ICS65.140

CCSB47

6540

伊犁哈薩克自治州地方標準

DB6540/T029—2023

新疆黑蜂鑒定方法

IdentificationmethodofblackbeeinXinjiang

2023-12-26發(fā)布2024-01-26實施

伊犁哈薩克自治州市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB6540/T029—2023

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

本文件由伊犁哈薩克自治州農(nóng)業(yè)科學研究所提出。

本文件由伊犁哈薩克自治州農(nóng)業(yè)農(nóng)村局歸口。

本文件起草單位：伊犁哈薩克自治州農(nóng)業(yè)科學研究所、新疆大學。

本文件主要起草人：古麗奴爾·吐拉西、胡紅英、師豐豐、巴黑提亞、何茜、阿地娜·卡瑪勒江。

I

DB6540/T029—2023

新疆黑蜂鑒定方法

1范圍

本文件規(guī)定了新疆黑蜂形態(tài)特征測定、基因型測定、分析評估等新疆黑蜂的鑒定方法。

本文件適用于伊犁哈薩克自治州區(qū)域內(nèi)新疆黑蜂的鑒定。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，

僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB/T40184畜禽基因組選擇育種技術(shù)規(guī)程

GB/T31016樣品采集與處理移動實驗室通用技術(shù)規(guī)范

NY/T1673畜禽微衛(wèi)星DNA遺傳多樣性檢測技術(shù)規(guī)程

NY/T2364蜜蜂種質(zhì)資源評價規(guī)范

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

新疆黑蜂Xinjiangblackbee

屬于蜜蜂科、蜜蜂屬、西方蜜蜂種（ApismelliferaL.），主要分布于新疆西北部伊犁、塔城、

阿勒泰地區(qū)。該黑蜂體形大、吻長、色黑、繁殖力強、分蜂性弱、耐寒、抗病、善于利用大宗或零星蜜

源。它是一個已為長期生產(chǎn)實踐證明了的適應(yīng)當?shù)貒揽釟夂蚝兔墼刺攸c的優(yōu)良黑蜂品系（生態(tài)型）。

蜂群beescolony

以群體為單位，由蜂王、工蜂、雄蜂組成的能獨立生活的蜜蜂群體。

亞種subspecies

亞種是某個種的表型上相似種群的集群，棲息在該物種分布范圍內(nèi)的次級地理區(qū)，而且在分類學

上和該種的其他種群不同。

工蜂workerbee

工蜂是蜜蜂蜂群三個類型的一種。工蜂是蜜蜂中性別上未發(fā)育進化完全的雌蜂，二倍體雌性蜜

蜂，個體較蜂王和雄蜂小。

基因組genome

指生物體所有遺傳物質(zhì)的總和。這些遺傳物質(zhì)包括DNA或RNA（病毒RNA）。

1

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全基因組重測序技術(shù)wholegenomesequencing

對已知基因組序列的物種進行不同個體的基因組測序，并在此基礎(chǔ)上對個體或群體進行差異性分

析。

單核苷酸多態(tài)性singlenucleotidepolymorphism

指在基因組水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列多樣性。

4形態(tài)特征測定

蜜蜂標本選擇

每一蜂群選擇10只～50只大小形態(tài)相對一致的工蜂，裝入95％的酒精中，帶回實驗室。樣品記錄信

息見附錄A.1。

形態(tài)特征描述

工蜂的主要形態(tài)指標有體色（腹部背板幾丁質(zhì)顏色）、毛色（胸腹部絨毛顏色）、吻長、右前翅面

積（用長×寬表示）、肘脈指數(shù)、跗節(jié)指數(shù)（后足第一跗節(jié)的寬度與長度之比，用右后足測量）、蠟鏡

面積（第四腹節(jié)蠟鏡大小，用長×寬表示）、腹部第三節(jié)背板長度、絨毛指數(shù)、覆毛長度。

形態(tài)鑒定

采用NY/T2364蜜蜂種質(zhì)資源評價規(guī)范工蜂形態(tài)特征指標內(nèi)容，按蜂群隨機挑選5只～10只工蜂，每

個蜂場測定數(shù)量不少于5群。形態(tài)指標信息見附錄A.2。

5基因型測定

樣品準備

樣品采集應(yīng)避免個體間DNA交叉污染，每個個體的采樣工具應(yīng)更換或清洗，按照GB/T31016的規(guī)定

執(zhí)行。

基因組DNA提取

提取的DNA應(yīng)符合基因芯片或測序?qū)悠焚|(zhì)量和數(shù)量的要求。DNA提取方法按照NY/T1673的規(guī)定執(zhí)

行。

基因型測定方法

將通過形態(tài)鑒定的新疆黑蜂樣品采用全基因組重測序技術(shù)中的SNP進行基因分型。按照GB/T40184

的規(guī)定執(zhí)行。

6分析評估

數(shù)據(jù)處理

2

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將測序得到的原始數(shù)據(jù)，通過生信軟件對序列進行過濾，僅保留低質(zhì)量堿基數(shù)目占比不超過50％的

序列；通過生物信息學軟件，與西方蜜蜂參考基因組（ApisMel4.5）及NCBI數(shù)據(jù)庫中其他亞種數(shù)據(jù)進

行比對，比對參數(shù)可使用軟件默認參數(shù)。

多態(tài)性位點檢測分型

對比對后的數(shù)據(jù)排序并進行PCR重復(fù)標記，通過gatk4.1等軟件檢測變異序列。使用默認參數(shù)對SNP

進行質(zhì)量過濾，獲得新疆黑蜂SNP。

評估鑒定結(jié)果

通過基于基因組信息的最佳線性無偏估計模型、貝葉斯方法分析，依據(jù)獲得的單系群評價新疆黑蜂

鑒定結(jié)果。

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附錄A

（資料性）

記錄和表格

A.1樣品信息

樣品信息格式見表A.1。

表A.1樣品信息表

基因組測序

序號采樣數(shù)據(jù)每群數(shù)量海拔經(jīng)度緯度地點時間采集人

數(shù)據(jù)名稱

A.2形態(tài)指標測定

新疆黑蜂形態(tài)指標測定參照見表A.2。

表A.2新疆黑蜂形態(tài)指標測定參照

形態(tài)特征指標

吻長mm5.58±0.45

右前翅長mm10.05±0.21

右前翅寬mm3.38±0.12

肘脈指數(shù)2.169±0.16

腹部第三背板長mm2.35±0.15

絨毛指數(shù)2.12±0.26

覆毛長度mm0.278±2.14

跗節(jié)指數(shù)0.563±0.27

蠟鏡面積mm22.23±0.35

腹部背板幾丁質(zhì)顏色