通關卷-發(fā)酵工程

考點01傳統(tǒng)發(fā)酵技術的應用

考點必背知識鞏固基礎落實建議用時：12分鐘

1.1857年，法國微生物學家巴斯德通過實驗證明，酒精發(fā)酵是曰活的引起的。此后，人們才開始

了解發(fā)酵的本質(zhì)。這里所說的發(fā)酵，是指人們利用微生物，在適宜的條件下，將原料通過________的代謝

轉(zhuǎn)化為人類所需要的產(chǎn)物。不同的微生物具有產(chǎn)生不同代謝物的能力，因此利用它們就可以生產(chǎn)出人們所

需要的多種產(chǎn)物。（P5）

2.千百年來，腐乳一直受到人們的喜愛。這是因為經(jīng)過微生物的發(fā)酵，豆腐中的蛋白質(zhì)被分解

成，味道鮮美，易于消化吸收，而腐乳本身又便于保存。多種微勺物參與了豆

腐的發(fā)酵，如酵母、曲霉和毛霉等，其中起主要作用的是o（P5）

3.像這種直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次發(fā)酵保存下來的面團、鹵汁等發(fā)酵物中的微生

物進化發(fā)酵、制作食品的技術一般稱為技術。傳統(tǒng)發(fā)酵以的固體發(fā)酵及半固體

發(fā)辭為主，通常是家庭式或作坊式的。（P5）

4.乳酸菌是厭氧細菌，在無氧的情況下能將葡萄糖分解成（反應簡式①），可用于乳制品的發(fā)酵、

泡菜的腌制等。乳酸菌種類很多，在自然界中分布廣泛、空氣、土壤、植物體表、人或動物的腸道內(nèi)都有

乳酸菌分布,常見的乳酸菌有乳酸鏈球菌和。

①C6Hl2。6------>2C3H（乳酸）+能量（P5）

5.酵母菌是微生物，在無氧條件下能進行酒精發(fā)酵（反應簡式②），可用于釀酒、制作饅頭

和面包等。溫度是影響酵母菌生長的重要因素，釀酒酵母的最適生長溫度約為O

②C6Hl2。6------->2C2H$OH（酒精）+2CO2+能量（P6）

6.制作傳統(tǒng)泡菜是利用植物體表面天然的來進行發(fā)酵的。發(fā)酵期間，乳酸會不斷積累，當它的質(zhì)

量百分比為0.4%?0.8%時,泡菜的口味、品質(zhì)最佳。（P6“探比?實踐”）

7.泡菜在腌制過程中會有產(chǎn)生。膳食中的亞硝酸鹽一般不會危害人體健康，但如果人體

攝入過量，會發(fā)生中毒，甚至死亡。（P6“探究?實踐”）

8.醋酸菌是好氧細菌，當02、糖源都充足時能將糖分解成醋酸（反應簡式③）；當缺少糖源時則將乙醇轉(zhuǎn)

化為,再將乙醛變?yōu)椋ǚ磻喪舰埽?。醋酸菌可用于制作各種風味的醋。多數(shù)醋酸菌的最

適生長溫度為。

③C6Hl2。6+2。2------->2CH3COOH（醋酸）+2H2O+2CO2+能1：

酶

④C2H5OH+O2------>CH3COOH（醋酸）+比0+能量（P7）

9.果酒自然發(fā)酵時，利用葡萄皮上_______________：工業(yè)生產(chǎn)時，人工接種純化的酵母菌，以提高發(fā)酵

效率。（P7“探究?實踐”）

10.果酒變果醋發(fā)酵改變兩個條件：一,因為醋酸菌是好氧細菌；二,因為酵母菌在18?

25℃,而醋酸菌在30?35。<3。（P7“探究?實踐”）

通氧

11.果酒與果醋發(fā)醉流程：挑選匍萄一沖洗（再去梗）一榨汁一酒精發(fā)醉了而醋酸發(fā)醉。（P7）

[=][§^S題精練考點鞏固題組突破分值：50分建議用時：15分鐘

一、單選題

1.我國許多傳統(tǒng)美食制作都利用了傳統(tǒng)發(fā)酵技術，卜列敘述錯浜的是（）

A.傳統(tǒng)發(fā)酵以混合菌種的固體發(fā)酵及半固體發(fā)酵為主

R.饅頭制作過程中利用了酵母菌呼吸作用產(chǎn)生的CCh

C.白酒釀造中后期需密封容器以保證酵母菌無氧呼吸

D.醬油釀造過程中乳酸菌將蛋白質(zhì)水解成肽和氨基酸

2.某同學選用新鮮成熟的葡萄制作果酒和果醋，下列相關敘述正確的是（）

A.果酒發(fā)酵時，每日放氣需迅速，避免空氣回流入發(fā)酵容器

B.果酒發(fā)酵時，用斐林試劑檢測葡萄汁中還原糖含量變化，磚紅色沉淀逐日增多

C.果醋發(fā)酵時，發(fā)酵液產(chǎn)生的氣泡量明顯多于果酒發(fā)酵時產(chǎn)生的

D.果醋發(fā)酵時，用重銘酸鉀溶液測定醋酸含量變化，溶液灰綠色逐日加深

3.下列關于傳統(tǒng)發(fā)酵技術應用的敘述，錯誤的是（）

A.制作泡菜時，用水密封泡菜壇的目的是促進乳酸菌的無敏呼吸

B.制作果酒?時，需每隔一定時間打開瓶蓋放氣

C.制作果醋時，可以往果酒7加入醋酸桿菌將乙醉轉(zhuǎn)化為醋酸

D.傳統(tǒng)發(fā)酵技術大多為混合菌種

4.黃酒是世界上最古老的酒類之一，黃酒的制作流程主要為：制曲―浸米一煮酒（浸好的小米加入開水中

煮熱）一拌曲一入缸發(fā)酵一壓榨一裝瓶。下列敘述正確的是（）

A.浸米有利于淀粉水解產(chǎn)生酒精從而提高酒的產(chǎn)量

B.入缸發(fā)醉時不能將攪拌好的煮熟小米裝滿發(fā)醉缸

C.浸好的小米煮熟后為避免雜菌污染需要立刻拌曲

D.為利于黃酒發(fā)酵，發(fā)酵溫度應控制在30-35（之間

5.通過傳統(tǒng)發(fā)酵工藝制作的果酒深受人們喜愛，下圖為某同學釀制葡萄酒的兩個簡易裝置，下列說法錯誤

的是（）

甲B乙

A.在葡萄酒的自然發(fā)酵過程中，酵母菌的來源是附著在葡萄皮表面的野生酵母菌

B.發(fā)酵時，乙醇和CO2是在酵母菌的細胞溶膠中產(chǎn)生的

C.若用乙裝置，在發(fā)酵過程口，必須進行的操作是定期擰尸瓶蓋

D.甲裝置中留有約1/3的空間既可以為酵母菌繁殖提供氧氣，乂可以防止發(fā)酵旺盛時汁液溢出

6.腐乳是我國勞動人民創(chuàng)造出的一種主要由毛霉發(fā)醉制作的大豆食品。下列有關腐乳發(fā)酵工藝的敘述錯誤

的是（）

A.傳統(tǒng)腐乳發(fā)酵是單一菌種發(fā)酵生產(chǎn)的食品

B.腌制前對豆腐塊加熱能減少雜菌污染

C.影響腐乳風味的因素包括菌株類型、原料品質(zhì)、溫度等

D.接種前一般會對毛霉菌株進行擴大培養(yǎng)

7.古徽州有許多美食深受人們喜愛，如徽州毛豆腐、靈山酒釀、臭蹶魚、徽州臭豆腐等。制作臭豆腐時需

要將豆腐浸入含有乳酸菌和芽狗桿菌等微生物的鹵汁中發(fā)酵，相關敘述正確的是（）

A.鹵汁中的乳酸菌和芽泡桿菌相互獨立，沒有種間關系

B.制作臭豆腐時?，豆腐相當于微生物生長的培養(yǎng)基

C.徽州毛豆腐中的毛霉、曲每產(chǎn)生的蛋白酶能促進大豆蛋白質(zhì)、脂肪分解，豐富營養(yǎng)成分

D.乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生了乳酸和二氧化碳，需定期排氣

8.生物胺是一類小分子含氮化合物，低濃度對神經(jīng)調(diào)節(jié)有重要作用，攝入過量則會引起心悸、頭痛、嘔吐

等癥狀。三種發(fā)酵產(chǎn)品中生物胺總量如表。下列說法錯誤的是（）

發(fā)醉產(chǎn)品奶酪泡菜腐乳

生物胺總量〃mgkg」7.4822.32508.05

A.不同發(fā)酵食品中生物胺含量有差異

B.食用奶酪不會有任何食品安全問題

C.制作泡菜的主要菌種是乳酸菌

D.從生物胺含量角度建議少食用腐乳

9.某興趣小組為了探究自然發(fā)酵和人工發(fā)酵制作泡菜的過程中亞硝酸鹽含晟隨著發(fā)酵時間的變化差異，其

II.我國勞動人民以舜猴桃為原料利用酵母菌等微生物發(fā)酵制作的貓猴桃果酒，富含氨基酸、維生素和膳

食纖維等，具有降血壓、保肝防癌等功效。狒猴桃果酒的大致工業(yè)化生產(chǎn)流程如下圖所示。

狒猴桃鮮果一破碎榨汁一酶解一過濾一調(diào)整成分一接入酵母T發(fā)酵T陳釀一滅菌一成品

(1)傳統(tǒng)的驕猴桃酒釀制原理是：利用附著在果皮上的野生酵母菌發(fā)酵過程中進行的_____________將糖類物

質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)榫凭虲02。為及時排除產(chǎn)生的C02,發(fā)酵過程中采取的措施是o

(2)圖中調(diào)整成分階段，需向培養(yǎng)液中添加一定量的白砂糖。為了確定制備果酒使用的培養(yǎng)液中舜猴桃果汁

與白砂糖的最佳配比，研究人員向不同原料配比的培養(yǎng)液中添加0.20%已活化的酵母菌,25。(2的條件下發(fā)酵。

7d后的檢測結(jié)果如下表(注：感官主要包括果酒的色澤、香氣和口味)：

編號原料配比(掰猴桃果汁：白砂糖)酒精度/(%vol)感官評分/分

110：18.184

210：28.689

310：38.781

410：48.479

510：58.276

據(jù)表可知，培養(yǎng)液中舜猴桃果汁與白砂糖的配比為時發(fā)酵效果較好，作出該判斷的

依據(jù)是o

(3)在上述實驗的過程中，研究人員發(fā)現(xiàn)，當發(fā)酹時間在9?lid時，魅猴桃酒的酒精濃度會降低，.且發(fā)酵

時間越長，口感越差，酸味越重。根據(jù)所學知識，嘗試解釋出現(xiàn)這一現(xiàn)象的原因：

。為提高酒的產(chǎn)量和品質(zhì)，需進一步確定貓猴桃酒的最佳發(fā)酵時間，請

簡要寫出實驗設計的思路o

12.果酒、果醋、泡菜、酸奶等食品，都是利用微生物發(fā)酵工程生產(chǎn)的，極大地滿足了人對飲食多元化發(fā)

展的需求，體現(xiàn)了我國飲食文化的多樣性和豐富性?；卮鹣铝型}：

(1)果酒制作的初始階段需要提高酵母菌的增殖速度，常采用的操作是(填“通氣”或“密閉發(fā)酵

時，細胞的有氧呼吸第一階段和無氧呼吸都在(結(jié)構(gòu))中進行：檢驗代謝產(chǎn)物乙醇，可將其與—

試劑反應，若呈灰綠色則有酒精生成。

(2)果醋的生產(chǎn)是利用醋酸桿菌在條件下將乙醇轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿岬倪^程，此時所需的溫度(填“高

于a等于"或“低于”)果酒生產(chǎn)所需的溫度。

(3)泡菜與酸奶進行發(fā)酵所用的菌種都是，其異化作用類型是.

(4)很多同學嘗試居家制作泡菜或酸奶，發(fā)現(xiàn)容器、蔬菜等雖未進行嚴格滅菌，而在發(fā)酵過程中一般不會出

現(xiàn)其他雜菌大量繁殖，其原因是，

(5)某同學在泡菜制作過程中，對亞硝酸鹽含量峰值隨時間變化的關系進行實驗探索，結(jié)果如圖所示。實驗

結(jié)果說明NaQ濃度越高，.

后-■-5%NaCl

去

遇

師

吟

a

(

m

g

、

k

)g

腌制時間(d)

考點02微生物的基本培養(yǎng)技術I

知識填空

考點必背知識鞏固基礎落實建議用時：30分鐘

(一)培養(yǎng)基的配制

1.人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，是進行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎。

2.培養(yǎng)基的化學成分包括_____________________________________________

__________________________________________________________________________等。

(1)：能為微生物的代謝提供的物質(zhì)。如CCh、NaHCCh等：糖類、石

油、花生粉餅等。只能利用。單質(zhì)碳不能作為碳源。

(2)：能為微生物的代謝提供的物質(zhì)。如N2、NH3、NO*、NH；等；蛋

白質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白陳等o只有才能利用o

(3)水

(4)無機鹽

(5)生長因子：微生物生長繁殖所必需的，但自身不能合成或合成能力有限，如維生素，氨基酸，堿基等。

培養(yǎng)某些微生物時可以不用添加生長囚子。

另外，培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對—、以及的要求。例如，培養(yǎng)

時需要在培養(yǎng)基中添加,培養(yǎng)時須將培養(yǎng)基的pH調(diào)至________,培養(yǎng)時需要

將pH調(diào)至,培養(yǎng)則需要提供的條件。(P10)

3.培養(yǎng)基的種類及用途：

(1)按可分為、和。應用

于工業(yè)或生活生產(chǎn)，應用于微生物的分離和鑒定，則常用于觀察微生物

的運動及菌種保藏等。

（2）按照培養(yǎng)基可分為和o是用成分已知的化學物

質(zhì)配制而成，其中成分的種類比例明確，常用于微生物的分離鑒定。是用化學成分不明的

天然物質(zhì)配制而成，常用于。

（3）按照培養(yǎng)基的,可將培養(yǎng)基分為和o選擇培養(yǎng)基是指在培

養(yǎng)基中加入某種化學物質(zhì)，以抑制不需要的微生物生長，促進所需要的微生物的生長。鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)

微生物的特點，在培養(yǎng)基中配制而成的，用以鑒別不同類別的微生物。

（-）無菌技術

1.獲得純凈培養(yǎng)物的關鍵是,要注意以下幾個方面：

①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行清潔和消毒。

②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌。

③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行。

④實驗操作時應避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。

無菌技術除了用來外，還能有

效O

2.消毒

（1）消毒指使用較為僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物（不包

括芽泡和抱子）。

（2）消毒方法常用,（對于一些不耐高溫的液體），還有（如

酒精、氯氣、石炭酸等）、。

3.滅菌

（1）滅菌是指使用殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽泡和抱子。

（2）滅菌方法有、、

①接種環(huán)、接種針、試管口等使用：

②玻璃器皿、金屬用具等使用,所用器械是;

③培養(yǎng)基、無菌水等使用,所用器械是o

4.比較消毒和滅菌

比較項理化因素的化用強度消滅微生物的數(shù)量芽抱和抱子能否被消滅

消毒

滅菌

（三）微生物的純培養(yǎng)

1.微生物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、、、分離和培養(yǎng)等步驟。（P11）

2.分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞群體,

這就是o采用和能將單個微生物分散在固體培養(yǎng)基上，之后經(jīng)培養(yǎng)得

到的單菌落一般是由單個微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。（P12“探究?實踐”）

3.倒平板待培養(yǎng)基冷卻至______左右時，在酒精燈火焰附近倒平板。（P12“探究?實踐”）

4.通過接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。經(jīng)數(shù)次劃線

后培養(yǎng)，可以分離得到單菌落。平板劃線的具體操作見下面的流程圖。（P13“探究?實踐”）

①將接種杯放在火焰②在火焰旁冷卻接種環(huán)?同時,③將試忤口

上約我.i'i到接料環(huán)撥出裝有解母曲培養(yǎng)液的試性通過火焰

--條st隙,川接仲環(huán)在培⑤將試管口④在火焰附近川

界疆發(fā)面迅速劃三至仁條通過火焰,接種環(huán)伸入值液

平行我.sI：mia井東上怫塞??'.他取?環(huán)菌

液

⑦灼燒接腫環(huán).待凡冷卻后,從第一次劃線的木編開

始作第二次劃線業(yè)狂以上操作.作第三、四，五次則

線注意不要將此后?次的劃線與第一次的劃線相連

5.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50T左右時?，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？

6.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？

________________________________________________________________________O

7.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？

________________________________________________________________________O

8.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？

為什么？

_________________________________________________________________________O

9.為什么在操作的第?步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？

為什么？

答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了;每次劃線前灼燒接種環(huán)是

從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),

10.住灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線?

11.在第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？

考點鞏固題組突破分值：50分建議用時：15分鐘

一、單選題

1.微生物培養(yǎng)時，常利用無菌技術來避免雜菌污染。下列相關敘述正確的是（）

A.無菌技術主要包括消毒和滅菌，消毒和滅菌的殺菌程度存在差異

B.配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中，再放入干熱滅菌箱中進行滅菌

C.倒平板時應把培養(yǎng)皿蓋完全打開，以免培養(yǎng)基濺到培養(yǎng)皿蓋上

D.接種前接種環(huán)必須灼燒滅菌，接種完成后接種環(huán)不用灼燒滅菌

2.下列關于微生物培養(yǎng)和利用的敘述，正確的是（）

A.接種前要了解固體培養(yǎng)基是否被污染，需用完全培養(yǎng)基接種菌液培養(yǎng)檢測

B.培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿需要的滅菌方法是干熱滅菌

C.接種時連續(xù)劃線的目的，是將聚集的菌體逐步稀釋獲得單個菌落

D.接種時，每次劃線前都不需要灼燒接種環(huán)，只需要在接種前和接種完成后灼燒

3.微生物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟，下列操作中，操作方法和操作目的

對應正確的選項是（）

選項操作方法操作目的

提供無機鹽、維持相對穩(wěn)定

A培養(yǎng)基中加入NaH2P04和Na2HPO4pH

B培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行干熱滅菌避免雜菌的污染

C在劃線后進行接種環(huán)的灼燒殺死接種環(huán)上的雜菌

D和空白培養(yǎng)基一同進行培養(yǎng)確定培養(yǎng)基消毒是否徹底

A.AB.BC.CD.D

4.LB培養(yǎng)基是一種應用最廣泛和最普通的細菌基礎培養(yǎng)基，配方如表。下列敘述正確的是（）

養(yǎng)分含量

胰蛋白陳10g

酵母粉5g

NaCl10g

瓊脂15g

蒸餡水1000mL

A.瓊脂是一種海藻多糖，可為細菌生長提供大量的碳源和能源

B,若用該培養(yǎng)基對霉菌進行純化培養(yǎng)，需將pH調(diào)至中性或弱堿性

c.該培養(yǎng)基中缺少纖維素，不能用來篩選分解纖維素的細菌一

D.該培養(yǎng)基屬于?固體培養(yǎng)基，可用來對菌種進行擴大培養(yǎng)

5.獲得純凈微生物培養(yǎng)物的關鍵是防止雜菌污染，無菌技術圍繞如何避免雜菌污染而展開，包括消毒和滅

菌。下列敘述錯誤的是（）

A.消毒只能殺死物體表面的部分微生物

B.消毒采用較溫和的物理、化學或生物方法

C.滅菌不僅能殺死微生物，還能殺死芽泡和抱子

D.不同的操作對象需要采取不同的消毒或滅菌方法

6.塑料克星黃粉蟲，其腸道微生物中存在能夠降解塑料（聚乙烯）的菌株?？茖W家提取其腸內(nèi)容物后進行

培養(yǎng)，再通過平板劃線的方法接種于以聚乙烯為唯一碳源的培養(yǎng)基上，獲得目的菌株。下列敘述正確的是

A.該培養(yǎng)基從功能來看屬于鑒別培養(yǎng)基

B.只有在劃線區(qū)域4才會出現(xiàn)單菌落

C.上述劃線過程，接種環(huán)至少需要灼燒滅菌5次

D.應選用蒸儲水溶解腸內(nèi)容物制成菌液后進行接種

7.某同學將5個手指尖在貼有“洗手前”標簽的固體培養(yǎng)基上輕輕按一下，然后將該手洗干凈，再將5個手

指尖在貼有“洗手后”標簽的同種培養(yǎng)基上輕輕按一下。將這兩個培養(yǎng)皿放入37。（：恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后,

發(fā)現(xiàn)貼有“洗手后”標簽的培養(yǎng)皿中菌落較少。下列相關敘述錯誤的是（）

A.該實驗中需要進行滅菌處理的材料用具有培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基等

B.“將手指尖在培養(yǎng)基上輕輕按?下”相當于微生物培養(yǎng)中的接種

C.兩個培養(yǎng)基均可在表面形成單個的菌落，且具有相同的形狀、顏色和隆起程度

D.該實驗結(jié)果表明，養(yǎng)成良好的洗手習慣有利于疾病的預防

8.關于微生物的培養(yǎng)，下列說法錯誤的是（）

A.異養(yǎng)微生物能利用有機碳源，也能利用無機氮源

B.適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液可加強消毒效果

C.平板劃線法和稀秤涂布平板法都需先稀秤菌液

D.稀釋涂布后得到的單菌落一般就是純培養(yǎng)物

9.肺炎支原體的藥敏實驗中，將疆有相同濃度的阿奇霉素、克拉霉素和羅紅霉素的圓形濾紙片放置于平板

不同位置。培養(yǎng)一段時間后，平板上出現(xiàn)的抑菌圈情況如圖所示。下列敘述正確的是（）

A.支原體與病毒的根本區(qū)別是細胞內(nèi)無核糖體

B,可依據(jù)菌落特征判斷病人是否有支原體感染

C.?處作為對照組，圓形濾紙片上滴加蒸馀水

D.阿奇霉素抑制支原體增殖效果比克拉霉素好

10.2023年4月我國新版《生活飲用水衛(wèi)生標準》（GB5749-2022）正式實施，其中對微生物的檢出要求如下

表。興趣小組的同學們對某蓄水池進行細菌總數(shù)測定，以了解池水是否符合飲用水衛(wèi)生標準。結(jié)合下表分

析，下列說法錯?誤?的是（）

序號指標限值

1總大腸桿菌/(MPN/l()()mL或CFU/100mL)不應檢出

2大腸埃希氏菌/(MPN/100mL或CFU/100mL)不應檢出

3菌落總數(shù)/(MPN/100mL或CFU/lOOmL)100

MPN表示最可能數(shù)，CFU表示菌落形成單位

A.可采用高壓蒸汽滅菌法或干熱滅菌法對取水樣的三角瓶滅菌

B.培養(yǎng)基中應加入伊紅一亞甲藍以區(qū)分大腸桿菌和其他細菌菌落

C.應將0.1mL稀釋水樣滴加到培養(yǎng)基表面并用涂布器涂抹均勻

D.應將平板倒置后在適宜條件下培養(yǎng)，以減少培養(yǎng)基污染的幾率

二、非選擇題

11.大腸桿菌是一種條件致病菌，一定數(shù)量的大腸桿菌有利于胃腸蠕動，過量的大腸桿菌則容易引發(fā)腹痛、

腹瀉等癥狀。某同學喝了自釀葡萄酒后出現(xiàn)腹痛、腹瀉現(xiàn)象。他懷疑酒中大腸桿菌含量超標，于是開展了

葡萄酒的檢測實驗。實驗的部分步驟如下：

①配制培養(yǎng)基②滅菌、冷卻③接種④培養(yǎng)與觀察

請回答下列問題：

(1)在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮、和滲透壓等條件。由于

該細菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、、等優(yōu)點，因此常作為遺傳學

研究的實驗材料。

(2)在大腸桿菌培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，靜止空氣中的細菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能一

(答出兩點)。

(3)酵母菌和大腸桿菌的代謝類型都是異養(yǎng)兼性厭氧型，但一般認為如果控制好發(fā)酵條件，葡萄酒是不易被

大腸桿菌污染的，原因是，

(4)將接種后的平板和一個空白平板放在適宜溫度下培養(yǎng)適宜的時間，設置空白平板對照的目的是

。通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)(寫出兩

點)等菌落特征對細菌進行初步的鑒定分類。

(5)若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù)，要想使估計值更接近實際值，除應嚴格操作、多次重復

外，還應保證待測樣品稀釋的“

12.尿素是?種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生

物種類和數(shù)量繁多，某生物興趣小組完成了“土壤中分解尿素的細菌分離與計數(shù)”的實驗，實驗中用到的尿素

培養(yǎng)基成分如下表所示，具體操信流程如圖所示。請分析回答。

葡萄糖尿素瓊脂

KH2PNa2HPO4MgSO47H2O

l.4g2.lg0.2g10.0gl.0g15.0g

將上述物質(zhì)溶解后，用蒸儲水定容到1000mL。

0.5mL0.5mL0.1mL

4.5mL無菌水

(1)在實驗中，下列材料或用具需要滅菌的是，需要消毒的是(填序號)。

①培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)HII②玻棒、試管、錐形瓶③實驗操作者的雙手④操作空間⑤接種用具

(2)培養(yǎng)基中加入尿素的目的是,從作用分析這種培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基，本實驗

還同時設立牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基進行接種后培養(yǎng)，目的是o

(3)除了本實驗的接種培養(yǎng)方法外，通常還可以采用方法能將單個微生物分散在固體培

養(yǎng)基上，之后經(jīng)培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個微生物繁殖形成的;此實驗不選這個方法

的原因是o

(4)分解尿素的細菌生長所需的氮源和碳源分別來自培養(yǎng)基中的,實驗需要振蕩的目的

是.

考點03微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)

知識填空

考點必背知識鞏固基礎落實建議用時：10分鐘

1.在微生物學中，將允許種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱為

選擇培養(yǎng)基。(P16)

2.如果想知道1g土壤中有多少能分解尿素的細菌，僅有選擇培養(yǎng)基是不夠的，還需要對土樣進行適當?shù)奶?/p>

理以及科學的測定微生物數(shù)量的方法?？刹捎孟♂屚坎计桨宸?，其操作如圖(P17)

?將沼布卷校住攏有

酒陰的憂懷中

3取011nL做（液,俄仙利培養(yǎng)班

?，用除有涔樣偏俊均勻地注€作培￥基表3將徐布騫就在火燃上妁燒.力樂精燃X、

嘛沒布時可培。II.使濠金均勻“除加R冷卻行.向透行探布，

稀釋涂布平板法操作不點圖

3.稀釋涂布平板法除可以用于分甚微生物外，也常用來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目。當樣品的稀釋度足夠高時，

培養(yǎng)基表面生長的一個單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活茵。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出

樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準確，一般選擇菌落數(shù)為的平板進行計數(shù)。（P18）

4.樣品的稀釋度將直接影響平板上的菌落數(shù)目。在實際操作中，通常選用一定稀釋范I制的樣品液進行培養(yǎng)，

以保證獲得菌落數(shù)為30?300、適于計數(shù)的平板。在同一稀釋度下，應至少對個平板進行重復計數(shù),

然后求出平均俏。（P18）

5.值得注意的是，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目,這是因為當兩個或多個細胞連在一起時，

平板上觀察到的只是一個菌落。因此，統(tǒng)計結(jié)果一般用而不是用活菌數(shù)來表示。（PI8）

6.細菌計數(shù)板和血細胞計數(shù)板的計數(shù)原理相同。血細胞計數(shù)板比細菌計數(shù)板厚，常用

于、等的計數(shù)。用細菌計數(shù)板可對的細胞進行觀

察和計數(shù)。（P18“相關信息”）

7.除上述的活菌計數(shù)外，利用進行直接計數(shù)，也是一種常用的、快速直觀的測定微生物數(shù)量的方

法。該方法利用特定的細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡二觀察、計數(shù)，然后再計算一定體積的樣品

中微生物的數(shù)得，統(tǒng)計的結(jié)果一般是活菌數(shù)和死菌數(shù)的。（P18）

8.絕大多數(shù)微生物都能利用葡萄精，但是只有能合成胭酶的微生物才能分解尿素。利用以作為唯一

氮源的選擇培養(yǎng)基，可以從土壤中分離出分解尿素的細菌。（P18“探究?實踐”）

9.一般來說，在相同的培養(yǎng)條件下，同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的特征。請仔細觀察你所分離到的菌落,

最好以表格的形式將不同菌落的特征（如形狀、大小和顏色等）記錄下來。（P19“探究?實踐”）

漉精練考點鞏固題組突破分值：50分建議用時：15分鐘

一、單選題

1.版酹催化尿素水解，產(chǎn)生的氨可作為細菌的氮源。腺酶被去除銀后失去活性。下列敘述曾送的是（）

A.銀是組成麻酶的重要元素

B.鋰能提高尿素水解反應的活化能

C.產(chǎn)赧酶細菌可在以NH4cl為唯?氮源的培養(yǎng)基生長繁殖

D.以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可用于篩選產(chǎn)腺酶細菌

2.某生物活動小組為探究當?shù)剞r(nóng)田土壤中分解尿素的細菌的數(shù)量，進行了取樣、系列梯度稀釋、涂布平板、

培養(yǎng)、計數(shù)等步驟，實驗操作過程如下，下列說法不正確的是（）

275

振蕩J\0-3mL285

280

土壤5g定容到

A.圖中接種的培養(yǎng)基是以尿素為唯一氮源的固體培養(yǎng)基，能生長的微生物可能不能合成脈酶

B.若每支試管稀釋10倍，則圖中a的數(shù)值應為2.7,5號試管共稀釋了1（）6倍

C.圖中左上角培養(yǎng)基菌落連成一片，可能是涂布不均勻造成的

D.若僅以4號試管接種培養(yǎng)基計數(shù)，5g該土壤中含分解尿素菌的估算數(shù)目是1.4x108個

3.下列關于土壤中尿素分解菌的分離與計數(shù)實驗的敘述，錯誤的是（）

A.培養(yǎng)過程中，將培養(yǎng)皿倒置能防止雜菌的污染

B.測定土壤中尿素分解菌的數(shù)量和土壤中固氮菌的數(shù)最應選用相同的稀釋倍數(shù)

C.判斷培養(yǎng)基滅菌是否徹底，可將未接種的以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基置于與實驗組相同條件下培養(yǎng)

D.判斷培養(yǎng)基是否具有篩選作用，可用牛肉膏蛋白陳培養(yǎng)基與實驗組相同處理最終對比菌落數(shù)

4.幽門螺桿菌（HP）是定植「胃部黏膜的異養(yǎng)微厭氧產(chǎn)服的菌，對胃黏膜細菌進行體外培養(yǎng)是診斷HP感

染的“金標準”，臨床上也可讓待測者口服14c標記的尿素，尿素可被麻酶催化分解為NH3和14co2,定時收

集并檢測待測者呼出氣體中是否含,4C可判斷HP感染情況。下列相關敘述正確的是（）

A.用以尿素為唯?氮源的培養(yǎng)基從胃黏膜中分離出HP,該過程所需設備、器具和試劑都要先進行高

壓蒸汽滅菌

B.體外培養(yǎng)HP時，應將培養(yǎng)基調(diào)為酸性，并在嚴格厭氧條件下進行培養(yǎng)

C.培養(yǎng)基中加入一定量的酚紅試劑可進一步鑒定HP

D.若待測者呼出的氣體含"C,則該氣體是由胃部HP產(chǎn)生，經(jīng)食道由口腔呼出

5.為篩選出某些特殊微生物，常常需要人為提供有利于目的菌株生長的條件，同時抑制或阻止其他微生物

的生長，或在培養(yǎng)基中加入某種指示劑使菌落產(chǎn)生明顯的特征性變化。下列說法錯誤的是（）

A.利用不含氮源的培養(yǎng)基可以初步篩選出硝化細菌

B.利用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基可以初步篩選出產(chǎn)腺酶的微生物

C.利用伊紅——亞甲藍固體培養(yǎng)基可以篩選出大腸桿菌菌落

D.利用含纖維素和剛果紅的固體培養(yǎng)基可以初步篩選出產(chǎn)纖維素酶的微生物

6.下表為培養(yǎng)某種微生物的培養(yǎng)基配方，下列相關敘述錯誤的是（）

青霉素

成分NaNO3K2HPO4KC1MgSO4*7H2OFeSO4(CH2O)H2O

（可殺死細菌）

含量3g1g0.5g0.5go.oig30gIL0.1萬單位

A.依物理性質(zhì)劃分，該培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基

B.由培養(yǎng)基的原料可知，所培養(yǎng)微生物的同化作用類型是異養(yǎng)型，培養(yǎng)的微生物可以是酵母菌

C.若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選能分解纖維素的細菌，則應除去（CHzO）,再添加纖維素作為哇一碳源

D.培養(yǎng)基中的唯一碳源是（CH2O）,唯一氮源是NaNCh

7.在牛、羊等反芻動物的瘤胃中生活著多種微生物，其中有能分解纖維素的微生物。某科研團隊按照如圖

所示的流程分離瘤胃中的纖維素分解菌，實驗中需要甲、乙兩種培養(yǎng)基，并在剛果紅培養(yǎng)基平板上篩選到

-降解圈

-菌落a

-菌落b

-菌落c

注：①②③表示相應操作。

A.培養(yǎng)基表面均加入一層無菌的石蠟主要是為防止雜菌的污染

B.甲培養(yǎng)基中唯一的碳源是纖維素，則該培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基

C.分離瘤胃中纖維素分解菌的方法可以是稀釋涂布平板法或平板劃線法

D.圖中降解圈的大小與纖維素陋活性有關，菌落a降解能力最強

8.從自然界中篩選具有優(yōu)良性狀的菌種的一般步驟為：采集樣品T富集培養(yǎng)（使菌體數(shù)量增多）T純種分

離一性能測定，如圖a、b是采用兩種接種方法接種后純化培養(yǎng)的效果圖。下列相關敘述正確的是（）

A.實驗用的培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基均可采用干熱滅菌法

B.獲得圖a所示結(jié)果的接種過程中，接種環(huán)需灼燒滅菌3次

C.可使用液體培養(yǎng)基進行富集培養(yǎng)

D.利用圖b計算出樣品中菌體濃度為5.85x108個的1,則接種稀釋液的稀釋倍數(shù)為e倍

9.大腸桿菌能在基本培養(yǎng)基上生長，X射線照射后產(chǎn)生的大腸桿菌不能在基本培養(yǎng)基上生長，但可以在完

全培養(yǎng)基上生長。夾層培養(yǎng)法多用于營養(yǎng)缺陷型菌株的篩選，其具體操作是：先在培養(yǎng)皿底部倒一薄層已

滅菌的基本培養(yǎng)基；待冷凝后，再添加一層內(nèi)含菌液（經(jīng)過X射線處理）的基本培養(yǎng)基；冷凝后再加一薄

層的基本培養(yǎng)基。培養(yǎng)一段時間后，對首次出現(xiàn)的菌落做好標記；然后再加一層完全培養(yǎng)基，經(jīng)培養(yǎng)后會

長出形態(tài)不一的菌落（如圖所示）。下列說法錯誤的是（）

A.X射線可能誘發(fā)基因突變導致人?腸桿菌營養(yǎng)缺陷

B.夾層培養(yǎng)法不適用于對需氧型微生物進行篩選

C.首次出現(xiàn)的菌落做標記時，應在皿蓋上做標記

D.最后培養(yǎng)基上形態(tài)較小的菌落可能是營養(yǎng)缺陷型菌株

10.在生活飲用水中如果大腸桿菌含量超標，會造成細菌性痢疾，嚴重時會造成脫水，甚至會危及生命。

可利用表中的培養(yǎng)基對生活飲用水中的大腸桿菌進行分離和計數(shù)，下列敘述正確的是（）

成分蛋白陳蔗糖乳糖K2HPO4顯色劑（伊紅美藍）瓊脂

含量10.0g5.0g5.0g2.0g0.2g12.0g

將上述物質(zhì)溶解后，用蒸儲水定容到1000mL

A.根據(jù)用途劃分該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基

B.在配制培養(yǎng)基時應先調(diào)節(jié)pH值，再滅菌后倒平板

C.使用后的培養(yǎng)基在丟棄前一定要經(jīng)過消毒處理，以免污染環(huán)境

D.為防止雜菌污染，還可以向培養(yǎng)基中添加適量抗生素

二、非選擇題

11.廚房中的酎余垃圾多為濕垃圾，濕垃圾處理的有效方法之一是用微生物對其進行降解。如圖1表示篩

選高效降解淀粉菌種的過程：

培養(yǎng)一

處理后段時間挑單菌落.培養(yǎng)出大量

④一，高效降解淀

接種滴加碘液接種粉的微生物

TX培養(yǎng)基

餐余垃圾Z培養(yǎng)基

浸出液Y培養(yǎng)基

(1)X培養(yǎng)基中加入的唯一碳源是o從用途上分析，Y培養(yǎng)基屬于—培養(yǎng)基。根據(jù)X培養(yǎng)基的結(jié)

果判斷，第I步所用的接種方法是0

(2)應挑選Y培養(yǎng)基?上的號(填序號)菌落接種于Z培養(yǎng)基.匕進一步培養(yǎng)。菌落①②③周圍產(chǎn)生了透

明圈，產(chǎn)生透明圈的原因是0

(3)④菌落能在Y培養(yǎng)基上生長但沒有形成透明圈，有人推測，④菌落可能利用了空氣中的CO?作為碳源。

若要進一步確定④菌落能否利用空氣中的作為碳源，請簡要寫出實驗思路和預期結(jié)

果：。

(4)高效降解淀粉菌種在Z培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間后，為估算其中的細菌數(shù)目，分別吸取0.1ml不同稀釋倍

數(shù)的稀釋液，接種于培養(yǎng)基上培養(yǎng)至菌落穩(wěn)定，結(jié)果如下表，則該取樣菌液中細菌密度為個/ml。

菌落數(shù)

稀釋倍數(shù)

平板1平板2平板3

104倍594

103倍122138112

IO2倍432491387

12.為建設社會主義新農(nóng)村，解戾農(nóng)村生產(chǎn)生活垃圾處理的問題，某辦事處給出了如下處理方案:

生活垃圾分類處理方案

廚余垃圾、作物秸稈堆肥或生產(chǎn)沼氣

包裝類垃圾衛(wèi)生填埋

有害垃圾、化工廢水專業(yè)化處理

(I)某團隊想通過富集培養(yǎng)從土壤中篩選出降解玉米秸稈的復合菌：為避免雜菌污染，取樣時應注意什么？

(答出2點)。

(2)若要篩選出能分解包裝塑料的細菌應使用培養(yǎng)基(按功能分)，其作用原理是能夠分解包

裝塑料的細菌可利用包裝塑料提供的碳源生長，不能分解包裝塑料的細菌則不能生長。

(3)叱工廢水經(jīng)專業(yè)化處理，無污染物后才能排入河流。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，某湖泊附近有一家化工廠，長期向湖偷

排工業(yè)廢水，造成湖中沉積了大量污染物，其中環(huán)境污染物M:一種含有C、H、0、N的有機物)難以降

解為了從中分離獲得能降解M的細菌的單菌落，某同學設計了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見、表)：

成分無機鹽淀粉M瓊脂水

培養(yǎng)基甲++++

培養(yǎng)基乙+++++

①據(jù)表判斷，其中成分M是作為____________起作用，培養(yǎng)基______________(填“甲”或“乙可用于分離

能降解M的目的菌。

②在5個細菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為103的土壤樣品溶液o」mL,培養(yǎng)-?段時間后，平板上長出

的細菌菌落數(shù)分別為13、156、462、178和191。該過程中采取的接種方法是,1mL

原土壤樣液中的細菌數(shù)量為xi()8個：與血細胞計數(shù)板計數(shù)法相比，此計數(shù)方法測得的活細菌數(shù)

較少。

考點04發(fā)酵工程及其應用

知識填空

考點必背知識鞏固基礎落實建議用時：15分鐘

1.發(fā)酵工程一般包括菌種的選育，擴大培養(yǎng)，培養(yǎng)基的配制、，接種，發(fā)酵，等

方面。(P22)

2.性狀優(yōu)良的菌種可以從自然界中篩選出來，也可以通過______育種或育種獲得。生產(chǎn)檸檬

酸就需要篩選產(chǎn)酸量高的黑曲霉。在啤酒生產(chǎn)中，使用基因工程改造的啤酒酵母，可以加速發(fā)酵過程，縮

短生產(chǎn)周期。(P22)

3.工業(yè)發(fā)酵罐的體積一股為幾十到幾百立方米，接入的菌種總體積需要幾立方米到幾十立方米。所以，在發(fā)

酵之前還需要對菌種進行培養(yǎng)。(P22)

4.現(xiàn)代發(fā)酵工程使用的大型發(fā)酵罐均有計算機控制系統(tǒng)，能對發(fā)酵過程中的溫度、、、罐

壓、通氣量、攪拌、泡沫和營養(yǎng)等進行監(jiān)測和控制；還可以進行反饋控制，使發(fā)酵全過程處于最佳狀態(tài)。（P23）

5.發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵：這是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)。在發(fā)醉過程中，要隨時檢測培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量、產(chǎn)物濃度

等，以了解發(fā)酵進程。還要及時添加必需的營養(yǎng)組分，更嚴格控制、和等發(fā)酵

條件。環(huán)境條件不僅會影響微生物的生長繁殖，而且會影響微生物代謝物的形成。如谷氨酸的發(fā)酵生產(chǎn)：

在中性和弱堿性條件下會積累谷氨酸；在酸性條件下則容易形成谷氨酰胺和。（P23）

6.如果發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細胞本身，可在發(fā)酵結(jié)束之后，采用、等方法將菌體分離和干燥,

即可得到產(chǎn)品。如果產(chǎn)品是代謝物，可根據(jù)產(chǎn)物的性質(zhì)采取適當?shù)奶崛?、和措施來獲得

產(chǎn)品。（P23）

7.發(fā)酵罐

發(fā)酵罐示意圖

8.發(fā)酵工程以其生產(chǎn)條件、原料來源豐富且價格低廉、產(chǎn)物專一、廢棄物對環(huán)境的污染和

容易處理等特點，在食品工業(yè)、醫(yī)藥T業(yè)和農(nóng)牧業(yè)等許多領域得到了廣泛的應用，形成了規(guī)模龐大的發(fā)酵

工業(yè)。（P24）

9.在我們的日常生活中，利用發(fā)酵工程生產(chǎn)的食品以及與食品有關的產(chǎn)品比比皆是，主要包括以下三個方面。

第一，生產(chǎn)傳統(tǒng)的發(fā)酵產(chǎn)品。第二，生產(chǎn)各種各樣的食品。第三，生產(chǎn)。（P24）

10.例如，以大豆為主要原料，利用產(chǎn)生蛋白酶的霉菌（如黑曲霉），將原料中的蛋白質(zhì)水解成

和，然后經(jīng)淋洗、調(diào)制成的醬油產(chǎn)品；以谷物或水果等為原料，利用釀酒酵母發(fā)酵生產(chǎn)的各

種o（P24）

U.濘檬酸是一種廣泛應用的食品酸度調(diào)節(jié)劑，它可以通過_______的發(fā)酵制得；由谷氨酸棒狀桿菌發(fā)酵可

以得到谷氨酸，谷氨酸經(jīng)過一系列處理就能制成味精。（P25）

12.與傳統(tǒng)的化學農(nóng)藥不同，微生物農(nóng)藥是利用微生物或其來防治病蟲害的。（P27）

13.許多國家以淀粉或纖維素的水解液、制糖工業(yè)的廢液等為原料，通過發(fā)酵獲得了大量的微生物

即單細胞蛋白。（P27）

:題精練考點鞏固題組突破分值：50分建議用時：15分鐘

一、單選題

1.從自然環(huán)境中篩選優(yōu)良菌株的一般步驟如圖所示。研究小組為了改良和開發(fā)利用鹽堿地資源，研究耐鹽

堿微生物對鹽堿的降解作用，對某水樣中的菌種進行了耐鹽微生物的分離，下列有關敘述錯誤的（）

采集樣品―富集培養(yǎng)-純化分離一性能測定

A.所選取的水樣應為鹽堿濃度較高的咸水水樣

B.應用液體培養(yǎng)基對采集的樣品進行富集培養(yǎng)

C.純化菌種的培養(yǎng)基中應加入高濃度的食鹽

D.采用平板劃線法可以對菌株進行純化和計數(shù)

2.根瘤菌是?種與豆科植物互利共