ICS65.020.30

B41

DB4201

武漢市地方標(biāo)準(zhǔn)

DB4201/T593—2019

豬口腔液樣品采集技術(shù)規(guī)范

2019-12-15發(fā)布2020-01-15實(shí)施

武漢市市場(chǎng)監(jiān)督管理局發(fā)布

DB4201/T593—2019

前言

本規(guī)范按照GB/T1.1-2009《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫(xiě)》給出的規(guī)則起草。

本規(guī)范附錄A和附錄B為資料性附錄。

本規(guī)范由武漢市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心提出。

本規(guī)范由武漢市農(nóng)業(yè)農(nóng)村局歸口。

本規(guī)范起草單位：武漢市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心、黃陂區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心。

本規(guī)范主要起草人：張四化、尹偉力、王雪、阮征、趙靜、劉開(kāi)武、萬(wàn)云、岳龍、倪楊帆、吳薇、

白蓮英、宮時(shí)玉。

本規(guī)范首次發(fā)布。

I

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豬口腔液樣品采集技術(shù)規(guī)范

1范圍

本規(guī)范規(guī)定了豬口腔液樣品采集的采樣前準(zhǔn)備、樣品采集技術(shù)、采樣登記、樣品的標(biāo)記與包裝、樣

品的保存與運(yùn)輸。

本規(guī)范適用于武漢市動(dòng)物防疫機(jī)構(gòu)技術(shù)人員及養(yǎng)殖企業(yè)技術(shù)人員開(kāi)展豬口腔液采集工作。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文

件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

NY/T3075畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)消毒技術(shù)

DB4201/T540重要?jiǎng)游镆卟”O(jiān)測(cè)樣品采集技術(shù)規(guī)范

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。

3.1

豬口腔液

豬口腔中的唾液以及通過(guò)口腔黏膜和齒齦溝進(jìn)入口腔的血清滲出液組成的混合液體。適用于豬口蹄

疫、豬藍(lán)耳病、豬圓環(huán)病毒病等疫病的抗體或病原檢測(cè)。

3.2

采樣

按照規(guī)定的程序和要求從動(dòng)物及其產(chǎn)品或環(huán)境取得樣品的過(guò)程。

4采樣前準(zhǔn)備

4.1采集用品

4.1.1一般要求

采集繩、自封袋、剪刀、離心管（1.5mL以上規(guī)格）等。

4.1.2采集繩選擇

選擇100%純棉、直徑1.5cm～2cm的繩子，長(zhǎng)度根據(jù)豬欄高度剪取，建議長(zhǎng)度

1.0m～1.2m。

4.1.3滅菌

1

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棉繩、剪刀、離心管使用前應(yīng)作滅菌處理，棉繩裝入無(wú)紡布布袋或棉布袋，剪刀、離心管裝入鋁盒，

121℃高壓蒸汽滅菌30min，65℃烘箱中烘干，將棉繩轉(zhuǎn)入無(wú)菌自封袋保存。

4.1.4采集繩數(shù)量

4.1.4.1豬飼養(yǎng)數(shù)量在25頭以內(nèi)的欄舍，懸掛一根棉繩；

4.1.4.2豬飼養(yǎng)數(shù)量大于25頭的欄舍可適當(dāng)增加棉繩數(shù)量，繩子間的距離不低于40cm。

4.2防護(hù)用品

一次性口罩、手套、防護(hù)服、鞋套，消毒液、醫(yī)療廢棄物垃圾袋等。

4.3記錄用品

記號(hào)筆、黑色中性筆、標(biāo)簽紙、采樣登記表、樣品編號(hào)表等。

4.4保存運(yùn)輸用品

采樣運(yùn)輸箱、冰袋、防震材料等。

5樣品采集技術(shù)

5.1采樣注意事項(xiàng)

5.1.1個(gè)人安全防護(hù)和消毒隔離規(guī)程按照NY/T3075的要求執(zhí)行。

5.1.2每采集一份樣品，更換一套一次性采樣用品，避免交叉污染。

5.1.3采樣后的廢棄物等按照相關(guān)的法律法規(guī)進(jìn)行無(wú)害化處理。

5.2采集時(shí)間

宜在豬較為活躍的上午采集，在采食前或采食半小時(shí)后采集。

5.3采集繩預(yù)處理

若豬啃咬棉繩的意愿不強(qiáng)烈，可在棉繩上噴灑無(wú)菌糖溶液。

5.4采集步驟

5.4.1棉繩懸掛

將棉繩懸掛于豬欄內(nèi)相對(duì)干凈的區(qū)域，遠(yuǎn)離飼喂、飲水和排便區(qū)，不接觸墻壁和豬欄。

5.4.2棉繩固定

棉繩上端打結(jié)固定，下端懸掛高度與豬身肩關(guān)節(jié)齊平。

5.4.3棉繩放置時(shí)間

棉繩放置45min，任豬自由咀嚼。

5.4.4口腔液收集

2

DB4201/T593—2019

戴上一次性無(wú)菌手套，將棉繩下端的濕潤(rùn)部分放入一次性無(wú)菌自封袋中，用力擠壓袋內(nèi)棉繩，釋放

口腔液至袋底。剪掉自封袋底部一角，將口腔液轉(zhuǎn)移至離心管中備用，液體量≥1mL為有效采集量。

5.4.5廢棄物處理

取下棉繩與其他廢棄物，裝入醫(yī)療廢棄物垃圾袋，按相關(guān)的法律法規(guī)進(jìn)行無(wú)害化處理。

6采樣登記

6.1填寫(xiě)《豬口腔液采樣登記表》（見(jiàn)附錄A）和《樣品編號(hào)表》（見(jiàn)附錄B），一式二份。

6.2表格應(yīng)用黑色中性筆逐項(xiàng)填寫(xiě)，信息準(zhǔn)確，字跡工整、清晰。

6.3將兩張表格裝在透明自封袋中，一份隨樣品送實(shí)驗(yàn)室，另一份留存?zhèn)浒浮?/p>

7樣品的標(biāo)記與包裝

7.1根據(jù)口腔液液體量及檢測(cè)目的選擇不同規(guī)格的離心管，液體容量不可超過(guò)離心管容量的2/3。裝

入口腔液后蓋上管蓋，用封口膜固封。

7.2用記號(hào)筆在離心管管蓋和管壁上作好標(biāo)記，以阿拉伯?dāng)?shù)字標(biāo)識(shí)，并在《樣品編號(hào)表》填寫(xiě)樣品編

號(hào)對(duì)應(yīng)的欄舍編號(hào)。

7.3不同欄舍的口腔液樣品不要混樣，同一場(chǎng)點(diǎn)采集的樣品置于同一自封袋中，在袋外粘貼標(biāo)簽，標(biāo)

簽應(yīng)注明采樣場(chǎng)點(diǎn)、采樣日期、樣品名稱(chēng)和數(shù)量等。

7.4自封袋上貼封條，封條上應(yīng)有采樣人簽章，并注明貼封日期。

8樣品的保存與運(yùn)輸

8.1口腔液采集后，24h內(nèi)可送抵實(shí)驗(yàn)室的，置于采樣運(yùn)輸箱內(nèi)運(yùn)輸，放冰袋維持箱內(nèi)溫度處于

2℃～8℃，加填防震材料避免樣品晃動(dòng)；24h內(nèi)不能送檢的，-20℃以下溫度凍存，詳細(xì)參照

DB4201/T540中10.1和10.2規(guī)定執(zhí)行。

8.2采樣運(yùn)輸箱應(yīng)完整無(wú)損，密封不漏液，必要時(shí)經(jīng)清潔、滅菌后使用，詳細(xì)參照

DB4201/T540中9.1規(guī)定執(zhí)行。

8.3樣品運(yùn)送應(yīng)符合生物安全要求，詳細(xì)參照DB4201/T540中10.5規(guī)定執(zhí)行。

3

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AA

附錄A

（規(guī)范性附錄）

豬口腔液采樣登記表

表A.1給出了豬口腔液采樣登記表表樣。

表A.1豬口腔液采樣登記表

采樣單位：采樣時(shí)間：采樣人：聯(lián)系電話：

*場(chǎng)點(diǎn)名稱(chēng)*聯(lián)系人*聯(lián)系電話

*地址區(qū)街（鄉(xiāng)）村*地理坐標(biāo)經(jīng)度：緯度：

*場(chǎng)點(diǎn)類(lèi)型□種豬場(chǎng)□商品代養(yǎng)豬場(chǎng)□散養(yǎng)戶□生豬屠宰場(chǎng)采樣數(shù)量

基本生產(chǎn)：

*現(xiàn)存欄數(shù)年出欄數(shù)種公畜數(shù)母畜數(shù)

情況后備：

樣品序號(hào)樣品編號(hào)（起止）養(yǎng)殖階段群體數(shù)量備注

情況

疫苗是否免疫疫苗類(lèi)型最后一次免疫時(shí)間

*O型口蹄疫□是□否□滅活苗□合成肽苗

*型口蹄疫□是□否□滅活苗□合成肽苗

*豬瘟□是□否□脾淋苗□細(xì)胞苗

免疫情況

*偽狂犬□是□否□弱毒苗□滅活苗

□普通型滅活苗□普通型弱毒苗

*藍(lán)耳病□是□否

□高致病性滅活苗□高致病性弱毒苗

其他□是□否

樣品序號(hào)樣品編號(hào)（起止）養(yǎng)殖階段群體數(shù)量

情況

疫苗是否免疫疫苗類(lèi)型最后一次免疫時(shí)間

*O型口蹄疫□是□否□滅活苗□合成肽苗

*型口蹄疫□是□否□滅活苗□合成肽苗

*豬瘟□是□否□脾淋苗□細(xì)胞苗

免疫情況

*偽狂犬□是□否□弱毒苗□滅活苗

□普通型滅活苗□普通型弱毒苗

*藍(lán)耳病□是□否

□高致病性滅活苗□高致病性弱毒苗

其他□是□否

樣品序號(hào)樣品編號(hào)（起止）養(yǎng)殖階段群體數(shù)量

情況

疫苗是否免疫疫苗類(lèi)型最后一次免疫時(shí)間

*O型口蹄疫□是□否□滅活苗□合成肽苗

*型口蹄疫□是□否□滅活苗□合成肽苗

*豬瘟□是□否□脾淋苗□細(xì)胞苗

免疫情況

*偽狂犬□是□否□弱毒苗□滅活苗

□普通型滅活苗□普通型弱毒苗

*藍(lán)耳病□是□否

□高致病性滅活苗□高致病性弱毒苗

其他□是□否

注1：地理坐標(biāo)，要求填寫(xiě)6位數(shù)（必須填寫(xiě)）。

注2：樣品編號(hào)：以例如1～10的簡(jiǎn)單阿拉伯?dāng)?shù)字標(biāo)識(shí)在采樣管上。

注3：養(yǎng)殖階段：哺乳仔豬、保育豬、育肥豬、生產(chǎn)母豬、后備母豬、種公豬。

注4：該表格一式兩份。

填表人簽字：

4

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BB

附錄B

（資料性附錄）

樣品編號(hào)表

表B.1給出了樣品編號(hào)表表樣。

表B.1樣品編號(hào)表

場(chǎng)點(diǎn)名稱(chēng)：采樣人：聯(lián)系電話：采樣時(shí)間：

樣品編號(hào)欄舍編號(hào)樣品編號(hào)欄舍編號(hào)樣品編號(hào)欄舍編號(hào)