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實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)在醫(yī)療設(shè)備中的應(yīng)用考核試卷考生姓名:答題日期:得分:判卷人:
本次考核旨在評(píng)估考生對(duì)實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)在醫(yī)療設(shè)備中應(yīng)用的掌握程度,包括原理、操作流程、數(shù)據(jù)分析以及在實(shí)際醫(yī)療場(chǎng)景中的應(yīng)用案例。
一、單項(xiàng)選擇題(本題共30小題,每小題0.5分,共15分,在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中,只有一項(xiàng)是符合題目要求的)
1.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的基本原理是:
A.酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定
B.核酸序列測(cè)定
C.聚合酶鏈反應(yīng)
D.流式細(xì)胞術(shù)
2.實(shí)時(shí)熒光定量PCR中,最常用的熒光標(biāo)記物是:
A.熒光素
B.熒光素酶
C.熒光素異硫氰酸酯
D.酪氨酸酶
3.下列哪個(gè)物質(zhì)不是實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)的必需成分?
A.DNA模板
B.引物
C.聚合酶
D.蛋白質(zhì)
4.實(shí)時(shí)熒光定量PCR中,循環(huán)閾值(Ct)的定義是:
A.PCR反應(yīng)達(dá)到最大熒光信號(hào)的循環(huán)次數(shù)
B.DNA擴(kuò)增量達(dá)到最大熒光信號(hào)的循環(huán)次數(shù)
C.PCR反應(yīng)開(kāi)始時(shí)的循環(huán)次數(shù)
D.DNA擴(kuò)增量達(dá)到預(yù)設(shè)熒光信號(hào)的循環(huán)次數(shù)
5.下列哪種因素會(huì)影響實(shí)時(shí)熒光定量PCR的特異性?
A.DNA模板濃度
B.引物設(shè)計(jì)
C.循環(huán)次數(shù)
D.PCR儀溫度
6.實(shí)時(shí)熒光定量PCR中,為了提高靈敏度,通常采用的PCR方法是:
A.熱啟動(dòng)PCR
B.線性PCR
C.擴(kuò)增子長(zhǎng)度選擇
D.常規(guī)PCR
7.下列哪種酶在實(shí)時(shí)熒光定量PCR中用于DNA的擴(kuò)增?
A.Klenow酶
B.T7聚合酶
C.Taq聚合酶
D.Pfu聚合酶
8.實(shí)時(shí)熒光定量PCR中,為了防止非特異性擴(kuò)增,通常采用的方法是:
A.退火溫度優(yōu)化
B.引物設(shè)計(jì)
C.循環(huán)次數(shù)增加
D.增加模板濃度
9.下列哪個(gè)指標(biāo)可以反映實(shí)時(shí)熒光定量PCR的定量準(zhǔn)確度?
A.擴(kuò)增效率
B.標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率
C.擴(kuò)增閾值
D.擴(kuò)增循環(huán)數(shù)
10.實(shí)時(shí)熒光定量PCR中,下列哪種熒光信號(hào)是檢測(cè)雙鏈DNA的?
A.吸收光譜
B.發(fā)射光譜
C.激發(fā)光譜
D.發(fā)射峰
11.下列哪種情況會(huì)導(dǎo)致實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果偏低?
A.擴(kuò)增效率低
B.引物設(shè)計(jì)不良
C.循環(huán)次數(shù)過(guò)多
D.DNA模板純度低
12.實(shí)時(shí)熒光定量PCR中,為了提高定量范圍,通常采用的方法是:
A.優(yōu)化退火溫度
B.使用更靈敏的熒光標(biāo)記物
C.增加模板濃度
D.選擇合適的內(nèi)參基因
13.下列哪種物質(zhì)不是實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)的抑制劑?
A.氨基酸
B.金屬離子
C.核酸酶
D.防沫劑
14.實(shí)時(shí)熒光定量PCR中,下列哪種情況會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增曲線的S形?
A.擴(kuò)增效率低
B.循環(huán)次數(shù)不足
C.引物設(shè)計(jì)不良
D.擴(kuò)增產(chǎn)物溶解度低
15.下列哪種因素會(huì)影響實(shí)時(shí)熒光定量PCR的線性范圍?
A.擴(kuò)增效率
B.循環(huán)次數(shù)
C.引物設(shè)計(jì)
D.DNA模板濃度
16.實(shí)時(shí)熒光定量PCR中,為了提高定量靈敏度,通常采用的方法是:
A.優(yōu)化退火溫度
B.使用更靈敏的熒光標(biāo)記物
C.增加模板濃度
D.選擇合適的內(nèi)參基因
17.下列哪種情況會(huì)導(dǎo)致實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果偏高?
A.擴(kuò)增效率低
B.引物設(shè)計(jì)不良
C.循環(huán)次數(shù)過(guò)多
D.DNA模板純度低
18.實(shí)時(shí)熒光定量PCR中,為了防止交叉污染,通常采取的措施是:
A.使用獨(dú)立的PCR反應(yīng)管
B.定期清潔PCR儀
C.使用一次性手套
D.定期更換PCR管
19.下列哪種因素會(huì)影響實(shí)時(shí)熒光定量PCR的定量準(zhǔn)確度?
A.擴(kuò)增效率
B.標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率
C.擴(kuò)增閾值
D.擴(kuò)增循環(huán)數(shù)
20.實(shí)時(shí)熒光定量PCR中,下列哪種熒光信號(hào)是檢測(cè)單鏈DNA的?
A.吸收光譜
B.發(fā)射光譜
C.激發(fā)光譜
D.發(fā)射峰
21.下列哪種情況會(huì)導(dǎo)致實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果偏低?
A.擴(kuò)增效率低
B.引物設(shè)計(jì)不良
C.循環(huán)次數(shù)過(guò)多
D.DNA模板純度低
22.實(shí)時(shí)熒光定量PCR中,為了提高定量范圍,通常采用的方法是:
A.優(yōu)化退火溫度
B.使用更靈敏的熒光標(biāo)記物
C.增加模板濃度
D.選擇合適的內(nèi)參基因
23.下列哪種物質(zhì)不是實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)的抑制劑?
A.氨基酸
B.金屬離子
C.核酸酶
D.防沫劑
24.實(shí)時(shí)熒光定量PCR中,下列哪種情況會(huì)導(dǎo)致擴(kuò)增曲線的S形?
A.擴(kuò)增效率低
B.循環(huán)次數(shù)不足
C.引物設(shè)計(jì)不良
D.擴(kuò)增產(chǎn)物溶解度低
25.下列哪種因素會(huì)影響實(shí)時(shí)熒光定量PCR的線性范圍?
A.擴(kuò)增效率
B.循環(huán)次數(shù)
C.引物設(shè)計(jì)
D.DNA模板濃度
26.實(shí)時(shí)熒光定量PCR中,為了提高定量靈敏度,通常采用的方法是:
A.優(yōu)化退火溫度
B.使用更靈敏的熒光標(biāo)記物
C.增加模板濃度
D.選擇合適的內(nèi)參基因
27.下列哪種情況會(huì)導(dǎo)致實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果偏高?
A.擴(kuò)增效率低
B.引物設(shè)計(jì)不良
C.循環(huán)次數(shù)過(guò)多
D.DNA模板純度低
28.實(shí)時(shí)熒光定量PCR中,為了防止交叉污染,通常采取的措施是:
A.使用獨(dú)立的PCR反應(yīng)管
B.定期清潔PCR儀
C.使用一次性手套
D.定期更換PCR管
29.下列哪種因素會(huì)影響實(shí)時(shí)熒光定量PCR的定量準(zhǔn)確度?
A.擴(kuò)增效率
B.標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率
C.擴(kuò)增閾值
D.擴(kuò)增循環(huán)數(shù)
30.實(shí)時(shí)熒光定量PCR中,下列哪種熒光信號(hào)是檢測(cè)單鏈DNA的?
A.吸收光譜
B.發(fā)射光譜
C.激發(fā)光譜
D.發(fā)射峰
二、多選題(本題共20小題,每小題1分,共20分,在每小題給出的選項(xiàng)中,至少有一項(xiàng)是符合題目要求的)
1.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的主要應(yīng)用領(lǐng)域包括:
A.病毒檢測(cè)
B.遺傳疾病診斷
C.腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)
D.微生物檢測(cè)
2.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,以下哪些是影響擴(kuò)增效率的因素?
A.引物設(shè)計(jì)
B.DNA模板質(zhì)量
C.循環(huán)次數(shù)
D.擴(kuò)增儀性能
3.在實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)中,以下哪些是必要的試劑?
A.DNA模板
B.引物
C.熒光標(biāo)記的寡核苷酸探針
D.聚合酶
4.以下哪些是實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中常用的熒光標(biāo)記物?
A.熒光素
B.熒光素酶
C.熒光素異硫氰酸酯
D.熒光素酶底物
5.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,以下哪些是提高定量準(zhǔn)確度的方法?
A.使用標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行校準(zhǔn)
B.優(yōu)化引物設(shè)計(jì)
C.使用高純度DNA模板
D.優(yōu)化反應(yīng)條件
6.以下哪些是實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中可能出現(xiàn)的偏差?
A.擴(kuò)增效率偏差
B.標(biāo)準(zhǔn)曲線偏差
C.擴(kuò)增閾值偏差
D.交叉污染偏差
7.以下哪些是實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中常見(jiàn)的質(zhì)量控制步驟?
A.反應(yīng)管清潔
B.引物和試劑驗(yàn)證
C.擴(kuò)增效率評(píng)估
D.擴(kuò)增曲線分析
8.以下哪些是實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中可能影響結(jié)果的因素?
A.擴(kuò)增儀溫度控制
B.反應(yīng)體系組成
C.DNA模板純度
D.擴(kuò)增時(shí)間
9.以下哪些是實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中用于定量分析的內(nèi)參基因?
A.GAPDH
B.β-actin
C.HPRT1
D.TUB
10.以下哪些是實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中用于檢測(cè)病毒的方法?
A.RT-qPCR
B.TaqMan探針
C.SYBRGreen
D.逆轉(zhuǎn)錄
11.以下哪些是實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中用于檢測(cè)細(xì)菌的方法?
A.16SrRNA基因擴(kuò)增
B.qPCR
C.熒光標(biāo)記引物
D.內(nèi)參基因校正
12.以下哪些是實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中用于檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物的方法?
A.免疫組化
B.qPCR
C.熒光原位雜交
D.生物芯片
13.以下哪些是實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中用于檢測(cè)遺傳疾病的方法?
A.Sanger測(cè)序
B.qPCR
C.基因芯片
D.遺傳咨詢(xún)
14.以下哪些是實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中用于檢測(cè)藥物濃度的方法?
A.HPLC
B.qPCR
C.熒光標(biāo)記探針
D.ELISA
15.以下哪些是實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中用于檢測(cè)病原體的方法?
A.PCR
B.qPCR
C.基因測(cè)序
D.免疫熒光
16.以下哪些是實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中用于檢測(cè)微生物的方法?
A.微生物培養(yǎng)
B.qPCR
C.酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定
D.生物傳感器
17.以下哪些是實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中用于檢測(cè)植物病原體的方法?
A.PCR
B.qPCR
C.基因組測(cè)序
D.酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定
18.以下哪些是實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中用于檢測(cè)動(dòng)物病原體的方法?
A.PCR
B.qPCR
C.實(shí)時(shí)熒光PCR
D.免疫學(xué)檢測(cè)
19.以下哪些是實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中用于檢測(cè)環(huán)境病原體的方法?
A.PCR
B.qPCR
C.基因組測(cè)序
D.生物標(biāo)志物
20.以下哪些是實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中用于檢測(cè)食品病原體的方法?
A.PCR
B.qPCR
C.食品微生物培養(yǎng)
D.食品化學(xué)分析
三、填空題(本題共25小題,每小題1分,共25分,請(qǐng)將正確答案填到題目空白處)
1.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,Ct值是指______。
2.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,擴(kuò)增效率通常用______來(lái)表示。
3.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,常用的熒光標(biāo)記物是______。
4.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,用于DNA擴(kuò)增的酶是______。
5.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,為了提高特異性,通常采用______。
6.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,用于檢測(cè)單鏈DNA的熒光信號(hào)是______。
7.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,用于檢測(cè)雙鏈DNA的熒光信號(hào)是______。
8.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,為了防止交叉污染,通常采取的措施是______。
9.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,用于定量分析的內(nèi)參基因包括______。
10.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,用于檢測(cè)病毒的方法包括______。
11.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,用于檢測(cè)細(xì)菌的方法包括______。
12.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,用于檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物的方法包括______。
13.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,用于檢測(cè)遺傳疾病的方法包括______。
14.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,用于檢測(cè)藥物濃度的方法包括______。
15.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,用于檢測(cè)病原體的方法包括______。
16.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,用于檢測(cè)微生物的方法包括______。
17.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,用于檢測(cè)植物病原體的方法包括______。
18.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,用于檢測(cè)動(dòng)物病原體的方法包括______。
19.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,用于檢測(cè)環(huán)境病原體的方法包括______。
20.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,用于檢測(cè)食品病原體的方法包括______。
21.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,為了提高靈敏度,通常采用______。
22.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,為了提高定量范圍,通常采用的方法是______。
23.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,為了防止非特異性擴(kuò)增,通常采用的方法是______。
24.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,為了提高定量準(zhǔn)確度,通常采用的方法是______。
25.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,為了優(yōu)化反應(yīng)條件,通常需要______。
四、判斷題(本題共20小題,每題0.5分,共10分,正確的請(qǐng)?jiān)诖痤}括號(hào)中畫(huà)√,錯(cuò)誤的畫(huà)×)
1.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)可以用于檢測(cè)所有類(lèi)型的DNA和RNA分子。()
2.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的定量準(zhǔn)確度不受擴(kuò)增效率的影響。()
3.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,引物設(shè)計(jì)是決定定量結(jié)果的關(guān)鍵因素之一。()
4.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,Ct值越低,表示目標(biāo)DNA含量越高。()
5.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,所有熒光標(biāo)記物都可以用于定量分析。()
6.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,使用SYBRGreen法時(shí)不需要設(shè)計(jì)特異性探針。()
7.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,擴(kuò)增效率可以通過(guò)比較標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率來(lái)評(píng)估。()
8.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,交叉污染是導(dǎo)致定量結(jié)果不準(zhǔn)確的主要原因之一。()
9.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,使用內(nèi)參基因可以幫助校正樣本間的差異。()
10.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,擴(kuò)增曲線的S形表明擴(kuò)增效率不均。()
11.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率越陡,表示定量范圍越寬。()
12.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,引物二聚體會(huì)導(dǎo)致定量結(jié)果偏高。()
13.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,為了提高靈敏度,可以增加DNA模板的濃度。()
14.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,實(shí)時(shí)熒光定量PCR比常規(guī)PCR更靈敏。()
15.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的量成正比。()
16.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,引物設(shè)計(jì)時(shí),應(yīng)避免引物二聚體的形成。()
17.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,擴(kuò)增效率低于100%是正?,F(xiàn)象。()
18.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,使用高純度DNA模板可以減少非特異性擴(kuò)增。()
19.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,實(shí)時(shí)熒光定量PCR可以用于檢測(cè)所有類(lèi)型的病毒。()
20.實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,定量結(jié)果可以通過(guò)比較不同樣本的Ct值來(lái)比較。()
五、主觀題(本題共4小題,每題5分,共20分)
1.請(qǐng)簡(jiǎn)述實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)的原理及其在醫(yī)療設(shè)備中的應(yīng)用價(jià)值。
2.請(qǐng)?jiān)敿?xì)說(shuō)明實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)中,如何通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)定量分析DNA或RNA樣本。
3.請(qǐng)討論實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)在病毒檢測(cè)、細(xì)菌檢測(cè)和腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)中的應(yīng)用案例,并分析其優(yōu)缺點(diǎn)。
4.請(qǐng)闡述在應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)時(shí),可能遇到的問(wèn)題及相應(yīng)的解決方法。
六、案例題(本題共2小題,每題5分,共10分)
1.案例背景:某醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室需要對(duì)一疑似流感患者進(jìn)行病毒檢測(cè)。請(qǐng)根據(jù)以下信息,設(shè)計(jì)實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)方案。
-病毒類(lèi)型:甲型流感病毒H1N1
-已知信息:H1N1病毒的RNA序列部分
-需要檢測(cè)的指標(biāo):H1N1病毒的RNA拷貝數(shù)
請(qǐng)回答以下問(wèn)題:
(1)設(shè)計(jì)特異性引物和探針。
(2)選擇合適的內(nèi)參基因和標(biāo)準(zhǔn)曲線制作方法。
(3)說(shuō)明PCR反應(yīng)條件和數(shù)據(jù)分析步驟。
2.案例背景:某生物公司開(kāi)發(fā)了一種新的實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)設(shè)備,用于檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物。請(qǐng)根據(jù)以下信息,分析該設(shè)備可能的優(yōu)勢(shì)和潛在問(wèn)題。
-設(shè)備特點(diǎn):自動(dòng)化操作、高靈敏度、快速結(jié)果
-應(yīng)用場(chǎng)景:臨床腫瘤診斷、癌癥復(fù)發(fā)監(jiān)測(cè)
請(qǐng)回答以下問(wèn)題:
(1)分析該設(shè)備在臨床應(yīng)用中的優(yōu)勢(shì)。
(2)列舉可能影響設(shè)備性能的潛在問(wèn)題,并提出解決方案。
標(biāo)準(zhǔn)答案
一、單項(xiàng)選擇題
1.C
2.C
3.D
4.D
5.B
6.A
7.C
8.B
9.A
10.D
11.A
12.B
13.D
14.D
15.A
16.A
17.C
18.A
19.A
20.D
21.B
22.C
23.A
24.D
25.C
二、多選題
1.A,B,C,D
2.A,B,D
3.A,B,C,D
4.A,C
5.A,B,C,D
6.A,B,C,D
7.A,B,C,D
8.A,B,C,D
9.A,B,C,D
10.A,B,C,D
11.A,B,C,D
12.A,B,C,D
13.A,B,C,D
14.A,B,C,D
15.A,B,C,D
16.A,B,C,D
17.A,B,C,D
18.A,B,C,D
19.A,B,C,D
20.A,B,C,D
三、填空題
1.PCR反應(yīng)達(dá)到最大熒光信號(hào)的循環(huán)次數(shù)
2.擴(kuò)增效率
3.熒光素異硫氰酸酯
4.Taq聚合酶
5.引物設(shè)計(jì)
6.發(fā)射峰
7.吸收光譜
8.使用獨(dú)立的PCR反應(yīng)管
9.GAPDH,β-actin,HPRT1,TUB
10.RT-qPCR,TaqMan探針,SYBRGreen,逆轉(zhuǎn)錄
11.16SrRNA基因擴(kuò)增,qPCR,熒光標(biāo)記引物,內(nèi)參基因校正
12.qPCR,熒光原位雜交,生物芯片
13.qPCR,Sanger測(cè)序,基因芯片,遺傳咨詢(xún)
14.HPLC,qPCR,熒光標(biāo)記探針,ELISA
15.PCR,qPCR,基因測(cè)序,免疫熒光
16.PCR,qPCR,酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定,生物傳感器
17.PCR,qPCR,基因組測(cè)序,酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定
18.PCR,qPCR,實(shí)時(shí)熒光PCR,免疫學(xué)檢測(cè)
19.PCR,qPCR,基因組測(cè)序,生物標(biāo)志物
20.PCR,qPCR,食品微生物培養(yǎng),食品化學(xué)分析
21.使用更靈敏的熒光標(biāo)記物
22.優(yōu)化退火溫
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