高級(jí)中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1廣西玉林市七校2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期4月期中聯(lián)合調(diào)研測(cè)試一、選擇題：本大題共16小題，共40分。第1-12小題，每小題2分；第13-16小題，每小題4分。在每小題所給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的。1.隨著生命科學(xué)的發(fā)展，生物工程技術(shù)已廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和環(huán)境保護(hù)等多個(gè)領(lǐng)域。下列敘述正確的是（）A.利用植物細(xì)胞工程技術(shù)對(duì)莖尖進(jìn)行培養(yǎng)，可獲得抗病毒的新品種B.通過基因工程導(dǎo)入腸乳糖酶基因的奶?？煞置诔鋈樘呛康偷娜橹瑿.利用發(fā)酵工程從微生物細(xì)胞中提取單細(xì)胞蛋白，生產(chǎn)微生物飼料D.胚胎移植時(shí)，需選取遺傳性狀優(yōu)良、生產(chǎn)能力強(qiáng)的母畜作為受體【答案】B〖祥解〗植物細(xì)胞工程的應(yīng)用：植物繁殖新途徑（微型繁殖、作物脫毒）、作物新品種培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等?！驹斘觥緼、植物細(xì)胞工程中的莖尖培養(yǎng)利用的是植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其原理是細(xì)胞的全能性。莖尖分生區(qū)細(xì)胞病毒極少，通過脫分化與再分化可獲得脫毒苗，但脫毒苗并未改變遺傳物質(zhì)，不能獲得抗病毒新品種?？共《酒贩N需通過基因工程或誘變育種獲得，A錯(cuò)誤；B、基因工程中，將腸乳糖酶基因?qū)肽膛；蚪M后，若該基因在乳腺細(xì)胞中成功表達(dá)，產(chǎn)生的乳糖酶可分解乳汁中的乳糖，從而降低乳糖含量，B正確；C、單細(xì)胞蛋白指微生物菌體本身，發(fā)酵工程中可直接收獲菌體作為飼料或食品，無需從細(xì)胞中提取蛋白質(zhì)，C錯(cuò)誤；D、胚胎移植時(shí)，受體母畜僅提供胚胎發(fā)育的生理環(huán)境，其遺傳性狀不影響后代。需選擇遺傳性狀優(yōu)良的是供體，而非受體，D錯(cuò)誤。故選B。2.國(guó)際上將每年的4月8日定為國(guó)際珍稀動(dòng)物保護(hù)日。黑足雪貂是世界十大瀕臨滅絕動(dòng)物之一，具有夜行性和穴居的生活習(xí)性?？茖W(xué)家使用30多年前冷凍的細(xì)胞，首次成功克隆出黑足雪貂。下列說法錯(cuò)誤的是（）A.利用動(dòng)物胚胎分割技術(shù)得到的個(gè)體基因型相同B.在黑足雪貂早期胚胎的形成過程中，卵裂期的胚胎總體積基本不變C.卵母細(xì)胞去核的實(shí)質(zhì)是去除卵母細(xì)胞中的紡錘體—染色體復(fù)合物D.利用冷凍的細(xì)胞克隆出黑足雪貂的過程利用了動(dòng)物細(xì)胞的全能性【答案】D〖祥解〗克隆動(dòng)物概念：將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物?！驹斘觥緼、胚胎分割技術(shù)是將早期胚胎切割成幾等份，經(jīng)移植獲得同卵多胎后代的方法，分割后的胚胎細(xì)胞具有相同的遺傳物質(zhì)，因此得到的個(gè)體基因型相同，A正確；B、卵裂期胚胎的細(xì)胞不斷分裂，但卵裂期的胚胎總體積基本不變，B正確；C、卵母細(xì)胞去核時(shí)，需去除處于減數(shù)第二次分裂中期（MⅡ期）的卵母細(xì)胞的紡錘體—染色體復(fù)合物，以去除遺傳物質(zhì)，C正確；D、克隆動(dòng)物通過核移植技術(shù)實(shí)現(xiàn)，該過程依賴的是動(dòng)物細(xì)胞核的全能性，而非整個(gè)細(xì)胞的全能性，D錯(cuò)誤。故選D。3.容縣豆豉、城隍酸蘿卜、燕京啤酒都屬于玉林的發(fā)酵食品。下列關(guān)于發(fā)酵食品的制作，敘述錯(cuò)誤的是（）A.豆豉的制作利用了毛霉等產(chǎn)生的蛋白酶B.制作酸蘿卜時(shí)，需要將瓶蓋打開，排出CO2C.釀造燕京啤酒，發(fā)酵時(shí)需將溫度控制在18—30℃進(jìn)行發(fā)酵D.利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)獲得的食品，菌種來源于天然存在的微生物或者前一次發(fā)酵保存下來的面團(tuán)、鹵汁等【答案】B〖祥解〗果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。【詳析】A、豆豉制作主要利用毛霉等微生物產(chǎn)生蛋白酶分解蛋白質(zhì)，A正確；B、制作酸蘿卜（泡菜）依賴乳酸菌的無氧發(fā)酵，需密封環(huán)境。CO?可通過泡菜壇的水封結(jié)構(gòu)排出，無需打開瓶蓋，否則會(huì)破壞無氧環(huán)境并引入雜菌，B錯(cuò)誤；C、釀造啤酒時(shí)，利用酵母菌發(fā)酵，酵母菌發(fā)酵的適宜溫度在18?30℃，C正確；D、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的菌種來源于自然環(huán)境或前次發(fā)酵殘留物（如面團(tuán)、鹵汁），D正確。故選B。4.關(guān)于細(xì)胞工程，下列說法錯(cuò)誤的是（）A胚胎工程中，可以取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定B.用水稻的雄配子或雌配子離體培養(yǎng)獲得植株的過程為單倍體育種，能明顯縮短育種年限C.動(dòng)物體細(xì)胞核移植的過程中，可以用物理法或化學(xué)法激活重構(gòu)胚D.在進(jìn)行體外受精時(shí)，若觀察到兩個(gè)極體可以說明已開始受精【答案】B〖祥解〗哺乳動(dòng)物核移植包括體細(xì)胞核移植和胚胎細(xì)胞核移植。由于動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難，而胚胎細(xì)胞的全能性高于體細(xì)胞，因此體細(xì)胞核移植的難度明顯高于后者。核移植過程中，可以使用顯微操作法、梯度離心、紫外線短時(shí)間照射等方法進(jìn)行去核?！驹斘觥緼、滋養(yǎng)層細(xì)胞位于胚胎外層，發(fā)育為胎膜和胎盤，取樣不會(huì)損傷胚胎，可用于性別鑒定，A正確；B、單倍體育種需通過配子離體培養(yǎng)獲得單倍體植株，再經(jīng)秋水仙素處理使其染色體加倍。選項(xiàng)僅提到離體培養(yǎng)，未包含染色體加倍步驟，無法直接縮短育種年限，B錯(cuò)誤；C、動(dòng)物體細(xì)胞核移植中，重構(gòu)胚需通過電脈沖、鈣離子載體等物理或化學(xué)方法激活以啟動(dòng)分裂，C正確；D、體外受精時(shí)，精子入卵觸發(fā)卵子完成減數(shù)第二次分裂，排出第二極體。觀察到兩個(gè)極體（第一極體和第二極體）表明受精已開始，D正確。故選B。5.精子載體法是以精子作為外源基因載體，攜帶外源基因進(jìn)入卵細(xì)胞，如圖表示用該方法制備轉(zhuǎn)基因鼠的基本流程。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.含有目的基因的精子與卵細(xì)胞受精時(shí)需要進(jìn)行細(xì)胞識(shí)別B.用上述方法獲得的轉(zhuǎn)基因鼠的性狀與導(dǎo)入外源基因的精子保持一致C.進(jìn)行②過程前，精子需要在含有肝素或Ca2+載體的溶液中進(jìn)行獲能處理D.在進(jìn)行過程④之前要對(duì)代孕母鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理【答案】B〖祥解〗細(xì)胞核移植技術(shù)是將一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入另一個(gè)去核的細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎或個(gè)體的技術(shù)?！驹斘觥緼、精子和卵細(xì)胞受精時(shí)需要通過接觸的方式進(jìn)行細(xì)胞識(shí)別，A正確；B、圖中，轉(zhuǎn)基因鼠的和遺傳物質(zhì)是導(dǎo)入外源基因的精子和卵細(xì)胞共同提供，質(zhì)基因主要由卵細(xì)胞提供，故其性狀不一定與導(dǎo)入外源基因的精子保持一致，B錯(cuò)誤；C、②過程是體外受精，精子在體外受精前需要進(jìn)行獲能處理，利用含有肝素或Ca2+載體的溶液，C正確；D、代孕母鼠要接受移植過去的早期胚胎，必須在生理上處于與供體相同的生理狀態(tài)，所以要對(duì)代孕母鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理，D正確。故選B。6.某同學(xué)在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行了酵母菌的純培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，下列有關(guān)該實(shí)驗(yàn)的敘述正確的是（）A.所用的培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對(duì)酵母菌的生長(zhǎng)越有利B.純培養(yǎng)物是由單一酵母菌繁殖所獲得的酵母菌群體分泌的代謝物C.若以平板劃線法純化酵母菌菌種，接種環(huán)的灼燒次數(shù)比劃線次數(shù)多一次D.擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)使用固體培養(yǎng)基，以便于挑取菌落獲得純化菌株【答案】C〖祥解〗微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?！驹斘觥緼、培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過高，影響細(xì)胞滲透壓，使微生物會(huì)通過滲透作用失水，對(duì)微生物的生長(zhǎng)不利，A錯(cuò)誤；B、純培養(yǎng)物是由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體，B錯(cuò)誤；C、由于每次劃線前后接種環(huán)都要灼燒滅菌，故用平板劃線法純化菌種時(shí)，接種環(huán)的灼燒次數(shù)比劃線次數(shù)多一次，C正確；D、擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)使用液體培養(yǎng)基，D錯(cuò)誤。故選C。7.冰球子是一種多年生草本植物，具有清熱解毒、消腫止痛的作用。植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于冰球子的快速繁殖。下列說法正確的是（）A.利用冰球子細(xì)胞進(jìn)行定向誘變可獲得有用的突變體B.冰球子外植體脫分化時(shí)需要光照，進(jìn)而形成不定形的薄壁組織團(tuán)塊C.生芽培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的比值比生根培養(yǎng)基中的大D.冰球子中含有的次生代謝物通常是基本生命活動(dòng)所必需的【答案】C〖祥解〗植物組織培養(yǎng)過程：離體的植物組織，器官或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育成植株。植物組織培養(yǎng)技術(shù)有廣泛的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（快繁技術(shù)、作物脫毒）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斘觥緼、誘變育種的原理是基因突變，具有不定向性，無法通過定向誘變直接獲得特定突變體，A錯(cuò)誤；B、脫分化過程需要在避光條件下進(jìn)行，光照會(huì)抑制脫分化，而再分化階段（如生芽、生根）才需要光照調(diào)節(jié)，B錯(cuò)誤；C、生芽培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的比值較高，促進(jìn)芽的分化；生根培養(yǎng)基中該比值較低，促進(jìn)根的分化，C正確；D、次生代謝物（如生物堿、萜類等）并非植物基本生命活動(dòng)所必需，它們主要在特定階段或組織中合成，D錯(cuò)誤。故選C。8.下列關(guān)于生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（）A.使用洋蔥提取DNA時(shí)，將切碎的洋蔥中充分研磨后過濾并棄去濾液B.“DNA粗提取”的實(shí)驗(yàn)中，將提取到的絲狀物與二苯胺溶液充分混勻后沸水浴，溶液即可變?yōu)樗{(lán)色C.PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定，電泳圖像中出現(xiàn)多條DNA條帶的可能原因是擴(kuò)增時(shí)設(shè)計(jì)的引物過短D.PCR復(fù)性溫度應(yīng)高于模板DNA的解鏈（變性）溫度，低于延伸溫度【答案】C〖祥解〗DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)溶于酒精；鑒定DNA時(shí)，需要先將DNA溶解在NaCl溶液中，再與二苯胺溶液混合，并在水浴加熱條件下呈現(xiàn)藍(lán)色。【詳析】A、在提取DNA時(shí)，洋蔥經(jīng)研磨后，DNA溶解在濾液中，應(yīng)保留濾液而非棄去，A錯(cuò)誤；B、DNA與二苯胺需在沸水浴條件下顯藍(lán)色，但粗提取的絲狀物需先溶解于2mol/L的NaCl溶液后再檢測(cè)，直接混合可能無法顯色，B錯(cuò)誤；C、PCR產(chǎn)物電泳出現(xiàn)多條帶可能是引物過短導(dǎo)致非特異性結(jié)合，引發(fā)非目標(biāo)序列擴(kuò)增，C正確；D、PCR復(fù)性溫度（50℃左右）應(yīng)低于變性溫度（90℃以上），且低于延伸溫度（72℃左右），D錯(cuò)誤。故選C。9.下列關(guān)于發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)及應(yīng)用的敘述中，正確的是（）A.發(fā)酵結(jié)束后，可通過過濾、沉淀等方法分離出微生物細(xì)胞本身B.在主發(fā)酵階段酵母菌會(huì)大量繁殖，主發(fā)酵結(jié)束后可得到澄清、成熟的啤酒C.產(chǎn)物濃度和微生物的數(shù)量的檢測(cè)必須在發(fā)酵結(jié)束后進(jìn)行D.微生物農(nóng)藥是利用微生物或其代謝物來防治病蟲害的，是化學(xué)防治的重要手段【答案】A〖祥解〗發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種技術(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種選育、培養(yǎng)基的配制、滅菌、擴(kuò)大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純等方面?！驹斘觥緼、如果發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細(xì)胞本身，可在發(fā)酵結(jié)束之后，采用過濾、沉淀等方法將菌體分離和干燥,即可得到產(chǎn)品，A正確；B、酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都在主發(fā)酵階段完成，主發(fā)酵結(jié)束后發(fā)酵液需要在低溫、密閉環(huán)境下進(jìn)行后發(fā)酵方可得到澄清、成熟的啤酒，B錯(cuò)誤；C、產(chǎn)物濃度和微生物的數(shù)量的檢測(cè)要在發(fā)酵過程中隨時(shí)進(jìn)行，C錯(cuò)誤；D、微生物農(nóng)藥是利用微生物或其代謝物來防治病蟲害的，微生物農(nóng)藥作為生物防治的重要手段，D錯(cuò)誤。故選A。10.L-天冬酰胺酶可分解天冬酰胺釋放出氨、氨與奈斯勒試劑反應(yīng)呈棕色。為篩選獲得L-天冬酰胺酶高產(chǎn)菌株，某研究小組用含有牛肉膏、蛋白胨、水、NaC1、奈斯勒試劑等成分的培養(yǎng)基進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果如圖所示。下列有關(guān)敘述中，錯(cuò)誤的是（）A.應(yīng)該在富含天冬酰胺的環(huán)境中取樣B.應(yīng)選擇菌落B作為高產(chǎn)L-天冬酰胺酶菌株進(jìn)行大量培養(yǎng)C.該培養(yǎng)基中含有瓊脂，充當(dāng)?shù)吹挠信Ｈ飧嗪偷鞍纂薉.獲得L-天冬酰胺酶高產(chǎn)菌株純培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染【答案】B〖祥解〗微生物常見的接種的方法：①平板劃線法，將已經(jīng)滅菌的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落；②稀釋涂布平板法，將待分離的菌液經(jīng)過適合的稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?！驹斘觥緼、要篩選能產(chǎn)生L-天冬酰胺酶的菌株，因?yàn)樵撁缚煞纸馓於０?，所以在富含天冬酰胺的環(huán)境中更容易找到能產(chǎn)生該酶的菌株，因此應(yīng)該在富含天冬酰胺的環(huán)境中取樣，A正確；B、菌落B和菌落C周圍棕色圈的直徑相同，但C的菌落直徑更小，因此菌落C的單個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生的L?天冬酰胺酶更多，應(yīng)選擇菌落C作為高產(chǎn)L?天冬酰胺酶菌株進(jìn)行大量培養(yǎng)，B錯(cuò)誤；C、從接種結(jié)果來看，菌落分布較為均勻，該培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，含有凝固劑（瓊脂），充當(dāng)?shù)吹某煞质桥Ｈ飧嗪偷鞍纂?，C正確；D、在微生物培養(yǎng)過程中，獲得純培養(yǎng)物的關(guān)鍵就是防止雜菌污染，這是微生物培養(yǎng)的基本要求，所以獲得L-天冬酰胺酶高產(chǎn)菌株純培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，D正確。故選B。11.利用轉(zhuǎn)基因山羊乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)丁酰膽堿酯酶，可治療有機(jī)磷中毒。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.應(yīng)該用山羊乳腺細(xì)胞中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子構(gòu)建基因表達(dá)載體B.乳腺生物反應(yīng)器的優(yōu)點(diǎn)在于可以生產(chǎn)大量的丁酰膽堿酯酶C.該過程中丁酰膽堿酯酶基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞的性染色體組成只能是XXD.常通過顯微注射法將丁酰膽堿酯酶基因?qū)肷窖虻娜橄偌?xì)胞來獲得轉(zhuǎn)基因山羊【答案】D〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斘觥緼、基因表達(dá)載體需使用乳腺細(xì)胞特異表達(dá)的啟動(dòng)子（如乳蛋白基因啟動(dòng)子），以確保目的基因僅在乳腺細(xì)胞中表達(dá)，A正確；B、乳腺生物反應(yīng)器通過乳汁分泌產(chǎn)物，產(chǎn)量高且易收集，B正確；C、由于只有雌性動(dòng)物才分泌乳汁，所以受體細(xì)胞的性染色體組成只能是XX，C正確；D、顯微注射法用于將基因?qū)胧芫?，直接?dǎo)入乳腺細(xì)胞無法發(fā)育為轉(zhuǎn)基因個(gè)體，D錯(cuò)誤；故選D。12.天然β-淀粉酶耐熱性差，不利于工業(yè)化應(yīng)用。研究人員將某種天然β-淀粉酶的第476位天冬氨酸替換為天冬酰胺后，其耐熱性明顯提升。下列敘述正確的是（）A.該工程屬于蛋白質(zhì)工程，其生產(chǎn)的蛋白質(zhì)是自然界已有的蛋白質(zhì)B.該改造過程是在分子層次上進(jìn)行的，要對(duì)天然β-淀粉酶的氨基酸序列進(jìn)行直接改造C.該工程根據(jù)中心法則推斷出的新的天然β-淀粉酶的脫氧核苷酸序列是唯一的D.該改造首先要預(yù)期蛋白質(zhì)功能，再設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，這是因?yàn)榻Y(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)【答案】D〖祥解〗蛋白質(zhì)工程：指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求。【詳析】A．蛋白質(zhì)工程通過改造基因來合成自然界不存在的蛋白質(zhì)，而題干中改造后的β-淀粉酶是人為設(shè)計(jì)的，并非自然界已有，A錯(cuò)誤；B．蛋白質(zhì)工程需通過修改基因序列間接改變蛋白質(zhì)的氨基酸序列，而非直接對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行分子層面的改造，B錯(cuò)誤；C．由于密碼子的簡(jiǎn)并性（不同密碼子可能編碼同一氨基酸），推斷出的脫氧核苷酸序列可能有多種，并非唯一，C錯(cuò)誤；D．蛋白質(zhì)工程遵循“預(yù)期功能→設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)→改造基因”的流程，因結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)，需先明確目標(biāo)功能再設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)，D正確；故選D。13.研究人員用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育轉(zhuǎn)基因番茄用于生產(chǎn)可口服的乙肝病毒疫苗（HBsAg蛋白）的過程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.相比于農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，花粉管通道法不需要進(jìn)行植物組織培養(yǎng)B.重組質(zhì)粒的構(gòu)建過程需要限制性內(nèi)切核酸酶、DNA連接酶，它可在選擇培養(yǎng)基上大量復(fù)制并表達(dá)C.重組質(zhì)粒還應(yīng)具有啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)等組成部分，啟動(dòng)子是DNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位D.能在含卡那霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的農(nóng)桿菌一定含有HBsAg基因【答案】A〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定?！驹斘觥緼、花粉管通道法可以直接實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植物的自然生成，而農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，還需要對(duì)成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng)獲得轉(zhuǎn)基因植物，而花粉管通道法避免了植物組織培養(yǎng)這一操作，A正確；B、重組質(zhì)粒的構(gòu)建過程需要限制性內(nèi)切核酸酶（切割目的基因和運(yùn)載體）、DNA連接酶（連接切割后的目的基因和運(yùn)載體），但該重組質(zhì)粒需要在受體細(xì)胞中才能大量復(fù)制并表達(dá)，B錯(cuò)誤；C、重組質(zhì)粒包括目的基因、標(biāo)記基因，此外還應(yīng)具有啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)等組成部分，啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，C錯(cuò)誤；D、用限制酶HindIII和XhoI切割后破壞了抗四環(huán)素基因，但不會(huì)破壞抗卡那霉素基因，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞，能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生存下來，但是若導(dǎo)入了空質(zhì)粒也能在含卡那霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，故能在含卡那霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的農(nóng)桿菌不一定含有HBsAg基因，D錯(cuò)誤。故選A。14.野生型菌株經(jīng)過突變后可能失去合成某種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的能力，稱為營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株，只有在基本培養(yǎng)基中補(bǔ)充所缺乏的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)后才能生長(zhǎng)。野生型菌株在限量培養(yǎng)基上獲取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的能力明顯強(qiáng)于營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株，如圖甲所示。利用生長(zhǎng)圖譜法可初步確定檢出的營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌的類型，即在下圖基本培養(yǎng)基乙的A—E這5個(gè)區(qū)域中分別添加不同的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，然后將營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌接種在乙上。下列說法正確的是（）A.若培養(yǎng)一段時(shí)間后在乙的BC交界處長(zhǎng)出了菌落，則說明該菌株是氨基酸和維生素營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌B.圖甲實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)將一個(gè)未接種的平板放在窗臺(tái)上培養(yǎng)，作為空白對(duì)照C.圖甲中，菌落A即為檢出的營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌菌株D.實(shí)驗(yàn)中的基本培養(yǎng)基需要用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌【答案】A〖祥解〗野生型菌株可以在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，而營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株不能在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，必須補(bǔ)充所缺乏的營(yíng)養(yǎng)因子才能生長(zhǎng)?！驹斘觥緼、若培養(yǎng)一段時(shí)間后在乙的B（加入的氨基酸）C（加入的維生素）交界處長(zhǎng)出了菌落，則說明該菌株是氨基酸和維生素營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌，A正確；B、圖甲實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)將一個(gè)未接種的平板同時(shí)放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，以判斷培養(yǎng)基是否被污染，B錯(cuò)誤；C、野生型菌株在限量培養(yǎng)基上獲取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的能力明顯強(qiáng)于營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株，圖甲中A菌落直徑大于菌落B，說明A菌落是野生型菌株，所以B為檢出的營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌菌株，C錯(cuò)誤；D、用高壓蒸汽滅菌法對(duì)基本培養(yǎng)基滅菌，D錯(cuò)誤。故選A。15.體外動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)制造出的細(xì)胞培養(yǎng)肉是一種人造肉，具有營(yíng)養(yǎng)可控、結(jié)構(gòu)仿真、口感真實(shí)的特點(diǎn)。其主要生產(chǎn)流程如下圖，圖中的微載體是一種固體的細(xì)胞生長(zhǎng)基質(zhì)，其表面能使細(xì)胞貼附。下列敘述正確的是（）A.①過程可用機(jī)械的方法或用胰蛋白酶、胃蛋白酶等方法處理以獲得細(xì)胞懸液B.③過程加入微載體為細(xì)胞提供更大附著面積，使細(xì)胞間不出現(xiàn)接觸抑制，產(chǎn)量增加C.在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞可以直接用離心法收集D.肌肉干細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞，能夠分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種細(xì)胞【答案】C〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動(dòng)物組織塊剪碎組織用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。【詳析】A、①過程為制備細(xì)胞懸液的過程，可用機(jī)械的方法或用胰蛋白酶處理的方法，但胃蛋白酶最適pH顯酸性，不適合用胃蛋白酶，A錯(cuò)誤；B、③過程中加入微載體為細(xì)胞提供了更大的附著面積，但細(xì)胞間會(huì)出現(xiàn)接觸抑制，B錯(cuò)誤；C、在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞可以直接用離心法收集，C正確；D、肌肉干細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞，能夠分化成特定的細(xì)胞和組織，不具有全能性，D錯(cuò)誤。故選C。16.非洲豬瘟是由ASFV（非洲豬瘟病毒）感染引起的一種急性、高度致死的傳染病。為實(shí)現(xiàn)ASFV的快捷高效檢測(cè)，我國(guó)科研人員在ASFV的K基因（大小為790bp）中間插入熒光素酶（Gluc）基因和綠色熒光蛋白（EGFP）基因，構(gòu)建了ASFV-Gluc-EGFP重組病毒體系（如圖1），通過PCR擴(kuò)增和電泳鑒定重組病毒是否構(gòu)建成功（結(jié)果如圖2）。下列說法正確的是（）A.在PCR體系中加入圖1中的引物1和引物2能特異性擴(kuò)增重組病毒B.圖2中出現(xiàn)790bp、1758bp的條帶說明樣液中重組病毒構(gòu)建成功C.用PCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí)需要已知目的基因的全部序列D.Gluc基因和EGFP基因可用于重組病毒的篩選，都起到標(biāo)記基因的作用【答案】D〖祥解〗基因工程表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等?！驹斘觥緼、引物1和引物2是根據(jù)K基因已知的部分序列設(shè)計(jì)的，在PCR體系中加入圖1中的引物1和引物2不一定能特異性擴(kuò)增重組病毒，可能重組病毒基因未成功插入，這只擴(kuò)增出K基因的一部分，A錯(cuò)誤；B、已知K基因大小為790bp，若重組病毒構(gòu)建成功，PCR擴(kuò)增產(chǎn)物應(yīng)該包含完整的K基因以及插入的Gluc和EGFP基因，其大小應(yīng)該大于790bp。圖2中出現(xiàn)790bp的條帶，可能是未發(fā)生重組的正常K基因擴(kuò)增產(chǎn)物；出現(xiàn)1758bp的條帶，由于不知道插入的Gluc和EGFP基因的總長(zhǎng)度是否剛好能使擴(kuò)增產(chǎn)物達(dá)到1758bp，且僅根據(jù)這兩個(gè)條帶不能確鑿地說明樣液中重組病毒構(gòu)建成功，有可能存在其他非預(yù)期的擴(kuò)增情況，B錯(cuò)誤；C、用PCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí)不需要已知目的基因的全部序列，需要已知目的基因兩端的序列，C錯(cuò)誤；D、由題意知，重組病毒包含Gluc基因和EGFP基因和K基因，故Gluc基因和EGFP基因可用于重組病毒的篩選，都起到標(biāo)記基因的作用，D正確。故選D。二、非選擇題：本大題共5小題，共60分。17.克隆技術(shù)又稱生物放大技術(shù)，為探究克隆技術(shù)能否用于人帕金森病的治療，科研人員利用“人帕金森病模型鼠”進(jìn)行了如圖所示實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答下列問題：（1）去核前應(yīng)保證采集的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)至________期才能用于動(dòng)物體細(xì)胞核移植。在動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)中，通常選擇卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，原因有________等。（答2點(diǎn)）（2）體外培養(yǎng)早期胚胎時(shí)，培養(yǎng)液中除應(yīng)含有細(xì)胞所需要的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，通常需要加入________等一些天然成分。（3）若想在過程①前獲得更多的卵母細(xì)胞，一般注射________（激素名稱）使雌鼠超數(shù)排卵，若用胚胎分割技術(shù)分割囊胚階段的胚胎時(shí)，應(yīng)注意________，否則會(huì)影響胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步的發(fā)育。（4）過程⑤中是否需要對(duì)人帕金森病模型鼠注射相應(yīng)的免疫抑制劑以避免發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，回答并說明理由：________，________?！敬鸢浮浚?）①.MⅡ②.卵母細(xì)胞的體積大、易操作、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量豐富，同時(shí)還含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)（2）血清（3）①.促性腺激素②.將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割（4）①.不需要②.該過程中移植的神經(jīng)元的遺傳物質(zhì)主要來自該小鼠，不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)〖祥解〗題圖分析：圖中①為核移植過程，②是早期胚胎培養(yǎng)過程，③是獲取胚胎干細(xì)胞的過程，④是誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化形成神經(jīng)元的過程，⑤是器官移植過程。【解析】（1）從卵巢中采集的卵母細(xì)胞需在體外培養(yǎng)至MⅡ期才能用于體細(xì)胞核移植；在動(dòng)物體細(xì)胞核移植過程中，通常選擇卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，原因有卵母細(xì)胞的體積大、易操作、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量豐富，同時(shí)還含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)等。（2）體外培養(yǎng)重構(gòu)胚時(shí)，培養(yǎng)液中除應(yīng)含有細(xì)胞所需要的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，通常需要加入動(dòng)物血清等一些天然成分。（3）胚胎工程中一般采用促性腺激素處理雌鼠使其超數(shù)排卵，以便獲得更多的卵子，在分割囊胚階段的胚胎時(shí)，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會(huì)影響胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。（4）利用圖示方法對(duì)人帕金森病模型鼠進(jìn)行治療時(shí)不需要給小鼠注射相應(yīng)的免疫抑制劑，因?yàn)樵撨^程中移植的神經(jīng)元的遺傳物質(zhì)主要來自該小鼠，不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。18.野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。利用相關(guān)工程技術(shù)可以獲得抗黑腐病雜種黑芥—花椰菜植株，用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力，再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，流程如下圖1.通過蛋白質(zhì)電泳技術(shù)分析了親本及待測(cè)植株中某些特異性蛋白，結(jié)果圖2所示。（1）過程①的所用的酶為________，經(jīng)過②操作后，需篩選出融合的雜種細(xì)胞，顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有黑芥葉肉細(xì)胞的________（填寫細(xì)胞器名稱）存在可初步篩選出雜種細(xì)胞。（2）原生質(zhì)體融合的原理是________，原生質(zhì)體經(jīng)過細(xì)胞壁再生，進(jìn)而脫分化形成________。（3）圖2中屬于雜種植株的是________，將雜種植株栽培在含有________的環(huán)境中，可篩選出具有高抗性的雜種植株。（4）結(jié)合其他工程技術(shù)，提出一種不使用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)就能生產(chǎn)抗黑腐病花椰菜植株實(shí)驗(yàn)思路。__________?！敬鸢浮浚?）①.纖維素酶和果膠酶②.綠色的葉綠體（2）①.細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性②.愈傷組織（3）①.4和5②.含有黑腐病菌（4）通過基因工程技術(shù)將黑腐病的抗性基因?qū)牖ㄒ酥仓甑募?xì)胞中，并通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得抗黑腐病花椰菜植株?！枷榻狻接蓤D可知，①用纖維素酶、果膠酶進(jìn)行去壁處理，②表示用物理或化學(xué)方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合?！窘馕觥浚?）過程①應(yīng)用了纖維素酶果膠酶去除植物細(xì)胞壁，獲得植物原生質(zhì)體。經(jīng)過②原生質(zhì)體融合后，需要篩選出融合的雜種細(xì)胞，可以通過觀察雜種細(xì)胞是否含有黑芥葉肉細(xì)胞的綠色的葉綠體來進(jìn)行判斷。（2）原生質(zhì)體融合的原理是細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性，原生質(zhì)體再生細(xì)胞壁后，經(jīng)過脫分化形成愈傷組織。（3）根據(jù)圖2中的電泳圖可知，4號(hào)和5號(hào)個(gè)體含有兩種花椰菜和黑芥兩種植株的蛋白質(zhì)是雜種細(xì)胞，為篩選高抗性雜種植株，需將雜種植株栽培在含有黑腐病菌的環(huán)境中，只有具有抗性的植株才能夠存活，從而將具有高抗性的雜種植株篩選出來。（4）據(jù)題干信息可知，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，花椰菜無抗黑腐病的抗性基因，易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，若要使花椰菜植株也具有抗黑腐病的能力，可以通過基因工程技術(shù)將黑腐病的抗性基因?qū)牖ㄒ酥仓甑募?xì)胞中，并通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得抗黑腐病花椰菜植株。19.吃腐爛的水果可能會(huì)出現(xiàn)頭暈、惡心、嘔吐或者更嚴(yán)重的癥狀，這和微生物產(chǎn)生的毒素有關(guān)。某學(xué)習(xí)小組為了尋找腐爛的蘋果中可安全食用的區(qū)域，開展以下實(shí)驗(yàn)：用蘋果的腐爛部位、距離腐爛部位1cm和2cm的組織做實(shí)驗(yàn)材料，檢測(cè)不同區(qū)域中微生物的種類和數(shù)量。已知蘋果的pH在3.5～4之間，下面是操作流程（青霉菌能產(chǎn)生青霉素，青霉素是一種抗生素）：（1）根據(jù)題意，本實(shí)驗(yàn)選用的接種方法是_______。該方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)少，這是因?yàn)開______。（2）步驟③中，根據(jù)特定微生物特殊的營(yíng)養(yǎng)要求，具有只允許特定微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)功能的培養(yǎng)基，屬于________培養(yǎng)基。統(tǒng)計(jì)腐爛部位的菌落數(shù)目發(fā)現(xiàn)，青霉菌、曲霉菌等真菌的數(shù)量較多，細(xì)菌數(shù)目很少。原因可能是______。（3）該實(shí)驗(yàn)估測(cè)細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL，若實(shí)驗(yàn)中每個(gè)平板上涂布接種0.1mL稀釋后的菌液，3個(gè)平板上的平均菌落數(shù)為200個(gè)，則該稀釋倍數(shù)為______倍。（4）蘋果腐爛部位的微生物能產(chǎn)生毒素，毒素運(yùn)輸?shù)教O果其他部位，導(dǎo)致蘋果其他部位存在一定量的毒素。分析數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)：①距離腐爛部位越遠(yuǎn)，微生物的數(shù)量越少；②距離腐爛部位2cm的樣品中微生物數(shù)量極少。若要證明距離腐爛部位2cm的部分是可安全食用部位的結(jié)論，還需要補(bǔ)充的實(shí)驗(yàn)操作為：________?！敬鸢浮浚?）①.稀釋涂布平板法②.當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落（2）①.選擇②.①細(xì)菌適宜在中性或弱堿性的環(huán)境中生長(zhǎng)，蘋果呈酸性，不適合細(xì)菌生長(zhǎng)；②青霉菌產(chǎn)生的青霉素等抗生素抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)（3）104（4）檢測(cè)上述區(qū)域中微生物產(chǎn)生的毒素含量（或檢測(cè)上述區(qū)域是否含毒素）〖祥解〗在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，稱為選擇培養(yǎng)基。【解析】（1）常見的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法，本實(shí)驗(yàn)需要檢測(cè)不同區(qū)域中微生物的種類和數(shù)量，故選用的是稀釋涂布平板法。當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，所以稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)少。（2）步驟③中，根據(jù)特定微生物特殊的營(yíng)養(yǎng)要求，具有只允許特定微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)功能的培養(yǎng)基，屬于選擇培養(yǎng)基。細(xì)菌適宜在中性或弱堿性的環(huán)境中生長(zhǎng)，蘋果呈酸性，不適合細(xì)菌生長(zhǎng)，且由于青霉菌產(chǎn)生的青霉素等抗生素抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)，故青霉菌、曲霉菌等真菌的數(shù)量較多，細(xì)菌數(shù)目很少。（3）利用稀釋涂布平板法對(duì)細(xì)菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，要保證每個(gè)平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)不超過200，假設(shè)稀釋倍數(shù)為a，在每個(gè)平板上涂布0.1mL稀釋后的菌液，則有200÷0.1×a=2×107，則稀釋倍數(shù)a=104。（4）雖然距離腐爛部位越遠(yuǎn)，微生物的數(shù)量越少，且距離腐爛部位2cm的樣品中微生物數(shù)量極少，但為了安全起見，還需要檢測(cè)上述區(qū)域中微生物產(chǎn)生的毒素含量。20.CD47是一種跨膜糖蛋白，它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6～5倍，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱。科學(xué)家推測(cè)抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，為此他們按照如下流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答下列問題：（1）上述單克隆抗體制備過程中涉及的細(xì)胞工程技術(shù)有：__________。（2）步驟①中與誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合不同的誘導(dǎo)方法是_________（3）經(jīng)過步驟③篩選后獲得細(xì)胞丁的名稱為_________，該步驟所依據(jù)的基本原理是_________。（4）據(jù)題意，該實(shí)驗(yàn)的對(duì)照組應(yīng)設(shè)置為________，該實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組的巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)高于對(duì)照組，理由是_________?！敬鸢浮浚?）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合（2）滅活病毒誘導(dǎo)法（3）①.能分泌抗CD47抗體的雜交瘤細(xì)胞②.抗原-抗體特異性結(jié)合（4）①.不加單克隆抗體（的巨噬細(xì)胞+腫瘤細(xì)胞共培養(yǎng)體系）②.具有抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，巨噬細(xì)胞的吞噬作用加強(qiáng)〖祥解〗單克隆抗體的制備的流程：（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾中形成的B淋巴細(xì)胞融合；2用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)。（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取?！窘馕觥浚?）單克隆抗體制備過程中需要培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞，需要將骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合，因此涉及的細(xì)胞工程技術(shù)有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞融合。（2）誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合的方法有物理法和化學(xué)法，步驟①中動(dòng)物細(xì)胞融合的方法除物理法和化學(xué)法外，特有的方法是滅活的病毒誘導(dǎo)法。（3）經(jīng)過步驟③抗體檢測(cè)和克隆化培養(yǎng)篩選后獲得細(xì)胞丁為能分泌抗CD47抗體的雜交瘤細(xì)胞，該步驟抗體檢測(cè)所依據(jù)的基本原理是抗原-抗體特異性結(jié)合。（4）依據(jù)題干信息，實(shí)驗(yàn)的原理是抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，所以自變量應(yīng)為是否含有抗CD47的單克隆抗體，因變量為巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)。所以，當(dāng)實(shí)驗(yàn)組為（具有抗CD47的單克隆抗體的）巨噬細(xì)胞+腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)系，對(duì)照組為不加單克隆抗體的巨噬細(xì)胞+腫瘤細(xì)胞共培養(yǎng)體系，由于具有抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，所以實(shí)驗(yàn)組的巨噬細(xì)胞的吞噬作用加強(qiáng)，實(shí)驗(yàn)組的吞噬指數(shù)高于對(duì)照組。21.生長(zhǎng)激素制劑是治療垂體性侏儒癥的特效藥。圖1是通過基因工程將人的生長(zhǎng)激素基因A導(dǎo)入大腸桿菌中生產(chǎn)生長(zhǎng)激素的過程，圖2是基因工程中所用到的質(zhì)粒，圖3是通過PCR獲取和擴(kuò)增目的基因。請(qǐng)回答下列問題：（1）使用PCR技術(shù)獲取和擴(kuò)增A基因，PCR技術(shù)要在緩沖體系中添加模板、4種脫氧核苷酸、兩種引物、__________、__________等。擴(kuò)增目的基因時(shí)，需要從圖3中選擇的一對(duì)引物是__________。（2）要使A基因能正確與圖2中的質(zhì)粒拼接在一起，需要在所選引物的__________端分別增加相應(yīng)的限制酶的酶切位點(diǎn)。分析圖2和圖3，若使用“雙酶切”法同時(shí)處理質(zhì)粒和目的基因，需在目的基因的上、下游分別添加__________、__________（填限制酶名稱）的識(shí)別序列。用“雙酶切”法同時(shí)處理質(zhì)粒和目的基因的優(yōu)點(diǎn)有：__________。（答2點(diǎn)）（3）圖3中的基因表達(dá)時(shí)，__________（填“a”或“b”）鏈作為轉(zhuǎn)錄的模板鏈?！敬鸢浮浚?）①.Mg2+②.耐高溫的DNA聚合酶③.引物2和引物3（2）①.5'②.AluI③.HindⅢ④.防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化以及目的基因與質(zhì)粒反向連接（3）b〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定?！窘馕觥浚?）PCR技術(shù)要在緩沖體系中添加Mg2+（能激活DNA聚合酶）、4種脫氧核苷酸（合成DNA的原料）、兩種引物（使子鏈在引物的3'端開始延伸）、模板和耐高溫的DNA聚合酶等。DNA分子中，游離的磷酸端是5'端，游離的羥基端是3'端，且引物與互補(bǔ)鏈方向相反，由于需要在引物的3'端延伸子鏈，因此選擇引物2和引物3。（2）由于子鏈沿著5'→3'的方向延伸，為保證準(zhǔn)確復(fù)制，需要在所選引物的5′端分別增加相應(yīng)的限制酶的酶切位點(diǎn)；轉(zhuǎn)錄方向是向右的，所以基因A在連接圖2載體時(shí)，上游應(yīng)靠近啟動(dòng)子，下游靠近終止子，而圖2中不能選EcoRI酶切割質(zhì)粒，會(huì)破壞復(fù)制原點(diǎn)，為了防止目的基因的反向連接，所以應(yīng)該在目的基因上游添加Alu酶識(shí)別序列，下游添加HindIII酶識(shí)別序列。采用“雙酶切”法同時(shí)處理質(zhì)粒和目的基因的優(yōu)點(diǎn)可防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化以及目的基因與質(zhì)粒反向連接。（3）轉(zhuǎn)錄過程中，mRNA的延伸方向?yàn)?′→3'，DNA中模板鏈的方向與之相反，因此圖3中的基因表達(dá)時(shí)b鏈作為轉(zhuǎn)錄的模板鏈。廣西玉林市七校2024-2025學(xué)年高二下學(xué)期4月期中聯(lián)合調(diào)研測(cè)試一、選擇題：本大題共16小題，共40分。第1-12小題，每小題2分；第13-16小題，每小題4分。在每小題所給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的。1.隨著生命科學(xué)的發(fā)展，生物工程技術(shù)已廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和環(huán)境保護(hù)等多個(gè)領(lǐng)域。下列敘述正確的是（）A.利用植物細(xì)胞工程技術(shù)對(duì)莖尖進(jìn)行培養(yǎng)，可獲得抗病毒的新品種B.通過基因工程導(dǎo)入腸乳糖酶基因的奶?？煞置诔鋈樘呛康偷娜橹瑿.利用發(fā)酵工程從微生物細(xì)胞中提取單細(xì)胞蛋白，生產(chǎn)微生物飼料D.胚胎移植時(shí)，需選取遺傳性狀優(yōu)良、生產(chǎn)能力強(qiáng)的母畜作為受體【答案】B〖祥解〗植物細(xì)胞工程的應(yīng)用：植物繁殖新途徑（微型繁殖、作物脫毒）、作物新品種培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等?！驹斘觥緼、植物細(xì)胞工程中的莖尖培養(yǎng)利用的是植物組織培養(yǎng)技術(shù)，其原理是細(xì)胞的全能性。莖尖分生區(qū)細(xì)胞病毒極少，通過脫分化與再分化可獲得脫毒苗，但脫毒苗并未改變遺傳物質(zhì)，不能獲得抗病毒新品種?？共《酒贩N需通過基因工程或誘變育種獲得，A錯(cuò)誤；B、基因工程中，將腸乳糖酶基因?qū)肽膛；蚪M后，若該基因在乳腺細(xì)胞中成功表達(dá)，產(chǎn)生的乳糖酶可分解乳汁中的乳糖，從而降低乳糖含量，B正確；C、單細(xì)胞蛋白指微生物菌體本身，發(fā)酵工程中可直接收獲菌體作為飼料或食品，無需從細(xì)胞中提取蛋白質(zhì)，C錯(cuò)誤；D、胚胎移植時(shí)，受體母畜僅提供胚胎發(fā)育的生理環(huán)境，其遺傳性狀不影響后代。需選擇遺傳性狀優(yōu)良的是供體，而非受體，D錯(cuò)誤。故選B。2.國(guó)際上將每年的4月8日定為國(guó)際珍稀動(dòng)物保護(hù)日。黑足雪貂是世界十大瀕臨滅絕動(dòng)物之一，具有夜行性和穴居的生活習(xí)性?？茖W(xué)家使用30多年前冷凍的細(xì)胞，首次成功克隆出黑足雪貂。下列說法錯(cuò)誤的是（）A.利用動(dòng)物胚胎分割技術(shù)得到的個(gè)體基因型相同B.在黑足雪貂早期胚胎的形成過程中，卵裂期的胚胎總體積基本不變C.卵母細(xì)胞去核的實(shí)質(zhì)是去除卵母細(xì)胞中的紡錘體—染色體復(fù)合物D.利用冷凍的細(xì)胞克隆出黑足雪貂的過程利用了動(dòng)物細(xì)胞的全能性【答案】D〖祥解〗克隆動(dòng)物概念：將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物。【詳析】A、胚胎分割技術(shù)是將早期胚胎切割成幾等份，經(jīng)移植獲得同卵多胎后代的方法，分割后的胚胎細(xì)胞具有相同的遺傳物質(zhì)，因此得到的個(gè)體基因型相同，A正確；B、卵裂期胚胎的細(xì)胞不斷分裂，但卵裂期的胚胎總體積基本不變，B正確；C、卵母細(xì)胞去核時(shí)，需去除處于減數(shù)第二次分裂中期（MⅡ期）的卵母細(xì)胞的紡錘體—染色體復(fù)合物，以去除遺傳物質(zhì)，C正確；D、克隆動(dòng)物通過核移植技術(shù)實(shí)現(xiàn)，該過程依賴的是動(dòng)物細(xì)胞核的全能性，而非整個(gè)細(xì)胞的全能性，D錯(cuò)誤。故選D。3.容縣豆豉、城隍酸蘿卜、燕京啤酒都屬于玉林的發(fā)酵食品。下列關(guān)于發(fā)酵食品的制作，敘述錯(cuò)誤的是（）A.豆豉的制作利用了毛霉等產(chǎn)生的蛋白酶B.制作酸蘿卜時(shí)，需要將瓶蓋打開，排出CO2C.釀造燕京啤酒，發(fā)酵時(shí)需將溫度控制在18—30℃進(jìn)行發(fā)酵D.利用傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)獲得的食品，菌種來源于天然存在的微生物或者前一次發(fā)酵保存下來的面團(tuán)、鹵汁等【答案】B〖祥解〗果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵?！驹斘觥緼、豆豉制作主要利用毛霉等微生物產(chǎn)生蛋白酶分解蛋白質(zhì)，A正確；B、制作酸蘿卜（泡菜）依賴乳酸菌的無氧發(fā)酵，需密封環(huán)境。CO?可通過泡菜壇的水封結(jié)構(gòu)排出，無需打開瓶蓋，否則會(huì)破壞無氧環(huán)境并引入雜菌，B錯(cuò)誤；C、釀造啤酒時(shí)，利用酵母菌發(fā)酵，酵母菌發(fā)酵的適宜溫度在18?30℃，C正確；D、傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的菌種來源于自然環(huán)境或前次發(fā)酵殘留物（如面團(tuán)、鹵汁），D正確。故選B。4.關(guān)于細(xì)胞工程，下列說法錯(cuò)誤的是（）A胚胎工程中，可以取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行性別鑒定B.用水稻的雄配子或雌配子離體培養(yǎng)獲得植株的過程為單倍體育種，能明顯縮短育種年限C.動(dòng)物體細(xì)胞核移植的過程中，可以用物理法或化學(xué)法激活重構(gòu)胚D.在進(jìn)行體外受精時(shí)，若觀察到兩個(gè)極體可以說明已開始受精【答案】B〖祥解〗哺乳動(dòng)物核移植包括體細(xì)胞核移植和胚胎細(xì)胞核移植。由于動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難，而胚胎細(xì)胞的全能性高于體細(xì)胞，因此體細(xì)胞核移植的難度明顯高于后者。核移植過程中，可以使用顯微操作法、梯度離心、紫外線短時(shí)間照射等方法進(jìn)行去核?！驹斘觥緼、滋養(yǎng)層細(xì)胞位于胚胎外層，發(fā)育為胎膜和胎盤，取樣不會(huì)損傷胚胎，可用于性別鑒定，A正確；B、單倍體育種需通過配子離體培養(yǎng)獲得單倍體植株，再經(jīng)秋水仙素處理使其染色體加倍。選項(xiàng)僅提到離體培養(yǎng)，未包含染色體加倍步驟，無法直接縮短育種年限，B錯(cuò)誤；C、動(dòng)物體細(xì)胞核移植中，重構(gòu)胚需通過電脈沖、鈣離子載體等物理或化學(xué)方法激活以啟動(dòng)分裂，C正確；D、體外受精時(shí)，精子入卵觸發(fā)卵子完成減數(shù)第二次分裂，排出第二極體。觀察到兩個(gè)極體（第一極體和第二極體）表明受精已開始，D正確。故選B。5.精子載體法是以精子作為外源基因載體，攜帶外源基因進(jìn)入卵細(xì)胞，如圖表示用該方法制備轉(zhuǎn)基因鼠的基本流程。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.含有目的基因的精子與卵細(xì)胞受精時(shí)需要進(jìn)行細(xì)胞識(shí)別B.用上述方法獲得的轉(zhuǎn)基因鼠的性狀與導(dǎo)入外源基因的精子保持一致C.進(jìn)行②過程前，精子需要在含有肝素或Ca2+載體的溶液中進(jìn)行獲能處理D.在進(jìn)行過程④之前要對(duì)代孕母鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理【答案】B〖祥解〗細(xì)胞核移植技術(shù)是將一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入另一個(gè)去核的細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎或個(gè)體的技術(shù)?！驹斘觥緼、精子和卵細(xì)胞受精時(shí)需要通過接觸的方式進(jìn)行細(xì)胞識(shí)別，A正確；B、圖中，轉(zhuǎn)基因鼠的和遺傳物質(zhì)是導(dǎo)入外源基因的精子和卵細(xì)胞共同提供，質(zhì)基因主要由卵細(xì)胞提供，故其性狀不一定與導(dǎo)入外源基因的精子保持一致，B錯(cuò)誤；C、②過程是體外受精，精子在體外受精前需要進(jìn)行獲能處理，利用含有肝素或Ca2+載體的溶液，C正確；D、代孕母鼠要接受移植過去的早期胚胎，必須在生理上處于與供體相同的生理狀態(tài)，所以要對(duì)代孕母鼠進(jìn)行同期發(fā)情處理，D正確。故選B。6.某同學(xué)在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行了酵母菌的純培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，下列有關(guān)該實(shí)驗(yàn)的敘述正確的是（）A.所用的培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度越高，對(duì)酵母菌的生長(zhǎng)越有利B.純培養(yǎng)物是由單一酵母菌繁殖所獲得的酵母菌群體分泌的代謝物C.若以平板劃線法純化酵母菌菌種，接種環(huán)的灼燒次數(shù)比劃線次數(shù)多一次D.擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)使用固體培養(yǎng)基，以便于挑取菌落獲得純化菌株【答案】C〖祥解〗微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?！驹斘觥緼、培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度過高，影響細(xì)胞滲透壓，使微生物會(huì)通過滲透作用失水，對(duì)微生物的生長(zhǎng)不利，A錯(cuò)誤；B、純培養(yǎng)物是由單一個(gè)體繁殖所獲得的微生物群體，B錯(cuò)誤；C、由于每次劃線前后接種環(huán)都要灼燒滅菌，故用平板劃線法純化菌種時(shí)，接種環(huán)的灼燒次數(shù)比劃線次數(shù)多一次，C正確；D、擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)使用液體培養(yǎng)基，D錯(cuò)誤。故選C。7.冰球子是一種多年生草本植物，具有清熱解毒、消腫止痛的作用。植物組織培養(yǎng)技術(shù)可用于冰球子的快速繁殖。下列說法正確的是（）A.利用冰球子細(xì)胞進(jìn)行定向誘變可獲得有用的突變體B.冰球子外植體脫分化時(shí)需要光照，進(jìn)而形成不定形的薄壁組織團(tuán)塊C.生芽培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的比值比生根培養(yǎng)基中的大D.冰球子中含有的次生代謝物通常是基本生命活動(dòng)所必需的【答案】C〖祥解〗植物組織培養(yǎng)過程：離體的植物組織，器官或細(xì)胞（外植體）脫分化形成愈傷組織，愈傷組織再分化形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育成植株。植物組織培養(yǎng)技術(shù)有廣泛的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑（快繁技術(shù)、作物脫毒）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)?！驹斘觥緼、誘變育種的原理是基因突變，具有不定向性，無法通過定向誘變直接獲得特定突變體，A錯(cuò)誤；B、脫分化過程需要在避光條件下進(jìn)行，光照會(huì)抑制脫分化，而再分化階段（如生芽、生根）才需要光照調(diào)節(jié)，B錯(cuò)誤；C、生芽培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的比值較高，促進(jìn)芽的分化；生根培養(yǎng)基中該比值較低，促進(jìn)根的分化，C正確；D、次生代謝物（如生物堿、萜類等）并非植物基本生命活動(dòng)所必需，它們主要在特定階段或組織中合成，D錯(cuò)誤。故選C。8.下列關(guān)于生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的敘述，正確的是（）A.使用洋蔥提取DNA時(shí)，將切碎的洋蔥中充分研磨后過濾并棄去濾液B.“DNA粗提取”的實(shí)驗(yàn)中，將提取到的絲狀物與二苯胺溶液充分混勻后沸水浴，溶液即可變?yōu)樗{(lán)色C.PCR的產(chǎn)物一般通過瓊脂糖凝膠電泳來鑒定，電泳圖像中出現(xiàn)多條DNA條帶的可能原因是擴(kuò)增時(shí)設(shè)計(jì)的引物過短D.PCR復(fù)性溫度應(yīng)高于模板DNA的解鏈（變性）溫度，低于延伸溫度【答案】C〖祥解〗DNA不溶于酒精，而某些蛋白質(zhì)溶于酒精；鑒定DNA時(shí)，需要先將DNA溶解在NaCl溶液中，再與二苯胺溶液混合，并在水浴加熱條件下呈現(xiàn)藍(lán)色?！驹斘觥緼、在提取DNA時(shí)，洋蔥經(jīng)研磨后，DNA溶解在濾液中，應(yīng)保留濾液而非棄去，A錯(cuò)誤；B、DNA與二苯胺需在沸水浴條件下顯藍(lán)色，但粗提取的絲狀物需先溶解于2mol/L的NaCl溶液后再檢測(cè)，直接混合可能無法顯色，B錯(cuò)誤；C、PCR產(chǎn)物電泳出現(xiàn)多條帶可能是引物過短導(dǎo)致非特異性結(jié)合，引發(fā)非目標(biāo)序列擴(kuò)增，C正確；D、PCR復(fù)性溫度（50℃左右）應(yīng)低于變性溫度（90℃以上），且低于延伸溫度（72℃左右），D錯(cuò)誤。故選C。9.下列關(guān)于發(fā)酵工程的基本環(huán)節(jié)及應(yīng)用的敘述中，正確的是（）A.發(fā)酵結(jié)束后，可通過過濾、沉淀等方法分離出微生物細(xì)胞本身B.在主發(fā)酵階段酵母菌會(huì)大量繁殖，主發(fā)酵結(jié)束后可得到澄清、成熟的啤酒C.產(chǎn)物濃度和微生物的數(shù)量的檢測(cè)必須在發(fā)酵結(jié)束后進(jìn)行D.微生物農(nóng)藥是利用微生物或其代謝物來防治病蟲害的，是化學(xué)防治的重要手段【答案】A〖祥解〗發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種技術(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種選育、培養(yǎng)基的配制、滅菌、擴(kuò)大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純等方面?！驹斘觥緼、如果發(fā)酵產(chǎn)品是微生物細(xì)胞本身，可在發(fā)酵結(jié)束之后，采用過濾、沉淀等方法將菌體分離和干燥,即可得到產(chǎn)品，A正確；B、酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都在主發(fā)酵階段完成，主發(fā)酵結(jié)束后發(fā)酵液需要在低溫、密閉環(huán)境下進(jìn)行后發(fā)酵方可得到澄清、成熟的啤酒，B錯(cuò)誤；C、產(chǎn)物濃度和微生物的數(shù)量的檢測(cè)要在發(fā)酵過程中隨時(shí)進(jìn)行，C錯(cuò)誤；D、微生物農(nóng)藥是利用微生物或其代謝物來防治病蟲害的，微生物農(nóng)藥作為生物防治的重要手段，D錯(cuò)誤。故選A。10.L-天冬酰胺酶可分解天冬酰胺釋放出氨、氨與奈斯勒試劑反應(yīng)呈棕色。為篩選獲得L-天冬酰胺酶高產(chǎn)菌株，某研究小組用含有牛肉膏、蛋白胨、水、NaC1、奈斯勒試劑等成分的培養(yǎng)基進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。結(jié)果如圖所示。下列有關(guān)敘述中，錯(cuò)誤的是（）A.應(yīng)該在富含天冬酰胺的環(huán)境中取樣B.應(yīng)選擇菌落B作為高產(chǎn)L-天冬酰胺酶菌株進(jìn)行大量培養(yǎng)C.該培養(yǎng)基中含有瓊脂，充當(dāng)?shù)吹挠信Ｈ飧嗪偷鞍纂薉.獲得L-天冬酰胺酶高產(chǎn)菌株純培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染【答案】B〖祥解〗微生物常見的接種的方法：①平板劃線法，將已經(jīng)滅菌的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落；②稀釋涂布平板法，將待分離的菌液經(jīng)過適合的稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?！驹斘觥緼、要篩選能產(chǎn)生L-天冬酰胺酶的菌株，因?yàn)樵撁缚煞纸馓於０?，所以在富含天冬酰胺的環(huán)境中更容易找到能產(chǎn)生該酶的菌株，因此應(yīng)該在富含天冬酰胺的環(huán)境中取樣，A正確；B、菌落B和菌落C周圍棕色圈的直徑相同，但C的菌落直徑更小，因此菌落C的單個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生的L?天冬酰胺酶更多，應(yīng)選擇菌落C作為高產(chǎn)L?天冬酰胺酶菌株進(jìn)行大量培養(yǎng)，B錯(cuò)誤；C、從接種結(jié)果來看，菌落分布較為均勻，該培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，含有凝固劑（瓊脂），充當(dāng)?shù)吹某煞质桥Ｈ飧嗪偷鞍纂?，C正確；D、在微生物培養(yǎng)過程中，獲得純培養(yǎng)物的關(guān)鍵就是防止雜菌污染，這是微生物培養(yǎng)的基本要求，所以獲得L-天冬酰胺酶高產(chǎn)菌株純培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，D正確。故選B。11.利用轉(zhuǎn)基因山羊乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)丁酰膽堿酯酶，可治療有機(jī)磷中毒。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.應(yīng)該用山羊乳腺細(xì)胞中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子構(gòu)建基因表達(dá)載體B.乳腺生物反應(yīng)器的優(yōu)點(diǎn)在于可以生產(chǎn)大量的丁酰膽堿酯酶C.該過程中丁酰膽堿酯酶基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞的性染色體組成只能是XXD.常通過顯微注射法將丁酰膽堿酯酶基因?qū)肷窖虻娜橄偌?xì)胞來獲得轉(zhuǎn)基因山羊【答案】D〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳析】A、基因表達(dá)載體需使用乳腺細(xì)胞特異表達(dá)的啟動(dòng)子（如乳蛋白基因啟動(dòng)子），以確保目的基因僅在乳腺細(xì)胞中表達(dá)，A正確；B、乳腺生物反應(yīng)器通過乳汁分泌產(chǎn)物，產(chǎn)量高且易收集，B正確；C、由于只有雌性動(dòng)物才分泌乳汁，所以受體細(xì)胞的性染色體組成只能是XX，C正確；D、顯微注射法用于將基因?qū)胧芫眩苯訉?dǎo)入乳腺細(xì)胞無法發(fā)育為轉(zhuǎn)基因個(gè)體，D錯(cuò)誤；故選D。12.天然β-淀粉酶耐熱性差，不利于工業(yè)化應(yīng)用。研究人員將某種天然β-淀粉酶的第476位天冬氨酸替換為天冬酰胺后，其耐熱性明顯提升。下列敘述正確的是（）A.該工程屬于蛋白質(zhì)工程，其生產(chǎn)的蛋白質(zhì)是自然界已有的蛋白質(zhì)B.該改造過程是在分子層次上進(jìn)行的，要對(duì)天然β-淀粉酶的氨基酸序列進(jìn)行直接改造C.該工程根據(jù)中心法則推斷出的新的天然β-淀粉酶的脫氧核苷酸序列是唯一的D.該改造首先要預(yù)期蛋白質(zhì)功能，再設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，這是因?yàn)榻Y(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)【答案】D〖祥解〗蛋白質(zhì)工程：指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需求?！驹斘觥緼．蛋白質(zhì)工程通過改造基因來合成自然界不存在的蛋白質(zhì)，而題干中改造后的β-淀粉酶是人為設(shè)計(jì)的，并非自然界已有，A錯(cuò)誤；B．蛋白質(zhì)工程需通過修改基因序列間接改變蛋白質(zhì)的氨基酸序列，而非直接對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行分子層面的改造，B錯(cuò)誤；C．由于密碼子的簡(jiǎn)并性（不同密碼子可能編碼同一氨基酸），推斷出的脫氧核苷酸序列可能有多種，并非唯一，C錯(cuò)誤；D．蛋白質(zhì)工程遵循“預(yù)期功能→設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)→改造基因”的流程，因結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)，需先明確目標(biāo)功能再設(shè)計(jì)結(jié)構(gòu)，D正確；故選D。13.研究人員用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法培育轉(zhuǎn)基因番茄用于生產(chǎn)可口服的乙肝病毒疫苗（HBsAg蛋白）的過程如圖所示。下列相關(guān)敘述正確的是（）A.相比于農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，花粉管通道法不需要進(jìn)行植物組織培養(yǎng)B.重組質(zhì)粒的構(gòu)建過程需要限制性內(nèi)切核酸酶、DNA連接酶，它可在選擇培養(yǎng)基上大量復(fù)制并表達(dá)C.重組質(zhì)粒還應(yīng)具有啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)等組成部分，啟動(dòng)子是DNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位D.能在含卡那霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的農(nóng)桿菌一定含有HBsAg基因【答案】A〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。【詳析】A、花粉管通道法可以直接實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因植物的自然生成，而農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，還需要對(duì)成功導(dǎo)入目的基因的受體細(xì)胞進(jìn)行植物組織培養(yǎng)獲得轉(zhuǎn)基因植物，而花粉管通道法避免了植物組織培養(yǎng)這一操作，A正確；B、重組質(zhì)粒的構(gòu)建過程需要限制性內(nèi)切核酸酶（切割目的基因和運(yùn)載體）、DNA連接酶（連接切割后的目的基因和運(yùn)載體），但該重組質(zhì)粒需要在受體細(xì)胞中才能大量復(fù)制并表達(dá)，B錯(cuò)誤；C、重組質(zhì)粒包括目的基因、標(biāo)記基因，此外還應(yīng)具有啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)等組成部分，啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，C錯(cuò)誤；D、用限制酶HindIII和XhoI切割后破壞了抗四環(huán)素基因，但不會(huì)破壞抗卡那霉素基因，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞，能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生存下來，但是若導(dǎo)入了空質(zhì)粒也能在含卡那霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，故能在含卡那霉素的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的農(nóng)桿菌不一定含有HBsAg基因，D錯(cuò)誤。故選A。14.野生型菌株經(jīng)過突變后可能失去合成某種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的能力，稱為營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株，只有在基本培養(yǎng)基中補(bǔ)充所缺乏的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)后才能生長(zhǎng)。野生型菌株在限量培養(yǎng)基上獲取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的能力明顯強(qiáng)于營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株，如圖甲所示。利用生長(zhǎng)圖譜法可初步確定檢出的營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌的類型，即在下圖基本培養(yǎng)基乙的A—E這5個(gè)區(qū)域中分別添加不同的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，然后將營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌接種在乙上。下列說法正確的是（）A.若培養(yǎng)一段時(shí)間后在乙的BC交界處長(zhǎng)出了菌落，則說明該菌株是氨基酸和維生素營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌B.圖甲實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)將一個(gè)未接種的平板放在窗臺(tái)上培養(yǎng)，作為空白對(duì)照C.圖甲中，菌落A即為檢出的營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌菌株D.實(shí)驗(yàn)中的基本培養(yǎng)基需要用干熱滅菌法進(jìn)行滅菌【答案】A〖祥解〗野生型菌株可以在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，而營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株不能在基本培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，必須補(bǔ)充所缺乏的營(yíng)養(yǎng)因子才能生長(zhǎng)?！驹斘觥緼、若培養(yǎng)一段時(shí)間后在乙的B（加入的氨基酸）C（加入的維生素）交界處長(zhǎng)出了菌落，則說明該菌株是氨基酸和維生素營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌，A正確；B、圖甲實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)將一個(gè)未接種的平板同時(shí)放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，以判斷培養(yǎng)基是否被污染，B錯(cuò)誤；C、野生型菌株在限量培養(yǎng)基上獲取營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的能力明顯強(qiáng)于營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株，圖甲中A菌落直徑大于菌落B，說明A菌落是野生型菌株，所以B為檢出的營(yíng)養(yǎng)缺陷型大腸桿菌菌株，C錯(cuò)誤；D、用高壓蒸汽滅菌法對(duì)基本培養(yǎng)基滅菌，D錯(cuò)誤。故選A。15.體外動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)制造出的細(xì)胞培養(yǎng)肉是一種人造肉，具有營(yíng)養(yǎng)可控、結(jié)構(gòu)仿真、口感真實(shí)的特點(diǎn)。其主要生產(chǎn)流程如下圖，圖中的微載體是一種固體的細(xì)胞生長(zhǎng)基質(zhì)，其表面能使細(xì)胞貼附。下列敘述正確的是（）A.①過程可用機(jī)械的方法或用胰蛋白酶、胃蛋白酶等方法處理以獲得細(xì)胞懸液B.③過程加入微載體為細(xì)胞提供更大附著面積，使細(xì)胞間不出現(xiàn)接觸抑制，產(chǎn)量增加C.在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞可以直接用離心法收集D.肌肉干細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞，能夠分化為成年動(dòng)物體內(nèi)任何一種細(xì)胞【答案】C〖祥解〗動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程：取動(dòng)物組織塊剪碎組織用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞制成細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)?！驹斘觥緼、①過程為制備細(xì)胞懸液的過程，可用機(jī)械的方法或用胰蛋白酶處理的方法，但胃蛋白酶最適pH顯酸性，不適合用胃蛋白酶，A錯(cuò)誤；B、③過程中加入微載體為細(xì)胞提供了更大的附著面積，但細(xì)胞間會(huì)出現(xiàn)接觸抑制，B錯(cuò)誤；C、在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞可以直接用離心法收集，C正確；D、肌肉干細(xì)胞屬于成體干細(xì)胞，能夠分化成特定的細(xì)胞和組織，不具有全能性，D錯(cuò)誤。故選C。16.非洲豬瘟是由ASFV（非洲豬瘟病毒）感染引起的一種急性、高度致死的傳染病。為實(shí)現(xiàn)ASFV的快捷高效檢測(cè)，我國(guó)科研人員在ASFV的K基因（大小為790bp）中間插入熒光素酶（Gluc）基因和綠色熒光蛋白（EGFP）基因，構(gòu)建了ASFV-Gluc-EGFP重組病毒體系（如圖1），通過PCR擴(kuò)增和電泳鑒定重組病毒是否構(gòu)建成功（結(jié)果如圖2）。下列說法正確的是（）A.在PCR體系中加入圖1中的引物1和引物2能特異性擴(kuò)增重組病毒B.圖2中出現(xiàn)790bp、1758bp的條帶說明樣液中重組病毒構(gòu)建成功C.用PCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí)需要已知目的基因的全部序列D.Gluc基因和EGFP基因可用于重組病毒的篩選，都起到標(biāo)記基因的作用【答案】D〖祥解〗基因工程表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。【詳析】A、引物1和引物2是根據(jù)K基因已知的部分序列設(shè)計(jì)的，在PCR體系中加入圖1中的引物1和引物2不一定能特異性擴(kuò)增重組病毒，可能重組病毒基因未成功插入，這只擴(kuò)增出K基因的一部分，A錯(cuò)誤；B、已知K基因大小為790bp，若重組病毒構(gòu)建成功，PCR擴(kuò)增產(chǎn)物應(yīng)該包含完整的K基因以及插入的Gluc和EGFP基因，其大小應(yīng)該大于790bp。圖2中出現(xiàn)790bp的條帶，可能是未發(fā)生重組的正常K基因擴(kuò)增產(chǎn)物；出現(xiàn)1758bp的條帶，由于不知道插入的Gluc和EGFP基因的總長(zhǎng)度是否剛好能使擴(kuò)增產(chǎn)物達(dá)到1758bp，且僅根據(jù)這兩個(gè)條帶不能確鑿地說明樣液中重組病毒構(gòu)建成功，有可能存在其他非預(yù)期的擴(kuò)增情況，B錯(cuò)誤；C、用PCR方法擴(kuò)增目的基因時(shí)不需要已知目的基因的全部序列，需要已知目的基因兩端的序列，C錯(cuò)誤；D、由題意知，重組病毒包含Gluc基因和EGFP基因和K基因，故Gluc基因和EGFP基因可用于重組病毒的篩選，都起到標(biāo)記基因的作用，D正確。故選D。二、非選擇題：本大題共5小題，共60分。17.克隆技術(shù)又稱生物放大技術(shù)，為探究克隆技術(shù)能否用于人帕金森病的治療，科研人員利用“人帕金森病模型鼠”進(jìn)行了如圖所示實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)回答下列問題：（1）去核前應(yīng)保證采集的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)至________期才能用于動(dòng)物體細(xì)胞核移植。在動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)中，通常選擇卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，原因有________等。（答2點(diǎn)）（2）體外培養(yǎng)早期胚胎時(shí)，培養(yǎng)液中除應(yīng)含有細(xì)胞所需要的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，通常需要加入________等一些天然成分。（3）若想在過程①前獲得更多的卵母細(xì)胞，一般注射________（激素名稱）使雌鼠超數(shù)排卵，若用胚胎分割技術(shù)分割囊胚階段的胚胎時(shí)，應(yīng)注意________，否則會(huì)影響胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步的發(fā)育。（4）過程⑤中是否需要對(duì)人帕金森病模型鼠注射相應(yīng)的免疫抑制劑以避免發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，回答并說明理由：________，________。【答案】（1）①.MⅡ②.卵母細(xì)胞的體積大、易操作、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量豐富，同時(shí)還含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)（2）血清（3）①.促性腺激素②.將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割（4）①.不需要②.該過程中移植的神經(jīng)元的遺傳物質(zhì)主要來自該小鼠，不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)〖祥解〗題圖分析：圖中①為核移植過程，②是早期胚胎培養(yǎng)過程，③是獲取胚胎干細(xì)胞的過程，④是誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化形成神經(jīng)元的過程，⑤是器官移植過程。【解析】（1）從卵巢中采集的卵母細(xì)胞需在體外培養(yǎng)至MⅡ期才能用于體細(xì)胞核移植；在動(dòng)物體細(xì)胞核移植過程中，通常選擇卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞，原因有卵母細(xì)胞的體積大、易操作、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)含量豐富，同時(shí)還含有促進(jìn)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)等。（2）體外培養(yǎng)重構(gòu)胚時(shí)，培養(yǎng)液中除應(yīng)含有細(xì)胞所需要的各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，通常需要加入動(dòng)物血清等一些天然成分。（3）胚胎工程中一般采用促性腺激素處理雌鼠使其超數(shù)排卵，以便獲得更多的卵子，在分割囊胚階段的胚胎時(shí)，要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會(huì)影響胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。（4）利用圖示方法對(duì)人帕金森病模型鼠進(jìn)行治療時(shí)不需要給小鼠注射相應(yīng)的免疫抑制劑，因?yàn)樵撨^程中移植的神經(jīng)元的遺傳物質(zhì)主要來自該小鼠，不會(huì)發(fā)生免疫排斥反應(yīng)。18.野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。利用相關(guān)工程技術(shù)可以獲得抗黑腐病雜種黑芥—花椰菜植株，用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力，再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，流程如下圖1.通過蛋白質(zhì)電泳技術(shù)分析了親本及待測(cè)植株中某些特異性蛋白，結(jié)果圖2所示。（1）過程①的所用的酶為________，經(jīng)過②操作后，需篩選出融合的雜種細(xì)胞，顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有黑芥葉肉細(xì)胞的________（填寫細(xì)胞器名稱）存在可初步篩選出雜種細(xì)胞。（2）原生質(zhì)體融合的原理是________，原生質(zhì)體經(jīng)過細(xì)胞壁再生，進(jìn)而脫分化形成________。（3）圖2中屬于雜種植株的是________，將雜種植株栽培在含有________的環(huán)境中，可篩選出具有高抗性的雜種植株。（4）結(jié)合其他工程技術(shù)，提出一種不使用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)就能生產(chǎn)抗黑腐病花椰菜植株實(shí)驗(yàn)思路。__________?！敬鸢浮浚?）①.纖維素酶和果膠酶②.綠色的葉綠體（2）①.細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性②.愈傷組織（3）①.4和5②.含有黑腐病菌（4）通過基因工程技術(shù)將黑腐病的抗性基因?qū)牖ㄒ酥仓甑募?xì)胞中，并通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得抗黑腐病花椰菜植株?！枷榻狻接蓤D可知，①用纖維素酶、果膠酶進(jìn)行去壁處理，②表示用物理或化學(xué)方法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合?！窘馕觥浚?）過程①應(yīng)用了纖維素酶果膠酶去除植物細(xì)胞壁，獲得植物原生質(zhì)體。經(jīng)過②原生質(zhì)體融合后，需要篩選出融合的雜種細(xì)胞，可以通過觀察雜種細(xì)胞是否含有黑芥葉肉細(xì)胞的綠色的葉綠體來進(jìn)行判斷。（2）原生質(zhì)體融合的原理是細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性，原生質(zhì)體再生細(xì)胞壁后，經(jīng)過脫分化形成愈傷組織。（3）根據(jù)圖2中的電泳圖可知，4號(hào)和5號(hào)個(gè)體含有兩種花椰菜和黑芥兩種植株的蛋白質(zhì)是雜種細(xì)胞，為篩選高抗性雜種植株，需將雜種植株栽培在含有黑腐病菌的環(huán)境中，只有具有抗性的植株才能夠存活，從而將具有高抗性的雜種植株篩選出來。（4）據(jù)題干信息可知，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，花椰菜無抗黑腐病的抗性基因，易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，若要使花椰菜植株也具有抗黑腐病的能力，可以通過基因工程技術(shù)將黑腐病的抗性基因?qū)牖ㄒ酥仓甑募?xì)胞中，并通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得抗黑腐病花椰菜植株。19.吃腐爛的水果可能會(huì)出現(xiàn)頭暈、惡心、嘔吐或者更嚴(yán)重的癥狀，這和微生物產(chǎn)生的毒素有關(guān)。某學(xué)習(xí)小組為了尋找腐爛的蘋果中可安全食用的區(qū)域，開展以下實(shí)驗(yàn)：用蘋果的腐爛部位、距離腐爛部位1cm和2cm的組織做實(shí)驗(yàn)材料，檢測(cè)不同區(qū)域中微生物的種類和數(shù)量。已知蘋果的pH在3.5～4之間，下面是操作流程（青霉菌能產(chǎn)生青霉素，青霉素是一種抗生素）：（1）根據(jù)題意，本實(shí)驗(yàn)選用的接種方法是_______。該方法統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)少，這是因?yàn)開______。（2）步驟③中，根據(jù)特定微生物特殊的營(yíng)養(yǎng)要求，具有只允許特定微生物生長(zhǎng)，同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)功能的培養(yǎng)基，屬于________培養(yǎng)基。統(tǒng)計(jì)腐爛部位的菌落數(shù)目發(fā)現(xiàn)，青霉菌、曲霉菌等真菌的數(shù)量較多，細(xì)菌數(shù)目很少。原因可能是______。（3）該實(shí)驗(yàn)估測(cè)細(xì)菌細(xì)胞數(shù)為2×107個(gè)/mL，若實(shí)驗(yàn)中每個(gè)平板上涂布接種0.1mL稀釋后的菌液，3個(gè)平板上的平均菌落數(shù)為200個(gè)，則該稀釋倍數(shù)為______倍。（4）蘋果腐爛部位的微生物能產(chǎn)生毒素，毒素運(yùn)輸?shù)教O果其他部位，導(dǎo)致蘋果其他部位存在一定量的毒素。分析數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)：①距離腐爛部位越遠(yuǎn)，微生物的數(shù)量越少；②距離腐爛部位2cm的樣品中微生物數(shù)量極少。若要證明距離腐爛部位2cm的部分是可安全食用部位的結(jié)論，還需要補(bǔ)充的實(shí)驗(yàn)操作為：________?！敬鸢浮浚?