1.2微生物的培養(yǎng)技術(shù)及應(yīng)用

第2課時(shí)微生物的選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)

一、單選題

1.以下有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐的敘述中，不正確的是（）

A.在酵母菌的分離和培養(yǎng)熨驗(yàn)中，劃線(xiàn)后蓋好培養(yǎng)皿，再將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)

B.分離土壤中的纖維素分解菌，一般先進(jìn)行選擇培養(yǎng)，增大細(xì)菌濃度

C.在釀酒生產(chǎn)上，常I可發(fā)酵罐中加少量尿素，其目的是作為氮源，用于酵母菌

合成蛋白質(zhì)和核酸

D.不能用稀釋涂布平板法來(lái)測(cè)定土壤溶液中某活菌數(shù)目

2.下列有關(guān)微生物分離、純化及計(jì)數(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.常用富含纖維素的培養(yǎng)基富集培養(yǎng)纖維素分解菌

B.平板劃線(xiàn)法通過(guò)連續(xù)劃線(xiàn)將聚集的菌種分散并計(jì)數(shù)

C.稀釋涂布平板法通過(guò)系列梯度稀釋可將微生物分散

D.用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)微生物時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果往往比稀釋涂布平板法得到的結(jié)果

偏大

3.下列關(guān)于微生物分離和培養(yǎng)的敘述，不無(wú)碰的是（）

A.微生物培養(yǎng)基中加入牛肉膏和蛋白腺可同時(shí)提供碳源和氮源

B.測(cè)定土壤樣品中的活菌數(shù)目，常在固體培養(yǎng)基上用平板劃線(xiàn)法接種

C.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可用于分離得到能分解尿素的細(xì)菌

D.經(jīng)剛果紅染色的以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基可用于相關(guān)菌種鑒定

4.下列有關(guān)微生物分離、純化及計(jì)數(shù)的敘述中，?錯(cuò)?誤的是（）

A.常用富含纖維素的培養(yǎng)基富集培養(yǎng)纖維素分解菌

B.平板劃線(xiàn)法通過(guò)連續(xù)劃線(xiàn)將聚集的菌種分散并計(jì)數(shù)

C.稀釋涂布平板法通過(guò)系列梯度稀釋可將微生物分散

D.用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)微生物時(shí)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果往往偏大

5.下圖中甲是稀釋涂布平板法中的部分操作，乙是平板劃線(xiàn)法的操作結(jié)果。

下列敘述中錯(cuò)誤的是（）

A.甲中涂布前要將涂布器灼燒，冷卻后才能涂布菌液

B.對(duì)于濃度較高的菌液，如甲中的稀釋倍數(shù)僅為IO?,則所得的菌落不一定是由

單一的細(xì)胞或徇子繁殖而成

C.乙培養(yǎng)皿中所得的菌落都是目的菌落，無(wú)需進(jìn)行進(jìn)一步的鑒定篩選

D.乙中的連續(xù)劃線(xiàn)的起點(diǎn)是上一次劃線(xiàn)的末端

6.下列有關(guān)微生物培養(yǎng)或純化的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.微生物在培養(yǎng)前要先對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理再接種

B.培養(yǎng)液中溶氧量的變化會(huì)影響醛母菌的繁殖和代謝途徑

C.分離自養(yǎng)型微生物的方法是用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)

D.分離純化微生物的常用方法是平板劃線(xiàn)法和糅釋涂布平板法

7.下列關(guān)于微生物培養(yǎng)和利用的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.接種前要了解固體培養(yǎng)基是否被污染可接種蒸儲(chǔ)水來(lái)培育檢測(cè)

B.接種時(shí)連續(xù)劃線(xiàn)的目的是將聚集的菌體逐步稀釋獲得單個(gè)菌落

C.以尿素為唯一氮源且含酚紅的培養(yǎng)基可選擇和鑒別尿素分解菌

D.利用剛果紅培養(yǎng)基上是否形成透明圈可篩選纖維素分解菌

8.下列有關(guān)微生物實(shí)驗(yàn)的敘述，不氐砸的是（）

A.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染

B.平板劃線(xiàn)法可用于微生物的計(jì)數(shù)

C.分離不同的微生物要采用不同的稀釋度

D.觀察菌落的特征可以用來(lái)進(jìn)行菌種的鑒定

9.在自然環(huán)境中常常是多種微生物混雜在一起，要對(duì)其中的某種微生物進(jìn)行研究,

就必需獲得其純化培養(yǎng)物，以排除其他微生物的干擾。下列關(guān)于微生物純化培養(yǎng)

的敘述中，不正確的（）

A.分離能分解尿素的細(xì)菌，要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源

B.平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法是常用的兩種方法

C.分離土壤中不同的微生物，要采用不同的稀釋度

D.平板劃線(xiàn)法可以采取連續(xù)劃線(xiàn)的方法使微生物均勻分布

10.尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能更好地被植物利

用。下列有關(guān)土壤中尿素分解菌的分離和培養(yǎng)的敘述，正確的是（）

A.培養(yǎng)基中加入尿素作為唯一碳源，該培養(yǎng)基是鑒別培養(yǎng)基

B.測(cè)定土壤中分解尿素的細(xì)菌數(shù)量和測(cè)定土壤中其他細(xì)菌的數(shù)量可采用相同的

稀釋度

C.細(xì)菌合成的麻酶能將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高

D.利用稀釋涂布平板法可以直接完成土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離計(jì)數(shù)和純化

鑒定

11.如圖甲為纖維單胞菌（能產(chǎn)生纖維素酶）的獲取過(guò)程。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的

是（）

A.①②③④培養(yǎng)基都應(yīng)以纖維素為唯一碳源

B.圖中所用培養(yǎng)基滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌

C.④所用的接種方法可對(duì)培養(yǎng)的微生.物進(jìn)行計(jì)數(shù)

D.可用剛果紅染料鑒定，看菌落周?chē)欠癯霈F(xiàn)透明圈

12.從某污水處理系統(tǒng)中分離出多種細(xì)菌，經(jīng)進(jìn)一步篩選獲得具有高效降低污水

中有機(jī)污染物（COD為有機(jī)污染物分解時(shí)化學(xué)需氧量）能力的菌株，過(guò)程如圖

所示。下列相關(guān)說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

菌液稀擇1伊倍挑取小菌落.

資種35€

分離出35c獲揖菌株.亦得高效降低

一h*：檢測(cè)降低一*COD能力的

的細(xì)菌培養(yǎng)5天培養(yǎng)1人△培養(yǎng)2大COD能力赭株

牛肉面蛋白陳

滅幽的污水閻拗養(yǎng)基牛肉膏笈白陳

液體培笄基

A.牛肉膏蛋白膿培養(yǎng)基可用高壓蒸汽滅菌法滅菌

B.為確定接種時(shí)菌液的最佳稀釋倍數(shù)可先用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)菌液中的細(xì)

菌數(shù)目

C.圖中平板劃線(xiàn)法獲得的菌落具有不同的菌落特征

D.挑取單菌落后接種到液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)，目的是擴(kuò)大化培養(yǎng)菌株

13.用稀釋涂布平板法測(cè)定微生物數(shù)量時(shí)，下列統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)的方法，最合理的是

（）

A.培養(yǎng)至有菌落出現(xiàn)時(shí)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)并作為結(jié)果

B.培養(yǎng)至不再有新菌落出現(xiàn)時(shí)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)并作為結(jié)果

C.培養(yǎng)后每隔一段時(shí)間統(tǒng)計(jì)一次，取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的數(shù)值作為結(jié)果

D.培養(yǎng)后每隔一段時(shí)間統(tǒng)計(jì)一次，取連續(xù)且最接近的三個(gè)數(shù)值的平均值作為結(jié)

果

14.關(guān)于土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)的敘述，不正確的是（）

A.除活菌計(jì)數(shù)法外,顯微鏡直接計(jì)數(shù)也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法

B.對(duì)土壤中分解尿素的細(xì)菌計(jì)數(shù)，應(yīng)直接對(duì)土壤溶液進(jìn)行稀釋涂布平板

C.選擇菌落數(shù)在30?300間的所有平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，以平均數(shù)為實(shí)驗(yàn)結(jié)果

D.應(yīng)該設(shè)置對(duì)照以排除非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾，提高可信度

15.如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖

分析正確的是（）

—168個(gè)菌落

一?175個(gè)菌落

—167個(gè)菌落

A.3號(hào)試管中的菌落稀釋倍數(shù)為KF倍

B.4號(hào)中稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)得到的菌落平均數(shù)可能是5號(hào)的10倍

C.5號(hào)試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7x107個(gè)

D.該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目要高

16.用紙片擴(kuò)散法測(cè)定其病原菌對(duì)各種抗生素敏感性的實(shí)驗(yàn)，是在某病原菌均勻

分布的平板上，鋪設(shè)含有不同種抗生素的紙片后進(jìn)行培養(yǎng)。圖示為培養(yǎng)的結(jié)果,

其中抑菌圈是在紙片周?chē)霈F(xiàn)的透明區(qū)域。下列分析正確的是（）

-抑菌圈

含抗生素知壓片

A.在圖示固體培養(yǎng)基上可用平板劃線(xiàn)法或涂布法接種病原菌

B.未出現(xiàn)抑菌圈可能是病原菌與抗生素接觸后發(fā)生抗性變異

C.形成的抑菌圈較小的原因可能是微生物對(duì)藥物較敏感

D.不同抗生素在平板上的擴(kuò)散速度不同會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響

17.下列是關(guān)于“檢測(cè)土壤中細(xì)菌總數(shù)”實(shí)驗(yàn)操作的敘述，其中錯(cuò)誤的是（）

A.用蒸儲(chǔ)水配制牛肉膏蛋白腺培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板

B.取10,10八105倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各01mL,分別涂布于各組平板上

C.將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，37c恒溫培養(yǎng)24?48小時(shí)

D.確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在30?300的實(shí)驗(yàn)組平板進(jìn)行計(jì)數(shù)

18.下列屬于涂布分離法和劃線(xiàn)分離法共同點(diǎn)的是（）

A,接種工具需保存在70%酒精中

B.接種前需對(duì)菌液進(jìn)行不同濃度稀釋

C.可用于單菌落的分離

D.可以對(duì)樣液中的細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)

二、識(shí)圖作答題

19.下列是與細(xì)菌培養(yǎng)有關(guān)的問(wèn)題，請(qǐng)回答：

（1）細(xì)菌培養(yǎng)前需要制備培養(yǎng)基。某培養(yǎng)基的配方有：NaNCh、KH2Po4、Na2HPO4>

MgSO4-7H2O.H2O,若此培養(yǎng)基用于培養(yǎng)分解尿素的細(xì)菌，則應(yīng)除去上述_______

成分，并加入，以補(bǔ)充源。

（2）對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，通常采用的方法是_________________法。

（3）下圖是利用法進(jìn)行菌種接種，把聚集的菌種逐步分散到培

養(yǎng)基的表面。

（4）若要測(cè)定某培養(yǎng)液中選定菌種的菌體數(shù)，既可在顯微鏡下用

直接計(jì)數(shù)，也可選用法統(tǒng)計(jì)活菌數(shù)目，一般前者得到的結(jié)果

（填或“<”）后者。

20.酵母的蛋白質(zhì)含量可達(dá)自身干重的一半，可作為飼料蛋白的來(lái)源。有些酵母

可以利用工'業(yè)廢甲醇作為碳源進(jìn)行培養(yǎng)，這樣既可.減少污染又可降低生產(chǎn)成本。

研究人員擬從土壤樣品中分離該類(lèi)醉母，并進(jìn)行大量培養(yǎng)。下圖所示為操作流程,

請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

①稱(chēng)屆七樣②梯度挎驛③平板澆注分離④劃線(xiàn)純化⑤爐大培養(yǎng)

（1）配制培養(yǎng)基時(shí)，按照培養(yǎng)基配方準(zhǔn)確稱(chēng)量各組分，將其溶解、定容后，調(diào)

節(jié)培養(yǎng)基的,及時(shí)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行分裝，并進(jìn)行溫度為℃

的滅菌。

（2）取步驟②中不同梯度的稀釋液加入標(biāo)記好的無(wú)菌培養(yǎng)皿中，在步驟③中將

溫度約（在25℃、50℃或80℃中選擇）的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿混勻,

冷凝后倒置培養(yǎng)。

（3）挑取分離平板中長(zhǎng)出的單菌落，按步驟④所示進(jìn)行劃線(xiàn)。下列敘述合理的

有。

a.為保證無(wú)菌操作，接種針、接種環(huán)使用前都必須滅菌

b.劃線(xiàn)時(shí)應(yīng)避免劃破培養(yǎng)基表面，以免不能形成正常菌落

c.挑取菌落時(shí)，應(yīng)挑取多個(gè)菌落，分別測(cè)定酵母細(xì)胞中甲醵的含量

d.可以通過(guò)逐步提高涪養(yǎng)基中甲醇的濃度，獲得甲醇高耐受株

（4）步驟⑤中，為使酵母數(shù)量迅速增加，培養(yǎng)過(guò)程中需保證充足的營(yíng)養(yǎng)和

供應(yīng)。為監(jiān)測(cè)酵母的活細(xì)胞密度，可用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)，菌落數(shù)

與實(shí)際細(xì)胞數(shù)有誤差，原因是

參考答案

一、單選題

1.D

【解析】

A.在大腸桿菌的分離和培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，劃線(xiàn)后蓋好培養(yǎng)皿，再將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng),

A正確；

B.分離某種細(xì)菌，一般先用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)，增大細(xì)菌濃度，B正確;

C.在釀酒生產(chǎn)上，常向發(fā)酵罐中加少量尿素，其目的是作為氮源，用于酵母菌合

成蛋白質(zhì)和核酸，C正確；

D.可用稀釋涂布平板法來(lái)測(cè)定土壤溶液中某活菌數(shù)目，D錯(cuò)誤。

2.B

【解析】

纖維素是纖維素分解菌的碳源，因此常用富含纖維素的培養(yǎng)基富集培養(yǎng)纖維素分

解菌；平板劃線(xiàn)法通過(guò)連續(xù)劃線(xiàn)將聚集的菌種分散，但不能用于微生物的計(jì)數(shù);

稀釋涂布平板法通過(guò)系列梯度稀釋可將微生物分散并計(jì)數(shù)；用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)

微生物時(shí)，會(huì)將死的微生物計(jì)數(shù)在內(nèi)，因此導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果往往偏大。

3.B

【解析】

A.牛肉膏能提供碳源、氮源、磷酸鹽、維生素，蛋白陳提供的是碳源、氮源、生

長(zhǎng)因子，所以微生物培養(yǎng)基中加入牛肉膏和蛋白陳可以同時(shí)提供碳源和氮源，A

正確；

B.測(cè)定土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)目，常用稀釋涂布平板法，而不用平板劃線(xiàn)法，平

板劃線(xiàn)法常用于微生物的分離、提純，B錯(cuò)誤；

C.以尿素作為唯一氮源的培養(yǎng)基可以分離得到能分解尿素的細(xì)菌，C正確；

D.經(jīng)剛果紅染色的以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基可用于鑒定纖維素分解菌，D正

確。

4.B

【解析】

A.纖維素是纖維素分解菌的碳源，因此常用富含纖維素的培養(yǎng)基富集培養(yǎng)纖維素

分解菌，A正確；

B.平板劃線(xiàn)法通過(guò)連續(xù)劃線(xiàn)將聚集的菌種分散，但不能用于微生物的計(jì)數(shù)，B錯(cuò)

誤；

C.稀釋涂布平板法通過(guò)系列梯度稀釋可將微生物分散并計(jì)數(shù)，C正確；

D.用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)微生物時(shí)，會(huì)將死的微生物計(jì)數(shù)在內(nèi)，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果往往

偏大，D正確。

5.C

【解析】

A.甲中涂布前要將涂布器灼燒，冷卻后才能進(jìn)行涂布操作，否則會(huì)殺死菌種，A

正確；

B.對(duì)于濃度較高的菌液，如甲中的稀釋倍數(shù)僅為則由于稀釋倍數(shù)不夠，所

得菌落也有可能是多個(gè)菌連在一起，會(huì)導(dǎo)致所得的菌落不一定是由單一的細(xì)胞或

抱子繁殖而成，B正確；

C.乙中所得菌落不一定都是目的菌落，需要進(jìn)行進(jìn)一步的鑒定篩選，C錯(cuò)誤；

D.在劃線(xiàn)時(shí)，每次劃線(xiàn)應(yīng)該從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始，D正確。

6.C

【解析】

A.微生物在培養(yǎng)前要先對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌處理再接種，防止其他微生物混入，A

正確；

B.酵母菌是兼性厭氧的，因此培養(yǎng)液中溶氧量的變化會(huì)影響酵母菌的繁殖和代謝

途徑，B正確；

C.用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基是用來(lái)分離纖維素分解菌的，分離自養(yǎng)型微生

物要用不加有機(jī)碳源的培養(yǎng)基，C錯(cuò)誤；

D.分離純化微生物的常用方法是平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法，D正確。

7.A

【解析】

A.檢測(cè)培養(yǎng)基被污染的方法是：將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時(shí)

間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生，A錯(cuò)誤；

B.接種換上的菌液經(jīng)過(guò)連續(xù)劃線(xiàn)，菌液中的菌體越來(lái)越少，最后容易形成單菌落,

B正確；

C.鑒定尿素分解菌培養(yǎng)基不是無(wú)氮，有唯一氮源尿素，尿素分解菌分解尿素形成

了氨氣，氨氣會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，用酚紅試劑即可鑒定出，c正確；

D.當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無(wú)法形成，培養(yǎng)基中

會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，可通過(guò)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分

解菌，D正確。

8.B

【解析】

A.微生物培養(yǎng)獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，A正確；

B.稀釋涂布平板法可用于微生物的計(jì)數(shù)，B錯(cuò)誤；

C分離微生物時(shí)涂布接種需要對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)蛛x不同的微生物要采用

不同的稀釋度，C正碓；

D.不同的微生物具有不同的菌落特征，觀察菌落的特征可以用來(lái)進(jìn)行菌種的鑒定,

D正確。

9.D

10.C

【解析】

A、培養(yǎng)基中加入尿素作為唯一碳源，該培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，A錯(cuò)誤；

B、因?yàn)橥寥乐懈黝?lèi)微生物的數(shù)量不同，故為獲得不同類(lèi)型的微生物，要按不同

的稀釋倍數(shù)進(jìn)行分離，B錯(cuò)誤；

C、細(xì)菌合成的服酶能將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)，pH升高，可

加入酚紅指示劑進(jìn)行檢測(cè)，C正確；

D、鑒定分解尿素的細(xì)菌應(yīng)該用加酚紅的鑒別培養(yǎng)基，D錯(cuò)誤。

11.C

【解析】

A.要篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株，平板內(nèi)的固體培養(yǎng)基和錐形瓶中的液體培養(yǎng)基應(yīng)以

纖維素作為唯一碳源，A正確；

B.對(duì)培養(yǎng)基的滅菌利用的是高壓蒸汽滅菌法，對(duì)接種環(huán)采用火焰灼燒法進(jìn)行滅菌,

B正確；

C.圖④采用的接種方法是平板劃線(xiàn)法，而對(duì)培養(yǎng)的微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)采用稀釋涂布

平板法，C錯(cuò)誤；

D.剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，紅色復(fù)合

物無(wú)法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過(guò)是否產(chǎn)生透明

圈來(lái)篩選纖維素分解菌，D正確。

12.C

【解析】

A.牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基一般用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，A正確；

B.用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)菌液中的細(xì)菌數(shù)目，可以幫助估算接種時(shí)的稀釋倍數(shù),

B正確；

C.根據(jù)平板中菌落分布情況可以判斷接種采用的是稀釋涂布平板法，C錯(cuò)誤；

D.挑取單菌落后接種到液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)目的是擴(kuò)大化培養(yǎng)菌株，D正確。

13.C

14.C

【解析】

A.除活菌計(jì)數(shù)法外，顯微鏡直接計(jì)數(shù)也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法，A正確；

B.對(duì)土壤中分解尿素的細(xì)菌計(jì)數(shù)，應(yīng)直接對(duì)土壤溶液進(jìn)行稀釋涂布平板，B正確；

C.由于稀釋倍數(shù)不同，計(jì)算時(shí)不能簡(jiǎn)單相加，應(yīng)乘上相應(yīng)稀釋倍數(shù)再取平均值，

C錯(cuò)誤；

D.應(yīng)該設(shè)置對(duì)照以排除非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾，提高可信度，D正確。

15.B

【解析】

A.3號(hào)試管是稀釋104倍，A錯(cuò)誤；

B.4號(hào)中稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)，稀釋倍數(shù)比5號(hào)的低10倍，如果稀釋倍數(shù)適當(dāng)，

得到的菌落平均數(shù)可能是5號(hào)的10倍，B正確；

C.5號(hào)試管進(jìn)行稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為

(168+175+167)+3xl06xio+l0R.7x108個(gè)，c錯(cuò)誤；

D.稀釋涂布平板得到的菌落可能存在兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌細(xì)胞長(zhǎng)成一個(gè)菌落，使該實(shí)

驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目要低，D錯(cuò)誤。

16.D

【解析】

A.據(jù)圖中菌落的分布狀況，在圖示固體培養(yǎng)基上采用的是涂布.法接種病原菌，A

錯(cuò)誤；

B.不是因?yàn)椴≡c抗生素接觸后發(fā)生抗性變異，變異是不定向的，在未與抗生

素接觸之前，病原菌種群中就己經(jīng)存在有抗性變異個(gè)體，B錯(cuò)誤；

C.形成的抑菌圈較小的原因可能是微生物對(duì)藥物較不敏感，C錯(cuò)誤；

D.不同抗生素在平板上的擴(kuò)散速度不同會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響，D正確。

17.B

【解析】

A.首先要進(jìn)行培養(yǎng)基的制備、用蒸儲(chǔ)水配制牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基，經(jīng)高溫、高壓

滅菌后倒平板，A正確；

B.培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，應(yīng)取?、IO，、106倍的土壤稀釋液和無(wú)菌水各分別涂

布于各組平板上，B錯(cuò)誤；

C.將實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組平板倒置，37c恒溫培養(yǎng)24?48小時(shí)，C正確；

D.確定對(duì)照組無(wú)菌后，選擇菌落數(shù)在3（）?30（）的進(jìn)行計(jì)數(shù)，求平均值，再通過(guò)計(jì)

算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)，D正確。

18.C

【解析】

A.接種環(huán)滅菌一般用灼燒法，A錯(cuò)誤；

B.涂布分離法接種前需配制不同濃度稀釋液，劃線(xiàn)分離法不需要，B錯(cuò)誤；

C.涂布分離法和劃線(xiàn)分離法都可用于單菌落的分離，C正確；

D.劃線(xiàn)分離法不能用于計(jì)數(shù)活菌，只能用于分離菌種，涂布分離法可以用來(lái)計(jì)數(shù)

活菌，D錯(cuò)誤。