸液與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合，不同于誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合的方法是________。融合的細(xì)胞將________（填“貼壁生長”/“懸浮生長”）生長。（2）①②為篩選過程，則甲、乙、丙中，只含雜交瘤細(xì)胞的是________，②過程表示將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上，通過多次的________（2分）最終篩選得到的抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞。（3）酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法是醫(yī)學(xué)上常用的定量檢測抗原的方法，具體原理如下圖：據(jù)圖分析，固相抗體和酶標(biāo)抗體均能與抗原結(jié)合，這是由于不同抗體與同一抗原表面的不同部分結(jié)合。據(jù)圖可知該檢測方法中，酶標(biāo)抗體的作用是________（2分），可通過測定產(chǎn)物量來判斷待測抗原量，若酶標(biāo)抗體是抗cTnI的單克隆抗體，則固相抗體可以用___________（2分）。（4）為鑒定抗cTnI單克隆抗體識別抗原的具體區(qū)域，可將對應(yīng)抗原（cTnI蛋白）進(jìn)行逐步截短，分別與純x蛋白示有反應(yīng)，“-”表示無反應(yīng)，“aa”表示氨基酸）。結(jié)果證明該單克隆抗體識別抗原（cTnI蛋白）的區(qū)域大概為（填“40~50”、“40~55”或“40~60”）位氨基酸。（2分）24.（每空1分，共8分）圖1是我國科學(xué)家利用胚胎干細(xì)胞建立體外胚胎和胚胎發(fā)育潛能研究的流程。人胚胎干細(xì)胞存在兩種不同狀態(tài)，即原始態(tài)（naive）和始發(fā)態(tài)（primed）。naive干細(xì)胞具有最高的發(fā)育潛能，primed干細(xì)胞全能性相對較低。圖2是OGT、OGA以及細(xì)胞骨架蛋白在胚胎干細(xì)胞中表達(dá)情況的電泳圖譜，OGT是負(fù)責(zé)在蛋白質(zhì)上加糖基的酶，OGA是負(fù)責(zé)將糖基從蛋白質(zhì)上去除的酶。（1）猴子芽體相當(dāng)于期的胚胎，過程③的起點(diǎn)細(xì)胞應(yīng)取自芽體的部位。（2）過程④⑤形成的胚胎是。過程⑥需對受體母猴進(jìn)行的處理是。（3）據(jù)圖2推測，naive干細(xì)胞發(fā)育潛能更高的原因可能是；該實驗設(shè)置細(xì)胞骨架蛋白表達(dá)量組別作為對照的作用是。（4）過程①需在圖2中的誘導(dǎo)培養(yǎng)基中完成，目的是。與過程①相比，過程②培養(yǎng)液中還應(yīng)添加。25.（除標(biāo)注外，每空1分，11分）我國科學(xué)家嘗試構(gòu)建地衣芽孢桿菌基因編輯系統(tǒng)，并通過將外源vgb基因定向插入19T-pfIB質(zhì)粒中對該系統(tǒng)進(jìn)行初步驗證，主要過程如圖1.請回答下列問題。（1）步驟①利用已構(gòu)建的質(zhì)粒19T-pflB，通過反向PCR獲得左右同源片段，除圖中已有的組分外，還應(yīng)添加緩沖液（Mg2+）和___________（答兩點(diǎn)，2分）等。下表為pflB部分基因序列和設(shè)計的相關(guān)引物，可選用的引物是___________（填編號）。DNA序列（虛線處省略了部分核苷酸序列）pflB基因5'-TCGCACACCTGACTACAATT……TCGCAATGGCAATCGGCAAACT-3'3'-AGCGTGTGGACTGATGTTAA……AGCGTTACCGTTAGCCGTTTGA-5'PCR引物①5'ACGGGATCCTTGTAGTCAGGTGTGCGA3'②5'ACGGGATCCTTTGCCGATTGCCATTGC3'③5'AACTGCAGTCGCACACCTGACTACAA3'④5'AACTGCAGGCAATGGCAATCGGCAAA3'注：下劃線標(biāo)注為BamHI識別序列5'-G↓GATCC-3'和PstI識別序列5'-CTGCA↓G-3'（2）步驟②雙酶切時，需使用的限制酶a和限制酶b分別是___________和___________，影響DNA連接酶反應(yīng)速率的因素有反應(yīng)體系的溫度、pH、酶濃度和___________（答出兩點(diǎn)，2分）等。（3）圖2是質(zhì)粒PNZTK-PFTF-vgb轉(zhuǎn)入地衣芽孢桿菌后，將目的基因插入基因組的過程示意圖。將受體菌接種在含四環(huán)素和___________（含/不含）卡那霉素培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間后，因沒有選擇壓力，會導(dǎo)致發(fā)生雙交換的質(zhì)粒丟失。挑取一定數(shù)量的單菌落，接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基上，并一一對應(yīng)接種到含卡那霉素的培養(yǎng)基上，實驗結(jié)果如圖3所示。其中在兩種培養(yǎng)基均能生長的菌株是只發(fā)生單交換或______