2025年高職分子生物學(xué)（分子實驗技術(shù)）下學(xué)期開學(xué)考

（考試時間：90分鐘滿分100分）班級______姓名______一、單項選擇題（總共10題，每題4分，每題只有一個正確答案，請將正確答案填寫在括號內(nèi)）1.以下哪種技術(shù)可用于DNA片段的擴增？（）A.WesternblotB.PCRC.ELISAD.原位雜交2.分子克隆中常用的載體不包括（）。A.質(zhì)粒B.噬菌體C.病毒D.核糖體3.用于檢測蛋白質(zhì)表達水平的技術(shù)是（）。A.SouthernblotB.NorthernblotC.WesternblotD.基因芯片4.以下關(guān)于限制性內(nèi)切酶的說法，錯誤的是（）。A.能識別特定的DNA序列B.可切割DNA分子C.具有特異性D.只作用于RNA5.基因工程中，連接目的基因和載體的酶是（）。A.DNA聚合酶B.逆轉(zhuǎn)錄酶C.限制性內(nèi)切酶D.DNA連接酶6.以下哪種方法可用于DNA測序？（）A.Sanger測序法B.熒光定量PCRC.原位雜交D.蛋白質(zhì)電泳7.分子實驗中，常用的核酸染料是（）。A.考馬斯亮藍B.溴化乙錠C.吉姆薩染料D.蘇木精8.用于RNA提取的試劑是（）。A.蛋白酶KB.酚氯仿C.異丙醇D.以上都是9.以下關(guān)于質(zhì)粒的說法，正確的是（）。A.是染色體外的環(huán)狀雙鏈DNAB.不能自主復(fù)制C.不含抗性基因D.只存在于細菌中10.蛋白質(zhì)純化過程中，常用的離子交換層析介質(zhì)是（）。A.瓊脂糖B.葡聚糖C.離子交換樹脂D.硅膠二、多項選擇題（總共5題，每題6分，每題至少有兩個正確答案，請將正確答案填寫在括號內(nèi)，多選、少選或錯選均不得分）1.分子生物學(xué)實驗中常用的緩沖液有（）。A.Tris-HCl緩沖液B.PBS緩沖液C.檸檬酸緩沖液D.甘氨酸緩沖液2.以下哪些是基因表達載體的組成部分？（）A.啟動子B.終止子C.多克隆位點D.抗性基因3.蛋白質(zhì)電泳常用的凝膠類型有（）。A.SDS凝膠B.Native凝膠C.瓊脂糖凝膠D.聚丙烯酰胺凝膠4.分子克隆中，篩選陽性克隆的方法有（）。A.抗生素抗性篩選B.藍白斑篩選C.酶切鑒定D.測序鑒定5.以下哪些技術(shù)可用于基因功能的研究？（）A.RNA干擾B.基因敲除C.過表達D.基因編輯三、判斷題（總共10題，每題3分，請判斷下列說法的對錯，正確的打“√”，錯誤的打“×”）1.PCR反應(yīng)中需要加入引物。（）2.Southernblot可用于檢測RNA。（）3.限制性內(nèi)切酶切割DNA后產(chǎn)生的末端都是粘性末端。（）4.基因工程中，目的基因只能從基因組DNA中獲取。（）5.蛋白質(zhì)的等電點是其在電場中不移動時的pH值。（）6.核酸分子雜交技術(shù)的原理是堿基互補配對。（）7.質(zhì)?？梢栽诓煌N屬的細胞中復(fù)制。（）8.Westernblot中使用的二抗可以直接結(jié)合目的蛋白。（）9.基因芯片技術(shù)可以同時檢測大量基因的表達。（）10.蛋白質(zhì)純化過程中，純度越高越好。（）四、簡答題（總共2題，每題15分，請簡要回答下列問題）1.簡述PCR技術(shù)的基本原理和反應(yīng)體系。2.請說明蛋白質(zhì)電泳的原理及SDS電泳的特點。五、綜合分析題（總共1題，每題20分，請結(jié)合所學(xué)知識分析并回答問題）在分子生物學(xué)實驗中，你成功構(gòu)建了一個重組質(zhì)粒，包含目的基因和抗性基因。請設(shè)計實驗步驟來驗證目的基因是否成功插入到質(zhì)粒中，并檢測其在宿主細胞中的表達情況。要求詳細描述實驗方法、預(yù)期結(jié)果及分析。答案：一、單項選擇題1.B2.D3.C4.D5.D6.A7.B8.D9.A10.C二、多項選擇題1.ABCD2.ABCD3.ABD4.ABCD5.ABCD三、判斷題1.√2.×3.×4.×5.√6.√7.×8.×9.√10.×四、簡答題1.PCR技術(shù)的基本原理是在模板DNA、引物和4種脫氧核苷酸存在的條件下，依賴于DNA聚合酶的酶促合成反應(yīng)。反應(yīng)體系包括模板DNA、引物、dNTP、TaqDNA聚合酶、緩沖液等。2.蛋白質(zhì)電泳的原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小、電荷等差異在電場中移動速度不同而分離。SDS電泳的特點是加入SDS使蛋白質(zhì)變性并帶上負電荷，消除了蛋白質(zhì)原有電荷差異，主要根據(jù)分子量大小分離蛋白質(zhì)。五、綜合分析題實驗方法：首先提取重組質(zhì)粒進行酶切鑒定，看是否能切出預(yù)期大小片段。然后將重組質(zhì)粒導(dǎo)入宿主細胞，通過抗生素抗性篩選陽性克隆。提取陽性克隆的質(zhì)粒再次酶切驗證。接著提取細胞總RNA進行逆轉(zhuǎn)錄PCR檢測目的基因轉(zhuǎn)錄情況，提取細胞總蛋白進行Westernblo