ICS67.08

CCSB32

3401

安徽省合肥市地方標(biāo)準(zhǔn)

DB3401/T314—2023

西瓜抗白粉病鑒定技術(shù)規(guī)程

Technicalcodeofpracticeforevaluationofwatermelonresistance

topowderymildew

2023-12-15發(fā)布2023-12-15實施

合肥市市場監(jiān)督管理局發(fā)布

Q/LB.□XXXXX-XXXX

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起

草。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機(jī)構(gòu)不承擔(dān)識別專利的責(zé)任。

本文件由合肥市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局提出并歸口。

本文件起草單位：安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院園藝研究所、合肥豐樂種業(yè)股份有限公司。

本文件主要起草人：嚴(yán)從生、洪秀景、張其安、王浩波、方凌、江海坤、俞飛飛、王艷、王明霞、

馬紹鋆、賈利、葛治歡、范家萌、徐麗媛。

DB3401/T314—2023

西瓜抗白粉病鑒定技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了西瓜抗白粉病鑒定的原理、方法及抗病性評價方法。

本文件適用于西瓜抗白粉病室內(nèi)苗期抗病性鑒定。

2規(guī)范性引用文件

本文件沒有規(guī)范性引用文件。

3術(shù)語和定義

NY/T3626界定的術(shù)語和定義適用于本文件。

4材料與方法

材料

4.1.1病原菌

單囊殼白粉菌（Podosphaeraxanthii）生理小種2France。

4.1.2西瓜品種

鑒定品種：待鑒定西瓜品種。

對照品種：抗病對照品種為西瓜抗白粉病種質(zhì)PI482246，感病對照品種“早佳”和其他待鑒定品種。

4.1.3培養(yǎng)基

馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）、馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)液（PDB）、麥粒沙培養(yǎng)基。

4.1.4其他材料

培養(yǎng)皿（直徑大小為90mm）、250mL三角瓶、試管、鑷子、酒精燈、脫脂棉、育苗盤等實驗耗材；

恒溫培養(yǎng)箱、超凈工作臺、高壓滅菌、冰箱、可控溫溫室、微波爐、電磁爐、搖床、離心機(jī)等實驗儀器。

方法

4.2.1PDA培養(yǎng)基制備

稱取洗凈去皮的馬鈴薯200g，切成小塊，加水1000mL，煮沸0.5h，紗布過濾，加入瓊脂粉15g，

加熱徹底溶化后，再加入葡萄糖15g，攪拌均勻并溶解后，加水至總體積為1000mL，分裝于250mL三

角瓶；121℃、0.1MPa，滅菌20min，隨后倒入90mm培養(yǎng)皿備用。

4.2.2PDB培養(yǎng)液制備

1

DB3401/T314—2023

PDA培養(yǎng)基中不加入瓊脂粉，制備方法和流程與4.2.1相同。

4.2.3病原菌擴(kuò)繁

取保存在－80℃的西瓜白粉病病原菌，用PDA培養(yǎng)基28℃條件下復(fù)蘇2d，待菌落長出后再轉(zhuǎn)接到新

的PDA培養(yǎng)基上生長，培養(yǎng)7d～10d備用。

4.2.4噴霧法孢子懸浮液的制備

取生長旺盛的西瓜白粉病病原菌菌絲，接種于PDB液體培養(yǎng)基中，在28℃搖床里振蕩培養(yǎng)7d~10

d后，將振蕩培養(yǎng)后的菌液用雙層紗布過濾，去掉菌絲，濾液以3000r/min離心，去除上清液，用無

菌水重懸，用血球計數(shù)板統(tǒng)計病原菌孢子的數(shù)目，調(diào)至孢子懸浮液濃度為1×106個/ml，現(xiàn)用現(xiàn)配。

4.2.5育苗

用47％春雷霉素·王銅可濕性粉劑按1000倍加入55℃溫水中浸種6h，用干凈的濕紗布包好，置于

28℃催芽，待種子胚根長至0.5cm、85％的種子露白后播種。播種時，將種子輕輕放入培養(yǎng)缽或育苗盤，

覆蓋潮土lcm，溫度控制在25℃～30℃的可控溫室。育苗到3葉或4葉期時形成鑒定和對照材料備

用。

4.2.6接種

采用PDA培養(yǎng)基繁殖病原菌，再用PDB培養(yǎng)基擴(kuò)大培養(yǎng)，制備孢子懸浮液，需要鑒定的品種直接播種

于無菌基質(zhì)中，同時播種對照品種。選取3葉或4葉期生長狀態(tài)一致、健壯的待鑒定西瓜幼苗，用制備的

1×106個/ml孢子懸浮液均勻噴灑植株葉面。設(shè)無菌水噴霧葉面接種為對照。

5鑒定

選擇材料

選取生長健壯、長勢一致的待鑒定材料、抗病材料和感病材料各20株幼苗，重復(fù)3次，分別放置，

用于抗病性鑒定。

接種后幼苗培養(yǎng)

接種后的待測材料在溫室生長，溫度控制在25℃～30℃，正常管理。

調(diào)查

5.3.1調(diào)查時間

接種后第10d開始調(diào)查，每隔5d調(diào)查一次，直至感病對照品種發(fā)病率達(dá)80％止。

5.3.2調(diào)查方法

記錄待測材料品種的發(fā)病情況，健康株數(shù)及總株數(shù)等記入西瓜抗白粉病鑒定調(diào)查表（參見附錄A），

分別記錄，計算發(fā)病率。

5.3.3計算發(fā)病率

5.3.4數(shù)據(jù)處理

2

DB3401/T314—2023

根據(jù)調(diào)查數(shù)據(jù)，記錄待測材料白粉病抗病性鑒定調(diào)查表（參見附錄A)，鑒定材料記錄于表A.1，抗

病材料記錄于表B.1，感病材料記錄于表B.2。

計算發(fā)病率：按式（1）計算。

b?a

P=×100……………（1）

b

式中：

P=發(fā)病率，單位為百分號（%）；

b=總株數(shù)，單位為株；

a=健株數(shù)，單位為株。

平均值：（P1+P2+…+P20）÷20

評價

5.4.1結(jié)果有效性

感病對照材料80%≤P，且抗病對照材料P＜20%，該批次抗白粉病鑒定結(jié)果視為有效。

5.4.2鑒定判別

西瓜白粉病抗病性分級標(biāo)準(zhǔn)用發(fā)病率的高低評價。

高抗（HighResistance,HR）P<20%

中抗（MiddleResistance,MR）20%≤P<50%

輕抗（SlightResistance,SR）50%≤P<80%

感?。⊿usceptible,S）80%≤P

6鑒定記錄

鑒定結(jié)果報告單需要出具鑒定單位、地點及時間等，報告格式參見附錄A。

3

DB3401/T314—2023

附錄A

（資料性）

西瓜待測材料白粉病抗病性鑒定調(diào)查表

西瓜白粉病品種抗病性鑒定調(diào)查表：鑒定材料見表A.1；抗病材料見表A.2；感病材料見表A.3。

表A.1西瓜鑒定材料白粉病抗病性鑒定調(diào)查表

總株接種后第接種后第接種后第接種后第接種后第接種后第接種后第

品種數(shù)10d15d20d25d30d35d40d平均抗性

編號

名稱健康發(fā)病健康發(fā)病健康發(fā)病健康發(fā)病健康發(fā)病健康發(fā)病健康發(fā)病值類型

株

株數(shù)率%株數(shù)率%株數(shù)率%株數(shù)率%株數(shù)率%株數(shù)率%株數(shù)率%

接種日期

鑒定地點

鑒定單位單位（蓋章程）年月日

檢測人：復(fù)核人：

年月日年月日

4

DB3401/T314—2023

表A.2西瓜抗病材料白粉病抗病性鑒定調(diào)查表

總株接種后第接種后第接種后第接種后第接種后第接種后第接種后第

品種數(shù)10d15d20d25d30d35d40d平均抗性

編號

名稱健康發(fā)病健康發(fā)病健康發(fā)病健康發(fā)病健康發(fā)病健康發(fā)病健康發(fā)病值類型

株

株數(shù)率%株數(shù)率%株數(shù)率%株數(shù)率%株數(shù)率%株數(shù)率%株數(shù)率%

接種日期

鑒定地點

鑒定單位單位（蓋章程）年月日

檢測人：復(fù)核人：

年月日年月日

表A.3西瓜感病材料白粉病抗病性鑒定調(diào)查表

總株接種后第接種后第接種后第接種后第接種后第接種后第接種后第

品種數(shù)10d15d20d25d30d35d40d平均抗性

編號

名稱健康發(fā)病健康發(fā)病健康發(fā)病健康發(fā)病健康發(fā)病健康發(fā)病健康發(fā)病值類型

株

株數(shù)率%株數(shù)率%株數(shù)率%株數(shù)率%株數(shù)率%株數(shù)率%株數(shù)率%