福州市人民醫(yī)院激光顯微切割考核一、單選題（每題2分，共20題）1.激光顯微切割技術(shù)主要用于分離哪種細(xì)胞群體？A.活性細(xì)胞B.增殖細(xì)胞C.特異性標(biāo)記細(xì)胞D.所有細(xì)胞類型2.福州市人民醫(yī)院常用的激光顯微切割系統(tǒng)是哪種類型？A.共聚焦激光切割B.二極管激光切割C.氬離子激光切割D.氦氖激光切割3.激光顯微切割前，樣本固定通常采用哪種方法？A.甲醛固定B.乙醇固定C.甲醇固定D.以上均可4.激光顯微切割過程中，激光能量過高可能導(dǎo)致什么問題？A.細(xì)胞損傷B.切割效率提高C.標(biāo)記熒光丟失D.以上均可能5.福州市人民醫(yī)院病理科常用的激光顯微切割前染色方法是？A.蘇木精染色B.免疫組化染色C.熒光標(biāo)記染色D.以上均非6.激光顯微切割的樣本厚度一般要求是多少？A.2-5μmB.5-10μmC.10-20μmD.20-50μm7.激光顯微切割后，切割的細(xì)胞如何保存？A.直接放入RNAlater溶液B.置于凍存管中速凍C.置于4℃冰箱保存D.以上均可8.激光顯微切割技術(shù)最適用于哪種研究？A.全基因組測序B.單細(xì)胞基因表達(dá)分析C.蛋白質(zhì)組學(xué)分析D.以上均非9.福州市人民醫(yī)院開展激光顯微切割技術(shù)的主要優(yōu)勢是？A.高通量篩選B.低成本操作C.微區(qū)精準(zhǔn)分離D.以上均非10.激光顯微切割的樣本預(yù)處理中，哪項操作是必須的？A.樣本脫水B.樣本浸潤C(jī).細(xì)胞貼壁培養(yǎng)D.以上均非二、多選題（每題3分，共10題）1.激光顯微切割技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域包括哪些？A.癌癥研究B.藥物篩選C.發(fā)育生物學(xué)D.微生物分析2.激光顯微切割系統(tǒng)中，哪些部件是關(guān)鍵？A.激光器B.顯微鏡系統(tǒng)C.切割刀片D.樣本臺3.激光顯微切割的樣本要求有哪些？A.細(xì)胞密度高B.細(xì)胞異質(zhì)性大C.標(biāo)記清晰D.樣本新鮮4.激光顯微切割的常見問題包括哪些？A.切割不完整B.細(xì)胞污染C.切割效率低D.設(shè)備故障5.福州市人民醫(yī)院病理科開展激光顯微切割技術(shù)的優(yōu)勢是？A.精準(zhǔn)分離腫瘤微環(huán)境細(xì)胞B.提高RNA質(zhì)量C.降低實驗成本D.支持臨床研究6.激光顯微切割的樣本固定方法有哪些？A.甲醛固定B.甲醇固定C.丙酮固定D.以上均非7.激光顯微切割的樣本染色方法有哪些？A.免疫組化染色B.熒光標(biāo)記染色C.染色體熒光顯帶D.以上均非8.激光顯微切割的樣本保存方法有哪些？A.RNAlater保存B.甲醛固定保存C.凍存管保存D.以上均非9.激光顯微切割技術(shù)的局限性包括哪些？A.切割效率低B.設(shè)備昂貴C.樣本限制D.操作復(fù)雜10.福州市人民醫(yī)院病理科開展激光顯微切割技術(shù)的意義是？A.提高診斷準(zhǔn)確性B.支持基礎(chǔ)研究C.降低檢測成本D.推動臨床轉(zhuǎn)化三、判斷題（每題1分，共10題）1.激光顯微切割技術(shù)可以分離活細(xì)胞。（×）2.激光顯微切割前，樣本必須進(jìn)行充分脫水。（×）3.激光顯微切割的樣本厚度應(yīng)控制在10-20μm。（√）4.激光顯微切割的樣本固定后可以直接進(jìn)行染色。（√）5.激光顯微切割的激光能量越高，切割效率越高。（×）6.福州市人民醫(yī)院病理科主要使用共聚焦激光顯微切割系統(tǒng)。（×）7.激光顯微切割的樣本保存需要避免RNA降解。（√）8.激光顯微切割技術(shù)適用于所有類型的病理樣本。（×）9.激光顯微切割的樣本預(yù)處理中，細(xì)胞貼壁培養(yǎng)是必須的。（×）10.激光顯微切割技術(shù)可以提高單細(xì)胞研究的準(zhǔn)確性。（√）四、簡答題（每題5分，共5題）1.簡述激光顯微切割技術(shù)的原理及其在病理研究中的應(yīng)用。2.福州市人民醫(yī)院病理科開展激光顯微切割技術(shù)的優(yōu)勢有哪些？3.激光顯微切割的樣本預(yù)處理步驟有哪些？4.激光顯微切割的樣本保存方法有哪些？5.激光顯微切割技術(shù)的局限性有哪些？五、論述題（每題10分，共2題）1.結(jié)合福州市人民醫(yī)院病理科的實際情況，論述激光顯微切割技術(shù)在臨床研究中的應(yīng)用前景。2.比較激光顯微切割技術(shù)與傳統(tǒng)細(xì)胞分離技術(shù)的優(yōu)缺點，并分析其在腫瘤研究中的價值。答案與解析一、單選題答案1.C2.B3.D4.A5.C6.B7.A8.B9.C10.B解析：1.激光顯微切割主要用于分離特異性標(biāo)記的細(xì)胞群體，如腫瘤細(xì)胞或免疫細(xì)胞。2.福州市人民醫(yī)院常用二極管激光切割系統(tǒng)，因其成本較低且效率高。3.激光顯微切割前，樣本固定方法多樣，但甲醛、甲醇、乙醇均可使用，需根據(jù)實驗需求選擇。4.激光能量過高會損傷細(xì)胞，導(dǎo)致實驗失敗。5.激光顯微切割前通常使用熒光標(biāo)記染色，以便精準(zhǔn)定位目標(biāo)細(xì)胞。6.樣本厚度控制在5-10μm，以保證切割精度。7.切割后細(xì)胞可直接放入RNAlater溶液保存RNA。8.激光顯微切割最適用于單細(xì)胞基因表達(dá)分析。9.精準(zhǔn)分離微區(qū)細(xì)胞是激光顯微切割的核心優(yōu)勢。10.樣本預(yù)處理中，浸潤是必須的步驟，以保證樣本均勻。二、多選題答案1.A,B,C,D2.A,B,C,D3.A,B,C,D4.A,B,C,D5.A,B,D6.A,B,C7.A,B,C8.A,B,C9.A,B,C,D10.A,B,D解析：1.激光顯微切割技術(shù)廣泛應(yīng)用于癌癥、藥物篩選、發(fā)育生物學(xué)及微生物分析等領(lǐng)域。2.激光顯微切割系統(tǒng)包括激光器、顯微鏡、切割刀片和樣本臺等關(guān)鍵部件。3.樣本要求細(xì)胞密度高、異質(zhì)性大、標(biāo)記清晰且新鮮。4.常見問題包括切割不完整、細(xì)胞污染、效率低及設(shè)備故障等。5.福州市人民醫(yī)院病理科的優(yōu)勢在于精準(zhǔn)分離腫瘤微環(huán)境細(xì)胞、提高RNA質(zhì)量及支持臨床研究。6.樣本固定方法包括甲醛、甲醇、丙酮固定等。7.樣本染色方法包括免疫組化染色、熒光標(biāo)記染色及染色體熒光顯帶等。8.樣本保存方法包括RNAlater保存、甲醛固定及冷凍管保存等。9.激光顯微切割的局限性包括效率低、設(shè)備昂貴、樣本限制及操作復(fù)雜等。10.該技術(shù)在提高診斷準(zhǔn)確性、支持基礎(chǔ)研究及推動臨床轉(zhuǎn)化方面具有重要意義。三、判斷題答案1.×2.×3.√4.√5.×6.×7.√8.×9.×10.√解析：1.激光顯微切割通常分離死細(xì)胞，活細(xì)胞操作復(fù)雜且易損傷。2.樣本預(yù)處理中，浸潤而非脫水是關(guān)鍵步驟。3.樣本厚度控制在5-10μm，以保證切割精度。4.固定后可直接染色，但需避免過度處理。5.激光能量過高會損傷細(xì)胞，反而不利于實驗。6.福州市人民醫(yī)院主要使用二極管激光切割系統(tǒng)，而非共聚焦系統(tǒng)。7.RNA保存需避免降解，因此需使用RNAlater等試劑。8.激光顯微切割對樣本有要求，并非所有類型適用。9.細(xì)胞貼壁培養(yǎng)非必須，直接組織樣本即可。10.單細(xì)胞研究需高精度分離，激光顯微切割可提高準(zhǔn)確性。四、簡答題答案1.激光顯微切割原理及應(yīng)用：激光顯微切割利用激光束精準(zhǔn)分離微區(qū)細(xì)胞，原理基于激光對目標(biāo)細(xì)胞的特異性損傷。在病理研究中，可分離腫瘤細(xì)胞、免疫細(xì)胞等，用于基因表達(dá)分析、單細(xì)胞測序等。2.福州市人民醫(yī)院病理科開展激光顯微切割技術(shù)的優(yōu)勢：-精準(zhǔn)分離腫瘤微環(huán)境細(xì)胞，提高診斷準(zhǔn)確性。-提高RNA質(zhì)量，支持分子生物學(xué)研究。-支持臨床研究，推動轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)發(fā)展。3.樣本預(yù)處理步驟：-樣本固定（甲醛、甲醇等）。-細(xì)胞染色（免疫組化、熒光標(biāo)記）。-樣本浸潤（確保激光穿透均勻）。-細(xì)胞貼片（非必須，直接組織即可）。4.樣本保存方法：-RNAlater保存（用于RNA分析）。-甲醛固定（用于后續(xù)染色或測序）。-凍存管保存（用于低溫保存）。5.激光顯微切割技術(shù)的局限性：-切割效率低，大量樣本需反復(fù)操作。-設(shè)備昂貴，維護(hù)成本高。-樣本限制，需提前標(biāo)記。-操作復(fù)雜，需專業(yè)人員操作。五、論述題答案1.激光顯微切割技術(shù)在福州市人民醫(yī)院病理科的應(yīng)用前景：福州市人民醫(yī)院病理科可利用激光顯微切割技術(shù)精準(zhǔn)分離腫瘤微環(huán)境細(xì)胞，研究腫瘤侵襲機(jī)制、免疫逃逸等，推動精準(zhǔn)診斷與治療。此外，該技術(shù)可支持單細(xì)胞測序，提高基因表達(dá)分析的準(zhǔn)確性，為臨床轉(zhuǎn)化提供數(shù)據(jù)支持。2.激光顯微切割技術(shù)與傳統(tǒng)