第41講動物細胞工程

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1.（2023?全國）克隆猴“中中”和“華華”登上學(xué)術(shù)期刊《細胞》封面，表明我國的克隆技術(shù)再次走在世界前

列。“中中，，和“華華，，的誕生成功證明了（）

A.動物細胞的全能性B.動物細胞的再生能力

C.動物細胞核的全能性D.動物細胞的分化能力

【答案】C

【分析】全能性是指個體某個器官或組織已經(jīng)分化的細胞在適宜的條件下再生成完整個體（或分化為各種

細胞）的潛力。全能性原因：已分化的細胞都含有該物種所特有的全套的遺傳信息，都有發(fā)育成為完整個

體所必需的全部基因。

【詳解】高度分化的動物細胞，從整個細胞來說，它的全能性受到限制，但它的細胞核仍保持著全能性，

因為細胞核內(nèi)含有保持物種遺傳性狀所需要的全套遺傳物質(zhì)?！爸兄?'和"華華”就是用乳腺細胞的細胞核與去

核卵細胞重組形成的一個細胞發(fā)育而成的，這證明動物細胞的細胞核具有全能性。

故選Co

2.（2023秋?湖北?高三荊州中學(xué)校聯(lián)考階段練習(xí)）小鼠作為一種與人類基因組序列相似度較高的哺乳動物,

常用于人類某些疾病的研究。小鼠胚胎干細胞的培養(yǎng)過程如圖所示，下列敘述錯誤的是（）

A.胚胎干細胞具有分化為成年動物體內(nèi)的任何一種類型細胞的潛能

B.體外培養(yǎng)胚胎干細胞需提供的氣體環(huán)境是95%的CCh和5%的空氣

C.圖中胚胎干細胞分化后的組織移入小鼠替代病變器官屬于治療性克隆

D.圖中重組細胞重編程、分裂、分化最終產(chǎn)生的小鼠與患病鼠性狀相似

【答案】B

【分析】胚胎干細胞簡稱ES或EK細胞，來源于早期胚胎或原始性腺（即囊胚期的內(nèi)細胞團）。特點：具

有胚胎細胞的特性，體積較小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物

任何一種組織細胞。另一方面，在體外培養(yǎng)條件下，ES細胞可不斷增殖而不發(fā)生分化，可進行冷凍保存，

也可以進行某些遺傳改造。

【詳解】A、胚胎干細胞有全能性，具有分化為成年動物體內(nèi)的任何一種類型細胞的潛能，A正確；

B、體外培養(yǎng)胚胎干細胞需提供的氣體環(huán)境是95%的空氣和5%的CCh,B錯誤；

C、圖中胚胎干細胞分化后的組織移入小鼠替代病變器官屬于治療性克隆，C正確；

D、圖中重組細胞重編程、分裂、分化最終產(chǎn)生的小鼠與患病鼠性狀相似，因為細胞核來自患病鼠，D正確。

故選B。

3.（2023秋?遼寧?高三校聯(lián)考開學(xué)考試）精準爆破腫瘤細胞的“生物導(dǎo)彈”——ADC（抗體偶聯(lián)藥物）能對

腫瘤細胞進行選擇性殺傷，該物質(zhì)由抗體（導(dǎo)彈體）、藥物（核彈頭）和接頭三部分組成，ADC的作用機

制如圖。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）

體

抗

物

藥

頭

接

A.ADC的制備過程運用了細胞培養(yǎng)和細胞融合技術(shù)

B.獲得制備ADC中足夠數(shù)量的抗體需經(jīng)過多次篩選

C.ADC能精準地識別腫瘤細胞，進入癌細胞需要消耗ATP

D.癌細胞的凋亡是由于溶酶體中水解酶的水解作用

【答案】D

【分析】單克隆抗體的制備過程：（1）制備產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然

后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細胞。（2）獲得雜交瘤細胞：①將鼠的骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合；②

用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，該雜種細胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢

測。（4）將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（5）提取單克隆抗體：從細胞培養(yǎng)液或小

鼠的腹水中提取。

【詳解】A、ADC是抗體與藥物的偶聯(lián)物，其制備過程運用了細胞培養(yǎng)和細胞融合技術(shù)，A正確；

B、制備ADC中的抗體為單克隆抗體，至少涉及兩次篩選，第一次是利用選擇性培養(yǎng)基進行初步篩選出雜

交瘤細胞，第二次是利用克隆化培養(yǎng)和抗體檢測的方法篩選出既能大量增殖，又能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤

細胞，獲得制備ADC中足夠數(shù)量的抗體需經(jīng)過多次篩選，B正確；

C、ADC能精準地識別腫瘤細胞，進入癌細胞為胞吞，需要消耗ATP,C正確；

D、結(jié)合圖示可知，癌細胞的凋亡是由于溶酶體中水解酶將藥物與抗體水解，釋放藥物，藥物將癌細胞裂解,

D錯誤。

故選D。

4.（2023秋?江西?高三校聯(lián)考階段練習(xí)）下列有關(guān)細胞工程的敘述，正確的是（）

A.動物細胞融合可以直接用PEG處理，植物細胞不能直接用PEG處理

B.細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)可提高單個細胞初生代謝物的含量

C.莖尖組織培養(yǎng)得到的脫毒苗可以抵抗病毒侵染

D.動植物組織經(jīng)胰蛋白酶處理成為單個細胞后才能進行培養(yǎng)

【答案】A

【分析】1、植物組織培養(yǎng)過程是：離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、

芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細胞的全能性，屬于無性生殖。

2、動物細胞融合不同于植物細胞融合的方法是滅活的病毒。

【詳解】A、植物體細胞雜交過程中，需先用酶解法去除細胞壁獲得原生質(zhì)體后，才可以用PEG處理，進

行原生質(zhì)體的融合，所以動物細胞融合可以直接用PEG處理，植物細胞融合不能直接用PEG處理，A正確；

B、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)無法提高單個細胞初生代謝物的含量，但可以通過培養(yǎng)得到更多細胞從而提高初

生代謝物的總量，B錯誤；

C、脫毒苗病毒含量少，甚至沒有病毒，但不一定能抵抗病毒，C錯誤；

D、動物組織經(jīng)胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理成為單個細胞后才能進行培養(yǎng)，植物組織培養(yǎng)時不需要用胰蛋白

酶處理，D錯誤。

故選Ao

5.（2023春?全國?高二課堂例題）Ca2+水平升高可直接或通過激活重構(gòu)胚使處于MII期的卵母細胞恢復(fù)分

裂周期。由于持續(xù)高水平的成熟促進因子（MPF,一種蛋白激酶）存在，Mil期的卵母細胞不能進入末期。

下列相關(guān)分析錯誤的是（）

A.自然受精過程中，精子入卵可能促進了卵母細胞細胞質(zhì)基質(zhì)中Ca2+水平升高

B.在核移植過程中，通過電融合法可使供體細胞與去核卵母細胞融合形成重構(gòu)胚

C.Ca2+載體法可激活重構(gòu)胚是因為載體促進了Ca2+從膜外向膜內(nèi)轉(zhuǎn)運

D.蛋白酶合成抑制劑可通過抑制MPF的合成使重構(gòu)胚保持休眠

【答案】D

【分析】將供體細胞注入去核卵母細胞，通過電刺激使兩細胞融合，供體細胞進入受體卵母細胞內(nèi)構(gòu)建重

組胚胎，通過物理或化學(xué)方法（如電脈沖、鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等）激活受體細胞。

【詳解】A、由題可知，能使鈣離子水平升高的機制都可以激活重構(gòu)胚，而重構(gòu)胚是促進卵母細胞分裂的，

精子的進入也是促進卵母細胞分裂的，故精子的進入促進鈣離子內(nèi)流，提高細胞質(zhì)基質(zhì)中鈣離子水平；A

正確；

B、因為體細胞直接注入進去后細胞質(zhì)并沒有與卵母細胞融合，而是被質(zhì)膜分割開來，并不能使體細胞核表

現(xiàn)出全能性，所以需要電刺激使其質(zhì)膜融合，B正確；

C、精子的進入卵母細胞可促進其分裂，而精子的進入促進鈣離子內(nèi)流，提高了卵母細胞細胞質(zhì)基質(zhì)中鈣離

子水平；題干信息鈣離子水平升高可直接或通過激活重構(gòu)胚使處于MII期的卵母細胞恢復(fù)分裂周期；故Ca2+

載體法可激活重構(gòu)胚是因為載體促進了Ca2+從膜外向膜內(nèi)轉(zhuǎn)運；C正確；

D、由題意可知，持續(xù)高水平的成熟促進因子（MPF）存在，導(dǎo)致Mil期的卵母細胞不能進入末期，因此蛋

白酶合成抑制劑可通過抑制MPF的合成使重構(gòu)胚激活，D錯誤。

故選D。

6.（2023春?全國?高二課堂例題）細胞工程中，選擇合適的生物材料是成功的關(guān)鍵。下列敘述錯誤的是（）

A.選擇植物的愈傷組織進行誘變處理可獲得有用的突變體

B.選擇去核的卵母細胞作為核受體進行核移植可提高克隆動物的成功率

C.選擇高度分化的動物體細胞進行培養(yǎng)有利于獲得大量的細胞

D.選擇一定大小的植物莖尖進行組織培養(yǎng)可獲得脫毒苗

【答案】C

【分析】1、動物細胞核移植是指將動物的一個細胞的細胞核移入一個去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組

并發(fā)育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發(fā)育為克隆個體。

2、選用去核卵（母）細胞的原因：卵（母）細胞大，容易操作；卵（母）細胞質(zhì)多，營養(yǎng)豐富；含有促使

細胞全能性表達的物質(zhì)。

3、植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（微型繁殖、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育

（單倍體育種、突變體的利用）、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

【詳解】A、愈傷組織細胞處于分生狀態(tài)，易受外界環(huán)境因素影響，因此選擇植物的愈傷組織進行誘變處理,

再進行人工選擇，可獲得優(yōu)質(zhì)的突變體，A正確；

B、卵細胞中含有促進全能性表達的物質(zhì)，因此擇去核的卵細胞作為核受體進行核移植可提高克隆動物的成

功率，B正確；

C、高度分化的細胞已經(jīng)失去分裂能力，因此選擇高度分化的動物體細胞進行培養(yǎng)不利于獲得大量細胞，C

錯誤；

D、莖尖等分生區(qū)組織幾乎不含病毒，因此選擇一定大小的植物莖尖進行組織培養(yǎng)可獲得脫毒苗，D正確。

故選C。

7.（2023春.全國.高二課堂例題）絨毛膜促性腺激素（HCG）是女性懷孕后胎盤細胞分泌的一種糖蛋白。

研究人員利用HCG免疫健康小鼠，制備了用于早孕診斷的HCG單克隆抗體。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）

A.早孕診斷的原理是單克隆抗體與HCG特異性結(jié)合

B.與一般的血清抗體相比，單克隆抗體的優(yōu)點是特異性強、靈敏度高、可大量制備

C.制備單克隆抗體的過程中有兩次篩選，第二次篩選的目的是為了獲得雜交瘤細胞

D.單抗制備過程中主要運用的細胞工程技術(shù)包括動物細胞培養(yǎng)和動物細胞融合

【答案】C

【分析】單克隆抗體的制備過程是：首先利用已免疫的B淋巴細胞和小鼠的骨髓瘤細胞融合，再通過特定

的選擇培養(yǎng)基篩選獲得雜交瘤細胞，然后再通過細胞培養(yǎng)用專一抗體檢測篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交

瘤細胞。該雜交瘤細胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體，因此利用符合要求的雜交瘤細胞再進行體外

培養(yǎng)或體內(nèi)培養(yǎng)獲得單克隆抗體。

【詳解】A、單克隆抗體特異性強、靈敏度高，可以與HCG特異性結(jié)合，依據(jù)該原理，可用作早孕診斷，

A正確；

B、一般的血清抗體針對性不強，與一般的血清抗體相比，單克隆抗體的優(yōu)點是特異性強、靈敏度高、可大

量制備，B正確；

C、對雜交細胞一般要進行兩次篩選，第一次篩選是用選擇培養(yǎng)基進行篩選獲得雜交瘤細胞，第二次篩選的

方法為專一抗體檢測陽性和克隆化培養(yǎng)，最終獲得的雜交瘤細胞既能產(chǎn)生特異性抗體，又能無限增殖，c

錯誤；

D、動物細胞培養(yǎng)技術(shù)是動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)，動物細胞融合技術(shù)最重要的用途是制備單克隆抗體，D

正確。

故選Co

8.（2023春?廣西?高二校聯(lián)考階段練習(xí)）人肌紅蛋白（Myo）是早期診斷急性心肌梗塞的生化標(biāo)志物之一。為

制備抗Myo的單克隆抗體，科研人員通過細胞工程技術(shù)獲得雜交瘤細胞進行動物細胞培養(yǎng)，獲取上清液

進行抗體陽性檢測，檢測原理如圖所示。以下說法錯誤的是（）

注：酶標(biāo)抗體可與待檢測抗體結(jié)合，

且攜帶的酶可與相應(yīng)底物反應(yīng)顯色

A.將能表達Myo基因的細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合，用于制備抗Myo的單克隆抗體

B.單克隆抗體的制備解決了血清抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差的問題

C.抗體檢測過程中，將人肌紅蛋白作為抗原固定

D.根據(jù)是否顯色來判斷是否有抗Myo的單克隆抗體產(chǎn)生

【答案】A

【分析】單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免

疫的B淋巴細胞；誘導(dǎo)B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩

選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培

養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】A、已免疫的B細胞和骨髓瘤細胞融合制備單克隆抗體，表達Myo基因的細胞與小鼠骨髓瘤細胞

融合，不能制備抗Myo的單克隆抗體，A錯誤；

B、單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)勢在于特異性強，靈敏度高，可大量制備，B正確；

C、而抗原和抗體的結(jié)合具有特異性，故利用人肌紅蛋白作為抗原固定來檢測抗體，C正確；

D、酶標(biāo)抗體可與待檢測抗體結(jié)合，且攜帶的酶可與相應(yīng)底物反應(yīng)顯色，因此根據(jù)是否顯色來判斷是否有抗

Myo的單克隆抗體產(chǎn)生，D正確。

故選Ao

9.（2023?全國?校聯(lián)考一模）已知細胞合成DNA有D和S兩條途徑，其中D途徑能被氨基蝶吟阻斷。人

淋巴細胞中有這兩種DNA的合成途徑，但其一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細胞中盡管沒有S途徑，但其能不

斷分裂增殖。如圖是科研人員為制備抗新冠病毒單克隆抗體而設(shè)計的流程圖。下列敘述正確的是（）

小鼠骨髓瘤細胞

[lining一⑤篩選出所需細胞

并用于單抗生產(chǎn)

D-②混合③HAT④克隆化培養(yǎng)

并促融培養(yǎng)基

淋巴細胞

A.圖中過程①獲得的淋巴細胞都能產(chǎn)生抗新冠病毒的抗體

B.過程③使用的HAT培養(yǎng)基中要有糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，通常還需加入血

清等天然成分；除此之外，還必須加入動物激素

C.可分別從④的各個小室中提取抗體，與新冠病毒混合，出現(xiàn)陰性反應(yīng)的小室中的細胞就是所需的雜

交瘤細胞

D.制備的單克隆抗體可以用于新冠病毒的檢測，利用了抗原抗體特異性結(jié)合的原理

【答案】D

【分析】在制備單克隆抗體時，首先要給小鼠注射相應(yīng)抗原，產(chǎn)生相應(yīng)的漿細胞，然后將漿細胞與骨髓瘤

細胞融合，經(jīng)過選擇培養(yǎng)基兩次篩選，最后獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞。在單克隆抗體的制備過程

中，使用了動物細胞培養(yǎng)和動物細胞融合等動物細胞工程技術(shù)。

【詳解】A、圖中過程①獲得的淋巴細胞不都能產(chǎn)生抗新冠病毒的抗體，A錯誤；

B、過程③使用的HAT培養(yǎng)基中要有糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，通常還需加入血清

等天然成分；該培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，還需要加入氨基蝶吟以抑制骨髓瘤細胞的D途徑，使培養(yǎng)基中只有

雜交瘤細胞能增殖，B錯誤；

C、④過程是篩選能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細胞，可分別從各個小室中提取抗體，與新冠病毒混合，出現(xiàn)

抗原抗體雜交帶（陽性）的小室中的細胞就是所需的雜交瘤細胞，C錯誤；

D、抗體能與引起它產(chǎn)生的抗原發(fā)生特異性結(jié)合反應(yīng)，制備的單克隆抗體可以用于新冠病毒的檢測，就是利

用了抗原抗體能發(fā)生特異性結(jié)合的原理，D正確。

故選D。

10.（2023秋?北京?高三北京二中?？茧A段練習(xí)）科研工作者利用禽流感病毒蛋白制備出單克隆抗體。下列

相關(guān)敘述正確的是（）

A.用動物細胞培養(yǎng)液培養(yǎng)禽流感病毒，經(jīng)分離純化獲得抗原蛋白

B.多次注射適宜濃度的抗原免疫小鼠，以獲得更多的漿細胞

C.將單個雜交瘤細胞接種到小鼠腹腔培養(yǎng)可獲得多種單克隆抗體

D.為達到預(yù)防禽流感的目的，需向未患病家禽注射所得抗體

【答案】B

【分析】單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免

疫的B淋巴細胞；誘導(dǎo)B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩

選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培

養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】A、禽流感病毒沒有細胞結(jié)構(gòu)，不能獨立代謝，因此不能用動物細胞培養(yǎng)液培養(yǎng)禽流感病毒，A錯

誤；

B、由于二次免疫會產(chǎn)生更多的記憶細胞和抗體，因此多次注射適宜濃度的抗原免疫小鼠，可以獲得更多的

記憶細胞形成的漿細胞，再由漿細胞與骨髓瘤細胞融合形成雜交瘤細胞，最后由雜交瘤細胞產(chǎn)生大量的單

一抗體，屬于單克隆抗體，B正確；

C、一個雜交瘤細胞只能產(chǎn)生一種抗體，因此將單個雜交瘤細胞接種到小鼠腹腔培養(yǎng)只能獲得一種單克隆抗

體，C錯誤；

D、為達到預(yù)防禽流感的目的，需向未患病家禽注射相應(yīng)的抗原制成的疫苗，使其產(chǎn)生主動免疫，而注射抗

體屬于被動免疫，常用于免疫治療，D錯誤。

故選B。

11.（2023春?全國?高二課堂例題）將Oct3/4、Sox2、c-Myc和KIf4基因通過逆轉(zhuǎn)錄病毒轉(zhuǎn)入小鼠成纖維

細胞后，置于培養(yǎng)胚胎干細胞（ES細胞）的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。2~3周后，細胞會呈現(xiàn)出與ES細胞類似的形態(tài)

和活躍分裂能力，這樣的細胞稱為誘導(dǎo)多能干細胞（iPS細胞）。下列說法錯誤的是（）

A.從獲取途徑看，iPS細胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細胞

B.體細胞轉(zhuǎn)化成的iPS細胞用于自身疾病的治療，有低免疫排斥的優(yōu)點

C.欲驗證iPS細胞的產(chǎn)生是由于外源基因的作用，應(yīng)設(shè)置不轉(zhuǎn)入外源基因的對照組

D.欲比較上述4種基因誘導(dǎo)iPS細胞時作用的大小，應(yīng)設(shè)置分別轉(zhuǎn)入1種基因的四個實驗組和同時轉(zhuǎn)

入4種基因的對照組

【答案】D

【分析】胚胎干細胞具有胚胎細胞的特性，在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小，細胞核大，核仁明顯；在功能上，具

有發(fā)育的全能性，可分化為成年動物體內(nèi)任何一種組織細胞。另外，在體外培養(yǎng)的條件下，可以增殖而不

發(fā)生分化，可進行冷凍保存，也可進行遺傳改造。

【詳解】A、由于iPS細胞具有活躍的分裂能力，故iPS細胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細胞，A正確；

B、體細胞轉(zhuǎn)化成的iPS細胞用于自身疾病的治療，為自身細胞，因此有低免疫排斥的優(yōu)點，B正確；

C、欲驗證iPS細胞的產(chǎn)生是由于外源基因的作用，自變量為是否含有外源基因，應(yīng)設(shè)置不轉(zhuǎn)入外源基因的

對照組，C正確；

D、欲比較上述4種基因誘導(dǎo)iPS細胞時作用的大小，應(yīng)設(shè)置分別轉(zhuǎn)入1種基因的四個實驗組和不轉(zhuǎn)入4種

基因的對照組，D錯誤。

故選D。

12.（2023春?全國?高二課堂例題）下圖為動物成纖維細胞的培養(yǎng)過程示意圖。下列敘述正確的是（）

①切取組織②制備細胞懸浮液③原代培養(yǎng)④傳代培養(yǎng)

A.步驟①操作不需要在無菌環(huán)境中進行

B.步驟②用鹽酸溶解細胞間物質(zhì)使細胞分離

C.步驟③到④常用胰蛋白酶處理

D.步驟④培養(yǎng)中，細胞之間相互接觸能促進細胞的分裂

【答案】C

【分析】動物細胞培養(yǎng)過程：取動物組織塊一剪碎組織一用胰蛋白酶處理分散成單個細胞一制成細胞懸液

一轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）1放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)一貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成細

胞懸液一轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）一放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

【詳解】A、動物細胞培養(yǎng)過程需要無菌操作，故步驟①的操作需要在無菌環(huán)境中進行，A錯誤；

B、動物細胞培養(yǎng)過程需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理動物組織，分散成單個細胞，制成細胞懸液，B錯

誤；

C、傳代培養(yǎng)時需要用胰蛋白酶處理貼壁生長的細胞，使之分散成單個細胞，再分瓶培養(yǎng)，故步驟③到④的

分瓶操作前常用胰蛋白酶處理，C正確；

D、步驟④為傳代培養(yǎng)過程，在該過程中，貼壁細胞會發(fā)生接觸抑制細胞分裂的現(xiàn)象，D錯誤。

故選C。

13.（2023?遼寧?統(tǒng)考高考真題）大量懸浮培養(yǎng)產(chǎn)流感病毒的單克隆細胞，可用于流感疫苗的生產(chǎn)。下列敘

述錯誤的是（）

A.懸浮培養(yǎng)單克隆細胞可有效避免接觸抑制

B.用于培養(yǎng)單克隆細胞的培養(yǎng)基通常需加血清

C.當(dāng)病毒達到一定數(shù)量時會影響細胞的增殖

D.培養(yǎng)基pH不會影響單克隆細胞的病毒產(chǎn)量

【答案】D

【分析】培養(yǎng)動物細胞使用合成培養(yǎng)基時需要加入血清等一些天然成分，必須保證環(huán)境是無菌、無毒的，

培養(yǎng)液還需要定期更換。。2是細胞代謝所必需的，CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。細胞貼附在培養(yǎng)瓶的

瓶壁上稱為細胞貼壁，貼壁細胞在生長增殖時會發(fā)生接觸抑制的現(xiàn)象。

【詳解】A、懸浮培養(yǎng)單克隆細胞，可以保證足夠的氣體交換，通過振蕩或轉(zhuǎn)動裝置使細胞始終處于分散懸

浮于培養(yǎng)液內(nèi)，可有效避免接觸抑制，A正確；

B、由于細胞的生長是比較復(fù)雜的過程，血清中含有一些必須的因子，用于培養(yǎng)單克隆細胞的培養(yǎng)基通常需

加血清，B正確；

C、病毒借助于細胞進行繁殖，利用了活細胞的物質(zhì)、能量、酶等，當(dāng)病毒達到一定數(shù)量時細胞的生命活動

受到影響，會影響細胞的增殖，C正確；

D、細胞的正常生命活動需要適宜的pH,培養(yǎng)基pH會影響細胞代謝，進而影響單克隆細胞的病毒產(chǎn)量，D

錯誤。

故選D。

14.（2023秋?福建龍巖?高三上杭一中?？茧A段練習(xí)）Graves病（GD）可導(dǎo)致甲狀腺功能亢進。研究發(fā)現(xiàn),

GD患者甲狀腺細胞表面表達大量細胞間黏附分子1（ICAM-1）,導(dǎo)致甲狀腺腫大?？蒲腥藛T通過制備單克

隆抗體，對治療GD進行了嘗試。

（1）用ICAM-1作為抗原間隔多次免疫若干只小鼠，幾周后取這些免疫小鼠的血清，分別加入多孔培養(yǎng)板的

不同孔中，多孔培養(yǎng)板中需加入以檢測這些小鼠產(chǎn)生的抗體。依據(jù)反應(yīng)結(jié)果，選出抗原一抗體反應(yīng)

最（填“強”或“弱”）的培養(yǎng)孔所對應(yīng)的小鼠M。

（2）取小鼠M的脾臟細胞制成細胞懸液，與實驗用骨髓瘤細胞進行融合，用選擇培養(yǎng)基篩選得到具有

能力的細胞。核酸合成有兩個途徑，物質(zhì)A可以阻斷其中的全合成途徑（如圖）。正常細胞內(nèi)含有補救合

成途徑所必需的轉(zhuǎn)化酶和激酶，制備單克隆抗體時選用的骨髓瘤細胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶?？捎眉尤際、A、T三

種物質(zhì)的“HAT培養(yǎng)基”篩選出特定的雜交瘤細胞。

糖和

全合成途徑：

氨基酸

A（阻斷）核

昔一DNA

酸

補救合成途徑：H、T轉(zhuǎn)化酶、激酶

融合前將部分培養(yǎng)細胞置于含HAT的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時間后培養(yǎng)基中（填“有”或“無”）骨髓

瘤細胞生長，說明培養(yǎng)基符合實驗要求。雜交瘤細胞可以在HAT培養(yǎng)基上大量增殖的原因是。

（3）將獲得的上述細胞在多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng)，用ICAM-1檢測，從中選擇的雜交瘤細胞，將其植入小

鼠腹腔中進行克隆培養(yǎng)，一段時間后從小鼠腹水中提取實驗用抗體。

【答案】⑴ICAM-1強

（2）無限增殖無雜交瘤細胞可以進行補救合成途徑

（3）大量產(chǎn)生抗ICAM-1抗體

【分析】單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫

能力的B淋巴細胞，利用動物細胞融合技術(shù)將免疫的B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合。單克隆抗體制備過程

中的兩次篩選：第一次篩選，利用特定選擇培養(yǎng)基篩選，獲得雜交瘤細胞，即AB型細胞（A為B淋巴細

胞，B為骨髓瘤細胞）,不需要A、B、AA、BB型細胞；第二次篩選，利用克隆化培養(yǎng)和抗體檢測篩選，

獲得產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞。

【詳解】（1）抗原和抗體結(jié)合具有特異性，多孔培養(yǎng)板中需加入ICAM-1以檢測小鼠是否產(chǎn)生抗ICAM-1

的抗體。依據(jù)反應(yīng)結(jié)果，選出抗原-抗體反應(yīng)最強的培養(yǎng)孔所對應(yīng)的小鼠M。

(2)B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合后具備了骨髓瘤細胞無限增殖的特點，因此用選擇培養(yǎng)基篩選得到具有

無限增殖能力的細胞。制備單克隆抗體時選用的骨髓瘤細胞中缺乏轉(zhuǎn)化酶，無法進行補救合成途徑，且物

質(zhì)A阻斷了全合成途徑，故在HAT培養(yǎng)基中無骨髓瘤細胞生長。雜交瘤細胞含有補救合成途徑所必需的轉(zhuǎn)

化酶和激酶，可以進行補救合成途徑，可以在HAT培養(yǎng)基上大量繁殖。

(3)根據(jù)抗原和抗體結(jié)合的特異性，用ICAM-1檢測，從中選擇大量產(chǎn)生抗ICAM-1抗體的雜交瘤細胞，

植入小鼠腹腔中克隆培養(yǎng)，一段時間后從小鼠腹水中提取實驗用抗體。

15.(2023春?江蘇鹽城?高二校聯(lián)考期中)下圖為科研工作者利用小鼠制備H7N9禽流感病毒單克隆抗體的

過程。請據(jù)圖回答有關(guān)問題：

(1)圖中X細胞一般指,與植物體細胞雜交相比，誘導(dǎo)X細胞和Y細胞融合還可采用o

動物細胞培養(yǎng)時，通常要在培養(yǎng)液中添加一定量的，以防培養(yǎng)過程中的污染；還需要放入二氧化

碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，CCh的主要作用是o貼滿瓶壁的細胞需要重新用酶處理，然后分瓶繼

續(xù)培養(yǎng)，這樣的培養(yǎng)過程通常被稱為。

(2)單克隆抗體的制備過程需要經(jīng)過多次篩選，首先用特定的選擇性培養(yǎng)基篩選出______，還需再次篩選，

最終獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞，選出符合要求的細胞后，可在體外條件下或注射到

進行增殖培養(yǎng)。

(3)利用上述技術(shù)生產(chǎn)的單克隆抗體可制作成診斷盒，用于準確、快速診斷H7N9禽流感病毒的感染者，這種

診斷運用了技術(shù)，這體現(xiàn)了單克隆抗體、的特性。

【答案】(1)骨髓瘤細胞滅活的病毒抗生素維持培養(yǎng)液的pH膠原蛋白酶或胰蛋

白酶傳代培養(yǎng)

(2)雜交瘤細胞小鼠腹腔

(3)抗原一抗體雜交特異性強靈敏度高

【分析】分析題圖：采用基因工程技術(shù)將H7N9病毒的抗原基因?qū)胧荏w細胞，并使之表達；B淋巴細胞能

產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖，而骨髓瘤細胞能無限增殖，但不能產(chǎn)生抗體，因此采用細胞融合技術(shù)將兩者

融合形成雜交瘤細胞，既可產(chǎn)生抗體，也能無限增殖，所以圖中X細胞表示骨髓瘤細胞，Y細胞表示B淋

巴細胞。

【詳解】(1)X細胞具有無限增殖的能力，一般選擇骨髓瘤細胞。誘導(dǎo)X細胞和Y細胞融合可采用化學(xué)試

劑聚乙二醇(PEG)、輔助離心震動電刺激等物理方法，還可用滅活的病毒誘導(dǎo)其融合，即與植物體細胞雜

交相比，讓動物細胞融合特有的方法是滅活的病毒誘導(dǎo)細胞融合。動物細胞培養(yǎng)時，通常還要在細胞培養(yǎng)

液中添加一定量的抗生素，防止細菌污染；還需要放入二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，C02的主要作用是維持培養(yǎng)

液的pH；貼滿瓶壁的細胞需要膠原蛋白酶或胰蛋白酶處理，然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng)，這樣的培養(yǎng)過程通常被稱

為傳代培養(yǎng)。

（2）單克隆抗體的制備過程需要經(jīng)過多次篩選，首先用特定的選擇性培養(yǎng)基（HAT培養(yǎng)基）篩選出雜交瘤

細胞，該培養(yǎng)基上B細胞和B細胞融合細胞、瘤細胞和瘤細胞融合細胞不能生長。還需進行克隆化培養(yǎng)和

專一抗體檢測（使用特定的抗原決定簇進行檢測），最終獲得足夠數(shù)量的能分泌所需（特異性/專一性）抗

體的細胞，選出符合要求的細胞后，可在體外條件下培養(yǎng)或注射到小鼠的腹腔內(nèi)進行增殖培養(yǎng)。

（3）單克隆抗體能與抗原特異性結(jié)合，利用上述技術(shù)生產(chǎn)的單克隆抗體可制作成診斷盒，用于準確、快速

診斷H7N9禽流感病毒的感染者，這種診斷運用了抗原一抗體雜交技術(shù)，這體現(xiàn)了單克隆抗體理化性質(zhì)單

一、與抗原結(jié)合的特異性強、靈敏度高的特性。

—真題實戰(zhàn)演練

1.（2023?遼寧?統(tǒng)考高考真題）大量懸浮培養(yǎng)產(chǎn)流感病毒的單克隆細胞，可用于流感疫苗的生產(chǎn)。下列敘

述錯誤的是（）

A.懸浮培養(yǎng)單克隆細胞可有效避免接觸抑制

B.用于培養(yǎng)單克隆細胞的培養(yǎng)基通常需加血清

C.當(dāng)病毒達到一定數(shù)量時會影響細胞的增殖

D.培養(yǎng)基pH不會影響單克隆細胞的病毒產(chǎn)量

【答案】D

【分析】培養(yǎng)動物細胞使用合成培養(yǎng)基時需要加入血清等一些天然成分，必須保證環(huán)境是無菌、無毒的，

培養(yǎng)液還需要定期更換。。2是細胞代謝所必需的，CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。細胞貼附在培養(yǎng)瓶的

瓶壁上稱為細胞貼壁，貼壁細胞在生長增殖時會發(fā)生接觸抑制的現(xiàn)象。

【詳解】A、懸浮培養(yǎng)單克隆細胞，可以保證足夠的氣體交換，通過振蕩或轉(zhuǎn)動裝置使細胞始終處于分散懸

浮于培養(yǎng)液內(nèi)，可有效避免接觸抑制，A正確；

B、由于細胞的生長是比較復(fù)雜的過程，血清中含有一些必須的因子，用于培養(yǎng)單克隆細胞的培養(yǎng)基通常需

加血清，B正確；

C、病毒借助于細胞進行繁殖，利用了活細胞的物質(zhì)、能量、酶等，當(dāng)病毒達到一定數(shù)量時細胞的生命活動

受到影響，會影響細胞的增殖，C正確；

D、細胞的正常生命活動需要適宜的pH,培養(yǎng)基pH會影響細胞代謝，進而影響單克隆細胞的病毒產(chǎn)量，D

錯誤。

故選D。

2.（2022.山東.高考真題）如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯(lián)后

重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體，簡稱雙抗。下列說法錯誤的是（）

抗體1抗體2抗體3

A.雙抗可同時與2種抗原結(jié)合

B.利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細胞

C.篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原

D.同時注射2種抗原可刺激B細胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細胞

【答案】D

【分析】單克隆抗體的制備過程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)

免疫的B淋巴細胞；誘導(dǎo)B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，

篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從

培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】A、根據(jù)抗原和抗體發(fā)生特異性結(jié)合的原理推測，雙抗可同時與2種抗原結(jié)合，A正確；

B、根據(jù)抗原與抗體能夠發(fā)生特異性結(jié)合的特性，利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細胞，從而使藥物

發(fā)揮相應(yīng)的作用，B正確；

C、在兩種不同的抗原刺激下，B細胞增殖、分化產(chǎn)生不同的漿細胞分泌形成兩種抗體，因此，篩選雙抗時

需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原來進行抗原-抗體檢測，從而實現(xiàn)對雙抗的篩選，C正確；

D、同時注射2種抗原可刺激B細胞分化形成不同的漿細胞，而不是分化成產(chǎn)雙抗的漿細胞，D錯誤。

故選D。

3.（2021?江蘇?高考真題）下列關(guān)于哺乳動物胚胎工程和細胞工程的敘述，錯誤的是（）

A.細胞培養(yǎng)和早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液中通常需要添加血清等物質(zhì)

B.早期胚胎需移植到經(jīng)同期發(fā)情處理的同種雌性動物體內(nèi)發(fā)育成個體

C.猴的核移植細胞通過胚胎工程已成功地培育出了克隆猴

D.將骨髓瘤細胞和B淋巴細胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)后融合的細胞即為雜交瘤細胞

【答案】D

【分析】1、胚胎移植的生理基礎(chǔ)（1）供體與受體相同的生理變化，為供體的胚胎植入受體提供了相同的

生理環(huán)境；（2）胚胎在早期母體中處于游離狀態(tài)，這就為胚胎的收集提供了可能；（3）子宮不對外來胚

胎發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能；（4）胚胎遺傳性狀不受受體任何影響。

2、漿細胞能夠分泌抗體，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤細胞具有無限增殖的能力，因此利用動物細胞融

合技術(shù)將漿細胞和骨髓瘤細胞融合成雜交瘤細胞，利用該細胞制備單克隆抗體。

【詳解】A、細胞培養(yǎng)和早期胚胎培養(yǎng)的培養(yǎng)液中通常需添加血清等物質(zhì)，A正確；

B、早期胚胎需移植到經(jīng)同期發(fā)情處理的同種雌性動物體內(nèi)發(fā)育成個體，B正確；

C、我國利用核移植技術(shù)成功培養(yǎng)出克隆猴“中中”和“華華”，C正確；

D、將骨髓瘤細胞和B淋巴細胞混合，經(jīng)誘導(dǎo)融合后的細胞不都是雜交瘤細胞，還有B細胞自身融合的細

胞、骨髓瘤細胞自身融合的細胞等，D錯誤。

故選D。

4.(2021?浙江?統(tǒng)考高考真題)將蝌蚪腸細胞的細胞核移植到去核的蛙卵中，形成重建的“合子”。有些“合

子”發(fā)育成正常的蝌蚪，而單獨培養(yǎng)腸細胞卻不能發(fā)育成蝌蚪。下列敘述錯誤的是()

A.腸細胞不能表達全能性是受某些物質(zhì)的限制

B.“合子”第一次分裂后形成的細胞已失去全能性

C.“合子”發(fā)育成正常蝌蚪的過程中伴隨著細胞分化

D.細胞核具有全能性是由于其含有該物種的全套基因

【答案】B

【分析】細胞的全能性是指細胞經(jīng)分裂和分化后，仍具有產(chǎn)生完整有機體或分化成其他各種細胞的潛能和特

性，植物的體細胞具有全能性，動物的體細胞不表現(xiàn)出全能性，但細胞核具有全能性。

【詳解】A、動物細胞經(jīng)過多次分裂后，細胞質(zhì)的成分已經(jīng)發(fā)生改變，原本能激發(fā)細胞全能性的物質(zhì)已經(jīng)消

失，故腸細胞不能表達全能性是受到了細胞內(nèi)物質(zhì)的限制，A正確；

B、“合子”第一次分裂、第二次分裂后形成的細胞仍具有全能性，B錯誤；

C、“合子”發(fā)育成正常蝌蚪個體的過程中，需要通過細胞分裂增加細胞的數(shù)量，通過細胞分化增加細胞的種

類，C正確；

D、雖然細胞經(jīng)過多次分裂失去了激發(fā)全能性的物質(zhì)，但細胞核仍含有該物種的全套基因，故動物細胞核具

有全能性，D正確。

故選B。

【點睛】

5.(2023?海南?高考真題)某團隊通過多代細胞培養(yǎng)，將小鼠胚胎干細胞的Y染色體去除，獲得XO胚胎

干細胞，再經(jīng)過一系列處理，使之轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣毎?。下列有關(guān)敘述錯誤的是()

A.營養(yǎng)供應(yīng)充足時，傳代培養(yǎng)的胚胎干細胞不會發(fā)生接觸抑制

B.獲得XO胚胎干細胞的過程發(fā)生了染色體數(shù)目變異

C.XO胚胎干細胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣毎倪^程發(fā)生了細胞分化

D.若某瀕危哺乳動物僅存雄性個體，可用該法獲得有功能的卵母細胞用于繁育

【答案】A

【分析】動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：

(1)充足的營養(yǎng)供給一微量元素、無機鹽、糖類、氨基酸、促生長因子、血清等。

(2)適宜的溫度：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2?7.4。

(3)無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應(yīng)進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過

程中的污染。止匕外，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害。

(4)氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2.。2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。

【詳解】A、營養(yǎng)供應(yīng)充足時，傳代培養(yǎng)的胚胎干細胞也會發(fā)生接觸抑制，A錯誤；

B、XO胚胎干細胞中丟失了Y染色體，因而該細胞的獲得過程發(fā)生了染色體數(shù)目變異，B正確；

C、X0胚胎干細胞轉(zhuǎn)變?yōu)橛泄δ艿穆涯讣毎倪^程發(fā)生了細胞分化，即細胞的功能發(fā)生了特化，因而發(fā)生

了細胞分化，C正確；

D、若某瀕危哺乳動物僅存雄性個體，可用該法，即獲得有功能的卵母細胞，進而用于繁育，實現(xiàn)瀕危物種

的保護，D正確。

故選A。

6.（2022?福建?統(tǒng)考高考真題）我國科研人員在航天器微重力環(huán)境下對多能干細胞的分化進行了研究，發(fā)

現(xiàn)與正常重力相比，多能干細胞在微重力環(huán)境下加速分化為功能健全的心肌細胞。下列敘述錯誤的是（）

A.微重力環(huán)境下多能干細胞和心肌細胞具有相同的細胞周期

B.微重力環(huán)境下進行人體細胞的體外培養(yǎng)需定期更換培養(yǎng)液

C.多能干細胞在分化過程中蛋白質(zhì)種類和數(shù)量發(fā)生了改變

D.該研究有助于了解微重力對細胞生命活動的影響

【答案】A

【分析】1、干細胞的概念：動物和人體內(nèi)保留著少量具有分裂和分化能力的細胞。

2、細胞分化是指在個體發(fā)育中，由一個或一種細胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定

性差異的過程。細胞分化的實質(zhì)是基因的選擇性表達。

【詳解】A、連續(xù)分裂的細胞才有細胞周期，心肌細胞已經(jīng)高度分化，不能再分裂，沒有細胞周期，A錯誤;

B、進行細胞的體外培養(yǎng)需定期更換培養(yǎng)液，避免代謝廢物對細胞的毒害作用，B正確；

C、分化過程的本質(zhì)是基因的選擇性表達，故多能干細胞在分化過程中蛋白質(zhì)種類和數(shù)量發(fā)生了改變，C正

確；

D、由題意可知，多能干細胞在微重力環(huán)境下能加速分化，所以該研究有助于了解微重力對細胞生命活動的

影響，D正確。

故選A。

7.（2022?遼寧?統(tǒng)考高考真題）二甲基亞碉（DMSO）易與水分子結(jié)合，常用作細胞凍存的滲透性保護劑。

干細胞凍存復(fù)蘇后指標(biāo)檢測結(jié)果見下表。下列敘述錯誤的是（）

凍存劑

合成培養(yǎng)基+DMSO合成培養(yǎng)基+DMSO+血清

指標(biāo)

Gi期細胞數(shù)百分比（％）65.7879.85

活細胞數(shù)百分比（％）15.2941.33

注：細胞分裂間期分為Gi期、S期（DNA復(fù)制期）和G2期

A.凍存復(fù)蘇后的干細胞可以用于治療人類某些疾病

B.Gi期細胞數(shù)百分比上升，導(dǎo)致更多干細胞直接進入分裂期

C.血清中的天然成分影響G1期，增加干細胞復(fù)蘇后的活細胞數(shù)百分比

D.DMSO的作用是使干細胞中自由水轉(zhuǎn)化為結(jié)合水

【答案】B

【分析】細胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融，實驗證明這樣可以最大限度的保存細胞活力。目前細胞

凍存多采用甘油或二甲基亞磯作保護劑，這兩種物質(zhì)能提高細胞膜對水的通透性，加上緩慢冷凍可使細胞

內(nèi)的水分滲出細胞外，減少細胞內(nèi)冰晶的形成，從而減少由于冰晶形成造成的細胞損傷。復(fù)蘇細胞應(yīng)采用

快速融化的方法，這樣可以保證細胞外結(jié)晶在很短的時間內(nèi)即融化，避免由于緩慢融化使水分滲入細胞內(nèi)

形成胞內(nèi)再結(jié)晶對細胞造成損傷。

【詳解】A、凍存復(fù)蘇后的干細胞可以經(jīng)誘導(dǎo)分裂分化形成多種組織器官，用于治療人類某些疾病，A正確;

B、Gi期細胞數(shù)百分比上升，說明細胞進入分裂間期，但不會導(dǎo)致干細胞直接進入分裂期，還需經(jīng)過S和

G2期，B錯誤；

C、分析表格可知，血清中的天然成分影響Gi期（該期細胞數(shù)百分比增大），能增加干細胞復(fù)蘇后的活細

胞數(shù)百分比，C正確；

D、二甲基亞颯（DMSO）易與水分子結(jié)合，可以使干細胞中自由水轉(zhuǎn)化為結(jié)合水，D正確。

故選B。

8.（2022?江蘇?統(tǒng)考高考真題）航天員葉光富和王亞平在天宮課堂上展示了培養(yǎng)的心肌細胞跳動的視頻。

下列相關(guān)敘述正確的是（）

A.培養(yǎng)心肌細胞的器具和試劑都要先進行高壓蒸汽滅菌

B.培養(yǎng)心肌細胞的時候既需要氧氣也需要二氧化碳

C.心肌細胞在培養(yǎng)容器中通過有絲分裂不斷增殖

D.心肌細胞在神經(jīng)細胞發(fā)出的神經(jīng)沖動的支配下跳動

【答案】B

【分析】動物細胞培養(yǎng)的過程：取動物組織塊T剪碎組織T用胰蛋白酶處理分散成單個細胞一制成細胞懸

液T轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）T放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)一貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成

細胞懸液一轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）一放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

【詳解】A、培養(yǎng)心肌細胞的器具要先進行高壓蒸汽滅菌，但是試劑并不都需要滅菌，如動物血清不能進行

高壓蒸汽滅菌，否則會使其中的成分失活，A錯誤；

B、培養(yǎng)心肌細胞的時候既需要氧氣（有助于進行有氧呼吸）也需要二氧化碳（有助于維持培養(yǎng)液的pH）,

B正確；

C、在體外培養(yǎng)條件下，細胞會因接觸抑制、細胞密度過大、代謝廢物積累、營養(yǎng)物質(zhì)消耗而停止分裂，C

錯誤；

D、心肌細胞節(jié)律性收縮，受植物性神經(jīng)的支配，是不隨意的，在神經(jīng)細胞釋放的神經(jīng)遞質(zhì)的支配下跳動，

D錯誤。

故選B。

9.（2022.湖北.統(tǒng)考高考真題）某興趣小組開展小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)的研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)的原代神經(jīng)

元生長緩慢，其原因不可能的是（）

A.實驗材料取自小鼠胚胎的腦組織B.為了防止污染將培養(yǎng)瓶瓶口密封

C.血清經(jīng)過高溫處理后加入培養(yǎng)基D.所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性

【答案】A

【分析】小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)屬于動物細胞培養(yǎng)，需要在無菌無毒和培養(yǎng)液提供類似內(nèi)環(huán)境的條件下進行。

【詳解】A、小鼠胚胎腦組織中含有豐富的原代神經(jīng)元，細胞增殖能力強，不會造成生長緩慢，A符合題意;

B、培養(yǎng)瓶瓶口密封會使培養(yǎng)液中缺氧，影響細胞有氧呼吸，造成供能不足，可能使細胞生長緩慢，B不符

合題意；

C、血清經(jīng)過高溫處理后，其中活性成分變性，失去原有功能，細胞生存環(huán)境嚴重惡化，可能使細胞生長緩

慢，C不符合題意；

D、小鼠內(nèi)環(huán)境為弱堿性，所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性，使細胞生存環(huán)境惡劣，可能造成細胞生長緩慢，D不

符合題意。

故選A?

10.（2022?江蘇?統(tǒng)考高考真題）下圖表示利用細胞融合技術(shù)進行基因定位的過程，在人-鼠雜種細胞中人的

染色體會以隨機方式丟失，通過分析基因產(chǎn)物進行基因定位。現(xiàn)檢測細胞I、II、III中人的4種酶活性，

只有n具有芳燒羥化酶活性，只有山具有胸背激酶活性，I、ill都有磷酸甘油酸激酶活性，I、n、ni均

有乳酸脫氫酶活性。下列相關(guān)敘述正確的有（）

保留的人IIIm

類染色體X,112,11X,11,17

A.加入滅活仙臺病毒的作用是促進細胞融合

B.細胞I、II、HI分別為人-人、人-鼠、鼠-鼠融合細胞

C.芳煌羥化酶基因位于2號染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號染色上

D.胸背激酶基因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上

【答案】ACD

【分析】分析題干信息：I保留X、11號染色體，II保留2、11號染色體，具有芳燒羥化酶活性，III,保

留X、11、17號染色體具有胸昔激酶活性，I、III都有磷酸甘油酸激酶活性，I、II、III均有乳酸脫氫酶

活性，所以支配芳燒羥化酶合成的基因位于2號染色體上，支配胸背激酶合成的基因位于17號染色體上；

支配磷酸甘油酸激合成的基因位于X號染色體上；支配乳酸脫氫酶合成的基因位于11號染色體上。

【詳解】A、動物細胞融合過程中，可以利用滅活的仙臺病毒或聚乙二醇作誘導(dǎo)劑促進細胞融合，A正確；

B、細胞III中保留了人的X、H、17號染色體，故不會是鼠-鼠融合細胞，B錯誤；

CD、根據(jù)分析可知，芳燃羥化酶基因位于2號染色體上，乳酸脫氫酶基因位于11號染色上，胸背激酶基

因位于17號染色體上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色體上，CD正確。

故選ACD?

11.(2023.湖南.統(tǒng)考高考真題)某些植物根際促生菌具有生物固氮、分解淀粉和抑制病原菌等作用?；卮?/p>

下列問題：

(1)若從植物根際土壤中篩選分解淀粉的固氮細菌，培養(yǎng)基的主要營養(yǎng)物質(zhì)包括水和—。

(2)現(xiàn)從植物根際土壤中篩選出一株解淀粉芽抱桿菌H,其產(chǎn)生的抗菌肽抑菌效果見表。據(jù)表推測該抗菌肽

對的抑制效果較好，若要確定其有抑菌效果的最低濃度，需在________濃度區(qū)間進

一步實驗。

抗菌肽濃度/(gg-mf1)

測試菌

55.2027.6013.806.903.451.730.86

金黃色葡萄球菌-----++

枯草芽抱桿菌-----++

禾谷鐮抱菌-++++++

假絲酵母-++++++

注：“+”表示長菌，表示未長菌。

(3)研究人員利用解淀粉芽抱桿菌H的淀粉酶編碼基因M構(gòu)建高效表達質(zhì)粒載體，轉(zhuǎn)入大腸桿菌成功構(gòu)建基

因工程菌A。在利用A菌株發(fā)酵生產(chǎn)淀粉酶M過程中，傳代多次后，生產(chǎn)條件未變，但某子代菌株不再產(chǎn)

生淀粉酶M。分析可能的原因是(答出兩點即可)。

(4)研究人員通過肺上皮干細胞誘導(dǎo)生成肺類器官，可自組裝或與成熟細胞組裝成肺類裝配體，如圖所示。

肺類裝配體培養(yǎng)需要滿足適宜的營養(yǎng)、溫度、滲透壓、pH以及—(答出兩點)等基本條件。肺類裝配體

形成過程中是否運用了動物細胞融合技術(shù)—(填“是''或"否”)。

肺上皮干細胞體細胞

?———J—............I篩選

I增殖分化II

0樓⑥

肺類器官A肺類器官BV'

|共培養(yǎng)||共培養(yǎng)|

繇

肺類裝配體1肺類裝配體2

(5)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)是一種耐藥菌，嚴重危害人類健康。科研人員擬用MRSA感染肺

類裝配體建立感染模型，來探究解淀粉芽胞桿菌H抗菌肽是否對MRSA引起的肺炎有治療潛力。以下實驗

材料中必備的是o

①金黃色葡萄球菌感染的肺類裝配體②MRSA感染的肺類裝配體③解淀粉芽抱桿菌H抗菌肽④生理

鹽水⑤青霉素(抗金黃色葡萄球菌的藥物)⑥萬古霉素(抗MRSA的藥物)

【答案】(1)無機鹽、淀粉

(2)金黃色葡萄球菌和枯草芽抱桿菌1.73~3.45

(3)淀粉酶編碼基因M發(fā)生突變；重組質(zhì)粒在大腸桿菌分裂過程中丟失

(4)無菌、無毒環(huán)境，含95%空氣和5%CC)2的氣體環(huán)境否

(5)②③④⑥

【分析】動物培養(yǎng)的條件：

1、營養(yǎng)：在使用合成培養(yǎng)基時，通常需要加入血清等一些天然成分。

2、無菌、無毒的環(huán)境：對培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進行滅菌處理以及在無菌環(huán)境下進行操作:定期更換培養(yǎng)液,

以便清除代謝產(chǎn)物，防止細胞代謝物積累對細胞自身造成危害。

3、適宜溫度、pH和滲透壓：哺乳動物細胞培養(yǎng)的溫度多為(36.5±0.5)℃；pH多為7.2~7.4；動物細胞培養(yǎng)

還需要考慮滲透壓。

4、氣體環(huán)境：02：細胞代謝所必需的；CO2：維持培養(yǎng)液pH。

【詳解】(1)由題意可知，根際促生菌具有固氮作用，可利用空氣中的氮氣作為氮源，因此用于篩選根際

促生菌的培養(yǎng)基的主要營養(yǎng)物質(zhì)包括水、無機鹽和淀粉。

(2)由題表可知，在抗菌肽濃度為3.45-55.20ug-mL-i范圍內(nèi)，金黃色葡萄球菌和枯草芽抱桿菌均不能生長,

表明該抗菌肽對它們的抑菌效果較好；因為抗菌肽的濃度為L73Ng-mL」時，它們均能生長，所以要確定抗

菌肽抑菌效果的最低濃度，應(yīng)在1.73?3.45ng-mL1的濃度區(qū)間進一步實驗。

(3)在利用A菌株發(fā)酵生產(chǎn)淀粉酶M過程中，傳代多次后，生產(chǎn)條件未變，但某子代菌株不再產(chǎn)生淀粉

酶M,可能的原因是淀粉酶編碼基因M