臨床檢驗專業(yè)高級職稱考題匯編前言臨床檢驗專業(yè)高級職稱考試是檢驗人員職業(yè)發(fā)展的重要里程碑，強調(diào)綜合應(yīng)用能力、臨床思維能力及新技術(shù)新進展的掌握?？荚噧?nèi)容涵蓋臨床基礎(chǔ)檢驗、血液學(xué)、生物化學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)、分子診斷等核心領(lǐng)域，重點考查對檢驗結(jié)果的解讀、疾病的診斷與鑒別診斷、實驗室質(zhì)量控制及新技術(shù)應(yīng)用等能力。本考題匯編以高頻考點為核心，以題型訓(xùn)練為導(dǎo)向，旨在幫助考生梳理知識框架、熟悉考試風(fēng)格、提升解題能力。內(nèi)容涵蓋選擇題、簡答題、案例分析題等常見題型，解析部分注重邏輯推導(dǎo)與臨床聯(lián)系，力求實現(xiàn)“做一題、通一類”的復(fù)習(xí)效果。第一章臨床基礎(chǔ)檢驗1.1考點解析臨床基礎(chǔ)檢驗是檢驗學(xué)科的基礎(chǔ)，重點考查尿液、糞便、腦脊液、胸腹水等體液的檢驗原理及臨床意義，其中尿液干化學(xué)分析的干擾因素、糞便隱血試驗的方法學(xué)評價、腦脊液細胞計數(shù)及分類是高頻考點。尿液干化學(xué)分析：每個項目的原理及干擾因素是核心。例如，隱血試驗基于血紅蛋白的過氧化物酶樣活性，氧化底物（如鄰甲苯胺）產(chǎn)生顏色變化；干擾因素包括：假陽性：肌紅蛋白、菌尿、氧化劑（如次氯酸鈉）、尿中含有大量維生素C（注：維生素C是假陰性的常見原因，因還原作用抑制反應(yīng)）；假陰性：維生素C（>100mg/L）、尿蛋白（>5g/L）、尿比重（<1.010）、尿中含有大量膽紅素。糞便隱血試驗（FOBT）：方法學(xué)評價是重點?；瘜W(xué)法（如愈創(chuàng)木脂法）靈敏度低、易受飲食（如動物血、蔬菜）及藥物（如阿司匹林）干擾；免疫法（如膠體金法）特異性高（僅檢測人血紅蛋白），但易受上消化道出血（血紅蛋白被消化酶分解）、大量維生素C（抑制抗原-抗體結(jié)合）干擾。腦脊液（CSF）細胞計數(shù)及分類：正常CSF細胞數(shù)為（0-8）×10?/L，以淋巴細胞為主（70%左右）。異常結(jié)果的臨床意義：中性粒細胞增多：化膿性腦膜炎（>90%）、結(jié)核性腦膜炎（早期）；淋巴細胞增多：結(jié)核性腦膜炎（后期）、病毒性腦膜炎、真菌性腦膜炎；嗜酸性粒細胞增多：寄生蟲感染（如腦囊蟲病）、過敏性疾?。患t細胞增多：腦出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血。1.2考題示例1.2.1選擇題（單選）題目：尿液干化學(xué)隱血試驗假陽性的常見原因是（）A.維生素C（>100mg/L）B.尿蛋白（>5g/L）C.肌紅蛋白D.尿比重（<1.010）答案：C解析：隱血試驗假陽性的原因包括：①肌紅蛋白（結(jié)構(gòu)與血紅蛋白相似，具有過氧化物酶樣活性）；②菌尿（細菌產(chǎn)生的酶可催化反應(yīng)）；③氧化劑（如次氯酸鈉，直接氧化底物）。選項A（維生素C）、B（尿蛋白）、D（尿比重過低）均為假陰性原因。1.2.2簡答題題目：簡述腦脊液細胞計數(shù)及分類的臨床意義。答案要點：中性粒細胞增多：提示化膿性腦膜炎（早期占比>90%）、結(jié)核性腦膜炎（早期）、腦膿腫（未破裂時）；淋巴細胞增多：提示結(jié)核性腦膜炎（后期占比>70%）、病毒性腦膜炎、真菌性腦膜炎、多發(fā)性硬化癥；嗜酸性粒細胞增多：提示寄生蟲感染（如腦囊蟲病、血吸蟲病）、過敏性腦膜炎、腦腫瘤；紅細胞增多：提示腦出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血、腦外傷（新鮮出血）；異常細胞：如腫瘤細胞（提示腦轉(zhuǎn)移瘤或原發(fā)性腦腫瘤）、白血病細胞（提示中樞神經(jīng)系統(tǒng)白血病）。1.2.3案例分析題患者信息：女性，35歲，因“頭痛、嘔吐2天”入院。查體：體溫38.5℃，頸部抵抗（+），克氏征（+）。實驗室檢查：腦脊液（CSF）外觀渾濁，壓力200mmH?O；細胞計數(shù)：白細胞1200×10?/L，中性粒細胞占85%；蛋白質(zhì)定量1.5g/L（參考值0.15-0.45g/L）；葡萄糖2.0mmol/L（參考值2.5-4.5mmol/L）；氯化物110mmol/L（參考值____mmol/L）。問題：（1）該患者CSF檢查的異常結(jié)果有哪些？（2）最可能的診斷是什么？請說明依據(jù)。答案解析：（1）異常結(jié)果：①外觀渾濁；②白細胞計數(shù)顯著升高（1200×10?/L），中性粒細胞占比高（85%）；③蛋白質(zhì)定量升高（1.5g/L）；④葡萄糖降低（2.0mmol/L）；⑤氯化物降低（110mmol/L）。（2）最可能的診斷：化膿性腦膜炎。依據(jù)：化膿性腦膜炎的典型CSF改變?yōu)椤叭咭坏汀薄准毎ㄖ行粤＜毎麨橹鳎╋@著升高、蛋白質(zhì)升高、壓力升高，葡萄糖及氯化物降低；結(jié)合患者發(fā)熱、頭痛、嘔吐（顱內(nèi)壓升高）、頸部抵抗（腦膜刺激征）的臨床表現(xiàn)，符合化膿性腦膜炎的診斷。第二章臨床血液學(xué)檢驗2.1考點解析臨床血液學(xué)檢驗是高級職稱考試的重點章節(jié)，重點考查骨髓細胞學(xué)檢查、白血病的診斷與鑒別、出血性疾病的實驗室評估。其中，白血病的FAB分型與免疫分型、骨髓增生異常綜合征（MDS）的診斷標(biāo)準(zhǔn)、出血性疾病的篩選試驗是高頻考點。白血病的FAB分型：基于骨髓原始細胞比例及細胞形態(tài)，如：急性淋巴細胞白血?。ˋLL）：原始淋巴細胞≥30%，分為L1（小細胞為主）、L2（大細胞為主）、L3（Burkitt淋巴瘤細胞）；急性髓系白血?。ˋML）：原始髓細胞≥30%，其中M3（急性早幼粒細胞白血?。┮援惓Ｔ缬琢＜毎麨橹鳎ā?0%），POX強陽性，常伴有DIC。出血性疾病的篩選試驗：血管壁/血小板異常：出血時間（BT）延長、血小板計數(shù)（PLT）異常、血塊收縮試驗（CRT）異常；凝血因子異常：凝血時間（CT）延長、活化部分凝血活酶時間（APTT）延長、凝血酶原時間（PT）延長；纖溶亢進：纖維蛋白降解產(chǎn)物（FDP）升高、D-二聚體（D-D）升高。2.2考題示例2.2.1選擇題（多選）題目：急性早幼粒細胞白血病（AML-M3）的典型實驗室特征包括（）A.骨髓原始早幼粒細胞≥30%（FAB分型）B.POX染色強陽性C.非特異性酯酶（NSE）陽性，且被NaF抑制D.常伴有DIC答案：ABD解析：AML-M3的核心特征：①骨髓中原始早幼粒細胞≥30%（FAB分型）；②細胞化學(xué)染色：POX強陽性（髓系細胞標(biāo)志），NSE陽性但不被NaF抑制（區(qū)別于單核細胞白血?。?；③臨床常伴有彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）（因早幼粒細胞釋放大量促凝物質(zhì)）。選項C錯誤，因NSE被NaF抑制是單核細胞白血病的特征。2.2.2簡答題題目：簡述骨髓增生異常綜合征（MDS）的診斷標(biāo)準(zhǔn)。答案要點：MDS的診斷需結(jié)合臨床表現(xiàn)、實驗室檢查及排除其他疾病，主要標(biāo)準(zhǔn)包括：1.骨髓象：①原始細胞比例：<20%（若≥20%則診斷為急性白血?。虎诓B(tài)造血：累及至少一系細胞（紅細胞系、粒細胞系、巨核細胞系），如紅細胞系的“核碎裂、核出芽”，粒細胞系的“Pelger-Huet畸形”，巨核細胞系的“小巨核細胞”；2.血象：一系或多系細胞減少（血紅蛋白<100g/L、血小板<100×10?/L、中性粒細胞<1.8×10?/L）；3.排除其他疾?。喝缭偕系K性貧血、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿（PNH）、巨幼細胞貧血、骨髓纖維化等。2.2.3案例分析題患者信息：男性，40歲，因“乏力、牙齦出血1個月”入院。查體：貧血貌，全身皮膚散在瘀點，肝脾未觸及。實驗室檢查：血常規(guī)：Hb80g/L，PLT20×10?/L，WBC3.0×10?/L，中性粒細胞1.2×10?/L；骨髓象：原始細胞占15%，可見“核出芽”“Pelger-Huet畸形”等病態(tài)造血細胞，巨核細胞數(shù)量減少，可見小巨核細胞；染色體檢查：del(5q)（5號染色體長臂缺失）。問題：（1）該患者最可能的診斷是什么？（2）請列出至少2項需與該疾病鑒別的疾病，并說明鑒別要點。答案解析：（1）最可能的診斷：骨髓增生異常綜合征（MDS）（具體分型為MDS-EB-1，因原始細胞15%<20%）。依據(jù)：①臨床表現(xiàn)：乏力（貧血）、牙齦出血（血小板減少）；②血象：三系細胞減少（Hb、PLT、WBC均降低）；③骨髓象：原始細胞15%（<20%），存在病態(tài)造血（核出芽、Pelger-Huet畸形、小巨核細胞）；④染色體異常（del(5q)是MDS的常見核型）。（2）需鑒別的疾病及鑒別要點：再生障礙性貧血（AA）：MDS有病態(tài)造血及原始細胞增多，而AA骨髓增生低下，無病態(tài)造血，原始細胞比例正常；陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿（PNH）：PNH可通過Ham試驗、CD55/CD59流式細胞術(shù)檢測紅細胞膜缺陷，而MDS無此特征；巨幼細胞貧血：巨幼細胞貧血有維生素B??/葉酸缺乏的證據(jù)（如血清維生素B??<100pg/mL、葉酸<3ng/mL），骨髓可見“巨幼變”細胞（如巨幼紅細胞），無病態(tài)造血及原始細胞增多。第三章臨床生物化學(xué)檢驗3.1考點解析臨床生物化學(xué)檢驗重點考查肝功能、腎功能、糖代謝、脂代謝等指標(biāo)的臨床意義及結(jié)果解讀，其中肝功能指標(biāo)的聯(lián)合解讀、糖尿病的實驗室診斷、脂代謝紊亂的分型是高頻考點。肝功能指標(biāo)的聯(lián)合解讀：肝細胞損傷：ALT（胞漿酶，敏感但特異性低）、AST（線粒體酶，升高提示肝細胞嚴(yán)重損傷），AST/ALT比值：急性肝炎時<1，肝硬化時>1（因線粒體損傷更嚴(yán)重）；膽汁淤積：ALP（膽管上皮細胞酶，升高提示膽管梗阻）、GGT（肝內(nèi)膽管酶，升高提示肝內(nèi)膽汁淤積或酒精性肝?。桓闻K合成功能：白蛋白（半衰期20天，反映長期合成功能）、前白蛋白（半衰期1-2天，反映短期合成功能）、凝血酶原時間（PT，反映維生素K依賴因子的合成能力）。糖尿病的實驗室診斷：空腹血糖（FPG）≥7.0mmol/L；口服葡萄糖耐量試驗（OGTT）2小時血糖≥11.1mmol/L；糖化血紅蛋白（HbA1c）≥6.5%（反映近2-3個月血糖控制情況）；隨機血糖≥11.1mmol/L伴糖尿病癥狀（多飲、多尿、多食、體重下降）。3.2考題示例3.2.1選擇題（單選）題目：下列指標(biāo)中，最能反映肝臟長期合成功能的是（）A.前白蛋白B.白蛋白C.谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）D.谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）答案：B解析：白蛋白由肝臟合成，半衰期約20天，能反映肝臟長期合成功能；前白蛋白半衰期僅1-2天，反映短期合成功能；ALT、AST是肝細胞損傷的標(biāo)志，不反映合成功能。3.2.2簡答題題目：簡述糖化血紅蛋白（HbA1c）的臨床意義。答案要點：HbA1c是血紅蛋白與葡萄糖的不可逆結(jié)合產(chǎn)物，反映近2-3個月的平均血糖水平，臨床意義包括：1.糖尿病診斷：HbA1c≥6.5%可作為糖尿病的診斷標(biāo)準(zhǔn)（ADA推薦）；2.血糖控制評估：是糖尿病患者長期血糖控制的金標(biāo)準(zhǔn)，目標(biāo)值通常為<7%（個體化調(diào)整）；3.并發(fā)癥預(yù)測：HbA1c升高與糖尿病微血管并發(fā)癥（如視網(wǎng)膜病變、腎?。┘按笱懿l(fā)癥（如冠心病、腦卒中）的風(fēng)險增加相關(guān)；4.鑒別應(yīng)激性高血糖：應(yīng)激性高血糖（如感染、手術(shù)）時，HbA1c通常正常（因短期血糖升高不影響HbA1c）。3.2.3案例分析題患者信息：男性，50歲，因“口渴、多飲、多尿1個月”入院。查體：體重指數(shù)（BMI）28kg/m2（肥胖），余無異常。實驗室檢查：空腹血糖（FPG）8.5mmol/L，口服葡萄糖耐量試驗（OGTT）2小時血糖13.2mmol/L，糖化血紅蛋白（HbA1c）7.8%，胰島素釋放試驗：空腹胰島素15μIU/mL（參考值5-20μIU/mL），OGTT2小時胰島素80μIU/mL（參考值<50μIU/mL）。問題：（1）該患者的診斷是什么？依據(jù)是什么？（2）胰島素釋放試驗結(jié)果提示什么？答案解析：（1）診斷：2型糖尿病。依據(jù)：①臨床表現(xiàn)：口渴、多飲、多尿（糖尿病典型癥狀）；②實驗室檢查：FPG8.5mmol/L（≥7.0mmol/L）、OGTT2小時血糖13.2mmol/L（≥11.1mmol/L）、HbA1c7.8%（≥6.5%）；③肥胖（BMI28kg/m2）是2型糖尿病的高危因素。（2）胰島素釋放試驗結(jié)果提示胰島素抵抗。依據(jù)：患者空腹胰島素正常，但OGTT2小時胰島素顯著升高（80μIU/mL，參考值<50μIU/mL），說明機體對胰島素的敏感性降低（胰島素抵抗），導(dǎo)致胰島素分泌增加以維持血糖水平，是2型糖尿病的主要病理機制之一。第四章臨床微生物學(xué)檢驗4.1考點解析臨床微生物學(xué)檢驗重點考查病原體的鑒定、耐藥機制及臨床應(yīng)用，其中細菌耐藥機制、病原學(xué)診斷的金標(biāo)準(zhǔn)、常見病原體的鑒別是高頻考點。細菌耐藥機制：酶解作用：如β-內(nèi)酰胺酶（如ESBLs、AmpC酶）水解β-內(nèi)酰胺類抗生素；靶位改變：如MRSA（耐甲氧西林金黃色葡萄球菌）的PBP2a（青霉素結(jié)合蛋白2a）與β-內(nèi)酰胺類抗生素親和力降低；主動外排：如銅綠假單胞菌的MexAB-OprM系統(tǒng)主動排出喹諾酮類、β-內(nèi)酰胺類抗生素；膜通透性改變：如革蘭陰性桿菌的外膜孔蛋白（OmpF、OmpC）缺失，導(dǎo)致β-內(nèi)酰胺類抗生素?zé)o法進入胞內(nèi)。病原學(xué)診斷的金標(biāo)準(zhǔn)：細菌培養(yǎng)（需結(jié)合臨床癥狀及標(biāo)本類型），但需注意假陽性（污染菌）及假陰性（標(biāo)本采集不當(dāng)、抗生素使用后）。4.2考題示例4.2.1選擇題（單選）題目：耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）的主要耐藥機制是（）A.產(chǎn)生β-內(nèi)酰胺酶B.青霉素結(jié)合蛋白（PBP2a）改變C.主動外排系統(tǒng)激活D.膜通透性降低答案：B解析：MRSA攜帶mecA基因，編碼PBP2a（青霉素結(jié)合蛋白2a），其與β-內(nèi)酰胺類抗生素的親和力顯著降低，導(dǎo)致抗生素?zé)o法抑制細菌細胞壁合成，從而耐藥。4.2.2簡答題題目：簡述ESBLs（超廣譜β-內(nèi)酰胺酶）的臨床意義。答案要點：ESBLs是由革蘭陰性桿菌（如大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌）產(chǎn)生的β-內(nèi)酰胺酶，能水解青霉素類、第三代頭孢菌素（如頭孢他啶、頭孢噻肟）、第四代頭孢菌素（如頭孢吡肟）及單環(huán)β-內(nèi)酰胺類（如氨曲南）抗生素，對碳青霉烯類（如亞胺培南）、頭霉素類（如頭孢西?。┘唉?內(nèi)酰胺類+β-內(nèi)酰胺酶抑制劑（如哌拉西林他唑巴坦）敏感。臨床意義：1.治療指導(dǎo)：ESBLs陽性菌株感染時，應(yīng)避免使用上述被水解的抗生素，首選碳青霉烯類或頭霉素類；2.感染控制：ESBLs菌株具有傳染性，需加強醫(yī)院感染防控（如隔離患者、手衛(wèi)生）；3.耐藥監(jiān)測：ESBLs是革蘭陰性桿菌的重要耐藥機制，需定期進行耐藥性監(jiān)測（如CLSI推薦的紙片擴散法）。4.2.3案例分析題患者信息：女性，65歲，因“咳嗽、咳痰1周，發(fā)熱2天”入院。有慢性阻塞性肺疾?。–OPD）病史。實驗室檢查：痰培養(yǎng)：金黃色葡萄球菌生長，藥敏結(jié)果：青霉素（R）、苯唑西林（R）、頭孢呋辛（R）、萬古霉素（S）、利奈唑胺（S）。問題：（1）該患者的病原菌是什么？其耐藥特點是什么？（2）應(yīng)選擇哪種抗生素治療？依據(jù)是什么？答案解析：（1）病原菌：耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）。耐藥特點：對青霉素、苯唑西林（甲氧西林同類藥）、頭孢呋辛（β-內(nèi)酰胺類）耐藥，對萬古霉素、利奈唑胺敏感。（2）治療選擇：萬古霉素或利奈唑胺。依據(jù)：MRSA對β-內(nèi)酰胺類抗生素（包括青霉素、頭孢菌素）均耐藥，因攜帶mecA基因編碼的PBP2a；萬古霉素（糖肽類）通過抑制細菌細胞壁合成發(fā)揮作用，是MRSA感染的經(jīng)典治療藥物；利奈唑胺（惡唑烷酮類）通過抑制細菌蛋白質(zhì)合成，對MRSA也有良好療效（尤其適用于腎功能不全患者）。第五章臨床免疫學(xué)檢驗5.1考點解析臨床免疫學(xué)檢驗重點考查自身免疫病的標(biāo)志性抗體、腫瘤標(biāo)志物、流式細胞術(shù)應(yīng)用，其中自身抗體譜的解讀、腫瘤標(biāo)志物的臨床價值、流式細胞術(shù)的臨床應(yīng)用是高頻考點。自身免疫病的標(biāo)志性抗體：系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）：抗dsDNA抗體（特異性高，與病情活動相關(guān)）、抗Sm抗體（特異性高，診斷金標(biāo)準(zhǔn)）；類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）：抗CCP抗體（環(huán)瓜氨酸肽抗體，特異性高，早期診斷及預(yù)后評估）、類風(fēng)濕因子（RF，敏感性高但特異性低）；干燥綜合征（SS）：抗SS-A抗體、抗SS-B抗體（與唾液腺、淚腺損傷相關(guān)）。腫瘤標(biāo)志物的臨床應(yīng)用：肝癌：AFP（甲胎蛋白，診斷金標(biāo)準(zhǔn)，>400ng/mL結(jié)合影像學(xué)可診斷）；結(jié)直腸癌：CEA（癌胚抗原，術(shù)后監(jiān)測復(fù)發(fā)的重要指標(biāo)）；前列腺癌：PSA（前列腺特異抗原，篩查及診斷的重要指標(biāo)，>10ng/mL提示前列腺癌可能）。5.2考題示例5.2.1選擇題（多選）題目：下列抗體中，屬于系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）標(biāo)志性抗體的有（）A.抗dsDNA抗體B.抗Sm抗體C.抗SS-A抗體D.抗CCP抗體答案：AB解析：抗dsDNA抗體（特異性>90%）與SLE的病情活動（如腎炎）相關(guān)；抗Sm抗體（特異性>95%）是SLE的診斷金標(biāo)準(zhǔn)（即使病情緩解也可陽性）；抗SS-A抗體主要見于干燥綜合征；抗CCP抗體主要見于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎。5.2.2簡答題題目：簡述抗CCP抗體（抗環(huán)瓜氨酸肽抗體）的臨床意義。答案要點：抗CCP抗體是類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）的特異性標(biāo)志物（特異性>90%），臨床意義包括：1.早期診斷：抗CCP抗體可在RA發(fā)病前數(shù)年出現(xiàn)，對早期RA（如僅有關(guān)節(jié)疼痛而無影像學(xué)改變）有重要診斷價值；2.預(yù)后評估：抗CCP抗體陽性的RA患者，關(guān)節(jié)侵蝕性病變（如骨質(zhì)破壞）的風(fēng)險更高，病情進展更快；3.鑒別診斷：可與類風(fēng)濕因子（RF）聯(lián)合應(yīng)用，提高RA的診斷特異性（RF在其他自身免疫病中也可陽性）。5.2.3案例分析題患者信息：女性，40歲，因“雙手關(guān)節(jié)腫痛3個月，加重1周”入院。查體：雙手近端指間關(guān)節(jié)、掌指關(guān)節(jié)腫脹、壓痛，晨僵>1小時。實驗室檢查：類風(fēng)濕因子（RF）陽性（1:80），抗CCP抗體陽性（>200U/mL），血沉（ESR）50mm/h，C反應(yīng)蛋白（CRP）20mg/L。問題：（1）該患者最可能的診斷是什么？依據(jù)是什么？（2）抗CCP抗體對該疾病的診斷有何價值？答案解析：（1）診斷：類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（RA）。依據(jù)：①臨床表現(xiàn)：雙手近端指間關(guān)節(jié)、掌指關(guān)節(jié)腫痛（RA的典型受累關(guān)節(jié)），晨僵>1小時（RA的特征性表現(xiàn)）；②實驗室檢查：RF陽性（敏感性高）、抗CCP抗體陽性（特異性高）、ESR及CRP升高（炎癥活動標(biāo)志）。（2）抗CCP抗體的價值：抗CCP抗體是RA的特異性標(biāo)志物（特異性>90%），該患者抗CCP抗體陽性，結(jié)合臨床表現(xiàn)及RF陽性，可明確RA的診斷（尤其對早期RA，因抗CCP抗體可在癥狀出現(xiàn)前數(shù)年陽性）；此外，抗CCP抗體陽性提示患者關(guān)節(jié)侵蝕性病變的風(fēng)險更高，需早期干預(yù)（如使用DMARDs藥物）。第六章分子診斷學(xué)檢驗6.1考點解析分子診斷學(xué)是檢驗學(xué)科的前沿領(lǐng)域，重點考查PCR技術(shù)、實時熒光PCR、下一代測序（NGS）的原理及應(yīng)用，其中實時熒光PCR的特點、NGS的臨床應(yīng)用、病原體的分子檢測是高頻考點。實時熒光PCR：與常規(guī)PCR的核心區(qū)別是實時監(jiān)測擴增產(chǎn)物的生成，通過熒光信號的變化（如SYBRGreen染料或TaqMan探針）定量分析模板濃度。特點包括：①定量準(zhǔn)確（可檢測模板的起始濃度）；②閉管操作（減少交叉污染）；③快速高效（無需post-PCR電泳檢測）。NGS（下一代測序）：又稱高通量測序，能同時檢測數(shù)百萬個DNA片段，臨床應(yīng)用包括：①腫瘤基因組分析（如肺癌的EGFR、ALK基因突變檢測，指導(dǎo)靶向治療）；②遺傳病診斷（如單基因遺傳病的基因突變檢測）；③病原體檢測（如新型冠狀病毒的全基因組測序）。6.2考題示例6.2.1選擇題（單選）題目：實時熒光PCR與常規(guī)PCR的主要區(qū)別是（）A.需要DNA模板B.需要DNA聚合酶C.實時監(jiān)測擴增產(chǎn)物的生成D.需要引物答案：C解析：實時熒光PCR與常規(guī)PCR均需要DNA模板、DNA聚合酶、引物，但實時熒光PCR通過熒光信號實時監(jiān)測擴增過程，而常規(guī)PCR需要post-PCR電泳檢測擴增產(chǎn)物（定性）。6.2.2簡答題題目：簡述下一代測序（NGS）在腫瘤診斷中的臨床應(yīng)用。答案要點：NGS通過高通量測序技術(shù)，可同時檢測腫瘤細胞中的基因突變、基因融合、拷貝數(shù)變異等，臨床應(yīng)用包括：1.靶向治療指導(dǎo)：如肺癌患者檢測EGFR（表皮生長因子受體）基因突變（如19外顯子缺失、21外顯子L858R突變），可使用EGFR-TKI（如吉非替尼、奧希替尼）治療；檢測ALK基因融合（如EML4-ALK），可使用ALK抑制劑（如克唑替尼）治療；2.免疫治療指導(dǎo)：檢測腫瘤組織的PD-L1表達（如通過NGS的RNA測序）及腫瘤突變負荷（TMB），預(yù)測免疫檢查點抑制劑（如帕博利珠單抗）的療效；3.預(yù)后評估：如結(jié)直腸癌患者檢測KRAS、NRAS基因突變，提示預(yù)后不良（對EGFR單抗治療無反應(yīng)）；4.微小殘留?。∕RD）監(jiān)測：通過NGS檢測外周血中的循環(huán)腫瘤DNA（ctDNA），早期發(fā)現(xiàn)腫瘤復(fù)發(fā)（比影像學(xué)早數(shù)月）。6.2.3案例分析題患者信息：男性，60歲，因“咳嗽、咯血1個月”入院。胸部CT示：右肺上葉占位性病變（3cm×2cm），考慮肺癌。