宿遷市人民醫(yī)院細(xì)胞分離技術(shù)考核一、單選題（每題2分，共20題）1.細(xì)胞分離技術(shù)中，下列哪種方法不屬于機(jī)械分離法？A.密度梯度離心B.梯度離心C.磁珠分選D.尼龍纖維過濾2.在分離造血干細(xì)胞時(shí)，常用的流式細(xì)胞術(shù)熒光標(biāo)記抗體不包括：A.CD34B.CD19C.CD3D.HLA-DR3.以下哪種緩沖液常用于外周血單個(gè)核細(xì)胞的分離？A.PBS緩沖液B.FBS緩沖液C.RPMI-1640緩沖液D.Hank’s緩沖液4.細(xì)胞分離過程中，若出現(xiàn)細(xì)胞活力下降，可能的原因是：A.離心速度過高B.緩沖液pH值不適宜C.細(xì)胞裂解過度D.以上都是5.磁珠分選技術(shù)中，用于分離CD34+細(xì)胞的磁珠應(yīng)為：A.負(fù)磁珠B.正磁珠C.中性磁珠D.無磁珠6.細(xì)胞分離后，若需進(jìn)行凍存，常用的凍存劑為：A.DMSOB.FBSC.PBSD.甘露醇7.在分離血小板時(shí)，常用的方法是：A.梯度離心B.磁珠分選C.尼龍纖維過濾D.以上都是8.細(xì)胞分離過程中，若需去除紅細(xì)胞，常用的方法是：A.活性炭吸附B.梯度離心C.熒光激活細(xì)胞分選（FACS）D.尼龍纖維過濾9.細(xì)胞分離后，若細(xì)胞數(shù)量不足，可能的原因是：A.細(xì)胞裂解過度B.分離方法選擇不當(dāng)C.細(xì)胞丟失在管壁上D.以上都是10.在分離腫瘤細(xì)胞時(shí)，常用的標(biāo)志物不包括：A.CD45B.CD56C.EpCAMD.CD34二、多選題（每題3分，共10題）1.細(xì)胞分離技術(shù)的常用方法包括：A.梯度離心B.磁珠分選C.尼龍纖維過濾D.流式細(xì)胞術(shù)分選2.細(xì)胞分離過程中，可能影響細(xì)胞活性的因素有：A.離心速度B.緩沖液成分C.溫度控制D.細(xì)胞裂解時(shí)間3.在分離造血干細(xì)胞時(shí)，常用的熒光標(biāo)記抗體包括：A.CD34B.CD19C.CD3D.HLA-DR4.細(xì)胞分離后，若需進(jìn)行凍存，需注意：A.緩沖液含DMSOB.冷凍速度控制C.存儲(chǔ)溫度D.解凍后需快速重懸5.磁珠分選技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)包括：A.操作簡便B.細(xì)胞損失少C.可重復(fù)使用D.分選純度高6.細(xì)胞分離過程中，可能出現(xiàn)的細(xì)胞污染包括：A.紅細(xì)胞污染B.病原體污染C.細(xì)胞裂解產(chǎn)物污染D.操作人員污染7.在分離血小板時(shí)，常用的方法包括：A.梯度離心B.磁珠分選C.尼龍纖維過濾D.血漿置換8.細(xì)胞分離后，若細(xì)胞數(shù)量不足，可能的原因包括：A.細(xì)胞裂解過度B.分離方法選擇不當(dāng)C.細(xì)胞丟失在管壁上D.原始細(xì)胞數(shù)量不足9.細(xì)胞分離技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域包括：A.腫瘤治療B.造血干細(xì)胞移植C.免疫細(xì)胞研究D.血液疾病診斷10.細(xì)胞分離過程中，需注意的實(shí)驗(yàn)室安全包括：A.防護(hù)手套使用B.生物安全柜操作C.化學(xué)試劑處理D.污染物滅活三、判斷題（每題2分，共10題）1.細(xì)胞分離過程中，離心速度越高，細(xì)胞分離效果越好。（×）2.磁珠分選技術(shù)適用于大規(guī)模細(xì)胞分離。（√）3.細(xì)胞分離后，若需進(jìn)行凍存，緩沖液需含F(xiàn)BS。（×）4.細(xì)胞分離過程中，若細(xì)胞裂解過度，會(huì)影響細(xì)胞活性。（√）5.細(xì)胞分離技術(shù)中，流式細(xì)胞術(shù)分選的純度最高。（√）6.細(xì)胞分離過程中，紅細(xì)胞污染可通過密度梯度離心去除。（√）7.細(xì)胞分離后，若細(xì)胞數(shù)量不足，可能的原因是分離方法選擇不當(dāng)。（√）8.細(xì)胞分離技術(shù)中，梯度離心適用于分離不同密度的細(xì)胞。（√）9.細(xì)胞分離過程中，需注意防護(hù)手套的使用，防止交叉污染。（√）10.細(xì)胞分離技術(shù)中，尼龍纖維過濾適用于分離貼壁細(xì)胞。（×）四、簡答題（每題5分，共4題）1.簡述密度梯度離心的原理及其應(yīng)用。2.簡述磁珠分選技術(shù)的原理及其優(yōu)缺點(diǎn)。3.簡述細(xì)胞分離過程中，如何提高細(xì)胞活力。4.簡述細(xì)胞分離技術(shù)在宿遷市人民醫(yī)院的應(yīng)用場景。五、論述題（每題10分，共2題）1.詳細(xì)論述細(xì)胞分離技術(shù)在腫瘤治療中的應(yīng)用及其面臨的挑戰(zhàn)。2.詳細(xì)論述細(xì)胞分離技術(shù)在造血干細(xì)胞移植中的應(yīng)用及其關(guān)鍵技術(shù)要點(diǎn)。答案與解析一、單選題答案與解析1.C-機(jī)械分離法包括梯度離心、尼龍纖維過濾等，磁珠分選屬于免疫分離法。2.B-CD19是B細(xì)胞標(biāo)志物，不用于分離造血干細(xì)胞，CD34、CD3、HLA-DR是造血干細(xì)胞常用標(biāo)志物。3.A-PBS緩沖液常用于外周血單個(gè)核細(xì)胞的分離，F(xiàn)BS、RPMI-1640、Hank’s緩沖液主要用于細(xì)胞培養(yǎng)。4.D-細(xì)胞活力下降可能由多種因素導(dǎo)致，包括離心速度過高、緩沖液pH不適宜、細(xì)胞裂解過度等。5.B-磁珠分選技術(shù)中，CD34+細(xì)胞常用正磁珠分離。6.A-DMSO是常用的細(xì)胞凍存劑，F(xiàn)BS、PBS、甘露醇不適用于長期凍存。7.A-梯度離心是分離血小板常用方法，磁珠分選和尼龍纖維過濾較少用于血小板分離。8.B-梯度離心可通過密度梯度去除紅細(xì)胞，其他方法不適用于此目的。9.D-細(xì)胞數(shù)量不足可能由多種因素導(dǎo)致，包括細(xì)胞裂解過度、分離方法不當(dāng)、細(xì)胞丟失在管壁上等。10.A-CD45是白細(xì)胞標(biāo)志物，不用于腫瘤細(xì)胞分離，CD56、EpCAM、CD34是腫瘤細(xì)胞常用標(biāo)志物。二、多選題答案與解析1.A、B、C、D-細(xì)胞分離技術(shù)包括梯度離心、磁珠分選、尼龍纖維過濾、流式細(xì)胞術(shù)分選等。2.A、B、C、D-細(xì)胞分離過程中，離心速度、緩沖液成分、溫度控制、細(xì)胞裂解時(shí)間均會(huì)影響細(xì)胞活性。3.A、C、D-CD34、CD3、HLA-DR是造血干細(xì)胞常用標(biāo)志物，CD19是B細(xì)胞標(biāo)志物。4.A、B、C、D-細(xì)胞凍存需注意緩沖液含DMSO、冷凍速度控制、存儲(chǔ)溫度、解凍后快速重懸。5.A、B、C、D-磁珠分選操作簡便、細(xì)胞損失少、可重復(fù)使用、分選純度高。6.A、B、C、D-細(xì)胞分離過程中，可能出現(xiàn)的污染包括紅細(xì)胞污染、病原體污染、細(xì)胞裂解產(chǎn)物污染、操作人員污染。7.A、C-血小板分離常用梯度離心和尼龍纖維過濾，磁珠分選較少用于血小板分離。8.A、B、C、D-細(xì)胞數(shù)量不足可能由細(xì)胞裂解過度、分離方法不當(dāng)、細(xì)胞丟失在管壁上、原始細(xì)胞數(shù)量不足等原因?qū)е隆?.A、B、C、D-細(xì)胞分離技術(shù)應(yīng)用于腫瘤治療、造血干細(xì)胞移植、免疫細(xì)胞研究、血液疾病診斷等領(lǐng)域。10.A、B、C、D-細(xì)胞分離過程中，需注意防護(hù)手套使用、生物安全柜操作、化學(xué)試劑處理、污染物滅活等實(shí)驗(yàn)室安全。三、判斷題答案與解析1.×-離心速度過高可能導(dǎo)致細(xì)胞損傷，并非越高越好。2.√-磁珠分選適用于大規(guī)模細(xì)胞分離，效率高、純度高。3.×-細(xì)胞凍存需使用含DMSO的緩沖液，F(xiàn)BS主要用于細(xì)胞培養(yǎng)。4.√-細(xì)胞裂解過度會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞膜損傷，影響細(xì)胞活性。5.√-流式細(xì)胞術(shù)分選可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞的高純度分選。6.√-密度梯度離心可通過梯度分離去除紅細(xì)胞。7.√-細(xì)胞數(shù)量不足可能由分離方法不當(dāng)導(dǎo)致。8.√-梯度離心適用于分離不同密度的細(xì)胞。9.√-細(xì)胞分離過程中需注意防護(hù)手套使用，防止交叉污染。10.×-尼龍纖維過濾適用于分離貼壁細(xì)胞，不適用于懸浮細(xì)胞。四、簡答題答案與解析1.密度梯度離心的原理及其應(yīng)用-原理：利用密度梯度介質(zhì)（如Ficoll、Percoll）中不同密度的細(xì)胞在離心力作用下分層分離。-應(yīng)用：常用于分離外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC）、血小板、腫瘤細(xì)胞等。2.磁珠分選技術(shù)的原理及其優(yōu)缺點(diǎn)-原理：利用磁珠表面修飾的抗體與目標(biāo)細(xì)胞結(jié)合，通過磁場分離目標(biāo)細(xì)胞。-優(yōu)點(diǎn)：操作簡便、純度高、可重復(fù)使用。-缺點(diǎn)：可能影響細(xì)胞活性、成本較高。3.細(xì)胞分離過程中，如何提高細(xì)胞活力-控制離心速度和時(shí)間、使用溫和的緩沖液、避免細(xì)胞裂解過度、低溫操作等。4.細(xì)胞分離技術(shù)在宿遷市人民醫(yī)院的應(yīng)用場景-造血干細(xì)胞移植、腫瘤治療、血液疾病診斷、免疫細(xì)胞研究等。五、論述題答案與解析1.細(xì)胞分離技術(shù)在腫瘤治療中的應(yīng)用及其面臨的挑戰(zhàn)-應(yīng)用：用于分離腫瘤細(xì)胞、免疫細(xì)胞（如T細(xì)胞）