2025年病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全技能提升培訓(xùn)題庫含答案1.【單選】依據(jù)WS/T442-2024，BSL-3實(shí)驗(yàn)室核心區(qū)與半污染區(qū)之間的最小負(fù)壓梯度應(yīng)維持為A.5Pa?B.10Pa?C.15Pa?D.20Pa答案：B2.【單選】在VeroE6細(xì)胞上分離猴痘病毒時(shí)，下列哪項(xiàng)個(gè)人防護(hù)裝備屬于“強(qiáng)制佩戴”級(jí)別A.一次性醫(yī)用口罩?B.N95防顆粒物呼吸器?C.外科帽?D.護(hù)目鏡答案：B3.【單選】2025版《高致病性病原微生物菌（毒）種運(yùn)輸容器》標(biāo)準(zhǔn)中，主容器與輔助容器之間填充吸附材料的最小量應(yīng)≥A.菌液體積的1倍?B.菌液體積的2倍?C.菌液體積的3倍?D.菌液體積的5倍答案：C4.【單選】對(duì)耐三氯生的鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行消毒效果驗(yàn)證時(shí)，選用0.1%過氧乙酸作用時(shí)間至少為A.1min?B.5min?C.10min?D.30min答案：B5.【單選】實(shí)驗(yàn)室發(fā)生100μL含SARS-CoV-2標(biāo)本溢灑于生物安全柜表面，首選的消毒順序是A.覆蓋吸附→5000mg/L含氯消毒→75%乙醇脫氯B.直接噴灑75%乙醇→紫外照射30minC.覆蓋吸附→0.5%過氧乙酸→無菌水擦拭D.覆蓋吸附→1%過氧化氫→無菌水擦拭答案：A6.【單選】下列哪項(xiàng)不是BSL-2+升級(jí)要素A.定向氣流?B.自動(dòng)閉門器?C.雙門互鎖傳遞窗?D.Ⅲ級(jí)生物安全柜答案：D7.【單選】使用微粒子霧化過氧化氫（aHP）對(duì)25m3BSL-3實(shí)驗(yàn)室終末消毒時(shí)，推薦H?O?濃度與循環(huán)時(shí)間分別為A.3mL/m3，30min?B.6mL/m3，60min?C.10mL/m3，90min?D.12mL/m3，120min答案：B8.【單選】對(duì)新型冠狀病毒OmicronXBB.1.5毒株進(jìn)行動(dòng)物感染實(shí)驗(yàn)時(shí)，動(dòng)物生物安全級(jí)別應(yīng)為A.ABSL-1?B.ABSL-2?C.ABSL-3?D.ABSL-4答案：C9.【單選】2025年起，運(yùn)輸類AUN2814標(biāo)本時(shí)，托運(yùn)人須隨附的新版文件是A.危險(xiǎn)品分類鑒定書?B.感染性物質(zhì)運(yùn)輸知情同意書?C.托運(yùn)人聲明書（多語言二維碼版）?D.海關(guān)通關(guān)單答案：C10.【單選】在生物安全柜內(nèi)操作高濃度結(jié)核分枝桿菌懸液時(shí)，為防止氣溶膠擴(kuò)散，下列做法錯(cuò)誤的是A.預(yù)先在操作區(qū)墊一次性吸附墊B.使用帶濾芯吸頭C.操作后立刻打開柜門取出廢棄物D.操作結(jié)束后靜置5min再擦拭消毒答案：C11.【單選】對(duì)BSL-3實(shí)驗(yàn)室排風(fēng)HEPA過濾器進(jìn)行原位檢漏，標(biāo)準(zhǔn)氣溶膠為A.DOP?B.PAO-4?C.NaCl?D.碘化鉀答案：B12.【單選】下列關(guān)于“菌（毒）種保藏雙鑰匙管理”的描述，正確的是A.實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人與后勤保障部各持一把B.實(shí)驗(yàn)員與生物安全官各持一把C.課題組長(zhǎng)與單位法人各持一把D.兩名經(jīng)授權(quán)的技術(shù)人員各持一把答案：D13.【單選】在-80℃超低溫冰箱中保存病毒株時(shí)，推薦使用的保藏管材質(zhì)為A.聚丙烯螺旋蓋外旋管?B.聚乙烯壓蓋管?C.玻璃安瓿?D.聚苯乙烯凍存管答案：A14.【單選】對(duì)CO?培養(yǎng)箱進(jìn)行真菌污染監(jiān)測(cè)，最敏感的指示菌為A.白色念珠菌?B.黑曲霉?C.銅綠假單胞菌?D.金黃色葡萄球菌答案：B15.【單選】2025年新版《實(shí)驗(yàn)室生物安全事件應(yīng)急預(yù)案》要求，單位級(jí)演練至少A.每季度1次?B.每半年1次?C.每年1次?D.每?jī)赡?次答案：B16.【單選】對(duì)BSL-2實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的銳器廢物，最長(zhǎng)暫存時(shí)間不得超過A.12h?B.24h?C.48h?D.72h答案：B17.【單選】在生物安全柜內(nèi)使用酒精燈，可能導(dǎo)致A.氣流擾動(dòng)與高溫破壞HEPA?B.增加氧氣濃度?C.降低相對(duì)濕度?D.產(chǎn)生CO?答案：A18.【單選】對(duì)耐碳青霉烯類腸桿菌目細(xì)菌（CRE）進(jìn)行滅活，下列哪種消毒劑效果最差A(yù).0.2%過氧乙酸?B.2%戊二醛?C.0.55%鄰苯二甲醛?D.0.1%氯己定答案：D19.【單選】對(duì)BSL-3實(shí)驗(yàn)室廢水進(jìn)行熱力消毒，推薦溫度與時(shí)間為A.60℃，30min?B.80℃，10min?C.95℃，3min?D.121℃，15min答案：C20.【單選】在實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)（LIMS）中，對(duì)高致病性菌毒種實(shí)行“雙人雙鎖”電子門禁，系統(tǒng)日志保存期限不少于A.1年?B.3年?C.5年?D.10年答案：C21.【多選】下列哪些屬于BSL-3實(shí)驗(yàn)室必備的個(gè)人防護(hù)裝備A.正壓防護(hù)服?B.電動(dòng)送風(fēng)過濾式呼吸器?C.雙層手套?D.防水圍裙?E.安全眼鏡答案：ABC22.【多選】對(duì)含氯消毒劑進(jìn)行濃度監(jiān)測(cè)，可采用A.碘量法?B.DPD比色法?C.試紙法?D.硫代硫酸鈉滴定法?E.紫外分光光度法答案：ABCD23.【多選】發(fā)生實(shí)驗(yàn)室獲得性感染后，應(yīng)立即啟動(dòng)的處置流程包括A.現(xiàn)場(chǎng)隔離?B.醫(yī)學(xué)評(píng)估?C.暴露源檢測(cè)?D.事件報(bào)告?E.心理干預(yù)答案：ABCDE24.【多選】下列哪些操作可在BSL-2實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行A.臨床標(biāo)本核酸提取?B.結(jié)核分枝桿菌藥物敏感性試驗(yàn)?C.甲型H1N1流感病毒雞胚接種?D.炭疽芽孢桿菌革蘭染色?E.大腸桿菌克隆擴(kuò)增答案：ACE25.【多選】關(guān)于生物安全柜性能檢測(cè)，需年度完成的項(xiàng)目有A.氣流模式可視化?B.下降風(fēng)速與流入風(fēng)速?C.高效過濾器檢漏?D.噪聲與照度?E.紫外強(qiáng)度答案：ABCD26.【多選】運(yùn)輸U(kuò)N3373B類標(biāo)本時(shí)，外包裝必須標(biāo)注A.托運(yùn)人信息?B.24h應(yīng)急電話?C.向上箭頭?D.生物危害標(biāo)志?E.溫度要求答案：ABC27.【多選】對(duì)實(shí)驗(yàn)室常用的一次性醫(yī)用口罩進(jìn)行密合性簡(jiǎn)易自檢，可采用A.正壓呼氣法?B.負(fù)壓吸氣法?C.甜味劑嗅辨法?D.熒光示蹤法?E.熱水蒸汽法答案：ABC28.【多選】下列哪些屬于生物安全二級(jí)屏障A.自動(dòng)閉門器?B.通風(fēng)系統(tǒng)?C.污水處理系統(tǒng)?D.個(gè)人防護(hù)裝備?E.高效過濾器答案：ABCE29.【多選】對(duì)BSL-3實(shí)驗(yàn)室核心區(qū)進(jìn)行環(huán)境監(jiān)控，應(yīng)包括A.溫度?B.相對(duì)濕度?C.負(fù)壓值?D.照度?E.氣流方向答案：ABCE30.【多選】關(guān)于菌毒種銷毀，正確的有A.采用121℃高壓蒸汽30min?B.使用6%過氧化氫常溫浸泡2h?C.經(jīng)審批后雙人監(jiān)督?D.留存影像與記錄?E.直接倒入下水道答案：ABCD31.【判斷】在BSL-2實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行新冠病毒培養(yǎng)時(shí)，只要佩戴N95口罩即可，無需使用生物安全柜。答案：錯(cuò)誤32.【判斷】對(duì)BSL-3實(shí)驗(yàn)室排風(fēng)HEPA過濾器進(jìn)行更換前，必須采用袋進(jìn)袋出方式。答案：正確33.【判斷】使用紫外燈對(duì)生物安全柜內(nèi)部消毒，可完全替代化學(xué)消毒。答案：錯(cuò)誤34.【判斷】運(yùn)輸高致病性病原微生物時(shí)，須提前向省級(jí)衛(wèi)健委申請(qǐng)準(zhǔn)運(yùn)證，且一次一批。答案：正確35.【判斷】實(shí)驗(yàn)室發(fā)生銳器傷后，應(yīng)立即擠壓傷口至出血后再?zèng)_洗消毒。答案：正確36.【判斷】對(duì)含埃博拉病毒樣本進(jìn)行離心，可在BSL-2實(shí)驗(yàn)室使用密閉轉(zhuǎn)子完成。答案：錯(cuò)誤37.【判斷】生物安全柜運(yùn)行期間，可暫時(shí)關(guān)閉風(fēng)機(jī)以節(jié)約能源。答案：錯(cuò)誤38.【判斷】對(duì)實(shí)驗(yàn)室廢棄物進(jìn)行高壓滅菌時(shí)，物品裝載量不得超過滅菌室容積的80%。答案：正確39.【判斷】菌毒種保藏冰箱應(yīng)實(shí)行“雙人雙鎖”，但可為同一人設(shè)置兩把鑰匙。答案：錯(cuò)誤40.【判斷】在ABSL-3實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行小鼠感染實(shí)驗(yàn)，操作人員須穿戴正壓防護(hù)服。答案：正確41.【填空】BSL-3實(shí)驗(yàn)室核心區(qū)相對(duì)于相鄰緩沖間的最小負(fù)壓應(yīng)維持在________Pa以上。答案：-1542.【填空】對(duì)含氯消毒劑進(jìn)行濃度稀釋時(shí)，常用公式為C?V?=C?V?，其中C?表示________。答案：原液的濃度43.【填空】運(yùn)輸U(kuò)N2814A類感染性物質(zhì)時(shí)，主容器與輔助容器之間應(yīng)填充不少于________倍體積的吸附材料。答案：344.【填空】對(duì)BSL-2實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的含核酸廢液，常用________mg/L含氯消毒劑作用30min后排放。答案：250045.【填空】生物安全柜下降風(fēng)速標(biāo)準(zhǔn)范圍為________m/s。答案：0.25–0.5046.【填空】對(duì)高壓滅菌效果進(jìn)行監(jiān)測(cè)，常用的生物指示劑為________。答案：嗜熱脂肪芽孢桿菌47.【填空】實(shí)驗(yàn)室獲得性感染報(bào)告時(shí)限為________小時(shí)。答案：248.【填空】對(duì)BSL-3實(shí)驗(yàn)室廢水進(jìn)行熱力消毒，最低溫度為________℃。答案：9549.【填空】菌毒種保藏冰箱溫度應(yīng)控制在________℃至________℃之間。答案：-60，-8050.【填空】對(duì)BSL-3實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行氣密性檢測(cè)，采用________法。答案：壓力衰減（或煙霧示蹤）51.【簡(jiǎn)答】簡(jiǎn)述BSL-3實(shí)驗(yàn)室核心區(qū)發(fā)生200mLSARS-CoV-2培養(yǎng)液溢灑的應(yīng)急處置流程。答案：1.立即停止實(shí)驗(yàn)，保持安全柜運(yùn)行；2.通知同室人員撤離并關(guān)閉房門；3.穿戴正壓防護(hù)服、雙層手套、防水靴套；4.用吸附材料覆蓋溢灑物，噴灑5000mg/L含氯消毒劑，作用30min；5.將污染物收集于生物危害袋，表面消毒后高壓滅菌；6.用75%乙醇脫氯，再用無菌水擦拭；7.填寫事件報(bào)告，24h內(nèi)上報(bào)生物安全委員會(huì)；8.對(duì)暴露人員進(jìn)行醫(yī)學(xué)評(píng)估與隨訪。52.【簡(jiǎn)答】列舉五種BSL-2實(shí)驗(yàn)室升級(jí)為BSL-2+需改造的關(guān)鍵設(shè)施。答案：1.安裝定向氣流系統(tǒng)；2.增設(shè)自動(dòng)閉門器；3.配置雙門互鎖傳遞窗；4.核心區(qū)域獨(dú)立排風(fēng)與高效過濾；5.出入口安裝可視對(duì)講與門禁系統(tǒng)。53.【簡(jiǎn)答】說明對(duì)BSL-3實(shí)驗(yàn)室排風(fēng)HEPA過濾器進(jìn)行原位檢漏的步驟。答案：1.關(guān)閉送風(fēng)，保持排風(fēng)運(yùn)行；2.在過濾器上游注入PAO-4氣溶膠，濃度20–80μg/L；3.使用光度計(jì)在下游掃描，探頭距過濾面2–5cm，速度≤5cm/s；4.若局部穿透率＞0.01%，判定為漏點(diǎn)；5.對(duì)漏點(diǎn)進(jìn)行密封或更換，重新檢測(cè)至合格；6.記錄數(shù)據(jù)并簽字存檔。54.【簡(jiǎn)答】闡述實(shí)驗(yàn)室“雙人雙鎖”管理制度的核心要素。答案：1.兩把鑰匙分別由兩名經(jīng)授權(quán)人員保管；2.同時(shí)到場(chǎng)方可開啟；3.系統(tǒng)記錄開門時(shí)間與人員；4.不得私自復(fù)制或轉(zhuǎn)借；5.丟失立即上報(bào)并更換鎖芯；6.每季度進(jìn)行權(quán)限審核。55.【簡(jiǎn)答】說明對(duì)耐碳青霉烯類肺炎克雷伯菌污染臺(tái)面時(shí)，選擇消毒劑及使用濃度。答案：1.選用0.2%過氧乙酸或2%戊二醛；2.覆蓋吸附材料，噴灑至完全濕潤(rùn)；3.作用時(shí)間≥30min；4.用無菌水擦拭去除殘留；5.干燥后再次采樣監(jiān)測(cè)，陰性方可恢復(fù)使用。56.【案例分析】某BSL-3實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行MERS-CoV動(dòng)物感染實(shí)驗(yàn)，操作員在更換墊料時(shí)被小鼠抓傷，無出血。請(qǐng)分析暴露風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)并給出處置方案。答案：風(fēng)險(xiǎn)等級(jí)：中等（無出血但病毒可在動(dòng)物體內(nèi)高滴度繁殖）。處置：1.立即擠壓傷口至出血，用75%乙醇與碘伏交替消毒；2.報(bào)告生物安全官與單位感染科；3.采集操作員與小鼠咽拭子進(jìn)行MERS-CoV核酸檢測(cè)；4.啟動(dòng)醫(yī)學(xué)觀察，隔離14d，每日測(cè)體溫與癥狀；5.若出現(xiàn)發(fā)熱，立即送定點(diǎn)醫(yī)院隔離治療；6.事件48h內(nèi)上報(bào)省級(jí)衛(wèi)健委；7.對(duì)操作區(qū)進(jìn)行終末消毒；8.修訂動(dòng)物抓取SOP，增加防抓手套與固定器。57.【案例分析】某單位接收一份標(biāo)注為UN3373的疑似猴痘病毒標(biāo)本，運(yùn)輸箱外層無破損，但內(nèi)層輔助容器出現(xiàn)裂痕。請(qǐng)給出現(xiàn)場(chǎng)處理流程。答案：1.禁止開啟，立即轉(zhuǎn)移至BSL-3實(shí)驗(yàn)室緩沖間；2.通知實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人與運(yùn)輸管理部門；3.拍照記錄，填寫異常接收記錄；4.穿戴正壓防護(hù)服，將輔助容器置于不銹鋼托盤；5.用5000mg/L含氯消毒劑噴灑外表面，作用30min；6.將輔助容器與吸附材料一并轉(zhuǎn)入生物危害袋，高壓滅菌；7.對(duì)托盤與緩沖間進(jìn)行終末消毒；8.向托運(yùn)方與上級(jí)主管部門提交書面報(bào)告；9.啟動(dòng)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，必要時(shí)調(diào)整運(yùn)輸協(xié)議。58.【案例分析】某BSL-2實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行結(jié)核分枝桿菌核酸提取，提取后產(chǎn)物擬送至BSL-3實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病毒培養(yǎng)。請(qǐng)說明樣本轉(zhuǎn)運(yùn)要求。答案：1.將核酸產(chǎn)物置于0.2mL帶蓋PCR管，再裝入防漏96孔板；2.用Parafilm密封，放入主容器（帶墊襯）；3.主容器外包裹吸水材料≥3倍體積；4.裝入硬質(zhì)輔助容器，貼UN3373標(biāo)簽；5.填寫標(biāo)本交接單，注明“結(jié)核核酸已滅活”；6.由雙人運(yùn)送，使用專用電梯；7.接收方在BSL-3緩沖間開箱，表面消毒后傳入核心間；8.記錄溫度與交接時(shí)間，保存3年。59.【案例分析】某單位計(jì)劃新建移動(dòng)式BSL-3實(shí)驗(yàn)室用于埃博拉病毒檢測(cè)，請(qǐng)列出三項(xiàng)關(guān)鍵設(shè)計(jì)與驗(yàn)證指標(biāo)。答案：1.車載廂體結(jié)構(gòu)：不銹鋼內(nèi)壁圓弧角，氣密性≤0.5%h-1@±250Pa；2.通風(fēng)系統(tǒng)：送排風(fēng)獨(dú)立，下降風(fēng)速0.35m/s，核心區(qū)負(fù)壓-25Pa，排風(fēng)雙級(jí)HEPA；3.驗(yàn)證指標(biāo)：現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行PAO檢漏、煙霧流型、壓力衰減、生物指示劑滅菌驗(yàn)證，全部合格后方可投入使用。60.【案例分析】某BSL-3實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行禽流感H5N1病毒雞胚培養(yǎng)，孵化期間發(fā)現(xiàn)雞胚全部死亡。請(qǐng)分析可能原因并給出改進(jìn)措施。答案：可能原因：1.病毒毒力過強(qiáng)，接種量過高；2.孵化溫度波動(dòng)大；3.雞胚本身帶菌導(dǎo)致繼發(fā)感染；4.操作過程污染。改進(jìn)措施：1.梯度稀釋病毒，確定適宜EID50；2.每日校準(zhǔn)孵化器溫度與濕度；3.選用SPF級(jí)雞胚，接種前照蛋篩選；4.嚴(yán)格無菌操作，增設(shè)青霉素-鏈霉素抑菌；5.設(shè)置空白對(duì)照，記錄死亡曲線；6.對(duì)死亡雞胚進(jìn)行細(xì)菌分離與PCR鑒定，排除污染。61.【計(jì)算】現(xiàn)有5%過氧乙酸原液，需配制0.2%消毒液10L，問需原液多少毫升？答案：C?V?=C?V?→5%×V?=0.2%×10000mL→V?=400mL需取400mL原液加9600mL水。62.【計(jì)算】某BSL-3實(shí)驗(yàn)室排風(fēng)量為1500m3/h，要求核心區(qū)負(fù)壓-25Pa，漏風(fēng)系數(shù)0.1，求最小送風(fēng)量。答案：送風(fēng)量=排風(fēng)量-漏風(fēng)量=1500-1500×0.1=1350m3/h。63.【計(jì)算】對(duì)1m3空間采用8mL/m3的6%過氧化氫霧化，求實(shí)際H?O?質(zhì)量。答案：8mL×6%=0.48mL純H?O?；密度1.11g/mL→0.48×1.11=0.53g。64.【計(jì)算】某單位每月產(chǎn)生500kg生物廢物，高壓滅菌柜每次最大裝載50kg，滅菌周期90min，每日運(yùn)行8h，求最少需要多少臺(tái)滅菌柜？答案：每日滅菌批次=8×60/90=5.3批；每日處理量=50×5.3=265kg；500/265≈1.89→需2臺(tái)。65.【計(jì)算】若1:100稀釋的病毒液在雞胚上的EID50為10-6.5/0.1mL，求原液滴度。答案：原液滴度=10-6.5+2=10-4.5/0.1mL→10-5.5TCID50/mL。66.【連線】將左側(cè)消毒劑與右側(cè)適用場(chǎng)景連線A.0.1%過氧乙酸??1.手消毒B.75%乙醇????2.BSC表面消毒C.2%戊二醛???3.器械滅菌D.0.5%碘伏???4.皮膚消毒答案：A-2，B-1，C-3，D-467.【排序】將下列BSL-3實(shí)驗(yàn)室啟動(dòng)流程按正確順序排列a.開啟送風(fēng)?b.開啟排風(fēng)?c.自檢報(bào)警系統(tǒng)?d.開啟HEPA消毒?e.人員進(jìn)入答案：c→b→a→d→e68.【配伍】將左側(cè)風(fēng)險(xiǎn)因素與右側(cè)控制措施配伍1.氣溶膠??A.Ⅲ級(jí)生物安全柜2.銳器傷??B.防抓手套3.動(dòng)物抓咬?C.帶濾芯吸頭4.濺灑??D.面屏+防水圍裙答案：1-A，2-C，3-B，4-D69.【圖解題】給出一張生物安全柜氣流示意圖，請(qǐng)指出下降氣流、流入氣流、排風(fēng)HEPA位置。答案：下降氣流：頂部送風(fēng)經(jīng)HEPA垂直向下；流入氣流：前窗開口處外部空氣向內(nèi)；排風(fēng)HEPA：位于柜頂后部，污染空氣經(jīng)HEPA排出。70.【圖解題】給出一張實(shí)驗(yàn)室布局圖，請(qǐng)用箭頭畫出從清潔區(qū)→緩沖間→核心區(qū)的定向氣流方向。答案：清潔區(qū)→緩沖間：氣流向外；緩沖間→核心區(qū)：氣流向內(nèi)；核心區(qū)排風(fēng)：經(jīng)HEPA排出室外。71.【論述】結(jié)合2025年新版《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》，闡述“動(dòng)態(tài)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估”在病原微生物實(shí)驗(yàn)室管理中的實(shí)施路徑，要求800字以上。答案：