氣相色譜法測定食用酒中乙醇含量第1頁，共64頁。三、儀器與試劑

1.儀器：氣相色譜儀、氫火焰檢測器（FID）、色譜柱、微量注射器、容量瓶（10cm3）、色譜工作站、吸量管（2、5cm3）。

2.試劑：無水乙醇(A.R)、無水n-C3H7OH(A.R)、丙酮、食用酒。第2頁，共64頁。

四、實驗步驟

1.色譜操作條件柱溫：90℃；汽化室溫度：150℃；檢測器溫度：130℃；N2（載氣）流速：40cm3/min；H2流速：35cm3/min；空氣流速：400cm3/min；

2.標準溶液的測定用吸量管準確吸取0.50cm3無水乙醇和0.50cm3無水n-C3H7OH于10cm3的容量瓶中，用丙酮定容至刻度，搖勻。用微量注射器吸取0.5μL標準溶液，注入色譜儀內，記錄各色譜峰的保留時間tR和色譜峰面積，求出以無水n-C3H7OH為標準物的相對校正因子。第3頁，共64頁。3.樣品溶液的測定用吸管吸取1.00cm3的食用酒樣品和0.50cm3的內標物（無水n-C3H7OH）于10cm3容量瓶中，用丙酮定容至刻度，搖勻。用微量注射器吸取0.5μL樣品溶液，注入色譜儀內，記錄各色譜峰的保留時間tR，對照比較標準溶液與樣品溶液的tR，以確定樣品中的醇，記錄C2H5OH和n-C3H7OH色譜峰面積，求出樣品中C2H5OH的含量。第4頁，共64頁。

實驗二

氣相色譜法測定生物柴油中脂肪酸甲酯一、實驗目的1.了解氣相色譜儀的基本構造與一般使用方法2.掌握氣相色譜檢測器的原理和操作；3.了解程序升溫色譜法的操作特點；4.學會用氣相色譜儀進行歸一化法定量分析。第5頁，共64頁。二、實驗原理

程序升溫是指色譜柱的溫度按照適宜的程序連續(xù)地隨時間呈線性或非線性升高。在程序升溫中，采用較低的初始溫度，使低沸點的組分得到良好分離，然后隨著溫度不斷升高，沸點較高的組分逐一“推出”。由于高沸點組分較快地流出，因而峰形尖銳，與低沸點組分類似。

在一定的色譜操作條件下，每種物質有一定的保留時間，而響應值與進樣量成線性關系。當樣品中所有組分都能流出色譜柱，并能給出可以測定的信號時，可以采用采用歸一化法進行定量分析。

歸一化法只適用于樣品中所有組分都從色譜柱流出并被檢測器檢出、且都在線性范圍內、同時又能測定或查出所有組分相對校正因子的樣品。第6頁，共64頁。三、儀器與試劑

1.儀器：6890型氣相色譜儀；色譜柱：HP-innowax毛細管色譜柱（30×0.25×0.25）；氫火焰離子化檢測器；微量注射器。2.試劑：生物柴油；正己烷。第7頁，共64頁。

四、實驗步驟

1.色譜操作條件：汽化室溫度280℃；檢測器溫度280℃；柱溫采用程序升溫：初始溫度170℃，保持0.5min，以5℃／min的升溫速率升至200℃，然后以15℃／min的升溫速率升至240℃，保持時間5min；載氣：N2，柱頭壓60kPa；氫氣：32mL／min；空氣：320mL／min；進樣量：1μL。

2.取一定量的生物柴油樣品于1mL的容量瓶中，用正己烷定容后，在上述色譜條件下進行氣相色譜分析，記錄下各色譜峰的保留時間和峰面積。第8頁，共64頁。根據(jù)公式（1）計算各脂肪酸甲酯的百分含量。

第9頁，共64頁。

實驗三

高效液相色譜法測定萘一、實驗目的認識高效液相色譜儀,掌握高效液相色譜儀的基本操作；2.掌握高效液相色譜法進行定性和定量分析的原理；

3.掌握外標法進行定量分析的方法。第10頁，共64頁。二、實驗原理

在一定的色譜操作條件下，每種物質有一定的保留時間，而響應值與進樣量成線性關系。外標法也叫標準曲線法。第11頁，共64頁。三、儀器與試劑

儀器:ShimadzuLC-10ATvp高效液相色譜儀；紫外吸收檢測器（254mm）；C18柱，25cm×4.6mm；微量注射器；超聲波清洗器1臺；溶劑過濾器1套。2.試劑:甲醇：色譜純；二次蒸餾水；萘：AR級。第12頁，共64頁。

四、實驗步驟

1.色譜操作條件：色譜柱：C18柱；流動相：甲醇：水＝80：20流速：1mL/min檢測波長：254nm柱溫：40℃；進樣量：20μL。第13頁，共64頁。2.標準溶液配制；3.樣品溶液的配制；4.進樣并記錄色譜圖

第14頁，共64頁。五、數(shù)據(jù)處理與分析第15頁，共64頁。

實驗四

內標法測定聯(lián)苯一、實驗目的進一步熟悉高效液相色譜儀的基本構造與一般使用方法；2.理解內標法的測定原理和優(yōu)點；3.初步學會設計色譜法進行樣品測定的實驗步驟，并以萘為內標物測定樣品中聯(lián)苯的含量。第16頁，共64頁。二、實驗原理

在一定的色譜操作條件下，每種物質有一定的保留時間，而響應值與進樣量成線性關系。內標法也叫內標標準曲線法。第17頁，共64頁。三、儀器與試劑

儀器:ShimadzuLC-10ATvp高效液相色譜儀；紫外吸收檢測器（254mm）；C18柱，25cm×4.6mm；微量注射器；超聲波清洗器1臺；溶劑過濾器1套。2.試劑:甲醇：色譜純；二次蒸餾水；萘、聯(lián)苯：AR級。第18頁，共64頁。

四、實驗步驟

1.色譜操作條件：色譜柱：C18柱；流動相：甲醇：水＝90：10流速：1mL/min檢測波長：254nm柱溫：40℃；進樣量：20μL。第19頁，共64頁。2.標準溶液配制；3.樣品溶液的配制；4.進樣并記錄色譜圖

第20頁，共64頁。五、數(shù)據(jù)處理與分析第21頁，共64頁。

實驗五

常見陰離子色譜分析一、實驗目的了解離子色譜儀的基本構造與一般使用方法；2.能用于測定樣品中常見陰離子的含量。第22頁，共64頁。二、實驗原理

離子色譜法是以為離子交換樹脂為固定相，電解質溶液為流動相的液相色譜方法，常以電導檢測器作為通用的檢測器。常見陰離子經(jīng)過陰離子柱分離后，利用保留時間進行定性分析，利用峰面積進行定量分析。第23頁，共64頁。三、儀器與試劑

儀器:ICS-90型離子色譜儀；電導檢測器；陰離子分析系統(tǒng)，微量注射器。2.試劑：Na2SO4、NaNO3、NaCl(均為分析純)；9mmol/LNa2CO3溶液。第24頁，共64頁。四、實驗步驟

1.色譜操作條件的設置；2.標準溶液配制；

3.樣品溶液的配制；4.進樣并記錄色譜圖。第25頁，共64頁。五、數(shù)據(jù)處理與分析第26頁，共64頁。

實驗六

分子熒光光譜分析法測定維生素B2一、實驗目的了解熒光光譜分析基本原理；2.掌握熒光法的定量分析方法；3.了解日立F-2500型熒光分光光度計的構造及其使用方法。第27頁，共64頁。二、實驗原理

維生素B2（核黃素）在一定波長的激發(fā)光照射下會發(fā)射出綠色熒光，根據(jù)熒光強度在一定濃度范圍內與熒光物質濃度成正比，用標準曲線法對樣品進行定量分析。第28頁，共64頁。三、儀器與試劑

儀器：日立F-2500型熒光分光光度計，液體樣品架，50mL容量瓶8個，100mL燒杯2個，洗瓶一個，玻璃棒二根，蒸餾水。2.試劑：1%的醋酸溶液；維生素B2標準溶液：稱出10.0mg維生素B2先溶于少量的1%的醋酸溶液，然后轉移到1000mL容量瓶中，用1%的醋酸溶液定容至刻度，搖勻，至陰暗處保存。此液含維生素B210.0μg/mL。第29頁，共64頁。四、實驗步驟

1.按照日立F-2500型熒光分光光度計的使用方法開好儀器。2.配制系列標準溶液：取5個50mL容量瓶，分別加入1.00，2.00，3.00，4.00，5.00mL濃度為10.0μg/mL的標準溶液，用水稀釋至刻度，搖勻。第30頁，共64頁。3.標準曲線的繪制把各標準樣品置于試樣架內，設置好儀器的工作條件，用蒸餾水做空白，分別掃描空白和標樣的熒光光譜，根據(jù)峰高和濃度繪制標準曲線。4.未知試樣的測定準確稱出一定量的未知試樣于小燒杯中，用水溶解并定容至100mL容量瓶內，搖勻，用測定標準曲線相同的條件，測其熒光強度。第31頁，共64頁。五、數(shù)據(jù)處理與分析根據(jù)試液的熒光強度，從標準曲線上查出試液中維生素B2的濃度，按下列公式計算維生素B2的含量。維生素B2的含量=C×100/G（μg/g）C—試液中維生素B2的濃度（從標準曲線上查出，單位是μg/mL）C—未知試樣的重量，單位是克（g）100—試樣被稀釋的體積。第32頁，共64頁。

實驗七

紫外吸收光譜法測定苯甲酸一、實驗目的了解紫外吸收光譜儀的基本構造與一般使用方法；2.能用于測定樣品中苯甲酸的含量。第33頁，共64頁。二、實驗原理

苯甲酸在225nm處有最大吸收峰，其吸光度與濃度的關系服從朗伯－比爾定律。第34頁，共64頁。三、儀器與試劑

儀器：UV1600紫外分光光度計；10mL容量瓶7個；20mL、5mL吸量管各1支。2.試劑:0.1mol?L-1NaOH溶液;苯甲酸鈉(AR);蒸餾水。第35頁，共64頁。四、實驗步驟

1.苯甲酸鈉貯備液的配制：稱量經(jīng)過干燥的苯甲酸鈉適量于1000mL容量瓶中，用水溶解，并定容。2.苯甲酸鈉工作溶液的配制：取20.00mL貯備液稀釋定容至1000mL。3.苯甲酸鈉系列標準溶液的配制：分別取苯甲酸鈉工作溶液0-5.00mL按下表配制。第36頁，共64頁。容量瓶編號12345678工作液（mL）01.002.003.004.005.004.004.00加入NaOH（mL）1.001.001.001.001.001.001.001.00定容（mL)10.010.010.010.010.010.010.010.0C（ppm）02.04.06.08.010.0X1X2第37頁，共64頁。五、數(shù)據(jù)處理與分析1.標準曲線的繪制：以苯甲酸鈉系列標準溶液的吸光度為縱坐標，相應的濃度為橫坐標，繪制作A-C標準曲線。2.樣品溶液中苯甲酸鈉含量計算：從A-C標準曲線上查出X值，從而求出樣品中苯甲酸的含量。第38頁，共64頁。

實驗八

雙波長法同時測定維生素C和E一、實驗目的進一步熟悉紫外吸收光譜儀的基本構造，掌握其一般使用方法；2.能用雙波長法同時測定雙組分的含量。第39頁，共64頁。二、實驗原理

吸光度具有加合性，根據(jù)兩組分吸收曲線的性質，選擇兩個合適的測定波長，通過解聯(lián)立方程的可以同時測出樣品中雙組分的含量。第40頁，共64頁。三、儀器與試劑

儀器:UV1600紫外分光光度計；50mL容量瓶10個；20mL、5mL吸量管各2支。2.試劑:維生素C;維生素E;無水乙醇。第41頁，共64頁。四、實驗步驟

1.維生素C和維生素E標準溶液的配制；2.維生素C和維生素E紫外吸收曲線的繪制，確定測定波長；3.維生素C和維生素E標準曲線的繪制；4.未知試樣的測定。第42頁，共64頁。五、數(shù)據(jù)處理與分析1.維生素C吸收曲線的繪制；2.維生素E吸收曲線的繪制；3.根據(jù)吸收曲線測定波長的選定；4.維生素C標準曲線的繪制：5.維生素E標準曲線的繪制：6.樣品溶液中維生素C和E含量計算。第43頁，共64頁。實驗九

原子吸收光譜法測定

井水、河水中鎂一、實驗目的１.學會原子吸收光譜法測定金屬元素的原理與方法；２.了解原子吸收分光光度計的基本構造，初步熟悉其操作方法；３.掌握火焰法測鎂的條件選擇。第44頁，共64頁。二、實驗原理

將樣品試液吸入空氣–乙炔火焰中，在火焰的高溫下，鎂化合物離解為鎂基態(tài)原子，基態(tài)原子蒸氣對鎂空心陰極燈發(fā)射的特征譜線產(chǎn)生吸收。將測得的試樣溶液的吸光度扣除試劑空白的吸光度，利用標準曲線法，確定試液中的鎂含量。

三、儀器與試劑

１、儀器：TAS-986型/GGX-Ⅱ型原子吸收分光光度計

２、試劑：10μg/mlMg標準液

第45頁，共64頁。四、實驗步驟

１.配制Mg標準系列

取10μg/mlMg標準液0.50、1.00、0.50、2.00、2.50ml，分別置于5個50ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度搖勻，得Mg標準系列。

２.樣品：

井水直接取4.00ml稀釋至100ml；河水過濾后取10ml，稀釋至100ml。第46頁，共64頁。元素光源燈電流波長通帶火焰燃燒器高度MgMg燈1.０mA285.2nm2A乙炔／空氣５～６mm３.儀器檢測條件第47頁，共64頁。按照上述條件，根據(jù)儀器操作步驟依次從低到高濃度測定標液和樣液。五、數(shù)據(jù)處理采用標準曲線法處理，樣品稀釋倍數(shù)。第48頁，共64頁。附一TAS-986原子吸收分光光度計火焰法操作規(guī)程１.正確連接儀器及計算機各連線和插頭，確認儀器電源開關處于“關”位，再開啟穩(wěn)壓器電源。２.順序打開打印機、顯示器、計算機電源開關，等待計算機處于“Windows”界面。３.裝上待測元素空心陰極燈，并記下燈位。打開TAS-986主機電源開關，雙擊“AAwin”軟件圖標→聯(lián)機“確定”，儀器自動進入自檢。第49頁，共64頁。４.自檢完成后，設定和選擇工作燈和預熱燈→“下一步”→修改或輸入正確的燈電流、分光帶寬、燃氣流量、燃燒器高度和位置→“下一步“尋峰”→“下一步”→“完成”。

５.在任務欄擊“儀器”，選擇“燃燒器參數(shù)”，

調節(jié)火焰原子化器的前后、上下及角度位置，其對準光路。

第50頁，共64頁。６.擊“儀器”→選擇“扣背景方式”→選擇“氘燈”或“自吸”扣背景，并輸入適當?shù)碾疅綦娏骰蛘}沖電流，在能量窗口再進行調節(jié)和能量自動平衡。若不進行背景校正，本步可省去。７.擊“參數(shù)”按鈕→在常規(guī)界面輸入“測量重復次數(shù)”、“采樣間隔”、及“采樣延時參數(shù)”；在顯示界面輸入“吸光度顯示范圍”及“頁面更新時間”在數(shù)據(jù)處理界面選擇“計算方式”，輸入“積分時間”、“濾波系數(shù)”→“確定”。第51頁，共64頁。

８.擊“樣品”按鈕→選擇“校正方法”、“曲線方程”、“濃度單位”→“下一步”→選擇

“標準系列樣品個數(shù)”，輸入“標準系列樣品濃度值”→“下一步”→選擇“未知樣品個數(shù)”

→“完成”。

９.順序打開空壓機“風機開關”→“工作開關”，待壓力穩(wěn)定后，檢查并調節(jié)出口壓力為0.25~0.3Mpa之間（推薦壓力0.25Mpa）。第52頁，共64頁。10.打開乙炔鋼瓶總閥，檢查并調節(jié)出口壓力為0.05~0.09Mpa之間（推薦壓力0.06Mpa）。

11.擊“點火”按鈕點火→吸噴蒸餾水1~2分鐘→吸噴標準系列空白溶液擊“校零”按鈕自動調零。

12.擊“測量”按鈕→順序吸噴標準系列溶液并在測量窗口擊“開始”按鈕測量標準溶液，作校準曲線。第53頁，共64頁。13.吸噴未知樣品溶液，擊“開始”按鈕測量未知樣品。全部未知樣品測量完畢后擊“終止”按鈕退出測量→吸噴蒸餾水1~2分鐘清洗燃燒器。14.擊“應用”按鈕→選擇“實驗記錄”→輸入“測量元素”、“樣品名稱”、“分析員”、“記錄”→“確定”。

第54頁，共64頁。15.在測量表格上擊右鍵→選擇“表格設置”→選擇所需顯示和打印的項目→在任務欄擊“打印”按鈕→選擇所需打印的內容→擊“確定”打印相應內容。

16.關閉乙炔鋼瓶總閥，燒去管路中余氣，待火焰熄滅后按空壓機“放水閥”放水→關閉空壓機“工作開關”→1~2分鐘后關閉“風機開關”。第55頁，共64頁。17.退出AAWin操作軟件→關閉TAS-986主機電源→關閉打印機、計算機、穩(wěn)壓器電源。

18.整理實驗室衛(wèi)生、檢查實驗室水、氣、電安全。第56頁，共64頁。附二GGX-Ⅱ型原子吸收分光光度計操作規(guī)程1.開機前準備⑴將主機各操作鈕置于適當位置；⑵安裝空心陰極燈。2.開機⑴依次開穩(wěn)壓器、總電源、調燈電流后預熱15～20分鐘；⑵選擇分析線及狹縫寬度后，調燈及燃燒器的位置，調負高壓，用“狀態(tài)檢查（工作選擇）”檢查負高壓與±15V電源是否正常。第57頁，共64頁。3.點火⑴關緊主機上各氣體調節(jié)針閥，將“空氣-笑氣”鈕旋至“空氣”，開排廢氣裝置；

⑵開空壓機，調空氣輸入壓為2～3kg·cm-2；⑶打開助燃氣針閥，開大至限壓開關被啟動后，調助燃氣流量；

⑷依次打開乙炔鋼瓶總閥、分閥，調節(jié)乙炔輸出壓力0.8kg·cm-2，調燃氣流量后點