發(fā)酵工程與設(shè)備

2022-3-24

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發(fā)酵工程是應(yīng)用生物（主要是微生物）的生長(zhǎng)繁殖和代謝活動(dòng)來(lái)大量生產(chǎn)人

們所需產(chǎn)品過程的理論和工程技術(shù)體系。也禰作微生物工程

發(fā)酵工程組成從廣義上講，由三部份組成：上游工程、發(fā)酵工程、下游

工程。

工業(yè)發(fā)酵的類型按微生物對(duì)氧的需求：厭氧發(fā)酵、好氧發(fā)酵、兼性厭

氧發(fā)酵。

按發(fā)酵工藝流程：分批發(fā)酵、連續(xù)發(fā)酵、補(bǔ)料分批發(fā)酵

菌絲結(jié)團(tuán)液沐培養(yǎng)條件下，繁殖的菌絲不分散舒展，而是聚成團(tuán)狀。

菌絲粘壁：在種子培養(yǎng)過程中，菌絲正常發(fā)育生長(zhǎng)，但再繼續(xù)培養(yǎng)時(shí)菌絲逐

步粘附在罐壁上。

反饋抑制：是生物化學(xué)途徑的末端產(chǎn)物抑制反應(yīng)途徑中某個(gè)催化酶的活性，

是由于末端產(chǎn)物連接到該酶的變構(gòu)位點(diǎn)，從而影響酶與底物的接觸。

反饋?zhàn)瓒簦菏巧锘瘜W(xué)途徑的末端產(chǎn)物阻撓反應(yīng)途徑中某個(gè)催化酶的合成。

阻遏發(fā)生在基因水平，通過末端產(chǎn)物和基因組連接阻撓某因子的轉(zhuǎn)錄，從而導(dǎo)致

酶合成的阻斷。

抗體突變株：是誘變后能夠在含有合適濃度的結(jié)構(gòu)類似物的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的

菌落。

誘變育種：利用物理或者化學(xué)誘導(dǎo)劑處理均勻分散的微生物細(xì)胞群。

育種方法具有：方法簡(jiǎn)單、快速、收效顯著等特點(diǎn)。

雜交育種：指兩個(gè)基因型不同的菌株通過接合使遺傳物質(zhì)重新組合，從中分

離和篩選具有新性狀的菌株。

細(xì)胞的雜交可以通過：細(xì)菌結(jié)合、f因子轉(zhuǎn)移、轉(zhuǎn)化和轉(zhuǎn)導(dǎo)等方法促使

基因重組。

代謝控制發(fā)酵：用人工誘變的方法，故意識(shí)地改變微生物的代謝途徑，最大

限度地積累產(chǎn)物，這種發(fā)酵形象地稱為代謝控制發(fā)酵，最早在氨基酸發(fā)酵中得到

成功應(yīng)用

回復(fù)突變：高產(chǎn)菌株在傳代的過程中，由于自然突變導(dǎo)致高產(chǎn)性狀的丟失，

生產(chǎn)性能下降，這種情況我們稱為回復(fù)突變

結(jié)構(gòu)類似物：在化學(xué)和空間結(jié)構(gòu)上和代謝的中間物（終產(chǎn)物）相似，于是在

代謝調(diào)節(jié)方面可以代替代謝中間物（終產(chǎn)物）的功能，但細(xì)胞不能以其作為自身

的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。

接種齡：指種子罐中培養(yǎng)的菌體從開始移入二一級(jí)種子罐或者發(fā)酵罐時(shí)的培

養(yǎng)時(shí)間，以對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期為宜。

接種量：是指移入的種子懸浮體積和接種后培養(yǎng)液體的體積的比例。

初級(jí)代謝產(chǎn)物：本數(shù)生長(zhǎng)期形成的，細(xì)胞自身生長(zhǎng)所必需的代謝產(chǎn)物。

次級(jí)代謝產(chǎn)物：在穩(wěn)定期所產(chǎn)生的自身生長(zhǎng)豐必需代謝產(chǎn)物。（微量、特殊

活性、明顯種屬特異性）

培養(yǎng)基種類分類

按成份不同劃分：天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基

按物理狀態(tài)不同劃分：固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基

按生產(chǎn)工藝的要求：抱子（斜面）培養(yǎng)基、種子培養(yǎng)基、發(fā)酵培養(yǎng)基

按用途不同劃分：基本培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基

糖蜜：糖蜜是制糖生產(chǎn)時(shí)的結(jié)晶母液，它是制糖工業(yè)的副產(chǎn)物。含有較豐富

的糖、氨素化合物和無(wú)機(jī)維生素等，是微生物工業(yè)的價(jià)廉物美的原料。

無(wú)機(jī)氮源被菌體作為氮源利用后，培養(yǎng)液中就留下了酸性或者堿性物質(zhì)，這

種經(jīng)微生物生理作用（代謝）后能形成酸性物質(zhì)的無(wú)機(jī)氮源叫生理酸性物質(zhì)，

如硫酸胺，若菌體代謝后能產(chǎn)生堿性物質(zhì)的則此種無(wú)機(jī)氮源稱為生理堿性物質(zhì),

如硝酸鈉。正確使用生理酸堿性物質(zhì)，對(duì)穩(wěn)定和調(diào)節(jié)發(fā)酵過程的ph有積極作

用。

速效氮源：鏤鹽、硝酸鹽、尿素等氮化物中的氮是水溶性的，玉米漿、牛肉

膏、蛋白陳、醇母膏等有機(jī)氮化物中的氮主要是蛋白質(zhì)的降解產(chǎn)物，都可以被菌

體直接吸收利用，稱為速效性氮源。

遲效氮源：餅粕中氮主要以蛋白質(zhì)的形式存在，屬遲效性氮源。

前體指某些化合物加入到發(fā)酵培養(yǎng)基中，能直接在生物合成過程中合成到產(chǎn)

物份子中去，而其自身的結(jié)構(gòu)并沒有多大變化，但是產(chǎn)物的產(chǎn)量卻因加入前體而

有較大的提高。

老化：淀粉的老化實(shí)際上是份子間氫鍵已斷裂的糊化淀粉重新羅列形成新的

氫鍵的過程，也就是復(fù)結(jié)晶過程。

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)方法：貼壁培養(yǎng)、懸浮培養(yǎng)、固定化培養(yǎng)

高溫致死原理：由于它使微生物的蛋白質(zhì)和咳酸等重要生物高份子發(fā)生變

性、破壞，例如它可使核酸發(fā)生脫氨、脫喋吟或者降解，以及破壞細(xì)胞膜上的類

脂質(zhì)成份等。

致死溫度：殺死微生物的極限溫度。

致死時(shí)間：在致死溫度下殺死全部微生物所需要的時(shí)間。

微生物對(duì)熱的反抗力用“熱阻”表示。熱阻指微生物在某一條件下的致死時(shí)

間。

營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和細(xì)菌芽抱對(duì)熱的反抗力不同。

相對(duì)熱阻：在相同條件下兩種微生物熱阻的比值。

分批滅菌過程：升溫、保溫和降溫，滅菌主要是在保溫過程中實(shí)現(xiàn)的，在升

溫的后期和冷卻的初期，培養(yǎng)基的溫度很高，于是對(duì)滅菌也有一定貢獻(xiàn)。

分批滅菌：將配好的培養(yǎng)基打入發(fā)酵罐，通入蒸汽將培養(yǎng)基和所用的設(shè)備（一

般是發(fā)酵罐）一起進(jìn)行滅菌，也稱實(shí)罐滅菌。

連續(xù)滅菌（連消）：培養(yǎng)基在罐外連續(xù)進(jìn)行加熱、維持和冷卻，然后進(jìn)入發(fā)

酵罐的殺菌方法。

衰減時(shí)間d值：活得微生物在受熱過程中減少到原來(lái)數(shù)目的1/10

（ns/nOW/lO）所需要的時(shí)間。

過濾除菌機(jī)理：慣性作用、擴(kuò)散作用、靜電吸附、攔截作用

過濾器的類型：機(jī)械過濾、介質(zhì)過濾、絕對(duì)過濾

空氣除菌的方法：輻射殺菌、加熱殺菌、化學(xué)藥物殺菌、靜電吸附、機(jī)械過

濾

為了獲得無(wú)菌空氣，普通采用三個(gè)主要工段：提高空氣的潔凈度、除去空

氣中油和水、獲得無(wú)菌空氣

空氣壓縮機(jī)：活塞式空氣壓縮機(jī)、離心式空氣壓縮機(jī)、螺桿式空氣壓縮機(jī)

絕對(duì)過濾器：介質(zhì)孔徑小于被截留的微生物體積，如四氟乙烯、纖維素樹脂

微孔濾膜。

絮凝：形成大顆粒絮凝體，便了過濾。

混凝：同時(shí)包括凝結(jié)和絮凝作用的過程。

沉降：利用分散質(zhì)與分散介質(zhì)之間的密度差異，將分散質(zhì)與分散介質(zhì)分開的

作用。

懸浮夜沉降分離設(shè)備：間歇式沉降器、半連續(xù)式沉降器、連續(xù)式沉降器

結(jié)晶法：在固相析出過程中，析出物為晶體E寸稱為結(jié)晶法。

沉淀法：在固相析出過程中，析出物為無(wú)定形固體時(shí)則稱為沉淀法。常用的

沉淀法主要有鹽析法、有機(jī)溶劑沉淀法和等電點(diǎn)沉淀法等。

萃?。豪萌苜|(zhì)在互不相溶的兩相之間分配系數(shù)的不同而使溶質(zhì)得到純化或

者濃縮的方法。

離子交換分離法是利用溶液中離子與離子交爽劑發(fā)生交換反應(yīng)進(jìn)行分離的

方法

離子交換劑由三部份組成：不溶性載體；功能基團(tuán)；可交換離子。

如果樹脂釋放的是活性陽(yáng)離子，它就能和溶液中的陽(yáng)離子發(fā)生交換，稱陽(yáng)離

子交換樹脂；如果釋放的是活性陰離子，它就能交換溶液中的陰離子，稱陰離子

交換樹脂。

離子交換設(shè)備的分類分批法、固定床法、流動(dòng)床法

膜過濾法:指以壓力為推動(dòng)力，依靠膜的選擇性，將液體中的組分進(jìn)行分離

的方法，包括微濾（mf）、超濾（uf）、納濾（nf）和反滲透（ro）四種過程。

通量衰減系數(shù)m：由于過程的濃差極化、膜的壓密、膜污染等的影響，使得

通量隨時(shí)間的變化。

當(dāng)溶劑透過膜，而溶質(zhì)留在膜上，于是使膜面濃度增大，并高于主體中濃度，

這種濃度差導(dǎo)致溶質(zhì)自膜面反擴(kuò)散至主體中，這種現(xiàn)象稱為濃差極化。

濃差極化：在膜分離過程中，一部份溶質(zhì)彼截留，在膜表面及挨近膜表面區(qū)

域的濃度越來(lái)越高，造成從膜表面到本體溶液之間產(chǎn)生濃度梯度，這一現(xiàn)象稱為

“濃差極化”。

微濾：當(dāng)壓力推動(dòng)流體透過膜或者其他過濾介質(zhì)，從流體中分離微米大小的

粒子時(shí)，這個(gè)過程為微濾

表面過濾：粒子的尺寸比過濾介質(zhì)的尺寸大，粒子以其幾何形狀被阻擋，不

能進(jìn)入和通過膜，這種篩濾機(jī)理稱為表面過濾。

深度過濾：粒子的尺寸比過濾介質(zhì)的尺寸小，粒子能進(jìn)入過濾介質(zhì)，井粘附

在其上，被除去。

氣體過濾器：去除氣體中的微粒和膠體、菌體等超純水生產(chǎn)中預(yù)處理和最終

供水

氣液接觸方式有三種：鼓泡接觸狀態(tài)、泡沫接觸狀態(tài)、噴霧接觸狀態(tài)

簡(jiǎn)單蒸飾型可分為靜止式、降膜式、離心式等幾種。

蒸發(fā)的分類

按操作空間的壓力可分為常壓、加壓或者減壓蒸發(fā)。

按蒸汽利用情況可分為單效蒸發(fā)、二效蒸發(fā)和多效蒸發(fā)

按操作流程可分為間歇式、連續(xù)式。

按加熱部份的結(jié)構(gòu)可分為膜式和非膜式。

蒸發(fā)過程：將含有固體溶質(zhì)的稀溶液加熱沸騰進(jìn)行濃縮，以獲得固體產(chǎn)品或

者制取溶劑。蒸發(fā)過程實(shí)際上是不揮發(fā)性的溶質(zhì)和揮發(fā)性的溶劑分離的過程。

物質(zhì)在溶解時(shí)普通要吸收熱量，在結(jié)晶時(shí)放出熱量，稱為結(jié)晶熱。相反的情

況，即溶解時(shí)放熱，結(jié)晶時(shí)吸熱，比較少見。因此結(jié)晶又是一個(gè)同時(shí)有質(zhì)量和熱

量傳遞的過程。

起晶方法：自然起晶，刺激起晶，品種起晶

干燥方法

空氣干燥、加熱面?zhèn)鳠岣稍铩⒓t外線干燥、冷凍升華干燥、微波干燥

空氣干燥設(shè)備按工作原理分為：氣流干燥、沸騰干燥和噴霧干燥。

游離水一一游離水分多存在于生物產(chǎn)品的細(xì)胞外及多孔物料的毛細(xì)管中。

結(jié)合水一一結(jié)合水分主要有滲透水分、結(jié)構(gòu)水分等，它與物料的結(jié)合力較強(qiáng)，

水分的活度小于1。

固態(tài)發(fā)酵：廣義：使用不溶性固體基質(zhì)培養(yǎng)微生物，得到代謝產(chǎn)物的工藝過

程

自然富集固態(tài)發(fā)酵：強(qiáng)化微生物混合固態(tài)發(fā)酵、限定微生物混合固態(tài)發(fā)酵、

單菌固態(tài)純種發(fā)醛

蒸料方法：常用的有罐式連續(xù)蒸煮，管式連續(xù)蒸煮，柱式連續(xù)蒸煮等三種方

法

本征動(dòng)力學(xué)：即沒有在生物反應(yīng)器中各種形式的傳遞過程等工程因素影響時(shí)

的微生物反應(yīng)的固有反應(yīng)速率。

宏觀動(dòng)力學(xué)：但是實(shí)際發(fā)酵過程是在生物反應(yīng)器中進(jìn)行，因此，從實(shí)用意義

出發(fā)，人們重視一定反應(yīng)器內(nèi)檢測(cè)到的反應(yīng)速率即總反應(yīng)速率及其影響因素，這

就是宏觀動(dòng)力學(xué)研究。

生物反應(yīng)工程：它涉及二方面的內(nèi)容，即宏觀微生物反應(yīng)動(dòng)力學(xué)和生物反應(yīng)

器工程。其中反應(yīng)器工程是指包括影響微生物反應(yīng)宏觀動(dòng)力學(xué)的生物反應(yīng)器形

式、結(jié)構(gòu)、操作方式、物料混和傳遞過程特性等

一\名稱解釋

1、前體指某些化合物加入到發(fā)酵培養(yǎng)基中，能直接彼微生物在生物合成

過程中合成到產(chǎn)物物份子中去，而其自身的結(jié)構(gòu)并沒有多大變化，但是產(chǎn)物的產(chǎn)

量卻因加入前體而有較大的提高。

2、發(fā)酵生長(zhǎng)因子從廣義上講，凡是微生物生長(zhǎng)不可缺少的微量的有機(jī)物

質(zhì)，如氨基酸、喋吟、喀咤、維生素等均稱生長(zhǎng)因子

3、菌濃度的測(cè)定是衡量產(chǎn)生菌在整個(gè)培養(yǎng)過程中菌體量的變化，普通前

期菌濃增長(zhǎng)很快，中期菌濃基本恒定。補(bǔ)料會(huì)引起菌濃的波動(dòng)，這也是衡量補(bǔ)料

量適合與否的一個(gè)參數(shù)。

4、攪拌熱：在機(jī)械攪拌通氣發(fā)酵罐中，由于機(jī)械攪拌帶動(dòng)發(fā)酵液作機(jī)械運(yùn)

動(dòng)，造成液體之間，液體與攪拌器等設(shè)備之間的磨擦，產(chǎn)生可觀的熱量。攪拌熱

與攪拌軸功率有關(guān)

5、分批培養(yǎng)：簡(jiǎn)單的過程，培養(yǎng)基中接入菌種以后，沒有物料的加入和取

出，除了空氣的通入和排氣。整個(gè)過程中菌的濃度、營(yíng)養(yǎng)成份的濃度和產(chǎn)物濃度

等參數(shù)都隨時(shí)間變化。

6、接種量：接種量=移入種子的體積/接種后培養(yǎng)液的體積

7、比耗氧速度或者呼吸強(qiáng)度單位時(shí)間內(nèi)單位體積分量的細(xì)胞所消耗的氧

氣，mmolo2?g菌T?hT

8、次級(jí)代謝產(chǎn)物是指微生物在一定生長(zhǎng)時(shí)期，以初級(jí)代謝產(chǎn)物為前體物

質(zhì)，合成一些對(duì)微生物的生命活動(dòng)無(wú)明確功能的物質(zhì)過程，這一過程的產(chǎn)物，即

為次級(jí)代謝產(chǎn)物。

9、實(shí)罐滅菌實(shí)罐滅菌（即分批滅菌）將配制好的培養(yǎng)基放入發(fā)酵罐或者

其他裝置中，通入蒸汽將培養(yǎng)基和所用設(shè)備加熱至滅菌溫度后維持一定時(shí)間，

在冷卻到接種溫度，這一工藝過程稱為實(shí)罐滅菌，也叫間歇滅菌。

10、種子擴(kuò)大培養(yǎng)：指將保存在砂土管、冷凍干燥管中處休眠狀態(tài)的生產(chǎn)

菌種接入試管斜面活化后，再經(jīng)過扁瓶或者搖瓶及種子罐逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng),最終獲

得一定數(shù)量和質(zhì)量的純種過程。這些純種培養(yǎng)物稱為種子。

11、初級(jí)代謝產(chǎn)物是指微生物從外界吸收各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，通過分解代謝

和合成代謝，生成維持生命活動(dòng)所需要的物質(zhì)和能量的過程。這一過程的產(chǎn)物即

為初級(jí)代謝產(chǎn)物。

12、倒種：一部分種子來(lái)源于種子罐，一部份來(lái)源于發(fā)酵罐。

13、維持消耗（m）指維持細(xì)胞最低活性所需消耗的能量，普通來(lái)講，單位

分量的細(xì)胞在單位時(shí)間內(nèi)用于維持消耗所需的基質(zhì)的量是一個(gè)常數(shù)。

14、產(chǎn)物促進(jìn)劑是指那些非細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的營(yíng)養(yǎng)物，又非前體，但加

入后卻能提高產(chǎn)量的添加劑

15、補(bǔ)料分批培養(yǎng)：在分批培養(yǎng)過程中補(bǔ)入新鮮的料液，以克服營(yíng)養(yǎng)不足

而導(dǎo)致的發(fā)酵過早結(jié)束的缺點(diǎn)。

在此過程中惟獨(dú)料液的加入沒有料液的取出，所以發(fā)酵結(jié)束時(shí)發(fā)酵液體積比

發(fā)酵開始時(shí)有所增加。在工廠的實(shí)際生產(chǎn)中采用這種方法不少。

16、發(fā)酵熱：所謂發(fā)酵熱就是發(fā)酵過程中釋放出來(lái)的凈熱量。什么叫凈

熱量呢？在發(fā)酵過程中產(chǎn)生菌分解基質(zhì)產(chǎn)生熱量，機(jī)械攪拌產(chǎn)生熱量，而罐壁散

熱、水分蒸發(fā)、空氣排氣帶走熱量。這各種產(chǎn)生的熱量和各種散失的熱量的代數(shù)

和就叫做凈熱量。發(fā)醉熱引起發(fā)酵液的溫度上升。發(fā)酵熱大，溫度上升快，發(fā)酵

熱小，溫度上升慢。

17、染菌率息染菌率指一年發(fā)酵染菌的批（次）數(shù)與總投料批（次）數(shù)

之比的百分率。染菌批次數(shù)應(yīng)包括染菌后培養(yǎng)基經(jīng)重新滅菌，又再次染菌的批次

數(shù)在內(nèi)

18、連續(xù)培養(yǎng)：發(fā)醉過程中一切補(bǔ)入新鮮料液一切放出等量的發(fā)醉液，使

發(fā)酵罐內(nèi)的體積維持恒定。達(dá)到穩(wěn)態(tài)后，整個(gè)過程中菌的濃度，產(chǎn)物濃度，限制

性基質(zhì)濃度都是恒定的。

19、臨界溶氧濃度指不影響呼吸所允許的最低溶氧濃度

20、回復(fù)突變由突變型到野生型的基因突變

21、種子見種子擴(kuò)大培養(yǎng)

22、培養(yǎng)基廣義上講培養(yǎng)基是指一切可供微生物細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖所需的一

組營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和原料。同時(shí)培養(yǎng)基也為微生物培養(yǎng)提供除營(yíng)養(yǎng)外的其它所必須的條

件。

23、發(fā)酵工程：利用微生物特定性狀和功能，通過現(xiàn)代化工程技術(shù)生產(chǎn)實(shí)用

物質(zhì)或者直接應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)的技術(shù)體系，是將傳統(tǒng)發(fā)酵于現(xiàn)代的dna重組、

細(xì)胞融合、份子修飾卻改造等新技術(shù)集合并發(fā)展起來(lái)的發(fā)酵技術(shù)。

二、填空題

1、微生物發(fā)酵培養(yǎng)（過程）方法主要有分批培養(yǎng)、補(bǔ)料分批培養(yǎng)、

連續(xù)培養(yǎng)、半連續(xù)培養(yǎng)四種。

2、微生物生長(zhǎng)普通可以分為：調(diào)整期、對(duì)數(shù)期、穩(wěn)定期和衰亡期。

3、發(fā)酵過程工藝控制的只要化學(xué)參數(shù)溶解氧、ph、核酸量等.

4、發(fā)酵過程控制的目的就是得到最大的比生產(chǎn)率和最大的得率。

5、菌種分離的普通過程采樣、富集、分離、目的菌的篩選。

6、富集培養(yǎng)目的就是讓目的菌在種群中占優(yōu)勢(shì)，使篩選變得可能。

7、根據(jù)工業(yè)微生物對(duì)氧氣的需求不同，培養(yǎng)法可分為好氧培養(yǎng)和厭

氧培養(yǎng)兩種。

8、微生物的培養(yǎng)基根據(jù)生產(chǎn)用途只要分為胞子培養(yǎng)基、種子培

養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基。

9、常用滅菌方法：化學(xué)滅菌、射線滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌

10、常用工業(yè)微生物可分為：細(xì)菌、酵母菌、霉菌、放線菌四大類。

11、發(fā)酵過程工藝控制的代謝參數(shù)中物理參數(shù)溫度、壓力、攪拌轉(zhuǎn)速、功

率輸入、流加數(shù)率和質(zhì)量等

12、環(huán)境無(wú)菌的檢測(cè)方法有：顯微鏡檢查法、肉湯培養(yǎng)法、平板培養(yǎng)法、

發(fā)酵過程的異常觀察法等

13、染菌原因：發(fā)酵工藝流程中的各環(huán)節(jié)漏洞和發(fā)酵過程管理不善兩個(gè)方

14、實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行的發(fā)酵菌液體發(fā)酵方式主要有四種：試管液體培養(yǎng)、淺

層液體培養(yǎng)、搖瓶培養(yǎng)、臺(tái)式發(fā)酵罐

15、發(fā)酵高產(chǎn)菌種選育方法包括（自然選育）、（雜交育種）、（誘變育

種）、（基因工程育和）、（原生質(zhì)體融合）。

16、發(fā)酵產(chǎn)物整個(gè)分離提取路線可分為：預(yù)處理、固液分離、初步純化、

精細(xì)純化和成品加工加工等五個(gè)主要過程。

17、發(fā)酵過程主要分析項(xiàng)目如下：ph、排氣氧、排氣co2和呼吸端、糖含

量、氨基氮和氨氮、磷含量、菌濃度和菌形態(tài)。

18、微生物調(diào)節(jié)其代謝采用酶活性、酶合成量、細(xì)胞膜的透性。

19、工業(yè)微生物菌種可以來(lái)自自然分離，也可以來(lái)自從微生物菌種保

藏機(jī)構(gòu)單位獲取。

20、發(fā)酵工業(yè)上常用的糖類主要有葡萄糖、糖蜜。

21、工業(yè)發(fā)酵方式根據(jù)所用菌種是單一或者是多種可以分為單一純種發(fā)

酵和混合發(fā)酵。

22、種子及發(fā)酵液進(jìn)行無(wú)菌狀況控制常用的方法顯微鏡檢測(cè)法、酚紅肉

湯培養(yǎng)基法、平板畫線培養(yǎng)法、發(fā)酵過程的異常觀察法。

23、菌種的分離和篩選普通分為采樣、富集、分離、目的菌的篩選步驟。

25、常用滅菌方法有：化學(xué)滅菌、射線滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌

50、簡(jiǎn)述通用試發(fā)酵罐的結(jié)構(gòu)

通用式發(fā)酵罐：具有通氣和攪拌裝置的立式圓筒形發(fā)酵罐。是目前大生產(chǎn)中

最常用的發(fā)醛罐。其容積可從幾升到幾百噸不等。包括罐體、攪拌系統(tǒng)、傳熱系

統(tǒng)、通氣系統(tǒng)。（1）罐體2）攪拌系統(tǒng)包括：驅(qū)動(dòng)機(jī)電、攪拌軸；渦輪攪拌器、

攪拌葉；擋板；軸封（端面軸封）（3）傳熱系統(tǒng)包括夾層傳熱、蛇管傳熱（一

般有4組、6組、8組）。（4）通氣系統(tǒng)包括單孔管、多孔環(huán)管

1、發(fā)酵工程的概念是什么？發(fā)酵工程基本可分為那兩個(gè)大部份，包括哪些

內(nèi)容？

答：發(fā)酵工程是利用微生物特定性狀好功能，通過現(xiàn)代化工程技術(shù)生產(chǎn)實(shí)用

物質(zhì)或者其直接應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)的技術(shù)體系，是將傳統(tǒng)發(fā)酵與現(xiàn)代的dna重組、

細(xì)胞融合、份子修飾和改造等新技術(shù)結(jié)合并發(fā)展起來(lái)的發(fā)酵技術(shù)。也可以說(shuō)是滲

透有工程學(xué)的微生物學(xué)，是發(fā)酵技術(shù)工程化的發(fā)展，由于主要利用的是微生物發(fā)

酵過程來(lái)生產(chǎn)產(chǎn)品，因此也稱為微生物工程。

一.發(fā)酵部份：1.菌種的特征和選育2.培養(yǎng)基的特性，選擇及其滅菌理論

3.發(fā)酹液的特性4.發(fā)酵機(jī)理。5.發(fā)酵過程動(dòng)力學(xué)6.空氣中懸浮細(xì)菌微粒

的過濾機(jī)理7.氧的傳遞。溶解。吸收。理論。8.連續(xù)培養(yǎng)和連續(xù)發(fā)酵的控制

二.提純部份1.細(xì)胞破碎，分離2.液輸送，過濾.除雜3.離子交

換滲析，逆滲透，超濾4.凝膠過濾，沉淀分離5溶媒萃取，蒸發(fā)蒸儲(chǔ)結(jié)晶，

干燥，包裝等過程和單元操作

2、現(xiàn)代發(fā)酵工程所用的發(fā)酵罐應(yīng)具備那些特征？

答：(1)、發(fā)醉罐應(yīng)有適宜的徑高比。罐身較長(zhǎng)，氧的利用率較高；

(2)、發(fā)酵罐應(yīng)能承受一定的壓力。因?yàn)榘l(fā)酵^在滅菌和正常工作時(shí)，要

承受一定的壓力(氣壓和液壓)和溫度；

(3)、發(fā)酵罐的攪拌通風(fēng)裝置能使氣液充分混合，實(shí)現(xiàn)傳質(zhì)傳熱作用，保

證微生物發(fā)酵過程中所需的溶解氧；

(4)、發(fā)酵罐內(nèi)應(yīng)盡量減少死角，避免臧污納垢，保證滅菌徹底，防止染

菌；

(5)、發(fā)酵罐應(yīng)具有足夠的冷卻面積；

(6)、攪拌器的軸封要嚴(yán)密，以減少泄露。

3、微生物發(fā)酵的種子應(yīng)具備那兒方面條件？

答：⑴、菌種細(xì)胞的生長(zhǎng)活力強(qiáng)，移種至發(fā)酵罐后能迅速生長(zhǎng)，遲緩期短。

(2)、生理性狀穩(wěn)定。

(3)、菌體總量及濃度能滿足大量發(fā)酵罐的要就。

(4)、無(wú)雜菌污染。

(5)、保持穩(wěn)定的生產(chǎn)能力。

10、發(fā)酵級(jí)數(shù)確定的依據(jù)是什么？

答：普通由菌絲體培養(yǎng)開始計(jì)算發(fā)酵級(jí)數(shù)，但有時(shí)，工廠從第一級(jí)種子罐開

始計(jì)算發(fā)酵級(jí)數(shù)

谷氨酸：三級(jí)發(fā)酵一級(jí)種子（搖瓶）一二級(jí)種子（小罐）一發(fā)酵青

霉素：三級(jí)發(fā)酵

一級(jí)種子（小罐）一二級(jí)種子（中罐）一發(fā)酵1、發(fā)酵級(jí)數(shù)確定的依據(jù)：

級(jí)數(shù)受發(fā)酵規(guī)模、菌體生長(zhǎng)特性、接種量的影響。2、級(jí)數(shù)大，難控制、易染菌、

易變異，管理艱難，一

般2-4級(jí)。3、在發(fā)酵產(chǎn)品的放大中，反應(yīng)級(jí)數(shù)的確定是非常重要的一個(gè)方

面

5、發(fā)酵產(chǎn)品的生產(chǎn)特點(diǎn)是什么，什么是種子擴(kuò)大培養(yǎng)，其任務(wù)是什么？

答：（2）、種子擴(kuò)大培養(yǎng)是指將保存在砂土管、冷凍干燥管中處休眠狀態(tài)

的生產(chǎn)菌種接入試管斜面活化后，再經(jīng)過扁瓶或者搖瓶及種子罐逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng),

最終獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的純種過程。這些純種培養(yǎng)物稱為種子。

（3）、種子擴(kuò)大培養(yǎng)的任務(wù)：現(xiàn)代的發(fā)酵工業(yè)生產(chǎn)規(guī)模越來(lái)越大，每只發(fā)

酵罐的容積有幾十立方米甚至幾百立方米，要使小小的微生物在幾十小時(shí)的較短

時(shí)間內(nèi)，完成如此巨大的發(fā)酵轉(zhuǎn)化任務(wù)，那就必須具備數(shù)量巨大的微生物細(xì)胞才

行。

（1）發(fā)醉和其他化學(xué)工業(yè)的最大區(qū)別在于它是生物體所進(jìn)行的化學(xué)反應(yīng)。

其主要特點(diǎn)如下：1,發(fā)酵過程普通來(lái)說(shuō)都是在常溫常壓下進(jìn)行的生物化學(xué)

反應(yīng)，反應(yīng)安全，要求條件也比較簡(jiǎn)單。2,發(fā)醉所用的原料通常以淀粉、糖蜜

或者其他農(nóng)副產(chǎn)品為主，只要加入少量的有機(jī)和無(wú)機(jī)氮源就可進(jìn)行反應(yīng)。微生物

因不同的類別可以有選擇地去利用它所需要的營(yíng)養(yǎng)。基于這一特性，可以利用

廢水和廢物等作為發(fā)醉的原料進(jìn)行生物資源的改造和更新。3,發(fā)酵過程是通

過生物體的自動(dòng)調(diào)節(jié)方式來(lái)完成的，反應(yīng)的專一性強(qiáng)，于是可以得到較為且一

的代謝產(chǎn)物.4,由于生物體本身所具有的反應(yīng)機(jī)制，能夠?qū)Ｒ恍缘睾透叨冗x

擇性地對(duì)某些較為復(fù)雜的化合物進(jìn)行特定部位地氧化、還原等化學(xué)轉(zhuǎn)化反應(yīng)，

也可以產(chǎn)生比較復(fù)雜的高份子化合物。5,發(fā)酵過程中對(duì)雜菌污染的防治至關(guān)重

要。除了必須對(duì)設(shè)備進(jìn)行嚴(yán)格消毒處理和空氣過濾外，反應(yīng)必須在無(wú)菌條件下

進(jìn)行。如果污染了雜菌，生產(chǎn)上就要遭到巨大的經(jīng)濟(jì)損失，要是感染了噬菌體,

對(duì)發(fā)酵就會(huì)造成更大的危害。于是維持無(wú)菌條件是發(fā)酵成敗的關(guān)鍵。6,微生

物菌種是進(jìn)行發(fā)酵的根本因素，通過變異和菌種篩選，可以獲得高產(chǎn)的優(yōu)良菌

株并使生產(chǎn)設(shè)備得到充分利用，也可以因此獲得也常規(guī)方法難以生產(chǎn)的產(chǎn)品。

7,工業(yè)發(fā)酵與其他工業(yè)相比，投資少，見效快，開可以取得顯著的經(jīng)濟(jì)效益。

基于以上特點(diǎn)，工業(yè)

發(fā)酵日益引起人們重視。和傳統(tǒng)的發(fā)酵工藝相比，現(xiàn)代發(fā)酵工程除了上述的發(fā)酵

特征之外更有其優(yōu)越性。除了使用微生物外，還可以用動(dòng)植物細(xì)胞和酶，也可以

用人工構(gòu)建的“工程菌'來(lái)進(jìn)行反應(yīng)；反應(yīng)設(shè)備也不只是常規(guī)的發(fā)酵罐，而是以

各種各樣的生物反應(yīng)器而代之，自動(dòng)化連續(xù)化程度高，使發(fā)酵水平在原有基礎(chǔ)上

有所提高和和創(chuàng)新。

發(fā)酵產(chǎn)品的生產(chǎn)特點(diǎn)：①普通操作條件比較溫和；②以淀粉、糖蜜等為主，

輔以少量有機(jī)、無(wú)機(jī)氮源為原料；③過程反應(yīng)以生命體的自動(dòng)調(diào)節(jié)方式進(jìn)行；④

能合成復(fù)雜的化合物如酶、光學(xué)活性體等；⑤能進(jìn)行一些特殊反應(yīng)，如官能團(tuán)導(dǎo)

入；⑥生產(chǎn)產(chǎn)品的生物體本身也是產(chǎn)物，含有多種物質(zhì)；⑦生產(chǎn)過程中，需要防

止雜菌污染；⑧菌種性能被改變，從而獲得新的反應(yīng)性能或者提高生產(chǎn)率。

6、培養(yǎng)成份用量的確定有什么規(guī)律？

答：(1)、參照微生物細(xì)胞內(nèi)元素的比例確定。培養(yǎng)基的成份配比雖然千

差萬(wàn)別，但都是用來(lái)培養(yǎng)某種微生物的，而不同類型的微生物細(xì)胞的成份比例其

實(shí)是有一定規(guī)律的。這些規(guī)律可以在很大程度上知道培養(yǎng)基的基本成份配比的選

擇。不同種類的微生物內(nèi)某種成份的含量其實(shí)是比較穩(wěn)定的。培養(yǎng)基最終會(huì)

被微生物吸收利用，因此其成份比例可以參考該種微生物的成份比例，至少可以

作為一個(gè)重要依據(jù)。此外，盡管不同種類的微生物的成份比例有一定的差異，但

還是有一定共性的。所以培養(yǎng)基中這集中營(yíng)養(yǎng)成份不管由什么具體物質(zhì)提供，其

用量基本上也符合這種關(guān)系。

(2)參照碳氮比確定。如果培養(yǎng)基中碳源過多，不利產(chǎn)物的合成。同樣碳

源過少或者氮源過少對(duì)發(fā)酵的影響也是不利的。不同種微生物碳氮比差異很大，

既是同種微生物在其不同生理時(shí)期對(duì)碳氮比要求也有不同，所以最適碳氮比要

通過試驗(yàn)確定，普通在100：(1—20)之間。

(3)、其他因素。培養(yǎng)基中一些用量極少的物質(zhì)普通要嚴(yán)格控制，不能過

量。例如，維生素、微量元素、某些生長(zhǎng)因子、前體等。具體用量要通過試驗(yàn)確

定。培養(yǎng)基中的一些成份的比例會(huì)影響培養(yǎng)基的某些理化性質(zhì)，這時(shí)要引起重

視。

7、敘述防止發(fā)酵菌種退化的具體條件措施有那些？

答：(1)控制傳代次數(shù)：盡量避免不必要的移種和傳代，并將必要的傳代

降低到最低限度，以減少細(xì)胞分裂過程中所產(chǎn)生的白發(fā)突變幾率。

(2)創(chuàng)造良好的培養(yǎng)條件：如在赤霉素生產(chǎn)菌g.fujikuroi的培養(yǎng)基中，

加入糖蜜、天冬酰胺、谷氨酰胺、5'-核甘酸或者甘露醇等豐富營(yíng)養(yǎng)物時(shí)，有防

止衰退效果。

(3)利用不易衰退的細(xì)胞傳代：對(duì)于放線菌和霉菌，菌絲細(xì)胞常含有幾個(gè)

細(xì)胞核，因此用菌絲接種就易浮現(xiàn)衰退，而抱子普通是單核的，用于接種就可避

免這種現(xiàn)象。

（4）采用有效的菌種保藏方法

（5）合理的育種：選育菌種是所處理的細(xì)胞應(yīng)使用單核的，避免使用多核

細(xì)胞;合理選擇誘變劑種類或者增加突變位點(diǎn)，以減少分離回復(fù)突變；在誘變處

理后及分離提純化，從而保證保藏菌種的純度。（6）、選用合適的培養(yǎng)基

在培養(yǎng)基中添加某種化學(xué)物質(zhì)可以防止菌種退化?；蛘哌x取營(yíng)養(yǎng)相對(duì)貧乏的培

養(yǎng)基在菌種保藏培養(yǎng)基，限制菌株的生長(zhǎng)代謝減少變異反而發(fā)生從而防止菌種

的退化。

15、結(jié)合所學(xué)《微生物發(fā)酵工程》課程論述某個(gè)工業(yè)發(fā)酵產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝流

程（可畫圖說(shuō)明），越詳細(xì)越好。

答：①培養(yǎng)基制備②、無(wú)菌空氣制備③、菌種與種子擴(kuò)大培

養(yǎng)④、發(fā)酵培養(yǎng)⑤、通過化學(xué)工程技術(shù)分離、提取、精制。

4、發(fā)酵工業(yè)上常用的氮源有那些，起何作用？

答：氮源主要用于構(gòu)成菌體細(xì)胞物質(zhì)（氨基酸，蛋白質(zhì)、核酸等）和含氮代

謝物。常用的氮源可分為兩大類：有機(jī)氮源和無(wú)機(jī)氮源。

1、無(wú)機(jī)氮源種類：氨鹽、硝酸鹽和氨水特點(diǎn)：微生物對(duì)它們的吸收快，所

以也稱之謂迅速利用的氮源。但無(wú)機(jī)氮源的迅速利用常會(huì)引起ph的變化如：

（nh4）2so4-*2nh3+2h2so4nano3+4h2-*nh3+2h2o+naoh無(wú)

機(jī)氮源被菌體作為氮源利用后，培養(yǎng)液中就留下了酸性或者堿性物質(zhì)，這種經(jīng)微

生物生理作用（代謝）后能形成酸性物質(zhì)的無(wú)機(jī)氮源叫生理酸性物質(zhì)，如硫酸

胺，若菌體代謝后能產(chǎn)生堿性物質(zhì)的則此種無(wú)機(jī)氮源稱為生理堿性物質(zhì)，如硝

酸鈉。正確使用生理酸堿性物質(zhì)，對(duì)穩(wěn)定和調(diào)節(jié)發(fā)酵過程的ph有積極作用。

所以選擇合適的無(wú)機(jī)氮源有兩層意義：滿足菌體生長(zhǎng)穩(wěn)定和調(diào)節(jié)發(fā)酵過程中的

ph2、有機(jī)氮源來(lái)源：工業(yè)上常用的有機(jī)氮源都是一些便宜的原料，花生餅粉、

黃豆餅粉、棉子餅粉、玉米漿、玉米蛋白粉、蛋白陳、酵母粉、魚粉、蠶蛹粉、

尿素、廢菌絲體和酒糟。成份復(fù)雜：除提供氮源外，有些有機(jī)氮源還提供大量

的無(wú)機(jī)鹽及生長(zhǎng)因子。有機(jī)氮源成份復(fù)雜可以從多個(gè)方面對(duì)發(fā)酵過程進(jìn)行影響，

而另一方面有機(jī)氮源的來(lái)源具有不穩(wěn)定性。所以在有機(jī)氮源選取時(shí)和使用過程中,

必須考慮原料的波動(dòng)對(duì)發(fā)酵的影響

8、如何選擇最適發(fā)酵溫度？

答：1、根據(jù)菌種及生長(zhǎng)階段選擇。微生物種類不同，所具有的酶系及其性

質(zhì)不同，所要求的溫度范圍也不同。在發(fā)酵前期由于菌量少，發(fā)酵目的是要盡快

達(dá)到大量的菌體，取稍高的溫度，促使菌的呼吸與代謝，使菌生長(zhǎng)迅速；在中期

菌量已達(dá)到合成產(chǎn)物的最適量，發(fā)酵需要延長(zhǎng)中期，從而提高產(chǎn)量，因此中期溫

度要稍低一些，可以推遲衰老。發(fā)酵后期，產(chǎn)物合成能力降低，延長(zhǎng)發(fā)酵周期沒

有必要，就又提高溫度，刺激產(chǎn)物合成到放罐。

2、根據(jù)培養(yǎng)條件選擇。溫度選擇還要根據(jù)培養(yǎng)條件綜合考慮，靈便選擇。

通氣條件差時(shí)可適當(dāng)降低溫度，使菌呼吸速率降低些，溶氧濃度也可高些。培養(yǎng)

基稀薄時(shí)，溫度也該低些。因?yàn)闇囟雀郀I(yíng)養(yǎng)利用快，會(huì)使菌過早自溶。

3、根據(jù)菌生長(zhǎng)情況菌生長(zhǎng)快，維持在較高溫度時(shí)間要短些；菌生長(zhǎng)慢，維

持較高溫度時(shí)間可長(zhǎng)些。培養(yǎng)條件適宜，如營(yíng)養(yǎng)豐富，通氣能滿足，那末前期溫

度可高些，以利于菌的生長(zhǎng)?？偟膩?lái)說(shuō)，溫度的選擇根據(jù)菌種生長(zhǎng)階段及培養(yǎng)條

件綜合考慮。要通過反復(fù)實(shí)踐來(lái)定出最適溫度。

9、不同時(shí)間染菌對(duì)發(fā)酵有什么影響，染菌如何控制？

答：（1）種子培養(yǎng)期染菌：由于接種量較小，生產(chǎn)菌生長(zhǎng)一開始不占優(yōu)勢(shì)，

而且培養(yǎng)液中幾乎沒有抗生素（產(chǎn)物）或者惟獨(dú)很少抗生素（產(chǎn)物）。于是它謹(jǐn)

防雜菌能力低，容易污染雜菌。如在此階段染菌，應(yīng)將培養(yǎng)液全部廢棄。（2）

發(fā)酵前期染菌：發(fā)酵前期最易染菌，且危害最大。原因發(fā)酵前期菌量不

很多，與雜菌沒有競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)；且還未合成產(chǎn)物（抗生素）或者產(chǎn)生很少，抵御

雜菌能力弱。

在這個(gè)時(shí)期要特殊警惕以制止染菌的發(fā)生。

染菌措施可以用降低培養(yǎng)溫度，調(diào)整補(bǔ)料量，用酸堿調(diào)ph值，

縮短培養(yǎng)周期等措施予以補(bǔ)救。如果前期染菌,且培養(yǎng)基養(yǎng)料消耗不多，可以重

新滅菌，補(bǔ)加一些營(yíng)養(yǎng)，重新接種再用。（3）發(fā)酵中期染菌：發(fā)酵中期染菌會(huì)

嚴(yán)重干擾產(chǎn)生菌的代謝。雜菌大量產(chǎn)酸，培養(yǎng)液ph下降；糖、氮消耗快，發(fā)酵

液發(fā)粘.菌餃自溶，產(chǎn)物分泌減少或者住手,有時(shí)甚至?xí)挂旬a(chǎn)牛的產(chǎn)物分解°

有時(shí)也會(huì)使發(fā)酵液發(fā)臭，產(chǎn)生大量泡沫。措施降溫培養(yǎng)，減少補(bǔ)料，

密切注意代謝變化情況。如果發(fā)酵單位到達(dá)一定水平可以提前放罐，或者抗生

素生產(chǎn)中可以將高單位的發(fā)酵液輸送一部份到染菌罐，抑制雜菌。（4）發(fā)

酵后期染菌：發(fā)酵后期發(fā)酵液內(nèi)已積累大量的產(chǎn)物，特殊是抗生素，對(duì)雜菌有

一定的抑制或者殺滅能力。因此如果染菌不多，對(duì)生產(chǎn)影響不大。如果染菌嚴(yán)

重，又破壞性較大，可以提前放罐。發(fā)酵染菌后的措施：染菌后的培養(yǎng)基必須

滅菌后才可放下水道。滅菌方法：可通蒸汽滅菌，也可加入過氧乙酸等化學(xué)滅菌

劑攪拌半小時(shí)，

力放下水道。否則山于各罐的管道相通，會(huì)造成其它罐的染菌，而且直接放下水

道也會(huì)造成空氣的污染而導(dǎo)致其它罐批染菌。

凡染菌的罐要找染菌的原因，對(duì)癥下藥，該罐也要徹底清洗，進(jìn)行空罐消

毒，才可進(jìn)罐。

染菌厲害時(shí)，車間環(huán)境要用石灰消毒，空氣用甲醛熏蒸。特殊，若染噬菌

體，空氣必須用甲醛蒸汽消毒1

12、什么是半連續(xù)培養(yǎng)，說(shuō)明其優(yōu)缺點(diǎn)。

答：在補(bǔ)料分批培養(yǎng)的基礎(chǔ)上間歇放掉部份發(fā)酵液（帶放）稱為半連續(xù)培養(yǎng)。

某些品種采取這種方式，如四環(huán)素發(fā)酵優(yōu)點(diǎn)放掉部份發(fā)酵液，再補(bǔ)入

部份料液，使代謝有害物得以稀釋有利于產(chǎn)物合成，提高了總產(chǎn)量。缺點(diǎn)代

謝產(chǎn)生的前體物被稀釋，提取的總體積增大

13、發(fā)酵工程主題微生物有什么特點(diǎn)？

答：發(fā)酵工程所利用的微生物主要是細(xì)菌、放線菌,酵母菌和霉菌

特點(diǎn)：（1）對(duì)周圍環(huán)境的溫度、壓強(qiáng)、滲透壓、酸堿度等條件有極大的適應(yīng)

能力（2）有極強(qiáng)的消化能力（3）有極強(qiáng)的繁殖能力

14、什么叫染菌，對(duì)發(fā)酵有什么影響，對(duì)提煉有什么危害？

答：染菌：發(fā)酵過程中除了生產(chǎn)菌以外，還有其它菌生長(zhǎng)繁殖染菌的

影響：發(fā)酵過程污染雜菌，會(huì)嚴(yán)重的影響生產(chǎn)，是發(fā)酵工業(yè)的致命傷。造成大量

原材料的浪費(fèi)，在經(jīng)濟(jì)上造成巨大損失。擾亂生產(chǎn)秩序，破壞生產(chǎn)計(jì)劃。遇到

連續(xù)染菌，特殊在找不到染菌原因往往會(huì)影響人們的情緒和生產(chǎn)積極性。影響產(chǎn)

品外觀及內(nèi)在質(zhì)量。發(fā)酵染菌對(duì)提煉的影響：染菌發(fā)酵液中含有比正常發(fā)

酵液更多的水溶性蛋白和其它雜質(zhì)。采用有機(jī)溶劑萃取的提煉工

藝，則極易發(fā)生乳化，很難使水相和溶劑相分離，影響進(jìn)一步提

純。采用直接離子交換樹脂的提取工藝，如鏈霉素、慶大霉素，

染菌后大量雜菌黏附在離子交換樹脂表面，或者被離子交換樹脂

附，大大降低離子交換樹脂的交換容量，而且有的雜菌很難用水

沖洗干凈，洗脫時(shí)與產(chǎn)物一起進(jìn)入洗脫液，影響進(jìn)一步提純

1、工業(yè)化菌種的要求？（1）原料便宜、生長(zhǎng)迅速、繁殖能力強(qiáng)、目的產(chǎn)物產(chǎn)

量高。（2）發(fā)酵中產(chǎn)生的泡沫少，易于控制培養(yǎng)條件，酶活性高，發(fā)酵周期短。

⑶抗雜菌和噬菌體的能力強(qiáng)。（4）不產(chǎn)生或者少產(chǎn)生與目標(biāo)產(chǎn)物相近的幅產(chǎn)物。

（5）菌種遺傳性穩(wěn)定，不易變異和退化⑹不產(chǎn)生任何有害的生物活性物質(zhì)和毒

素，保證安全生產(chǎn)。

2、自然界分離微生物的普通操作步驟？

樣品的采取一預(yù)處理一培養(yǎng)一菌落的選擇

初篩一復(fù)篩一性能的鑒定一菌種保臧

3、什么叫自然選育？自然選育在工藝生產(chǎn)中的意義？自然選育就是不經(jīng)人

工處理，利用微生物的自然突變進(jìn)行菌種選育的過程。自然選育在工業(yè)生產(chǎn)上的

意義：自然選育可以有效地用于高性能突變株的分離。自然選育雖然突變率很低，

但卻是工廠保證穩(wěn)產(chǎn)高產(chǎn)的重要措施。

4、什么是誘變育種？常用的誘變劑有哪些？什么是培養(yǎng)基?發(fā)酵培養(yǎng)基的特

點(diǎn)？用各種物理、化學(xué)的因素人工誘發(fā)基因突變進(jìn)行的篩選，稱為誘變育種誘變

劑：物理：紫外，x射線，P射線，快中子等化學(xué)：硫酸二乙酯（eds）,亞硝

基胭

5、發(fā)酹生產(chǎn)用的碳源有哪些？常用的糖類有哪些，各自有何特點(diǎn)？碳源：

糖類（淀粉、葡萄糖、蔗糖等）、油脂（動(dòng)、植物油）、有機(jī)酸（虎魄酸、檸檬

酸、乳酸、乙酸等）和低碳醇（甲醇、乙醇等）。糖類：葡萄糖，所有的微生物

都能利用葡萄糖，但是會(huì)引起葡萄糖效應(yīng)糖蜜，是制糖生產(chǎn)時(shí)的結(jié)晶母液，

它是制糖工業(yè)的副產(chǎn)物。主要含有蔗糖，總糖可達(dá)50%~75雙普通糖蜜分甘蔗

糖蜜和甜菜糖蜜葡萄糖蜜。淀粉、糊精，缺點(diǎn)：難利用、發(fā)酵液比較稠、普通〉2.佻

時(shí)加入一定的c（-淀粉酶。成份比較復(fù)雜，有直鏈淀粉和支鏈淀粉等等。優(yōu)點(diǎn)：

來(lái)源廣泛、價(jià)格低，可以解除葡萄糖效應(yīng)。

6、什么是生理性酸性物質(zhì)？什么是生理性堿性物質(zhì)？無(wú)機(jī)氮源被菌體作為

氮源利用后，培養(yǎng)液中就留下了酸性或者堿性物質(zhì)，這種經(jīng)微生物生理作用（代謝）

后能形成酸性物質(zhì)的無(wú)機(jī)氮源叫生理酸性物質(zhì)，如硫酸胺，若菌體代謝后能產(chǎn)生

堿性物質(zhì)的則此種無(wú)機(jī)氮源稱為生理堿性物質(zhì)，如硝酸鈉。正確使用生理酸堿性

物質(zhì)，對(duì)穩(wěn)定和調(diào)節(jié)發(fā)酵過程的ph有積極作用。

7、常用的無(wú)機(jī)氮源和有機(jī)氮源有哪些？有機(jī)氮源在發(fā)酵培養(yǎng)基中的作用？

常用的有機(jī)氮源有花生餅粉、黃豆餅粉、酵母粉、蛋白陳等；常用的無(wú)機(jī)氮源有

氨水、錢鹽和硝酸鹽。有機(jī)氮源在發(fā)酵培養(yǎng)基中的作用有：作為菌體生長(zhǎng)繁殖的

營(yíng)養(yǎng)；有些還是某些產(chǎn)物合成的前體

8、什么是前體？前體添加的方式？

前體指某些化合物加入到發(fā)酵培養(yǎng)基中，能直接彼微生物在生物合成過程中

合成到產(chǎn)物物份子中去，而其自身的結(jié)構(gòu)并沒有多大變化，但是產(chǎn)物的產(chǎn)量卻因

加入前體而有較大的提高。前體使用時(shí)普遍采用流加的方法。

9,什么是生長(zhǎng)因子？生長(zhǎng)因子來(lái)源？凡是微生物生長(zhǎng)不可缺少向細(xì)胞自身

不能合成的微量的有機(jī)物質(zhì)，如氨基酸、噂吟、嚓噬、維生素等均稱生長(zhǎng)因子。

有機(jī)氮源是這些生長(zhǎng)因子的重要來(lái)源

10、什么是產(chǎn)物促進(jìn)劑？產(chǎn)物促進(jìn)劑舉例？是指那些非細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的營(yíng)

養(yǎng)物，又非前體，但加入后卻能提高產(chǎn)量的添加劑。如：鏈霉素生產(chǎn)加巴比妥，

賴氨酸生產(chǎn)加紅霉素等。如加入微量的“九二。”可以促進(jìn)某些放線菌的生長(zhǎng)，

縮短發(fā)酵周期，提高抗生索的產(chǎn)量，囚此起到生長(zhǎng)因素的作用。還有在四環(huán)素發(fā)

醉中加入硫氟化葦，菌體呼吸強(qiáng)，糖代謝快，而抗生素合成受阻，所以降低菌體

呼吸，產(chǎn)量就會(huì)提高。

11、培養(yǎng)基設(shè)計(jì)的普通步驟？1.生態(tài)摹擬2.查閱文獻(xiàn)：直接、間接的信

息。3.借助優(yōu)選法或者正交試驗(yàn)法精心設(shè)計(jì)培養(yǎng)基的配方。4.試驗(yàn)比較：實(shí)驗(yàn)

規(guī)模普通由定性到定量，由小到大。搖瓶、反應(yīng)器培養(yǎng)基研究的兩個(gè)層次搖瓶

——培養(yǎng)基設(shè)計(jì)的第一步反應(yīng)器一最終的優(yōu)化的基礎(chǔ)配方

12、什么是種子的擴(kuò)大培養(yǎng)？種子擴(kuò)大培養(yǎng)是發(fā)酵生產(chǎn)的第一道工序。就是

將保存在砂土管、冷凍干燥管中處于休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌種接種到試管斜面活化

后，再經(jīng)過搖瓶及種子罐逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)而獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的純種過程。

13、種子擴(kuò)大培養(yǎng)的目的與要求、普通步驟？（1）目的：其任務(wù)是要得到

純而壯的培養(yǎng)物，獲得活力旺盛的、接種數(shù)量足夠的培養(yǎng)物。（2）種子的要求：

總量及濃度能滿足要求生理狀況穩(wěn)定，個(gè)體與群體活力強(qiáng)，移種至發(fā)酵后，能夠

迅速生長(zhǎng)無(wú)雜菌污染⑶普通步驟：休眠抱子一母斜面活化一搖瓶種子或者茄

子瓶斜面或者固體培養(yǎng)基抱子一一級(jí)種子罐一二級(jí)種子罐一發(fā)酵罐

14、在大規(guī)模發(fā)酵的種子制備過程中，為什么包括實(shí)驗(yàn)室階段和生產(chǎn)車間階

段？實(shí)驗(yàn)室階段：不用種子罐，所用的設(shè)備為培養(yǎng)箱、搖床等實(shí)驗(yàn)室常見設(shè)備，

在工廠這些培養(yǎng)過程普通都在菌種室完成，因此現(xiàn)象地將這些培養(yǎng)過程稱為實(shí)驗(yàn)

室階段的種子培養(yǎng)。對(duì)于不產(chǎn)芽抱和抱子的微生物，實(shí)驗(yàn)室階段的種子擴(kuò)培最終

是獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的菌體，如谷氨酸的種子培養(yǎng)。對(duì)于產(chǎn)抱子的微生物，獲

得一定數(shù)量和質(zhì)量的泡子或者一定數(shù)量和質(zhì)量的菌絲體。生產(chǎn)車間階段：種子培

養(yǎng)在種子罐里面進(jìn)行，普通在工程歸為發(fā)酵車間管理，因此形象地稱這些培養(yǎng)

過程

為生產(chǎn)車間階段。在生產(chǎn)車間階段，最終普通都是獲得一定數(shù)量的菌絲體。菌絲

體比抱子要有利：縮短發(fā)酵時(shí)間，有利于獲得好的發(fā)酵結(jié)果。

15、什么是接種量？接種量=移入種子的體積/接種后培養(yǎng)液的體積

17、什么是種齡？種齡確定的依據(jù)？種齡是指種子罐中培養(yǎng)的菌體開始移入

下一級(jí)種子罐或者發(fā)酵罐時(shí)的培養(yǎng)時(shí)間。原則：對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期末，細(xì)胞活力強(qiáng)，菌

體濃度相對(duì)較大，但是最終由實(shí)驗(yàn)結(jié)果定。

18、什么是接種、倒種、雙種？接種：接入種子罐后直接移種到發(fā)酵解。雙

種：兩個(gè)種子罐種子接種到一個(gè)發(fā)酵罐中。倒種：一部份種子來(lái)源于種子罐，一

部份來(lái)源于發(fā)酵罐。

19、什么是濕熱滅菌、分批滅菌、連續(xù)滅菌？

濕熱滅菌：直接用飽和蒸汽進(jìn)行滅菌。分批滅菌：就是將配制好的培養(yǎng)基放

在發(fā)酵罐或者其他裝置中，通入蒸汽將培養(yǎng)基和所用設(shè)備一起進(jìn)行加熱滅菌的

過程，通常也稱為實(shí)罐滅菌。連續(xù)滅菌：培養(yǎng)基在發(fā)酵罐外經(jīng)過一套連續(xù)滅菌設(shè)

備，以比分批滅菌高的溫度和較短的時(shí)間進(jìn)行快速連續(xù)加熱滅菌，并快速冷卻，

再立即輸入預(yù)先經(jīng)過空罐滅菌后的發(fā)酵罐中。

21、什么是菌體的比生長(zhǎng)速率？產(chǎn)物的比形成速率？基質(zhì)的比消耗速率？

菌體的比生長(zhǎng)速率：?jiǎn)挝环至康木w瞬時(shí)增量p=（dx/dt）/x；單位為1/h,

其中X—菌體濃度（g/1）產(chǎn)物的形成比速：?jiǎn)挝粫r(shí)間內(nèi)單位菌體形成產(chǎn)物（菌

體）的量n=（dp/dt）/x,；單位為1/h,其中p—產(chǎn)物濃度（g/1）基質(zhì)的比

消耗速率:單位時(shí)間內(nèi)單位菌體消耗基質(zhì)的量二（ds/dt）/x；單位為1/h,其中s—

底物濃度（g/1）

22、什么是monod方程其使用條件如何？各參數(shù)的意義與求解？當(dāng)培養(yǎng)基中

不存在抑制細(xì)胞生長(zhǎng)的物質(zhì)時(shí)，細(xì)胞的生長(zhǎng)速率與基質(zhì)濃度關(guān)系（monod方程式）

如下：p=pmaxs/（ks+s）p：菌體的生長(zhǎng)比速s：限制性基質(zhì)濃度ks：半飽

和常數(shù)pmax:最大比生長(zhǎng)速點(diǎn)monod方程的參數(shù)求解（雙倒數(shù)法）：將monod方

程取倒數(shù)可得：1/p=l/pmax+ks/pmaxs或者s/p=s/pmax+ks/pmax這

樣通過測(cè)定不同限制性基質(zhì)濃度下，微生物的比生長(zhǎng)速度，就可以通過回歸分

析計(jì)算出monod方程的兩個(gè)參數(shù)。

23、什么是一類發(fā)酵？二類發(fā)酵？三類發(fā)酵？

一類發(fā)酵：產(chǎn)物形成與底物利用直接相關(guān)，為生長(zhǎng)聯(lián)系型，又稱簡(jiǎn)單發(fā)醉型，

產(chǎn)物直接由碳源代謝而來(lái)，產(chǎn)物生成速度的變化與微生物對(duì)碳源利用速度的變化

是平行的，產(chǎn)物生成與微生物的生長(zhǎng)也是平行的。在這些發(fā)酵過程中，菌體的生

長(zhǎng)、基質(zhì)的消耗、產(chǎn)物的生成三個(gè)速度都有一個(gè)高峰，三高峰幾乎同時(shí)浮現(xiàn)。

二類發(fā)醉：產(chǎn)物形成與底物利用間接相關(guān)，為部份生長(zhǎng)聯(lián)系型，又稱中間發(fā)

酵型，產(chǎn)物不是碳源的直接氧化產(chǎn)物，而是菌體代謝的主流產(chǎn)物。它的特點(diǎn)是在

發(fā)酵的第一時(shí)期碳源大量消耗用于菌體的迅速增長(zhǎng)而產(chǎn)物的形成很少或者全無(wú)，

第二時(shí)期碳源大量消耗用于產(chǎn)物的高速合成及菌體的生長(zhǎng)。

三類發(fā)酵：產(chǎn)物形成與底物利用不相關(guān)，為非生長(zhǎng)聯(lián)系型，又稱復(fù)雜發(fā)醉型，

產(chǎn)物的生成在菌體生長(zhǎng)和基質(zhì)消耗完以后才開始，與菌體生長(zhǎng)不相關(guān)，與基質(zhì)消

耗無(wú)直接關(guān)系，所形成的產(chǎn)物為次級(jí)代謝產(chǎn)物。

24、引么是連續(xù)培養(yǎng)？什么是連續(xù)培養(yǎng)的稀釋率？由于新鮮培養(yǎng)基不斷補(bǔ)

充，所以不會(huì)發(fā)生營(yíng)養(yǎng)物的枯竭，另一方面，發(fā)酵液不斷取出，發(fā)酵罐內(nèi)的微生

物始終處于旺盛的指數(shù)生長(zhǎng)期，罐內(nèi)細(xì)胞濃度X、比生長(zhǎng)速率H、以及t,ph

等都保持恒定。稀釋率(d):補(bǔ)料速度與反應(yīng)器體積的比值(卜1)

25、為何氧容易成為好氧發(fā)酵的限制性因素？

氧是需氧微生物生長(zhǎng)所必需的。氧往往容易成為控制因素，是因?yàn)檠踉谒?/p>

的溶解度很低，培養(yǎng)基因含有大量的有機(jī)和無(wú)機(jī)物質(zhì)，氧的溶解度比水中還要更

低。在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期即使發(fā)醉液中的氧濃度達(dá)到飽和，若此時(shí)終止供氧，發(fā)醉液中

的溶氧可在幾分鐘內(nèi)全部耗盡，使溶氧成為控制因素。

26、比耗氧速度和呼吸強(qiáng)度的概念？

比耗氧速度：?jiǎn)挝毁|(zhì)量的細(xì)胞(干重)在單,立時(shí)間內(nèi)消耗氧的量即比耗氧速

率(呼吸強(qiáng)度)來(lái)表示：qo2=(qo2)maxXcl/(kO+cl)qo2比耗

氧速率(mmolo2/g菌?h),cl溶解氧濃度，KO氧的米氏常數(shù)(mol/m3),

(qo2)max最大比耗氧速率(mmolo2/g菌?h)

27、臨界溶氧濃度、氧飽和度的概念？臨界氧濃度：ccr臨界氧濃度：指

不影響菌的呼吸所允許的最低氧濃度。氧飽和度：發(fā)酵液中氧的濃度/臨界溶氧

溶度

28、影響微生物需氧的因素有哪些？

細(xì)胞濃度直接影響培養(yǎng)液的攝氧率，在分批發(fā)酵中攝氧率變化很大，不同生

長(zhǎng)階段需氧不同，對(duì)數(shù)生長(zhǎng)后期達(dá)最大值。培養(yǎng)基的成份和濃度顯著影響微生物

的攝氧率，碳源種類對(duì)細(xì)胞的需氧量有很大影響，普通葡萄糖的利用速度比其他

的糖要快。

影響沉降速度的因素：

①顆粒直徑②分散介質(zhì)粘度③兩相密度差④沉降設(shè)備尺寸行狀和壁效應(yīng)的

影響

29、發(fā)酵液中的體積氧傳遞方程？其中kla的物理意義是什么？以單位體積

的液體中所具有的氧的傳遞面積為a(m2/m3)otr=kla(c*-cl)kla以氧

濃度為推動(dòng)力的容積氧傳遞系數(shù)，反映了設(shè)備的供氧能力

30、如何調(diào)節(jié)搖瓶發(fā)酵的供氧水平？

往復(fù)，頻率80-120分/次，振幅8cm旋轉(zhuǎn)，偏心距轉(zhuǎn)速250rpm裝液量，一

般取1/10擺布：250ml,15-25ml；500ml,30ml；750ml,80ml

31、如何調(diào)節(jié)通氣攪拌發(fā)酵罐的供氧水平？

普通認(rèn)為，發(fā)酵初期較大的通風(fēng)和攪拌而產(chǎn)生過大的剪切力，對(duì)菌體的生長(zhǎng)

有時(shí)會(huì)產(chǎn)生不利的影響，所以有時(shí)發(fā)酵初期采用小通風(fēng)，停攪拌，非但有利于降

低能耗，而且在工藝上也是必須的。但是通氣增大的時(shí)間一定要把握好

32、氧的供需研究與反應(yīng)器設(shè)計(jì)與放大的關(guān)系？發(fā)酵過程放大艱難的原因

就在放大時(shí)不可能同時(shí)做到幾何相似、流體運(yùn)動(dòng)學(xué)相似和流體動(dòng)力學(xué)相似，當(dāng)在

小試研究時(shí)某一個(gè)對(duì)生產(chǎn)產(chǎn)生影響的重要因素沒有被觀察到，而這個(gè)因素恰恰在

放大時(shí)成為關(guān)鍵因子時(shí)，就會(huì)造成整個(gè)發(fā)酵過程的失敗(供氧、混合、剪切)。

20、在發(fā)酵過程中無(wú)菌空氣是如何獲得的？除去或者殺滅空氣中的微生物，

加熱滅菌、輻射殺菌、靜電除菌、過濾除菌。

33、發(fā)酵過程中溶氧濃度監(jiān)控的意義？

當(dāng)our(r)與do反向變化時(shí)，表明其限制因素為細(xì)胞水平的菌體代謝問題，當(dāng)

our(r)與do同向變化時(shí)，表明其限制因素為工程水平的氧傳遞問題。此時(shí)溶氧處

于臨界氧以下(這一結(jié)淪)可客觀地、動(dòng)態(tài)地把握臨界氧水平及氧平衡的制約因

素。

34、發(fā)酵過程糖代謝、氮代謝有什么規(guī)律，為什么？糖代謝：特殊是快速利

用的糖，分解成小份子酸、醇，使ph下降。糖缺乏，ph上升，是補(bǔ)料的標(biāo)志之

氮代謝：氨基酸被利用后產(chǎn)生nh3,ph會(huì)上升；尿素被分解成nh3,ph

上升。微生物生長(zhǎng)和產(chǎn)物合成與糖代謝有密切關(guān)系。糖的消耗反映產(chǎn)生菌的生長(zhǎng)

繁殖情況，反映產(chǎn)物合成的活力。菌體生長(zhǎng)旺盛糖耗一定快，殘?zhí)且簿徒档偷每?/p>

通過糖含量的測(cè)定，可以控制菌體生長(zhǎng)速率，可控制補(bǔ)糖來(lái)調(diào)節(jié)ph,促進(jìn)產(chǎn)物

合成，不致于盲目補(bǔ)糖，造成發(fā)酵不正常。氮利用快慢可分析出菌休生長(zhǎng)情況，

含氮產(chǎn)物合成情況。但是氮源太多會(huì)促使菌體大量生長(zhǎng)。有些產(chǎn)物合成受到過量

錢離子的抑制，因此必須控制適量的氮。通過氨基氮和氨氮的分析可控制發(fā)酵過

程，適時(shí)采取補(bǔ)氨措施。發(fā)酵后期氨基氮回升，這時(shí)就要放罐，否則影響提取過

程。

37、補(bǔ)料過多或者過少對(duì)發(fā)酵有什么影響?

投料過多造成菌體細(xì)胞大量生長(zhǎng)，無(wú)法穩(wěn)定的產(chǎn)生發(fā)酵產(chǎn)物，導(dǎo)致菌體生產(chǎn)

力下降，同時(shí)改變發(fā)酵液流變學(xué)性質(zhì)。如果補(bǔ)料過少,則使菌體過早進(jìn)入衰退期，

引起菌體衰老和自，同樣使生產(chǎn)力下降。

36、發(fā)酵過程為什么要補(bǔ)料？補(bǔ)些什么？

在分批培養(yǎng)過程中補(bǔ)入新鮮的料液，以克服營(yíng)養(yǎng)不足而導(dǎo)致的發(fā)酵過早結(jié)束

的缺點(diǎn)。在這樣一種系統(tǒng)中可以維持低的基質(zhì)濃度，避免快速利用碳源的阻遏效

應(yīng)；可以通過補(bǔ)料控制達(dá)到最佳的生長(zhǎng)和產(chǎn)物合成條件；還可以利用計(jì)算機(jī)控制

合理的補(bǔ)料速率，穩(wěn)定最佳生產(chǎn)工藝。發(fā)酵基質(zhì)和緩沖液等。

39、發(fā)酵過程中ph會(huì)不會(huì)發(fā)生變化為什么？

發(fā)酵過程中ph是不斷變化的

(1)糖代謝特殊是快速利用的糖，分解成小份子酸、醇，使Ph下降。糖缺

乏，ph上升，是補(bǔ)料的標(biāo)志之一

(2)氮代謝當(dāng)氨基酸中的-nh2被利用后ph會(huì)下降；尿素被分解成nh3,ph

上升，nh3利用后ph下降，當(dāng)碳源不足時(shí)氮源當(dāng)碳源利用ph上升。

(3)生理酸堿性物質(zhì)利用后ph會(huì)上升或者下降

(4)某些產(chǎn)物本身呈酸性或者堿性，使發(fā)酵液ph變化。如有機(jī)酸類產(chǎn)生

使ph下降，紅霉素、潔霉素、螺旋霉素等抗生素呈堿性，使ph上升。

(5)菌體自溶ph上升，發(fā)酵后期，ph上升

(6)雜菌的污染，ph下降

40、ph對(duì)發(fā)酵的影響表現(xiàn)在哪些方面？

(1)ph影響酶的活性。當(dāng)ph值抑制菌體某些酶的活性時(shí)使菌的新陳代謝

受阻。(2)ph影響微生物細(xì)胞膜所帶電荷。從而改變細(xì)胞膜的透性，影響微生

物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收及代謝物的排泄，因此影響新陳代謝的進(jìn)行。(3)ph值影

響培養(yǎng)基某些成份和中間代謝物的解離，從而影響微生物對(duì)這些物質(zhì)的利用。4)

ph值影響代謝方向。ph不同，往往引起菌體代謝過程不同，使代謝產(chǎn)物的質(zhì)量

和比例發(fā)生改變。例如黑曲霉在ph2飛時(shí)發(fā)酵產(chǎn)生檸檬酸，在ph近中性時(shí)，則

產(chǎn)生草酸。谷氨酸發(fā)酵，在中性和微堿性條件下積累谷氨酸，在酸性條件下則容

易形成谷氨酰胺和聯(lián)乙酰谷氨酰胺。(5)ph在微生物培養(yǎng)的不同階段有不同的

影響。

41、發(fā)酵過程的ph控制可以采取哪些措施?

（1）調(diào)節(jié)基礎(chǔ)培養(yǎng)基的配方。c/n、碳源科類和濃度（2）補(bǔ)料的控制,①

簡(jiǎn)單的加酸加堿：②補(bǔ)入無(wú)機(jī)氮源；③同時(shí)補(bǔ)入碳氮源。

42、根據(jù)微生物對(duì)溫度的依賴可分類成哪兒類微生物？不同微生物的生長(zhǎng)

對(duì)溫度的要求不同，根據(jù)它們對(duì)溫度的要求大致可分為四類：嗜冷菌適應(yīng)于0~

26c生長(zhǎng)，嗜溫菌適應(yīng)于1523c生長(zhǎng)，嗜熱菌適應(yīng)于37?65℃生長(zhǎng)，嗜高溫

菌適應(yīng)于65℃以上生長(zhǎng)。

44、發(fā)酵過程的溫度會(huì)不會(huì)變化？為什么？會(huì)。發(fā)酵中溫