2025年醫(yī)衛(wèi)類(lèi)微生物檢驗(yàn)技術(shù)(中級(jí))-專(zhuān)業(yè)知識(shí)參考題庫(kù)含答案解析一、單選題（共35題）1.在微生物檢驗(yàn)中，巧克力培養(yǎng)基常用于培養(yǎng)何種細(xì)菌？【選項(xiàng)】A.需氧革蘭氏陽(yáng)性球菌B.苛養(yǎng)性細(xì)菌（如流感嗜血桿菌）C.腸道革蘭氏陰性桿菌D.耐高滲真菌【參考答案】B【解析】巧克力培養(yǎng)基通過(guò)加熱溶解紅細(xì)胞釋放X因子（血紅素）和V因子（NAD），滿(mǎn)足苛養(yǎng)菌（如流感嗜血桿菌、腦膜炎奈瑟菌）的生長(zhǎng)需求。A選項(xiàng)多為血瓊脂培養(yǎng)基的適用對(duì)象，C選項(xiàng)常用麥康凱培養(yǎng)基，D選項(xiàng)需高滲培養(yǎng)基（如沙保羅培養(yǎng)基）。2.下列哪種細(xì)菌接種方法適用于保存菌種？【選項(xiàng)】A.連續(xù)劃線(xiàn)法B.分區(qū)劃線(xiàn)法C.傾注平板法D.斜面接種法【參考答案】D【解析】斜面接種法通過(guò)擴(kuò)大菌種生長(zhǎng)面積延長(zhǎng)保存時(shí)間，適用于菌種短期保存。A和B用于分離純化單個(gè)菌落，C用于活菌計(jì)數(shù)，均不用于菌種保存。3.抗酸染色中，脫色步驟使用的試劑是？【選項(xiàng)】A.5%石炭酸復(fù)紅B.3%鹽酸酒精C.堿性亞甲藍(lán)D.盧戈氏碘液【參考答案】B【解析】抗酸染色流程：初染（石炭酸復(fù)紅）→加熱→脫色（3%鹽酸酒精）→復(fù)染（亞甲藍(lán)）。B為唯一脫色劑，D為革蘭氏染色媒染劑，C為復(fù)染劑。4.下列哪種消毒劑不適用于皮膚黏膜消毒？【選項(xiàng)】A.0.5%碘伏B.75%乙醇C.2%戊二醛D.0.1%苯扎溴銨【參考答案】C【解析】戊二醛毒性強(qiáng)，僅用于器械消毒；A、B、D均屬低毒皮膚黏膜消毒劑，其中苯扎溴銨為陽(yáng)離子表面活性劑，對(duì)皮膚刺激性小。5.在革蘭氏染色中，若脫色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致？【選項(xiàng)】A.所有菌染成紫色B.所有菌染成紅色C.革蘭氏陽(yáng)性菌染成紅色D.革蘭氏陰性菌染成紫色【參考答案】C【解析】脫色過(guò)度溶解革蘭氏陽(yáng)性菌細(xì)胞壁的脂質(zhì)，使其失去初染的紫色而呈現(xiàn)復(fù)染的紅色。陰性菌本身無(wú)脫色阻力，仍為紅色。B錯(cuò)誤因陰性菌本身為紅色，陽(yáng)性菌異常顯色。6.下列培養(yǎng)基中，可用于鑒別大腸埃希菌與產(chǎn)氣腸桿菌的是？【選項(xiàng)】A.SS瓊脂B.克氏雙糖鐵培養(yǎng)基C.尿素培養(yǎng)基D.IMViC試驗(yàn)【參考答案】D【解析】IMViC（吲哚、甲基紅、VP、枸櫞酸鹽）試驗(yàn)是大腸埃希菌（++--）與產(chǎn)氣腸桿菌（--++）的核心鑒別依據(jù)。B僅能判斷葡萄糖/乳糖發(fā)酵，C用于變形桿菌屬鑒定，A為沙門(mén)/志賀菌選擇培養(yǎng)基。7.高壓蒸汽滅菌法的標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)是？【選項(xiàng)】A.100℃、15minB.121℃、15minC.160℃、2hD.132℃、3min【參考答案】B【解析】121℃維持15分鐘可殺滅所有微生物包括芽胞。A為煮沸消毒條件，C為干熱滅菌參數(shù)，D為預(yù)真空壓力滅菌器參數(shù)，非常規(guī)標(biāo)準(zhǔn)。8.觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性的細(xì)菌是？【選項(xiàng)】A.肺炎鏈球菌B.糞腸球菌C.金黃色葡萄球菌D.草綠色鏈球菌【參考答案】C【解析】觸酶試驗(yàn)檢測(cè)過(guò)氧化氫酶。葡萄球菌屬陽(yáng)性，鏈球菌屬陰性（A/B/D均為鏈球菌）。C正確，其余均為觸酶陰性菌。9.血清學(xué)診斷中，恢復(fù)期抗體效價(jià)比急性期升高多少倍有診斷意義？【選項(xiàng)】A.≥2倍B.≥4倍C.≥8倍D.≥10倍【參考答案】B【解析】依據(jù)血清學(xué)動(dòng)態(tài)觀(guān)察原則，恢復(fù)期抗體效價(jià)較急性期升高≥4倍（如IgG或總抗體），提示現(xiàn)癥感染。低于4倍可能為既往感染或交叉反應(yīng)。10.室內(nèi)質(zhì)控中，標(biāo)準(zhǔn)菌株的傳代次數(shù)要求不超過(guò)？【選項(xiàng)】A.3代B.5代C.10代D.15代【參考答案】B【解析】標(biāo)準(zhǔn)菌株傳代次數(shù)過(guò)多易導(dǎo)致表型變異（如藥敏改變）。CLSI指南規(guī)定：從原始菌種傳代≤5次，確保生物學(xué)特性穩(wěn)定。A過(guò)于嚴(yán)苛，C/D超出允許范圍。11.1.革蘭氏染色中，酒精脫色是關(guān)鍵步驟，若脫色時(shí)間過(guò)短會(huì)導(dǎo)致以下哪種結(jié)果？A.革蘭陽(yáng)性菌被染成紅色B.革蘭陰性菌被染成紫色C.所有細(xì)菌均呈無(wú)色D.無(wú)法區(qū)分細(xì)菌形態(tài)【選項(xiàng)】A.革蘭陽(yáng)性菌被染成紅色B.革蘭陰性菌被染成紫色C.所有細(xì)菌均呈無(wú)色D.無(wú)法區(qū)分細(xì)菌形態(tài)【參考答案】B【解析】革蘭氏染色中，酒精脫色的作用是溶解革蘭陰性菌的脂質(zhì)外膜，使其失去初染的結(jié)晶紫；而革蘭陽(yáng)性菌因細(xì)胞壁肽聚糖層厚，脫色后仍保留紫色。若脫色時(shí)間過(guò)短，革蘭陰性菌外膜未能充分溶解，結(jié)晶紫未被洗脫，會(huì)錯(cuò)誤染成紫色（假陽(yáng)性）。選項(xiàng)A是脫色過(guò)度的結(jié)果，選項(xiàng)C和D不符合染色機(jī)制。12.2.用于分離流感嗜血桿菌的巧克力培養(yǎng)基中，加入的“X因子”和“V因子”分別是指？A.X因子為血紅素，V因子為煙酰胺腺嘌呤二核苷酸B.X因子為煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，V因子為血紅素C.X因子為葉酸，V因子為維生素B6D.X因子為NAD，V因子為氯化血紅素【選項(xiàng)】A.X因子為血紅素，V因子為煙酰胺腺嘌呤二核苷酸B.X因子為煙酰胺腺嘌呤二核苷酸，V因子為血紅素C.X因子為葉酸，V因子為維生素B6D.X因子為NAD，V因子為氯化血紅素【參考答案】A【解析】流感嗜血桿菌生長(zhǎng)需X因子（氯化血紅素，提供鐵離子）和V因子（NAD，輔酶Ⅰ）。巧克力培養(yǎng)基通過(guò)加熱血液釋放這些因子。選項(xiàng)B混淆了兩者順序，選項(xiàng)C和D的成分描述錯(cuò)誤。13.3.高壓蒸汽滅菌法的標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)是？A.100℃,15psi,20分鐘B.121℃,15psi,15分鐘C.121℃,10psi,30分鐘D.134℃,20psi,5分鐘【選項(xiàng)】A.100℃,15psi,20分鐘B.121℃,15psi,15分鐘C.121℃,10psi,30分鐘D.134℃,20psi,5分鐘【參考答案】B【解析】高壓蒸汽滅菌的常規(guī)條件為121℃、15psi（磅/平方英寸）維持15分鐘，可殺滅所有微生物包括芽孢。選項(xiàng)A溫度不足，選項(xiàng)C壓力錯(cuò)誤，選項(xiàng)D為快速滅菌參數(shù)，不適用于常規(guī)物品。14.4.下列哪組細(xì)菌的IMViC試驗(yàn)結(jié)果為“＋＋－－”？A.大腸埃希菌B.產(chǎn)氣腸桿菌C.肺炎克雷伯菌D.普通變形桿菌【選項(xiàng)】A.大腸埃希菌B.產(chǎn)氣腸桿菌C.肺炎克雷伯菌D.普通變形桿菌【參考答案】A【解析】IMViC試驗(yàn)包括吲哚（I）、甲基紅（M）、VP（V）、枸櫞酸鹽（C）四項(xiàng)。大腸埃希菌結(jié)果為＋（吲哚）、＋（甲基紅）、－（VP）、－（枸櫞酸鹽）。產(chǎn)氣腸桿菌為－－＋＋，肺炎克雷伯菌多為－＋－＋，變形桿菌結(jié)果不定。15.5.抗酸染色中，能將背景染成藍(lán)色的試劑是？A.石碳酸復(fù)紅B.酸性酒精C.亞甲藍(lán)D.孔雀綠【選項(xiàng)】A.石碳酸復(fù)紅B.酸性酒精C.亞甲藍(lán)D.孔雀綠【參考答案】C【解析】抗酸染色步驟：①石碳酸復(fù)紅初染（紅色）；②酸性酒精脫色；③亞甲藍(lán)復(fù)染（藍(lán)色背景）。結(jié)核分枝桿菌抗酸性強(qiáng)保留紅色，其他細(xì)菌和背景被染成藍(lán)色?？兹妇G用于芽孢染色。16.6.膿液標(biāo)本分離培養(yǎng)時(shí)，優(yōu)先選擇的培養(yǎng)基組合是？A.血瓊脂平板＋麥康凱平板B.巧克力平板＋SS平板C.堿性蛋白胨水＋TCBS平板D.沙保弱培養(yǎng)基＋羅氏培養(yǎng)基【選項(xiàng)】A.血瓊脂平板＋麥康凱平板B.巧克力平板＋SS平板C.堿性蛋白胨水＋TCBS平板D.沙保弱培養(yǎng)基＋羅氏培養(yǎng)基【參考答案】A【解析】膿液常見(jiàn)病原菌為金黃色葡萄球菌、鏈球菌等革蘭陽(yáng)性菌及腸桿菌科細(xì)菌。血瓊脂平板支持大部分細(xì)菌生長(zhǎng)，麥康凱平板用于分離革蘭陰性桿菌。選項(xiàng)B適用于腸道致病菌，選項(xiàng)C針對(duì)弧菌，選項(xiàng)D用于真菌或結(jié)核分枝桿菌。17.7.關(guān)于細(xì)菌的菌落形態(tài)，描述錯(cuò)誤的是？A.鏈球菌可形成灰白色、細(xì)小、凸起的菌落B.肺炎克雷伯菌常呈黏液型菌落C.炭疽芽孢桿菌為卷發(fā)狀邊緣的粗糙型菌落D.銅綠假單胞菌產(chǎn)生綠色水溶性色素【選項(xiàng)】A.鏈球菌可形成灰白色、細(xì)小、凸起的菌落B.肺炎克雷伯菌常呈黏液型菌落C.炭疽芽孢桿菌為卷發(fā)狀邊緣的粗糙型菌落D.銅綠假單胞菌產(chǎn)生綠色水溶性色素【參考答案】C【解析】炭疽芽孢桿菌在普通瓊脂上形成粗糙、灰白色、不透明、邊緣卷發(fā)狀的菌落，但描述中“卷發(fā)狀邊緣”實(shí)為顯微鏡下菌鏈特征，肉眼觀(guān)察為邊緣不規(guī)則。其他選項(xiàng)均正確：鏈球菌菌落小且凸起；肺炎克雷伯菌因莢膜呈黏液型；銅綠假單胞菌產(chǎn)生綠膿素和熒光素。18.8.關(guān)于紫外線(xiàn)消毒的敘述，錯(cuò)誤的是？A.殺菌作用最強(qiáng)的波長(zhǎng)為265nmB.適用于空氣和物體表面消毒C.可穿透玻璃、塑料等材料D.對(duì)芽孢的殺滅效果較差【選項(xiàng)】A.殺菌作用最強(qiáng)的波長(zhǎng)為265nmB.適用于空氣和物體表面消毒C.可穿透玻璃、塑料等材料D.對(duì)芽孢的殺滅效果較差【參考答案】C【解析】紫外線(xiàn)主要為253.7nm波長(zhǎng)殺菌效果最佳（選項(xiàng)A正確），但穿透力弱，普通玻璃、塑料均可阻擋（選項(xiàng)C錯(cuò)誤）。適用于空氣和光滑表面（選項(xiàng)B正確），對(duì)細(xì)菌繁殖體有效，芽孢需長(zhǎng)時(shí)間照射（選項(xiàng)D正確）。19.9.紙片擴(kuò)散法（K-B法）藥敏試驗(yàn)中，“中介”結(jié)果的臨床意義是？A.表示細(xì)菌對(duì)該藥完全耐藥B.提示需降低給藥劑量C.在高劑量藥物濃度時(shí)可能有效D.僅適用于尿路感染治療【選項(xiàng)】A.表示細(xì)菌對(duì)該藥完全耐藥B.提示需降低給藥劑量C.在高劑量藥物濃度時(shí)可能有效D.僅適用于尿路感染治療【參考答案】C【解析】CLSI指南規(guī)定，“中介”表明藥物在生理濃集部位（如尿液）或高于常規(guī)劑量時(shí)可能有效，或作為防止技術(shù)誤差的緩沖區(qū)（選項(xiàng)C正確）。選項(xiàng)A描述的是“耐藥”，選項(xiàng)B和D均為錯(cuò)誤解讀。20.10.三級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室（BSL-3）的操作要求不包括？A.實(shí)驗(yàn)人員需接種相關(guān)疫苗B.在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行可能產(chǎn)生氣溶膠的操作C.廢氣需經(jīng)HEPA過(guò)濾器處理后排放D.實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有雙門(mén)傳遞窗和定向氣流【選項(xiàng)】A.實(shí)驗(yàn)人員需接種相關(guān)疫苗B.在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行可能產(chǎn)生氣溶膠的操作C.廢氣需經(jīng)HEPA過(guò)濾器處理后排放D.實(shí)驗(yàn)室應(yīng)有雙門(mén)傳遞窗和定向氣流【參考答案】A【解析】BSL-3用于處理高致病性病原體（如結(jié)核分枝桿菌），要求：①B、C、D均為設(shè)施規(guī)范；②人員疫苗接種非強(qiáng)制要求（選項(xiàng)A錯(cuò)誤），除非操作特定病原體（如天花）。其他級(jí)別實(shí)驗(yàn)室也無(wú)此普遍要求。21.用于分離培養(yǎng)沙門(mén)菌屬的選擇性培養(yǎng)基中，常見(jiàn)的抑菌劑是？【選項(xiàng)】A.亞硒酸鹽B.膽鹽C.孔雀綠D.青霉素【參考答案】A【解析】沙門(mén)菌選擇性培養(yǎng)基常用亞硒酸鹽作為抑菌劑，抑制多數(shù)非目標(biāo)腸道菌（如大腸桿菌），而膽鹽常用于SS瓊脂（抑菌較弱），孔雀綠主要用于結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)基，青霉素為非選擇性抑菌劑，不適用于腸道菌分離。22.抗酸染色法用于檢測(cè)下列何種微生物？【選項(xiàng)】A.金黃色葡萄球菌B.結(jié)核分枝桿菌C.白假絲酵母菌D.肺炎鏈球菌【參考答案】B【解析】抗酸染色是結(jié)核分枝桿菌的特征性染色方法，因其細(xì)胞壁含大量分枝菌酸而抵抗酸乙醇脫色。金黃色葡萄球菌用革蘭染色（陽(yáng)性），真菌需特殊染色（如乳酸酚棉藍(lán)），肺炎鏈球菌為革蘭陽(yáng)性雙球菌。23.下列哪項(xiàng)試驗(yàn)是鑒別致病性金黃色葡萄球菌與非致病性葡萄球菌的關(guān)鍵指標(biāo)？【選項(xiàng)】A.觸酶試驗(yàn)B.凝固酶試驗(yàn)C.氧化酶試驗(yàn)D.七葉苷水解試驗(yàn)【參考答案】B【解析】凝固酶試驗(yàn)是區(qū)分致病性金葡菌（陽(yáng)性）與其他葡萄球菌的核心試驗(yàn)，觸酶試驗(yàn)用于區(qū)分葡萄球菌（陽(yáng)性）與鏈球菌（陰性），氧化酶試驗(yàn)用于鑒別腸桿菌科（陰性）與非發(fā)酵菌（陽(yáng)性），七葉苷水解與腸球菌鑒定相關(guān)。24.細(xì)菌動(dòng)力試驗(yàn)最常用的培養(yǎng)基是？【選項(xiàng)】A.普通瓊脂培養(yǎng)基B.半固體瓊脂培養(yǎng)基C.血瓊脂培養(yǎng)基D.巧克力瓊脂培養(yǎng)基【參考答案】B【解析】半固體瓊脂（含0.4%-0.5%瓊脂）可觀(guān)察細(xì)菌擴(kuò)散生長(zhǎng)判斷動(dòng)力，普通瓊脂和血瓊脂用于固體培養(yǎng)，巧克力瓊脂用于苛養(yǎng)菌（如流感嗜血桿菌）培養(yǎng)。25.IMViC試驗(yàn)中，“I”代表的試驗(yàn)是？【選項(xiàng)】A.吲哚試驗(yàn)B.甲基紅試驗(yàn)C.枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)D.VP試驗(yàn)【參考答案】A【解析】IMViC依次為吲哚（Indole）、甲基紅（MethylRed）、VP（Voges-Proskauer）、枸櫞酸鹽（Citrate），用于大腸埃希菌（＋＋－－）與產(chǎn)氣腸桿菌（－－＋＋）的鑒別。26.K-B法藥敏試驗(yàn)中，抑菌圈直徑的測(cè)量需讀取的是？【選項(xiàng)】A.抑菌圈最內(nèi)緣距離B.抑菌圈最外緣距離C.平板背面透光區(qū)邊緣D.肉眼可見(jiàn)明顯抑菌區(qū)域邊緣【參考答案】D【解析】K-B法需測(cè)量肉眼清晰可見(jiàn)的抑菌圈邊緣（不包括微弱生長(zhǎng)區(qū)），以毫米為單位記錄直徑，參照CLSI標(biāo)準(zhǔn)判讀敏感度。平皿背面測(cè)量?jī)H用于透明培養(yǎng)基（如MH瓊脂）。27.下列哪項(xiàng)病毒必須在活細(xì)胞內(nèi)才能增殖？【選項(xiàng)】A.腺病毒B.輪狀病毒C.流感病毒D.以上均是【參考答案】D【解析】病毒均為嚴(yán)格細(xì)胞內(nèi)寄生，腺病毒（無(wú)包膜DNA病毒）、輪狀病毒（雙鏈RNA病毒）、流感病毒（包膜RNA病毒）均需宿主細(xì)胞提供復(fù)制場(chǎng)所和原料。28.細(xì)菌內(nèi)毒素檢測(cè)的鱟試驗(yàn)原理是基于？【選項(xiàng)】A.抗原-抗體凝集反應(yīng)B.內(nèi)毒素激活鱟血凝集系統(tǒng)C.內(nèi)毒素引起鱟血細(xì)胞裂解D.內(nèi)毒素誘導(dǎo)鱟血變形細(xì)胞溶解物凝固【參考答案】D【解析】鱟試驗(yàn)利用內(nèi)毒素激活鱟血中的凝固酶原系統(tǒng)，導(dǎo)致變形細(xì)胞溶解物形成凝膠，檢測(cè)限可達(dá)0.001EU/mL，用于藥品、醫(yī)療器械的無(wú)菌檢查。29.高壓蒸汽滅菌的標(biāo)準(zhǔn)條件是？【選項(xiàng)】A.100℃,15-20分鐘B.121℃,15-30分鐘C.160℃,2小時(shí)D.132℃,3分鐘【參考答案】B【解析】121℃（壓力103.4kPa）維持15-30分鐘可徹底殺滅包括芽孢在內(nèi)的所有微生物。100℃為煮沸消毒（殺滅繁殖體），160℃用于干熱滅菌（≥2小時(shí)），132℃為預(yù)真空滅菌器快速滅菌參數(shù)。30.用于鑒別志賀菌屬和沙門(mén)菌屬的關(guān)鍵生化反應(yīng)是？【選項(xiàng)】A.尿素酶試驗(yàn)B.硫化氫試驗(yàn)C.賴(lài)氨酸脫羧酶試驗(yàn)D.甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)【參考答案】C【解析】志賀菌賴(lài)氨酸脫羧酶陰性，沙門(mén)菌多為陽(yáng)性（除傷寒沙門(mén)菌）；兩者均尿素酶陰性，但沙門(mén)菌多產(chǎn)硫化氫（志賀菌不產(chǎn)），甘露醇發(fā)酵試驗(yàn)非關(guān)鍵區(qū)分點(diǎn)（部分志賀菌可陽(yáng)性）。31.革蘭氏染色過(guò)程中，哪一步驟直接影響細(xì)菌染色的最終結(jié)果？【選項(xiàng)】A.初染（結(jié)晶紫）B.媒染（碘液）C.脫色（酒精）D.復(fù)染（沙黃）【參考答案】C【解析】革蘭氏染色中，脫色是關(guān)鍵步驟。若脫色過(guò)度，革蘭陽(yáng)性菌的紫色會(huì)被洗脫，導(dǎo)致假陰性；脫色不足則革蘭陰性菌無(wú)法褪色，出現(xiàn)假陽(yáng)性。酒精脫色時(shí)間需嚴(yán)格控制（通常為15-30秒），其他步驟如初染、媒染、復(fù)染為固定和對(duì)比步驟。32.SS瓊脂培養(yǎng)基常用于分離何種病原菌？【選項(xiàng)】A.葡萄球菌B.沙門(mén)氏菌C.結(jié)核分枝桿菌D.白喉?xiàng)U菌【參考答案】B【解析】SS瓊脂（沙門(mén)氏菌-志賀氏菌瓊脂）含膽鹽和煌綠，可抑制革蘭陽(yáng)性菌及部分大腸桿菌，選擇性地促進(jìn)沙門(mén)氏菌和志賀氏菌生長(zhǎng)。A項(xiàng)常用甘露醇高鹽瓊脂，C項(xiàng)用羅氏培養(yǎng)基，D項(xiàng)用呂氏血清斜面。33.病毒在細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE）表現(xiàn)不包括？【選項(xiàng)】A.細(xì)胞變圓脫落B.細(xì)胞融合形成合胞體C.胞漿內(nèi)嗜酸性包涵體D.培養(yǎng)基變渾濁【參考答案】D【解析】CPE為病毒致細(xì)胞形態(tài)改變，如細(xì)胞脫落（A）、合胞體（B）、包涵體（C）。D項(xiàng)培養(yǎng)基渾濁可能因細(xì)菌污染，病毒增殖不引起肉眼可見(jiàn)渾濁。34.臨床標(biāo)本若需長(zhǎng)時(shí)間運(yùn)送保存，以下操作錯(cuò)誤的是？【選項(xiàng)】A.腦脊液保存于4℃冷藏箱B.糞便標(biāo)本加入甘油緩沖鹽水C.血液標(biāo)本冷凍保存D.厭氧菌標(biāo)本置厭氧轉(zhuǎn)運(yùn)瓶【參考答案】C【解析】C錯(cuò)誤：血液標(biāo)本冷凍會(huì)破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，冷凍僅適用于血清或部分病毒標(biāo)本（如-70℃保存）。A、B、D為正確保存方法，甘油緩沖鹽水可保護(hù)志賀氏菌等腸道菌，厭氧瓶防止氧氣進(jìn)入。35.用于藥敏試驗(yàn)質(zhì)控的標(biāo)準(zhǔn)菌株是？【選項(xiàng)】A.大腸埃希菌ATCC25922B.金黃色葡萄球菌ATCC29249C.銅綠假單胞菌ATCC27853D.肺炎鏈球菌ATCC49619【參考答案】A【解析】大腸埃希菌ATCC25922為CLSI推薦的藥敏質(zhì)控菌株（腸道桿菌代表）。B項(xiàng)為凝固酶陰性葡萄球菌測(cè)試菌株，C項(xiàng)用于非發(fā)酵菌藥敏質(zhì)控，D項(xiàng)用于肺炎鏈球菌β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素試驗(yàn)。二、多選題（共35題）1.關(guān)于微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)要求，以下說(shuō)法正確的是：A.接觸可能含有病原微生物的標(biāo)本時(shí)，必須佩戴防護(hù)手套B.生物安全柜內(nèi)操作過(guò)程中可短暫關(guān)閉玻璃窗以提高操作靈活性C.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，所有廢棄物必須經(jīng)高壓蒸汽滅菌處理后方可丟棄D.處理具有潛在氣溶膠風(fēng)險(xiǎn)的標(biāo)本時(shí)，應(yīng)在生物安全柜內(nèi)操作E.實(shí)驗(yàn)服可重復(fù)使用，但需每周清洗消毒【選項(xiàng)】A.接觸可能含有病原微生物的標(biāo)本時(shí)，必須佩戴防護(hù)手套B.生物安全柜內(nèi)操作過(guò)程中可短暫關(guān)閉玻璃窗以提高操作靈活性C.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，所有廢棄物必須經(jīng)高壓蒸汽滅菌處理后方可丟棄D.處理具有潛在氣溶膠風(fēng)險(xiǎn)的標(biāo)本時(shí)，應(yīng)在生物安全柜內(nèi)操作E.實(shí)驗(yàn)服可重復(fù)使用，但需每周清洗消毒【參考答案】ACD【解析】1.A正確：接觸潛在感染性標(biāo)本時(shí)佩戴手套是基礎(chǔ)防護(hù)要求。2.B錯(cuò)誤：生物安全柜操作期間禁止關(guān)閉前窗，否則會(huì)破壞氣流屏障，增加暴露風(fēng)險(xiǎn)。3.C正確：高危廢棄物必須經(jīng)滅菌處理以避免病原體擴(kuò)散。4.D正確：氣溶膠風(fēng)險(xiǎn)操作（如離心、震蕩）需在生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。5.E錯(cuò)誤：實(shí)驗(yàn)服一旦污染應(yīng)立即更換，不可重復(fù)使用至固定周期。2.下列細(xì)菌培養(yǎng)條件描述中，錯(cuò)誤的是：A.淋病奈瑟菌需在5%-10%CO?環(huán)境培養(yǎng)B.破傷風(fēng)梭菌需在厭氧環(huán)境中培養(yǎng)C.結(jié)核分枝桿菌最適生長(zhǎng)溫度為30℃D.嗜肺軍團(tuán)菌常用活性炭酵母浸液培養(yǎng)基E.幽門(mén)螺桿菌需補(bǔ)充5%-10%羊血的培養(yǎng)基【選項(xiàng)】A.淋病奈瑟菌需在5%-10%CO?環(huán)境培養(yǎng)B.破傷風(fēng)梭菌需在厭氧環(huán)境中培養(yǎng)C.結(jié)核分枝桿菌最適生長(zhǎng)溫度為30℃D.嗜肺軍團(tuán)菌常用活性炭酵母浸液培養(yǎng)基E.幽門(mén)螺桿菌需補(bǔ)充5%-10%羊血的培養(yǎng)基【參考答案】CE【解析】1.A正確：淋病奈瑟菌為苛養(yǎng)菌，需CO?促進(jìn)生長(zhǎng)。2.B正確：破傷風(fēng)梭菌為嚴(yán)格厭氧菌。3.C錯(cuò)誤：結(jié)核分枝桿菌最適生長(zhǎng)溫度為37℃（人體體溫）。4.D正確：活性炭酵母浸液培養(yǎng)基（BCYE）是軍團(tuán)菌專(zhuān)用培養(yǎng)基。5.E錯(cuò)誤：幽門(mén)螺桿菌常用Skirrow培養(yǎng)基（含馬血），羊血非必需。3.關(guān)于微生物學(xué)檢驗(yàn)中的消毒滅菌方法，以下組合正確的是：A.血清樣本除菌——濾膜過(guò)濾法B.手術(shù)器械滅菌——紫外線(xiàn)照射30分鐘C.病毒接種細(xì)胞前處理——0.1%苯扎溴銨浸泡D.高危廢棄物處理——121℃高壓蒸汽滅菌20分鐘E.實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面消毒——75%乙醇擦拭【選項(xiàng)】A.血清樣本除菌——濾膜過(guò)濾法B.手術(shù)器械滅菌——紫外線(xiàn)照射30分鐘C.病毒接種細(xì)胞前處理——0.1%苯扎溴銨浸泡D.高危廢棄物處理——121℃高壓蒸汽滅菌20分鐘E.實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面消毒——75%乙醇擦拭【參考答案】ADE【解析】1.A正確：濾膜過(guò)濾可去除血清中細(xì)菌而不破壞成分。2.B錯(cuò)誤：手術(shù)器械需高壓蒸汽滅菌，紫外線(xiàn)穿透力差無(wú)法滅菌。3.C錯(cuò)誤：苯扎溴銨滅活病毒效果差，常用β-丙內(nèi)酯處理。4.D正確：高壓蒸汽滅菌是生物廢棄物處理的金標(biāo)準(zhǔn)。5.E正確：75%乙醇可有效滅活多數(shù)病原體，適用于臺(tái)面消毒。4.下列生化試驗(yàn)與細(xì)菌鑒定匹配正確的是：A.肺炎克雷伯菌——脲酶陽(yáng)性B.大腸埃希菌——氧化酶陽(yáng)性C.銅綠假單胞菌——?jiǎng)恿υ囼?yàn)陰性D.沙門(mén)菌屬——H?S產(chǎn)生陽(yáng)性E.金黃色葡萄球菌——凝固酶陽(yáng)性【選項(xiàng)】A.肺炎克雷伯菌——脲酶陽(yáng)性B.大腸埃希菌——氧化酶陽(yáng)性C.銅綠假單胞菌——?jiǎng)恿υ囼?yàn)陰性D.沙門(mén)菌屬——H?S產(chǎn)生陽(yáng)性E.金黃色葡萄球菌——凝固酶陽(yáng)性【參考答案】ADE【解析】1.A正確：肺炎克雷伯菌可分解尿素產(chǎn)生堿性環(huán)境。2.B錯(cuò)誤：大腸埃希菌氧化酶陰性，腸桿菌科多為此特性。3.C錯(cuò)誤：銅綠假單胞菌具鞭毛，動(dòng)力試驗(yàn)陽(yáng)性。4.D正確：沙門(mén)菌在TSI培養(yǎng)基中產(chǎn)H?S形成黑色沉淀。5.E正確：凝固酶試驗(yàn)是金葡菌鑒定的關(guān)鍵指標(biāo)。5.關(guān)于細(xì)菌耐藥性檢測(cè)方法，描述錯(cuò)誤的是：A.K-B紙片擴(kuò)散法需根據(jù)CLSI標(biāo)準(zhǔn)判讀抑菌圈直徑B.肉湯稀釋法可直接測(cè)定藥物對(duì)細(xì)菌的最小殺菌濃度（MBC）C.PCR檢測(cè)耐藥基因可替代傳統(tǒng)藥敏試驗(yàn)作為治療依據(jù)D.β-內(nèi)酰胺酶檢測(cè)可用頭孢硝噻吩紙片法E.ESBLs確證試驗(yàn)需比較含克拉維酸與不含克拉維酸的抑菌圈差異【選項(xiàng)】A.K-B紙片擴(kuò)散法需根據(jù)CLSI標(biāo)準(zhǔn)判讀抑菌圈直徑B.肉湯稀釋法可直接測(cè)定藥物對(duì)細(xì)菌的最小殺菌濃度（MBC）C.PCR檢測(cè)耐藥基因可替代傳統(tǒng)藥敏試驗(yàn)作為治療依據(jù)D.β-內(nèi)酰胺酶檢測(cè)可用頭孢硝噻吩紙片法E.ESBLs確證試驗(yàn)需比較含克拉維酸與不含克拉維酸的抑菌圈差異【參考答案】BC【解析】1.A正確：CLSI指南是K-B法判讀的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)。2.B錯(cuò)誤：肉湯稀釋法測(cè)定的是MIC（最低抑菌濃度），MBC需額外試驗(yàn)。3.C錯(cuò)誤：耐藥基因檢測(cè)不能完全替代表型藥敏試驗(yàn)（如表達(dá)沉默基因）。4.D正確：頭孢硝噻吩紙片變色提示β-內(nèi)酰胺酶活性。5.E正確：克拉維酸可抑制ESBLs活性，通過(guò)抑菌圈差異確認(rèn)產(chǎn)酶。6.下列培養(yǎng)基與其用途匹配錯(cuò)誤的是：A.SS培養(yǎng)基——志賀菌選擇性分離B.TCBS培養(yǎng)基——霍亂弧菌培養(yǎng)C.羅氏培養(yǎng)基——結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)D.巧克力培養(yǎng)基——流感嗜血桿菌培養(yǎng)E.堿性蛋白胨水——白喉棒狀桿菌增菌【選項(xiàng)】A.SS培養(yǎng)基——志賀菌選擇性分離B.TCBS培養(yǎng)基——霍亂弧菌培養(yǎng)C.羅氏培養(yǎng)基——結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)D.巧克力培養(yǎng)基——流感嗜血桿菌培養(yǎng)E.堿性蛋白胨水——白喉棒狀桿菌增菌【參考答案】E【解析】1.A正確：SS培養(yǎng)基抑制革蘭陽(yáng)性菌，促進(jìn)腸道致病菌生長(zhǎng)。2.B正確：TCBS培養(yǎng)基的高pH和膽鹽適合弧菌生長(zhǎng)（霍亂弧菌呈黃色菌落）。3.C正確：羅氏培養(yǎng)基含孔雀綠抑制雜菌，用于結(jié)核菌培養(yǎng)。4.D正確：巧克力培養(yǎng)基（含V因子和X因子）支持嗜血桿菌生長(zhǎng)。5.E錯(cuò)誤：堿性蛋白胨水用于霍亂弧菌增菌，白喉棒狀桿菌用呂氏血清培養(yǎng)基。7.關(guān)于病毒核酸檢測(cè)的敘述，正確的是：A.RT-PCR可用于RNA病毒檢測(cè)B.實(shí)時(shí)熒光PCR可定量檢測(cè)病毒載量C.引物設(shè)計(jì)的依據(jù)是病毒包膜蛋白基因D.核酸提取需在生物安全柜內(nèi)操作E.PCR循環(huán)參數(shù)需針對(duì)特定病毒優(yōu)化【選項(xiàng)】A.RT-PCR可用于RNA病毒檢測(cè)B.實(shí)時(shí)熒光PCR可定量檢測(cè)病毒載量C.引物設(shè)計(jì)的依據(jù)是病毒包膜蛋白基因D.核酸提取需在生物安全柜內(nèi)操作E.PCR循環(huán)參數(shù)需針對(duì)特定病毒優(yōu)化【參考答案】ABDE【解析】1.A正確：RT-PCR通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄將RNA轉(zhuǎn)為DNA后擴(kuò)增。2.B正確：實(shí)時(shí)熒光PCR通過(guò)Ct值定量計(jì)算初始模板量。3.C錯(cuò)誤：引物設(shè)計(jì)通常針對(duì)保守區(qū)域（如聚合酶基因），非包膜蛋白。4.D正確：核酸提取涉及開(kāi)蓋操作，需生物安全防護(hù)。5.E正確：退火溫度、循環(huán)次數(shù)等需根據(jù)病毒基因特性調(diào)整。8.下列微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制措施中，必須執(zhí)行的是：A.每批培養(yǎng)基使用前做無(wú)菌試驗(yàn)B.每日監(jiān)測(cè)二氧化碳培養(yǎng)箱的CO?濃度C.每月對(duì)高壓滅菌器進(jìn)行生物指示劑監(jiān)測(cè)D.新購(gòu)試劑需用標(biāo)準(zhǔn)菌株驗(yàn)證效能E.每年對(duì)檢測(cè)人員進(jìn)行盲樣考核【選項(xiàng)】A.每批培養(yǎng)基使用前做無(wú)菌試驗(yàn)B.每日監(jiān)測(cè)二氧化碳培養(yǎng)箱的CO?濃度C.每月對(duì)高壓滅菌器進(jìn)行生物指示劑監(jiān)測(cè)D.新購(gòu)試劑需用標(biāo)準(zhǔn)菌株驗(yàn)證效能E.每年對(duì)檢測(cè)人員進(jìn)行盲樣考核【參考答案】ACD【解析】1.A正確：培養(yǎng)基無(wú)菌試驗(yàn)可排除污染導(dǎo)致的假陰性。2.B錯(cuò)誤：CO?濃度通常每周校準(zhǔn)，非每日監(jiān)測(cè)。3.C正確：高壓滅菌器每月用嗜熱脂肪芽孢桿菌監(jiān)測(cè)滅菌效果。4.D正確：試劑效能驗(yàn)證是質(zhì)控基本要求（如藥敏紙片用ATCC標(biāo)準(zhǔn)菌株）。5.E錯(cuò)誤：人員盲樣考核頻次無(wú)統(tǒng)一規(guī)定，通常每季度或每半年一次。9.關(guān)于微生物標(biāo)本采集與運(yùn)輸，錯(cuò)誤的是：A.腦脊液細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本需常溫立即送檢B.血培養(yǎng)瓶消毒后靜置10分鐘再注入血液C.痰標(biāo)本應(yīng)在抗菌藥物使用前采集D.糞便標(biāo)本運(yùn)送需加入甘油緩沖鹽水保存E.生殖道標(biāo)本采集應(yīng)避開(kāi)月經(jīng)期【選項(xiàng)】A.腦脊液細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本需常溫立即送檢B.血培養(yǎng)瓶消毒后靜置10分鐘再注入血液C.痰標(biāo)本應(yīng)在抗菌藥物使用前采集D.糞便標(biāo)本運(yùn)送需加入甘油緩沖鹽水保存E.生殖道標(biāo)本采集應(yīng)避開(kāi)月經(jīng)期【參考答案】AB【解析】1.A錯(cuò)誤：腦脊液標(biāo)本需保溫運(yùn)送（35-37℃），防止嗜冷菌死亡。2.B錯(cuò)誤：血培養(yǎng)瓶消毒后應(yīng)即刻采血，靜置會(huì)增加污染風(fēng)險(xiǎn)。3.C正確：抗菌藥物會(huì)抑制細(xì)菌生長(zhǎng)，導(dǎo)致假陰性。4.D正確：甘油緩沖鹽水可維持腸道致病菌活性（如志賀菌）。5.E正確：經(jīng)血可能干擾生殖道標(biāo)本的病原體檢出。10.在真菌檢驗(yàn)中，以下特征與相應(yīng)真菌匹配正確的是：A.厚膜孢子——白念珠菌B.墨汁負(fù)染莢膜——新型隱球菌C.45℃生長(zhǎng)試驗(yàn)——莢膜組織胞漿菌D.乳酸棉酚藍(lán)染色——觀(guān)察真菌形態(tài)E.玉米粉培養(yǎng)基——誘導(dǎo)紅色毛癬菌產(chǎn)孢【選項(xiàng)】A.厚膜孢子——白念珠菌B.墨汁負(fù)染莢膜——新型隱球菌C.45℃生長(zhǎng)試驗(yàn)——莢膜組織胞漿菌D.乳酸棉酚藍(lán)染色——觀(guān)察真菌形態(tài)E.玉米粉培養(yǎng)基——誘導(dǎo)紅色毛癬菌產(chǎn)孢【參考答案】ABD【解析】1.A正確：白念珠菌在玉米粉培養(yǎng)基可產(chǎn)生厚壁孢子。2.B正確：墨汁染色顯示隱球菌的透明莢膜（背景黑色）。3.C錯(cuò)誤：45℃生長(zhǎng)試驗(yàn)用于鑒別白念珠菌（生長(zhǎng)）與其他念珠菌。4.D正確：乳酸棉酚藍(lán)使真菌著色（藍(lán)色），便于形態(tài)觀(guān)察。5.E錯(cuò)誤：玉米粉培養(yǎng)基用于念珠菌產(chǎn)孢，紅色毛癬菌用馬鈴薯葡萄糖瓊脂。11.下列哪些方法是微生物實(shí)驗(yàn)室常用于細(xì)菌鑒定的傳統(tǒng)技術(shù)？（）【選項(xiàng)】A.革蘭染色及顯微鏡觀(guān)察形態(tài)B.生化反應(yīng)試驗(yàn)（如糖發(fā)酵、氧化酶試驗(yàn)等）C.16SrRNA基因測(cè)序分析D.質(zhì)譜技術(shù)（如MALDI-TOFMS）E.免疫熒光法檢測(cè)表面抗原【參考答案】AB【解析】1.A正確：革蘭染色是細(xì)菌鑒定的基礎(chǔ)方法，通過(guò)染色特性（陽(yáng)性/陰性）和形態(tài)（球菌/桿菌）初步分類(lèi)。2.B正確：生化試驗(yàn)（如糖代謝、酶活性）是傳統(tǒng)鑒定的核心手段，如API鑒定系統(tǒng)依賴(lài)此類(lèi)反應(yīng)。3.C錯(cuò)誤：16SrRNA測(cè)序?qū)儆诜肿由飳W(xué)技術(shù)，非傳統(tǒng)方法。4.D錯(cuò)誤：質(zhì)譜技術(shù)為現(xiàn)代快速鑒定手段，非傳統(tǒng)范疇。5.E錯(cuò)誤：免疫熒光法常用于病毒或特定抗原檢測(cè)，細(xì)菌傳統(tǒng)鑒定中較少直接使用。12.關(guān)于血清學(xué)試驗(yàn)在微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用，下列描述正確的是？（）【選項(xiàng)】A.肥達(dá)試驗(yàn)用于傷寒、副傷寒沙門(mén)菌感染的輔助診斷B.外斐試驗(yàn)可輔助診斷立克次體?。ㄈ绨哒顐〤.抗鏈球菌溶血素“O”（ASO）試驗(yàn)用于風(fēng)濕熱篩查D.直接凝集試驗(yàn)僅適用于細(xì)菌性疾病的檢測(cè)E.補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)對(duì)病毒感染的診斷具有高度特異性【參考答案】ABCE【解析】1.A正確：肥達(dá)試驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)患者血清中沙門(mén)菌抗體進(jìn)行傷寒診斷。2.B正確：外斐試驗(yàn)利用變形桿菌抗原與立克次體的交叉反應(yīng)進(jìn)行診斷。3.C正確：ASO試驗(yàn)用于A組鏈球菌感染后風(fēng)濕熱或腎小球腎炎的輔助診斷。4.D錯(cuò)誤：直接凝集試驗(yàn)也用于寄生蟲(chóng)病（如瘧疾）和支原體檢測(cè)。5.E正確：補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)曾是病毒診斷金標(biāo)準(zhǔn)（如乙腦病毒），但因操作復(fù)雜現(xiàn)已較少用。13.高壓蒸汽滅菌法的操作要求及適用物品范圍包括？（）【選項(xiàng)】A.滅菌條件通常為121℃、15～20分鐘B.適用于含糖培養(yǎng)基的滅菌，無(wú)需調(diào)整參數(shù)C.手術(shù)器械、玻璃器皿等耐高溫物品首選此法D.可滅活朊病毒污染的物品E.滅菌后需檢測(cè)滅菌效果（如使用化學(xué)指示卡）【參考答案】ACE【解析】1.A正確：121℃維持15-30分鐘是標(biāo)準(zhǔn)滅菌參數(shù)。2.B錯(cuò)誤：含糖培養(yǎng)基需115℃滅菌以防糖類(lèi)炭化。3.C正確：金屬器械、玻璃器皿等耐高溫物品適用此法。4.D錯(cuò)誤：朊病毒需特殊處理（如134℃≥18分鐘）。5.E正確：化學(xué)指示卡或生物指示劑（如嗜熱脂肪芽孢桿菌）用于效果驗(yàn)證。14.臨床微生物實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)時(shí)，可選用的標(biāo)準(zhǔn)化方法包括？（）【選項(xiàng)】A.瓊脂稀釋法B.紙片擴(kuò)散法（K-B法）C.E試驗(yàn)（Epsilometertest）D.自動(dòng)化儀器法（如VITEK系統(tǒng)）E.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）檢測(cè)耐藥基因【參考答案】ABCD【解析】1.A正確：瓊脂稀釋法是CLSI推薦的定量藥敏方法之一。2.B正確：K-B法是WHO推薦的定性標(biāo)準(zhǔn)方法。3.C正確：E試驗(yàn)結(jié)合稀釋法和擴(kuò)散法原理，可測(cè)定MIC值。4.D正確：VITEK等自動(dòng)化系統(tǒng)通過(guò)比濁法快速檢測(cè)藥敏結(jié)果。5.E錯(cuò)誤：PCR檢測(cè)耐藥基因?qū)俜肿由飳W(xué)手段，非常規(guī)藥敏試驗(yàn)方法。15.病毒分離培養(yǎng)的常用技術(shù)包括？（）【選項(xiàng)】A.雞胚尿囊腔接種B.細(xì)胞培養(yǎng)（如Hep-2、Vero細(xì)胞系）C.血瓊脂平板培養(yǎng)D.顯色培養(yǎng)基培養(yǎng)E.ELISA法檢測(cè)病毒抗原【參考答案】AB【解析】1.A正確：雞胚接種是傳統(tǒng)病毒培養(yǎng)方法（如流感病毒）。2.B正確：細(xì)胞培養(yǎng)是當(dāng)前病毒分離的主流技術(shù)。3.C錯(cuò)誤：血瓊脂平板用于細(xì)菌培養(yǎng)。4.D錯(cuò)誤：顯色培養(yǎng)基針對(duì)特定細(xì)菌（如MRSA）。5.E錯(cuò)誤：ELISA是抗原檢測(cè)方法，非分離培養(yǎng)技術(shù)。16.關(guān)于實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)，下列描述符合BSL-2級(jí)要求的是？（）【選項(xiàng)】A.實(shí)驗(yàn)人員需穿戴防護(hù)服、手套和護(hù)目鏡B.操作應(yīng)在Ⅱ級(jí)生物安全柜內(nèi)進(jìn)行C.實(shí)驗(yàn)室門(mén)口張貼生物危險(xiǎn)標(biāo)識(shí)D.處理高致病性病原體時(shí)需使用正壓防護(hù)服E.實(shí)驗(yàn)室需配備定向氣流和高效空氣過(guò)濾系統(tǒng)【參考答案】ABC【解析】1.A正確：BSL-2要求基本個(gè)人防護(hù)（如防護(hù)服、手套）。2.B正確：可能產(chǎn)生氣溶膠的操作需在Ⅱ級(jí)生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。3.C正確：所有BSL-2實(shí)驗(yàn)室需有生物危險(xiǎn)標(biāo)識(shí)。4.D錯(cuò)誤：正壓防護(hù)服為BSL-4級(jí)防護(hù)措施。5.E錯(cuò)誤：定向氣流和高效過(guò)濾是BSL-3及以上實(shí)驗(yàn)室的要求。17.細(xì)菌的特殊結(jié)構(gòu)中，哪些與致病性密切相關(guān)？（）【選項(xiàng)】A.莢膜（如肺炎鏈球菌的抗吞噬作用）B.芽孢（如炭疽桿菌的抵抗力）C.鞭毛（如霍亂弧菌的運(yùn)動(dòng)侵襲能力）D.菌毛（如淋球菌的黏附定植作用）E.質(zhì)粒（如攜帶耐藥基因的R質(zhì)粒）【參考答案】ACDE【解析】1.A正確：莢膜可抵抗宿主吞噬細(xì)胞殺滅。2.B錯(cuò)誤：芽孢主要增強(qiáng)環(huán)境抵抗力，與直接致病無(wú)關(guān)。3.C正確：鞭毛運(yùn)動(dòng)有助于細(xì)菌穿透黏膜屏障。4.D正確：菌毛介導(dǎo)細(xì)菌與宿主細(xì)胞的黏附。5.E正確：質(zhì)粒攜帶耐藥基因影響治療，間接增強(qiáng)致病性。18.結(jié)核分枝桿菌實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的特征性方法包括？（）【選項(xiàng)】A.抗酸染色鏡檢（齊-尼氏染色）B.羅氏培養(yǎng)基培養(yǎng)（生長(zhǎng)緩慢，需4-8周）C.革蘭染色呈紫色陽(yáng)性桿菌D.PCR法檢測(cè)特異性IS6110序列E.紫外線(xiàn)照射30分鐘可徹底殺滅【參考答案】ABD【解析】1.A正確：抗酸染色是結(jié)核桿菌形態(tài)學(xué)診斷金標(biāo)準(zhǔn)。2.B正確：羅氏培養(yǎng)基為分離培養(yǎng)的專(zhuān)用方法。3.C錯(cuò)誤：結(jié)核分枝桿菌革蘭染色呈弱陽(yáng)性但不易著色，常規(guī)描述為"抗酸陽(yáng)性菌"。4.D正確：IS6110是結(jié)核桿菌的特異性基因靶標(biāo)。5.E錯(cuò)誤：結(jié)核桿菌對(duì)紫外線(xiàn)敏感，但需根據(jù)照射強(qiáng)度確定時(shí)間，30分鐘不準(zhǔn)確。19.真菌鏡檢常用的染色方法與適用對(duì)象對(duì)應(yīng)正確的是？（）【選項(xiàng)】A.10%KOH溶液——溶解角蛋白觀(guān)察皮膚癬菌B.墨汁負(fù)染——新型隱球菌莢膜檢測(cè)C.乳酸酚棉藍(lán)染色——絲狀真菌形態(tài)觀(guān)察D.革蘭染色——白念珠菌假菌絲顯示E.HE染色——組織標(biāo)本內(nèi)真菌結(jié)構(gòu)觀(guān)察【參考答案】ABCDE【解析】1.A正確：KOH處理角質(zhì)層后更易觀(guān)察癬菌菌絲。2.B正確：墨汁負(fù)染凸顯隱球菌莢膜（如腦脊液標(biāo)本）。3.C正確：棉藍(lán)染色使絲狀真菌（如曲霉）結(jié)構(gòu)更清晰。4.D正確：革蘭染色中白念珠菌呈G?，可顯示假菌絲。5.E正確：HE染色用于病理切片中的真菌形態(tài)觀(guān)察（如念珠菌、毛霉）。20.防止PCR檢測(cè)假陽(yáng)性的措施包括？（）【選項(xiàng)】A.設(shè)立陰性對(duì)照（無(wú)模板對(duì)照）B.試劑分裝與實(shí)驗(yàn)區(qū)域分區(qū)操作C.使用UNG酶（尿嘧啶-DNA糖基化酶）防污染D.所有試劑進(jìn)行高壓滅菌處理E.延長(zhǎng)模板DNA變性時(shí)間至10分鐘【參考答案】ABC【解析】1.A正確：陰性對(duì)照可監(jiān)測(cè)反應(yīng)體系污染。2.B正確：試劑制備、標(biāo)本處理、PCR擴(kuò)增分區(qū)操作防交叉污染。3.C正確：UNG酶可降解含dU的污染產(chǎn)物。4.D錯(cuò)誤：DNA模板高壓滅菌會(huì)破壞，且Taq酶等試劑不能高壓。5.E錯(cuò)誤：延長(zhǎng)變性時(shí)間可能破壞DNA聚合酶活性，與防污染無(wú)關(guān)。21.關(guān)于微生物檢驗(yàn)中的消毒與滅菌技術(shù)，下列表述正確的有：（）A.煮沸消毒法可殺死所有細(xì)菌繁殖體和部分芽孢B.干熱滅菌適用于不耐高溫濕熱的玻璃器皿C.高壓蒸汽滅菌法的滅菌參數(shù)為121℃、15-30分鐘D.紫外線(xiàn)消毒對(duì)革蘭陰性菌的殺滅效果優(yōu)于革蘭陽(yáng)性菌E.含氯消毒劑在有機(jī)物存在時(shí)仍能保持高效殺菌能力【選項(xiàng)】A.煮沸消毒法可殺死所有細(xì)菌繁殖體和部分芽孢B.干熱滅菌適用于不耐高溫濕熱的玻璃器皿C.高壓蒸汽滅菌法的滅菌參數(shù)為121℃、15-30分鐘D.紫外線(xiàn)消毒對(duì)革蘭陰性菌的殺滅效果優(yōu)于革蘭陽(yáng)性菌E.含氯消毒劑在有機(jī)物存在時(shí)仍能保持高效殺菌能力【參考答案】ABCE【解析】1.A正確：煮沸消毒（100℃）可殺滅細(xì)菌繁殖體，但芽孢需長(zhǎng)時(shí)間煮沸才能滅活。2.B正確：干熱滅菌（160~170℃）適用于玻璃器皿等不耐濕熱物品的滅菌。3.C正確：高壓蒸汽滅菌標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)為121℃、15~30分鐘，可徹底殺滅所有微生物。4.D錯(cuò)誤：紫外線(xiàn)對(duì)革蘭陽(yáng)性菌（如金黃色葡萄球菌）殺滅效果優(yōu)于革蘭陰性菌（如大腸桿菌）。5.E正確：含氯消毒劑穩(wěn)定性較強(qiáng)，有機(jī)物對(duì)其殺菌效果影響較小。22.下列哪些微生物檢驗(yàn)標(biāo)本采集后需立即送檢且避免冷藏？（）A.腦脊液B.尿液C.膿液D.生殖道分泌物E.血液培養(yǎng)瓶【選項(xiàng)】A.腦脊液B.尿液C.膿液D.生殖道分泌物E.血液培養(yǎng)瓶【參考答案】AE【解析】1.A正確：腦脊液標(biāo)本中微生物（如腦膜炎奈瑟菌）對(duì)溫度敏感，冷藏會(huì)導(dǎo)致死亡。2.B錯(cuò)誤：尿液標(biāo)本如不能立即送檢需冷藏（2~8℃）保存，防止細(xì)菌過(guò)度繁殖。3.C錯(cuò)誤：膿液標(biāo)本可短期室溫保存，多數(shù)病原菌耐受力較強(qiáng)。4.D錯(cuò)誤：生殖道分泌物（如淋球菌）雖需盡快送檢，但短時(shí)冷藏不影響檢出率。5.E正確：血液培養(yǎng)瓶需保持恒溫（35~37℃），避免冷藏導(dǎo)致的細(xì)菌生長(zhǎng)抑制。23.關(guān)于腸道致病菌的選擇性培養(yǎng)基，正確的組合是：（）A.沙門(mén)菌——SS瓊脂B.志賀菌——麥康凱瓊脂C.霍亂弧菌——堿性蛋白胨水D.副溶血性弧菌——TCBS瓊脂E.大腸埃希菌O157——山梨醇麥康凱瓊脂【選項(xiàng)】A.沙門(mén)菌——SS瓊脂B.志賀菌——麥康凱瓊脂C.霍亂弧菌——堿性蛋白胨水D.副溶血性弧菌——TCBS瓊脂E.大腸埃希菌O157——山梨醇麥康凱瓊脂【參考答案】ACDE【解析】1.A正確：SS瓊脂含膽鹽抑制革蘭陽(yáng)性菌，利于沙門(mén)菌（無(wú)色菌落）和志賀菌（粉紅色菌落）分離。2.B錯(cuò)誤：志賀菌首選培養(yǎng)基為SS瓊脂或HE瓊脂，麥康凱瓊脂用于初步篩選腸桿菌科細(xì)菌。3.C正確：堿性蛋白胨水（pH8.4~9.0）是霍亂弧菌增菌培養(yǎng)的經(jīng)典選擇。4.D正確：TCBS瓊脂（硫代硫酸鹽-枸櫞酸鹽-膽鹽-蔗糖）可特異性分離副溶血性弧菌（綠色菌落）。5.E正確：山梨醇麥康凱瓊脂（SMAC）中大腸埃希菌O157:H7不發(fā)酵山梨醇呈無(wú)色菌落，可與其他大腸桿菌區(qū)分。24.下列哪些方法可用于細(xì)菌的快速鑒定？（）A.MALDI-TOFMSB.全自動(dòng)藥敏分析系統(tǒng)C.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）D.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）E.明膠液化試驗(yàn)【選項(xiàng)】A.MALDI-TOFMSB.全自動(dòng)藥敏分析系統(tǒng)C.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）D.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）E.明膠液化試驗(yàn)【參考答案】ACD【解析】1.A正確：基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜（MALDI-TOFMS）可在數(shù)分鐘內(nèi)通過(guò)蛋白質(zhì)譜分析鑒定細(xì)菌。2.B錯(cuò)誤：藥敏分析系統(tǒng)主要用于抗菌藥物敏感性試驗(yàn)，非鑒定手段。3.C正確：ELISA通過(guò)檢測(cè)細(xì)菌特異性抗原來(lái)實(shí)現(xiàn)快速鑒定（如輪狀病毒檢測(cè)）。4.D正確：PCR通過(guò)擴(kuò)增特定基因片段快速鑒定病原微生物（如結(jié)核分枝桿菌）。5.E錯(cuò)誤：明膠液化試驗(yàn)屬于傳統(tǒng)生化試驗(yàn)，需18~24小時(shí)觀(guān)察結(jié)果，非快速方法。25.關(guān)于真菌與細(xì)菌的結(jié)構(gòu)區(qū)別，下列描述正確的有：（）A.真菌具有真正的細(xì)胞核B.細(xì)菌細(xì)胞膜含固醇類(lèi)物質(zhì)C.真菌細(xì)胞壁主要成分為肽聚糖D.細(xì)菌核糖體為80S型E.真菌的繁殖方式包括無(wú)性和有性孢子【選項(xiàng)】A.真菌具有真正的細(xì)胞核B.細(xì)菌細(xì)胞膜含固醇類(lèi)物質(zhì)C.真菌細(xì)胞壁主要成分為肽聚糖D.細(xì)菌核糖體為80S型E.真菌的繁殖方式包括無(wú)性和有性孢子【參考答案】AE【解析】1.A正確：真菌為真核生物，具有完整細(xì)胞核；細(xì)菌為原核生物，無(wú)核膜。2.B錯(cuò)誤：真菌細(xì)胞膜含固醇類(lèi)（如麥角固醇），細(xì)菌細(xì)胞膜不含固醇（支原體除外）。3.C錯(cuò)誤：真菌細(xì)胞壁主要成分為幾丁質(zhì)和β-葡聚糖，細(xì)菌為肽聚糖。4.D錯(cuò)誤：細(xì)菌核糖體為70S型，真菌核糖體為80S型（與真核生物相同）。5.E正確：真菌可通過(guò)分生孢子（無(wú)性）或子囊孢子/擔(dān)孢子（有性）繁殖。26.下列哪些微生物需在生物安全三級(jí)（BSL-3）實(shí)驗(yàn)室操作？（）A.結(jié)核分枝桿菌B.布魯氏菌C.人類(lèi)免疫缺陷病毒（HIV）D.炭疽芽孢桿菌E.甲型肝炎病毒【選項(xiàng)】A.結(jié)核分枝桿菌B.布魯氏菌C.人類(lèi)免疫缺陷病毒（HIV）D.炭疽芽孢桿菌E.甲型肝炎病毒【參考答案】ABD【解析】1.A正確：結(jié)核分枝桿菌可通過(guò)氣溶膠傳播，需BSL-3實(shí)驗(yàn)室操作。2.B正確：布魯氏菌屬高致病性病原體，實(shí)驗(yàn)室感染風(fēng)險(xiǎn)高，需BSL-3防護(hù)。3.C錯(cuò)誤：HIV病毒操作需BSL-2級(jí)（血液樣本檢測(cè)）或BSL-3級(jí)（病毒培養(yǎng)），但常規(guī)血清學(xué)檢測(cè)在BSL-2即可進(jìn)行。4.D正確：炭疽芽孢桿菌為甲類(lèi)傳染病病原體，操作需BSL-3級(jí)。5.E錯(cuò)誤：甲型肝炎病毒經(jīng)消化道傳播，常規(guī)檢測(cè)可在BSL-2實(shí)驗(yàn)室完成。27.關(guān)于病毒培養(yǎng)的細(xì)胞病變效應(yīng)（CPE），正確的描述有：（）A.腺病毒感染可出現(xiàn)細(xì)胞變圓和葡萄串樣聚集B.單純皰疹病毒引起細(xì)胞融合形成合胞體C.脊髓灰質(zhì)炎病毒導(dǎo)致細(xì)胞膜破裂溶解D.輪狀病毒在細(xì)胞內(nèi)形成嗜堿性包涵體E.呼吸道合胞病毒導(dǎo)致細(xì)胞固縮脫落【選項(xiàng)】A.腺病毒感染可出現(xiàn)細(xì)胞變圓和葡萄串樣聚集B.單純皰疹病毒引起細(xì)胞融合形成合胞體C.脊髓灰質(zhì)炎病毒導(dǎo)致細(xì)胞膜破裂溶解D.輪狀病毒在細(xì)胞內(nèi)形成嗜堿性包涵體E.呼吸道合胞病毒導(dǎo)致細(xì)胞固縮脫落【參考答案】ABC【解析】1.A正確：腺病毒的典型CPE為細(xì)胞變圓、聚集成葡萄串狀。2.B正確：?jiǎn)渭儼捳畈《荆℉SV）可導(dǎo)致細(xì)胞融合形成多核巨細(xì)胞（合胞體）。3.C正確：脊髓灰質(zhì)炎病毒等腸道病毒引起細(xì)胞快速溶解。4.D錯(cuò)誤：輪狀病毒在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)形成嗜酸性包涵體，非嗜堿性。5.E錯(cuò)誤：呼吸道合胞病毒（RSV）的CPE特征為合胞體形成，而非細(xì)胞固縮脫落。28.下列哪些屬于核酸檢測(cè)的防污染措施？（）A.反應(yīng)體系中加入dUTP-UNG酶系統(tǒng)B.實(shí)驗(yàn)區(qū)域進(jìn)行單向工作流程（試劑準(zhǔn)備→樣本處理→擴(kuò)增區(qū)）C.使用帶濾芯的微量移液器吸頭D.擴(kuò)增產(chǎn)物開(kāi)蓋前冷凍處理E.實(shí)驗(yàn)臺(tái)每日用70%乙醇擦拭【選項(xiàng)】A.反應(yīng)體系中加入dUTP-UNG酶系統(tǒng)B.實(shí)驗(yàn)區(qū)域進(jìn)行單向工作流程（試劑準(zhǔn)備→樣本處理→擴(kuò)增區(qū)）C.使用帶濾芯的微量移液器吸頭D.擴(kuò)增產(chǎn)物開(kāi)蓋前冷凍處理E.實(shí)驗(yàn)臺(tái)每日用70%乙醇擦拭【參考答案】ABC【解析】1.A正確：dUTP-UNG酶系統(tǒng)可降解含尿嘧啶的污染物，防止既往擴(kuò)增產(chǎn)物污染。2.B正確：?jiǎn)蜗蚬ぷ髁鞒瘫苊鈹U(kuò)增產(chǎn)物反向污染試劑制備區(qū)。3.C正確：帶濾芯吸頭防止氣溶膠交叉污染。4.D錯(cuò)誤：擴(kuò)增產(chǎn)物冷凍無(wú)法滅活核酸，正確方法為化學(xué)滅活（如次氯酸處理）。5.E錯(cuò)誤：70%乙醇不能有效滅活核酸，需用含氯消毒劑或紫外照射。29.關(guān)于血清學(xué)試驗(yàn)的表述，正確的有：（）A.肥達(dá)試驗(yàn)通過(guò)凝集效價(jià)判定傷寒沙門(mén)菌感染B.膠體金法檢測(cè)HIV抗體存在窗口期假陰性風(fēng)險(xiǎn)C.抗鏈球菌溶血素O試驗(yàn)（ASO）用于輔助診斷風(fēng)濕熱D.梅毒非特異性血清學(xué)試驗(yàn)首選TPPA法E.前帶現(xiàn)象會(huì)導(dǎo)致抗原抗體反應(yīng)假陽(yáng)性結(jié)果【選項(xiàng)】A.肥達(dá)試驗(yàn)通過(guò)凝集效價(jià)判定傷寒沙門(mén)菌感染B.膠體金法檢測(cè)HIV抗體存在窗口期假陰性風(fēng)險(xiǎn)C.抗鏈球菌溶血素O試驗(yàn)（ASO）用于輔助診斷風(fēng)濕熱D.梅毒非特異性血清學(xué)試驗(yàn)首選TPPA法E.前帶現(xiàn)象會(huì)導(dǎo)致抗原抗體反應(yīng)假陽(yáng)性結(jié)果【參考答案】ABC【解析】1.A正確：肥達(dá)試驗(yàn)通過(guò)檢測(cè)O、H抗體效價(jià)輔助診斷傷寒或副傷寒。2.B正確：HIV感染后2~6周為抗體窗口期，此期間膠體金法可能漏檢。3.C正確：ASO效價(jià)升高提示A群鏈球菌感染，是風(fēng)濕熱的重要診斷依據(jù)。4.D錯(cuò)誤：梅毒非特異性試驗(yàn)為RPR/TRUST，TPPA屬于特異性確證試驗(yàn)。5.E錯(cuò)誤：前帶現(xiàn)象（抗原過(guò)量）導(dǎo)致假陰性，鉤狀效應(yīng)（抗體過(guò)量）導(dǎo)致假陽(yáng)性。30.關(guān)于支原體的生物學(xué)特性，正確的描述有：（）A.缺乏細(xì)胞壁，呈多形性B.能在無(wú)生命培養(yǎng)基中生長(zhǎng)C.菌落呈“荷包蛋”樣外觀(guān)D.對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素敏感E.解脲脲原體可引起非淋菌性尿道炎【選項(xiàng)】A.缺乏細(xì)胞壁，呈多形性B.能在無(wú)生命培養(yǎng)基中生長(zhǎng)C.菌落呈“荷包蛋”樣外觀(guān)D.對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素敏感E.解脲脲原體可引起非淋菌性尿道炎【參考答案】ABCE【解析】1.A正確：支原體無(wú)細(xì)胞壁，形態(tài)多樣（球狀、絲狀等）。2.B正確：支原體可在含膽固醇和血清的培養(yǎng)基中獨(dú)立生長(zhǎng)。3.C正確：典型菌落中心顆粒狀，周?chē)该鲄^(qū)，形似荷包蛋。4.D錯(cuò)誤：無(wú)細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)導(dǎo)致其對(duì)青霉素等β-內(nèi)酰胺類(lèi)天然耐藥。5.E正確：解脲脲原體是泌尿生殖道感染的常見(jiàn)病原體。31.關(guān)于選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基的描述，下列哪些選項(xiàng)是正確的？A.麥康凱瓊脂能抑制革蘭陽(yáng)性菌的生長(zhǎng)，屬于選擇培養(yǎng)基B.SS瓊脂既可抑制非致病菌又能區(qū)分沙門(mén)菌和志賀菌的菌落特征C.血瓊脂平板屬于鑒別培養(yǎng)基，可觀(guān)察細(xì)菌溶血現(xiàn)象D.巧克力瓊脂通過(guò)添加血紅蛋白和輔酶Ⅰ，屬于營(yíng)養(yǎng)加強(qiáng)型選擇培養(yǎng)基E.伊紅美藍(lán)瓊脂能鑒別大腸埃希菌的金屬光澤菌落【選項(xiàng)】A.麥康凱瓊脂能抑制革蘭陽(yáng)性菌的生長(zhǎng)，屬于選擇培養(yǎng)基B.SS瓊脂既可抑制非致病菌又能區(qū)分沙門(mén)菌和志賀菌的菌落特征C.血瓊脂平板屬于鑒別培養(yǎng)基，可觀(guān)察細(xì)菌溶血現(xiàn)象D.巧克力瓊脂通過(guò)添加血紅蛋白和輔酶Ⅰ，屬于營(yíng)養(yǎng)加強(qiáng)型選擇培養(yǎng)基E.伊紅美藍(lán)瓊脂能鑒別大腸埃希菌的金屬光澤菌落【參考答案】ABCE【解析】A正確，麥康凱含膽鹽結(jié)晶紫，抑制革蘭陽(yáng)性菌；B正確，SS瓊脂中膽鹽抑制非致病菌，硫化氫指示劑可區(qū)分沙門(mén)菌（產(chǎn)硫化氫呈黑色）與志賀菌（無(wú)色）；C正確，血瓊脂通過(guò)溶血環(huán)特征（α/β/γ溶血）鑒別細(xì)菌；D錯(cuò)誤，巧克力瓊脂是營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基非選擇培養(yǎng)基；E正確，大腸埃希菌在伊紅美藍(lán)瓊脂上呈紫黑色金屬光澤。32.高壓蒸汽滅菌法的操作要求中，需特別注意的是？A.滅菌溫度為121℃時(shí)需維持15-20分鐘B.液體滅菌后需快速排氣以防爆沸C.待滅菌物品體積不應(yīng)超過(guò)滅菌器容積的80%D.滅菌包裹內(nèi)需放置化學(xué)指示卡監(jiān)測(cè)效果E.滅菌結(jié)束后立即開(kāi)門(mén)取出物品【選項(xiàng)】A.滅菌溫度為121℃時(shí)需維持15-20分鐘B.液體滅菌后需快速排氣以防爆沸C.待滅菌物品體積不應(yīng)超過(guò)滅菌器容積的80%D.滅菌包裹內(nèi)需放置化學(xué)指示卡監(jiān)測(cè)效果E.滅菌結(jié)束后立即開(kāi)門(mén)取出物品【參考答案】ACD【解析】A正確，此為常規(guī)滅菌參數(shù)；B錯(cuò)誤，液體應(yīng)自然冷卻防爆沸；C正確，確保蒸汽穿透；D正確，化學(xué)指示卡是必要監(jiān)測(cè)手段；E錯(cuò)誤，需壓力降至零再開(kāi)門(mén)防氣溶膠噴出。33.革蘭氏染色操作的關(guān)鍵控制點(diǎn)包括：A.涂片厚度應(yīng)均勻且不宜過(guò)厚B.結(jié)晶紫初染時(shí)間需嚴(yán)格控制在1分鐘C.乙醇脫色是決定染色成敗的核心步驟D.沙黃復(fù)染可修正脫色過(guò)度造成的假陰性E.染液需每日新鮮配制【選項(xiàng)】A.涂片厚度應(yīng)均勻且不宜過(guò)厚B.結(jié)晶紫初染時(shí)間需嚴(yán)格控制在1分鐘C.乙醇脫色是決定染色成敗的核心步驟D.沙黃復(fù)染可修正脫色過(guò)度造成的假陰性E.染液需每日新鮮配制【參考答案】ACD【解析】A正確，厚涂片影響脫色效果；B錯(cuò)誤，初染時(shí)間通常30-60秒范圍較寬；C正確，脫色不足/過(guò)度導(dǎo)致假陽(yáng)/陰性；D正確，復(fù)染可使脫色過(guò)度的革蘭陽(yáng)性菌顯紅色；E錯(cuò)誤，染液可保存數(shù)周。34.關(guān)于微生物接種方法，描述錯(cuò)誤的是：A.斜面接種可采用連續(xù)劃線(xiàn)法獲得單個(gè)菌落B.穿刺接種常用于觀(guān)察動(dòng)力和保存菌種C.傾注平板法適用于兼性厭氧菌的定量培養(yǎng)D.L棒涂布法需將樣本與冷卻至50℃的瓊脂混勻E.棋盤(pán)格劃線(xiàn)法用于分離混雜樣本的優(yōu)勢(shì)菌【選項(xiàng)】A.斜面接種可采用連續(xù)劃線(xiàn)法獲得單個(gè)菌落B.穿刺接種常用于觀(guān)察動(dòng)力和保存菌種C.傾注平板法適用于兼性厭氧菌的定量培養(yǎng)D.L棒涂布法需將樣本與冷卻至50℃的瓊脂混勻E.棋盤(pán)格劃線(xiàn)法用于分離混雜樣本的優(yōu)勢(shì)菌【參考答案】ADE【解析】A錯(cuò)誤，斜面接種用于增殖培養(yǎng)不分離單菌落；B正確，半固體穿刺可觀(guān)察動(dòng)力；C正確，傾注法用于水樣等定量檢測(cè)；D錯(cuò)誤，L棒涂布法直接在凝固瓊脂表面涂布；E錯(cuò)誤，棋盤(pán)格劃線(xiàn)目的是分離單菌落而非優(yōu)勢(shì)菌。35.下列哪些屬于分子生物學(xué)檢測(cè)的快速鑒定技術(shù)？A.MALDI-TOFMS蛋白指紋圖譜分析B.自動(dòng)生化鑒定系統(tǒng)的API條C.熒光定量PCR檢測(cè)耐藥基因D.乳膠凝集試驗(yàn)測(cè)抗原E.全基因組測(cè)序分析突變位點(diǎn)【選項(xiàng)】A.MALDI-TOFMS蛋白指紋圖譜分析B.自動(dòng)生化鑒定系統(tǒng)的API條C.熒光定量PCR檢測(cè)耐藥基因D.乳膠凝集試驗(yàn)測(cè)抗原E.全基因組測(cè)序分析突變位點(diǎn)【參考答案】AC【解析】A正確，MALDI-TOF20分鐘出結(jié)果；B錯(cuò)誤，API條屬于傳統(tǒng)生化反應(yīng)需18-24小時(shí)；C正確，qPCR2小時(shí)完成；D錯(cuò)誤，乳膠凝集屬免疫學(xué)方法；E錯(cuò)誤，全基因組測(cè)序需數(shù)天。三、判斷題（共30題）1.1.革蘭染色法的初染步驟中，使用亞甲藍(lán)進(jìn)行染色會(huì)導(dǎo)致菌體呈現(xiàn)永久性藍(lán)色?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】錯(cuò)誤。革蘭染色法的初染劑為結(jié)晶紫，而非亞甲藍(lán)。亞甲藍(lán)多用于抗酸染色或簡(jiǎn)單染色，革蘭染色步驟為：結(jié)晶紫（初染）→碘液（媒染）→乙醇脫色→沙黃或品紅（復(fù)染）。染色結(jié)果應(yīng)呈紫色（G?）或紅色（G?），而非藍(lán)色。2.2.高壓蒸汽滅菌法中，溫度達(dá)到121.3℃時(shí)，保持20分鐘可殺滅所有微生物及其芽孢。【選項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】錯(cuò)誤。高壓蒸汽滅菌的標(biāo)準(zhǔn)條件為121℃、15分鐘（或132℃、4分鐘），20分鐘可能導(dǎo)致部分不耐熱物質(zhì)變性，但15分鐘已足以滅活芽孢，故題干中“20分鐘”冗余且不準(zhǔn)確。3.3.巧克力培養(yǎng)基通過(guò)添加血液并加熱至80℃制作，用于培養(yǎng)苛養(yǎng)菌（如流感嗜血桿菌）?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A【解析】正確。巧克力培養(yǎng)基是將血液（如羊血）加熱至80℃后溶解紅細(xì)胞，釋放X因子（血紅素）和V因子（NAD），為流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌提供必需生長(zhǎng)因子。4.4.細(xì)菌的鞭毛染色需用負(fù)染法，以避免染色劑直接附著于鞭毛表面?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】錯(cuò)誤。鞭毛染色需采用特殊媒染劑（如鞣酸）和染色劑（如復(fù)紅）進(jìn)行正染，通過(guò)沉淀染色劑使鞭毛增粗顯色，而非負(fù)染法（背景著色而目標(biāo)物透明）。5.5.結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)需在羅氏培養(yǎng)基中37℃孵育至少8周?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】錯(cuò)誤。結(jié)核分枝桿菌生長(zhǎng)緩慢，羅氏培養(yǎng)基通常需孵育2-8周，但多數(shù)陽(yáng)性培養(yǎng)結(jié)果在2-4周內(nèi)可見(jiàn)菌落，8周為培養(yǎng)終點(diǎn)而非最低時(shí)長(zhǎng)要求。6.6.血瓊脂平板的α溶血表現(xiàn)為菌落周?chē)霈F(xiàn)完全透明的溶血環(huán)。【選項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】錯(cuò)誤。α溶血為草綠色不透明環(huán)（紅細(xì)胞部分溶解），β溶血為完全透明環(huán)（如化膿性鏈球菌），γ溶血為無(wú)溶血環(huán)。題干描述實(shí)為β溶血特征。7.7.紫外線(xiàn)滅菌法適用于空氣消毒，但對(duì)無(wú)防護(hù)的操作人員眼睛具有損傷風(fēng)險(xiǎn)?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A【解析】正確。紫外線(xiàn)（如波長(zhǎng)253.7nm）通過(guò)破壞微生物DNA殺菌，廣泛用于空氣和物體表面消毒，但直接暴露可致角膜炎或皮膚紅斑，操作時(shí)需避光防護(hù)。8.8.乳糖發(fā)酵試驗(yàn)陽(yáng)性的大腸埃希菌分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，使培養(yǎng)基變黃并產(chǎn)生氣泡?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A【解析】正確。大腸埃希菌含β-半乳糖苷酶，分解乳糖產(chǎn)酸（溴甲酚紫指示劑變黃）及氣體（倒管內(nèi)氣泡），而志賀菌、沙門(mén)菌等致病菌通常不發(fā)酵乳糖。9.9.微生物實(shí)驗(yàn)室Ⅱ級(jí)生物安全柜可同時(shí)保護(hù)操作者、環(huán)境和樣本，適用于結(jié)核分枝桿菌操作?！具x項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】A【解析】正確。Ⅱ級(jí)生物安全柜（A1/A2型）通過(guò)高效過(guò)濾器凈化進(jìn)出氣流，提供人員、環(huán)境及樣本三級(jí)防護(hù)，適用于危險(xiǎn)度II級(jí)的微生物（如結(jié)核分枝桿菌）。10.10.補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)中，“溶血系統(tǒng)”出現(xiàn)溶血表明待檢樣本中存在目標(biāo)抗體。【選項(xiàng)】A.正確B.錯(cuò)誤【參考答案】B【解析】錯(cuò)誤。補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)通過(guò)“溶血系統(tǒng)”指示結(jié)果：若樣本含抗體，補(bǔ)體被結(jié)合→不溶血為陽(yáng)性；若無(wú)抗體，游離補(bǔ)體致溶血為陰性。題干邏輯顛倒。11.1.伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，主要用于革蘭陽(yáng)性菌的分離培養(yǎng)。【選項(xiàng)】正確（）錯(cuò)誤（）【參考答案】錯(cuò)誤【解析】伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基是鑒別培養(yǎng)基而非選擇培養(yǎng)基，主要用于鑒別大腸埃希菌等腸道桿菌，其原理是通過(guò)伊紅和美藍(lán)與細(xì)菌發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸的特性結(jié)合，形成特定菌落顏色（如金屬光澤）。選擇培養(yǎng)基常通過(guò)添加抑制劑（如膽鹽）抑制非目標(biāo)菌生長(zhǎng)。12.2.抗酸染色中，結(jié)核分枝桿菌經(jīng)染色后呈現(xiàn)紅色是因?yàn)槠浼?xì)胞壁含大量脂質(zhì)，能抵抗酸性脫色劑的脫色作用?！具x項(xiàng)】正確（）錯(cuò)誤（）【參考答案】正確【解析】抗酸染色原理基于分枝桿菌細(xì)胞壁含分枝菌酸等脂質(zhì)成分，能與石炭酸復(fù)紅牢固結(jié)合并抵抗鹽酸酒精脫色，最終呈紅色；非抗酸菌因無(wú)此結(jié)構(gòu)而被脫色，復(fù)染后呈藍(lán)色。13.3.高壓蒸汽滅菌法適用于所有耐高溫、耐潮濕的醫(yī)療器械滅菌，滅菌條件通常為121℃維持15-20分鐘?！具x項(xiàng)】正確（）錯(cuò)誤（）【參考答案】錯(cuò)誤【解析】高壓蒸汽滅菌的標(biāo)準(zhǔn)條件為121℃維持15-20分鐘，但部分特殊物品（如某些培養(yǎng)基或精密器械）需調(diào)整溫度或時(shí)間。此外，不耐高溫或濕熱物品（如粉劑、油劑）需選用干熱滅菌或過(guò)濾除菌法。14.4.細(xì)菌的革蘭染色步驟依次為：