臨床生物化學(xué)檢測(cè)方法的

選擇與評(píng)價(jià)第2頁主要內(nèi)容第二章方法評(píng)價(jià)

臨床生化檢驗(yàn)方法的選擇

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臨床生化檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)和性能判定2臨床生化檢驗(yàn)方法的校準(zhǔn)與溯源性

臨床生化檢驗(yàn)方法的測(cè)量不確定度

43第一節(jié)臨床生物化學(xué)檢測(cè)方法的選擇一臨床生物化學(xué)檢測(cè)方法的分級(jí)檢測(cè)方法決定性方法參考方法常規(guī)方法第5頁決定性方法（definitivemethod）也稱為一級(jí)參考方法（primaryreferencemethod)參考方法（referencemethod）也稱為二級(jí)參考方法（secondaryreferencemethod）常規(guī)方法（routinemethod）；推薦方法（recommendedmethod）第6頁

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`準(zhǔn)確度最高，系統(tǒng)誤差最小，經(jīng)過詳細(xì)的研究，沒有發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生誤差的原因或在某些方面不夠明確的方法。決定性方法參考方法

準(zhǔn)確度與精密度已經(jīng)充分證實(shí)的分析方法，干擾因素少，系統(tǒng)誤差與重復(fù)測(cè)定的隨機(jī)誤差相比可以忽略不計(jì)，有適當(dāng)?shù)撵`敏度、特異性及較寬的分析范圍。常規(guī)方法

性能指標(biāo)符合臨床或其他目的需要，有足夠的精密度、準(zhǔn)確度、特異性和適當(dāng)?shù)姆治龇秶医?jīng)濟(jì)實(shí)用。

一臨床生化檢驗(yàn)方法分級(jí)第7頁表2-1臨床生化檢驗(yàn)項(xiàng)目的決定性方法、參考方法、常規(guī)方法項(xiàng)目決定性方法參考方法

常規(guī)方法鈣ID-MS原子吸收分光光度法鄰甲酚酞絡(luò)合酮法、MTB法氯ID-MS、中子活化法電流滴定法硫氰酸汞法、選擇性電極法鎂ID-MS原子吸收分光光度法MTB法鉀ID-MS、中子活化法火焰光度法離子選擇電極法、火焰光度法鈉中子活化法火焰光度法離子選擇電極法、火焰光度法清蛋白-免疫化學(xué)法溴甲酚綠法總蛋白-凱氏定氮法雙縮脲法肌肝ID-MS離子交換層析法苦味酸法、酶法尿素ID-MS尿素酶法二乙酰一肟法、酶法尿酸ID-MS尿酸酶法（紫外）磷鎢酸比色法膽紅素-重氮反應(yīng)法J-G法、釩酸鹽氧化法葡萄糖ID-MS已糖激酶法葡萄糖氧化酶法膽固醇ID-MSAbell-Kendall法酶法甘酒三脂ID-MS變色酸顯色法酶法第8頁

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`（primaryreferencematerials）也稱一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品，與決定性方法平行，用于驗(yàn)證決定性方法、評(píng)價(jià)與校準(zhǔn)參考方法，以及為二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品定值。

原級(jí)參考物質(zhì)次級(jí)參考物質(zhì)

（secondaryreferencematerials）也稱二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品，二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品的定值源于一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品和參考方法，主要用于評(píng)價(jià)常規(guī)方法，也可為質(zhì)控物定值。

常規(guī)校準(zhǔn)品

校準(zhǔn)（calibration）指的是對(duì)由儀器、方法和試劑所組成的檢測(cè)系統(tǒng)的校準(zhǔn)過程。電解質(zhì)、酶類、其他生化指標(biāo)應(yīng)合理選擇校準(zhǔn)品二臨床生化檢驗(yàn)的參考物質(zhì)和校準(zhǔn)品

第9頁標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)品質(zhì)控品一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品用高純化學(xué)物質(zhì)（純度>99.98%）直接通過稱重配制的溶液，是唯一值。一般由國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)計(jì)量局出具證書。二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品某種成分的濃度可用公認(rèn)的參考方法測(cè)定。由參考實(shí)驗(yàn)室或權(quán)威學(xué)術(shù)組織出具證書，如SRM、BCR、IFCC。標(biāo)準(zhǔn)品(standard）可用做校準(zhǔn)品（calibrater），考慮血清成分復(fù)雜、難以避免基質(zhì)效應(yīng)，建議用與新鮮血清相似的介質(zhì)做校準(zhǔn)品，一般由試劑盒供應(yīng)商提供和賦值。校準(zhǔn)品的量值應(yīng)有溯源性，不同測(cè)定系統(tǒng)賦值不同。質(zhì)控品多是成分相對(duì)穩(wěn)定的混合血清，分為定值和非定值、凍干或液體，添加了防腐劑和保護(hù)劑等。定值往往由試劑盒供應(yīng)商委托幾家實(shí)驗(yàn)室在特定測(cè)定系統(tǒng)上測(cè)得的均值和標(biāo)準(zhǔn)差。第10頁標(biāo)準(zhǔn)品與校準(zhǔn)品大多數(shù)定量的方法（分光光度法、電化學(xué)、免疫定量）都需要用標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)，即通過標(biāo)準(zhǔn)比較來計(jì)算。校準(zhǔn)是這些方法定量必經(jīng)的過程。用什么“標(biāo)準(zhǔn)”來校準(zhǔn)？羅氏公司的C.f.a.s（calibratorforautomationsystem），屬于多項(xiàng)校準(zhǔn)品，因使用方便，很多實(shí)驗(yàn)室都在使用。但前提是“指定的測(cè)定系統(tǒng)”。第11頁圖2-2方法分級(jí)與標(biāo)準(zhǔn)品之間的關(guān)系臨床生物化學(xué)常規(guī)檢測(cè)方法的選擇臨床實(shí)驗(yàn)室引入新方法的流程三臨床生物化學(xué)常規(guī)檢測(cè)方法的選擇臨床需求性能要求

精密度、正確度及準(zhǔn)確度、檢測(cè)限、分析測(cè)量范圍和分析特異性

攜帶污染、試劑批間變異、檢測(cè)器的不精密度確?；颊邫z測(cè)結(jié)果臨床可接受

確定檢測(cè)需求探討檢驗(yàn)項(xiàng)目周轉(zhuǎn)時(shí)間、臨床應(yīng)用等關(guān)鍵問題了解臨床醫(yī)生對(duì)關(guān)鍵性能指標(biāo)的要求了解診斷靈敏度和特異性臨床生物化學(xué)常規(guī)檢測(cè)方法的選擇考查候選方法材料人員機(jī)器候選方法的選擇

測(cè)量環(huán)境方法第15頁四檢測(cè)系統(tǒng)的比對(duì)完成一個(gè)項(xiàng)目檢驗(yàn)所涉及的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品、操作程序、質(zhì)量控制、保養(yǎng)計(jì)劃等的組合稱為檢測(cè)系統(tǒng)（testingsystem）。常規(guī)檢測(cè)系統(tǒng)有配套檢測(cè)系統(tǒng)和自建檢測(cè)系統(tǒng)。（一）檢測(cè)系統(tǒng)的概念第16頁

.配套檢測(cè)系統(tǒng)

自建檢測(cè)系統(tǒng)

（二）檢測(cè)系統(tǒng)的分類整個(gè)檢測(cè)系統(tǒng)涉及的各個(gè)部分完全按照指定廠商要求配套使用。若該系統(tǒng)已經(jīng)國(guó)家法定部門認(rèn)證,則使用這樣的檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)臨床樣品進(jìn)行檢驗(yàn)，其結(jié)果具溯源性。實(shí)驗(yàn)室自行建立的檢測(cè)系統(tǒng)，如A制造商的試劑盒、B制造商的校準(zhǔn)品、C制造商分析儀的組合。第17頁①制訂分析質(zhì)量目標(biāo)

②儀器性能評(píng)價(jià)

③確定對(duì)比檢測(cè)系統(tǒng)

內(nèi)容④初步評(píng)價(jià)檢測(cè)系統(tǒng)⑤比對(duì)允許不精密度、允許偏倚和允許總誤差準(zhǔn)確度和精密度

參考系統(tǒng)或公認(rèn)的測(cè)定系統(tǒng)性能指標(biāo)40-100例（二）檢測(cè)系統(tǒng)比對(duì)的實(shí)施步驟可接受性判斷步驟第18頁測(cè)定系統(tǒng)方法學(xué)操作程序校準(zhǔn)品儀器試劑配方和來源測(cè)定系統(tǒng)的關(guān)鍵要素第19頁第19頁

1

2統(tǒng)一方法：以方法學(xué)評(píng)價(jià)為基礎(chǔ)，提出參考方法或推薦方法。統(tǒng)一試劑的主要成分和測(cè)定條件。實(shí)施機(jī)構(gòu)：國(guó)際臨床化學(xué)學(xué)會(huì)、臨檢中心逐級(jí)溯源：常規(guī)校準(zhǔn)品應(yīng)向二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)品、一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)溯源。實(shí)施機(jī)構(gòu)：ISO、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)計(jì)量局、參考實(shí)驗(yàn)室、試劑盒供應(yīng)商、臨床實(shí)驗(yàn)室全球性可比性戰(zhàn)略實(shí)施33保證儀器良好的工作狀態(tài)、嚴(yán)格的操作規(guī)程和質(zhì)量控制、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部測(cè)定系統(tǒng)的比對(duì)、實(shí)驗(yàn)室間的比對(duì)第20頁方法學(xué)的性能指標(biāo)

一

二

三第二節(jié)臨床生化檢驗(yàn)方法的性能評(píng)價(jià)

方法學(xué)性能評(píng)價(jià)的內(nèi)容

方法學(xué)評(píng)價(jià)試驗(yàn)

臨床生物化學(xué)方法學(xué)性能判斷

四實(shí)用性（微量快速）可行性（條件和費(fèi)用）可靠性（準(zhǔn)確特異安全）基本要求方法選擇要求和步驟方法學(xué)評(píng)價(jià)是通過實(shí)驗(yàn)途徑，測(cè)定并評(píng)價(jià)方法的精密度與準(zhǔn)確度，強(qiáng)調(diào)的都是誤差，評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)的過程就是對(duì)誤差的測(cè)定。實(shí)驗(yàn)方法評(píng)價(jià)目的和意義準(zhǔn)確度與偏差系數(shù)精密度與變異系數(shù)靈敏度與檢出限評(píng)價(jià)指標(biāo)一、方法評(píng)價(jià)指標(biāo)特異度與干擾率線性范圍與檢測(cè)范圍實(shí)驗(yàn)誤差1.準(zhǔn)確度與偏差系數(shù)（CB）

測(cè)定值與真值的符合程度，常用不準(zhǔn)確度表示。

偏差系數(shù)（CB）=(真值-x／真值)×100%血糖（5.5mmol/L）5.4mmol/L5.0mmol/L例：2.精密度與變異系數(shù)（CV）

同一標(biāo)本多次測(cè)定值的差異，常用標(biāo)準(zhǔn)差(S)或變異系數(shù)表示。N1=5.4mmol/LN2=5.6mmol/LN3=5.2mmol/LN4=5.3mmol/LN5=5.5mmol/LN6=5.1mmol/LN7=5.4mmol/L血糖（5.5mmol/L）3.靈敏度與檢出限：指化學(xué)反應(yīng)中能檢出的最小值。常用最小檢出量或摩爾消光系數(shù)來表示。血清總蛋白（75g/L）雙縮脲法（0.2-1.7g/L）溴甲酚綠（0.01g/L）紫外法（0.001g/L）免疫熒光法（0.01mg/L）摩爾消光系數(shù)越大,靈敏度越高

4.特異度與干擾率：指分析測(cè)定中只與某一成分發(fā)生反應(yīng)的特性強(qiáng)弱。

血清蛋白（７５g/L）特異性與非特異干擾的區(qū)別酶聯(lián)免疫法（酶與底物,抗原與抗體的特異性結(jié)合）雙縮脲法（肽鍵）

5.線性范圍：指實(shí)驗(yàn)方法所能檢測(cè)標(biāo)本中某物質(zhì)的濃度范圍。A=k·C·L雙縮脲法（0-140g/L

）溴甲酚綠（10-60g/L）血清蛋白（７５g/L）6.實(shí)驗(yàn)誤差（error）：測(cè)定值與真值的差異。誤差系統(tǒng)誤差隨機(jī)誤差恒定系統(tǒng)誤差比例系統(tǒng)誤差偶然誤差過失誤差重復(fù)性試驗(yàn)回收試驗(yàn)干擾試驗(yàn)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)二、方法評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)方法比較試驗(yàn)第31頁回收試驗(yàn)

干擾試驗(yàn)

線性試驗(yàn)

重復(fù)性試驗(yàn)對(duì)比試驗(yàn)檢測(cè)限與檢測(cè)范圍批內(nèi)批間

日內(nèi)日間總不精密度方法學(xué)評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)準(zhǔn)確度目的：考察隨機(jī)誤差，評(píng)價(jià)精密度形式與方法：批內(nèi)重復(fù)實(shí)驗(yàn)；天內(nèi)重復(fù)試驗(yàn)；天間重復(fù)試驗(yàn)分析樣品：采用標(biāo)準(zhǔn)液、控制物溶液、病人標(biāo)本或混合血清均可分析物濃度：在具有決定性意義的濃度重復(fù)次數(shù)：20次以上（一）重復(fù)性試驗(yàn)第33頁1.試驗(yàn)樣品一般選擇2個(gè)，一個(gè)在參考區(qū)間附近，另一個(gè)為異常值2.初步的批內(nèi)精密度評(píng)價(jià)：即一個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定20次，計(jì)算出均值，標(biāo)準(zhǔn)差和變異系數(shù)。用2個(gè)樣品每天測(cè)定2批，批間測(cè)定間隔不得少于2h，每批平行測(cè)定2份，至少共測(cè)定20天，80個(gè)數(shù)據(jù)。每對(duì)結(jié)果間的差（共40個(gè)）代表批內(nèi)差；2批均值之間的差（共20個(gè)）代表批間差；每天4個(gè)結(jié)果的均值（共20個(gè)）代表日間差。每批測(cè)定至少做一個(gè)質(zhì)控。

精密度精密度圖

精密度圖（precisionprofile）以分析物濃度為橫坐標(biāo)，以SD或CV為縱坐標(biāo)繪制的一條函數(shù)關(guān)系曲線。分析物濃度與標(biāo)準(zhǔn)差/變異系數(shù)關(guān)系圖第35頁（二）回收試驗(yàn)所謂回收即評(píng)定方法正確測(cè)定加入常規(guī)樣品中的純分析物的能力。即在未知濃度的常規(guī)樣品中加入一定量的待測(cè)組分，檢測(cè)加入前后該組分的增加量，實(shí)際增加量與理論加入量的比值就是回收率。目的是測(cè)定比例系統(tǒng)誤差。

目的：分析比例系統(tǒng)誤差方法:基礎(chǔ)管回收管XX+b結(jié)果:回收量=回收管量-基礎(chǔ)管量回收率=（回收濃度/加入濃度）

100%回收試驗(yàn)回收試驗(yàn)舉例：偶氮法測(cè)定血清鈣的回收試驗(yàn)樣品制備：1號(hào)：基礎(chǔ)樣品血清2.0ml+蒸餾水0.1ml2號(hào)：低濃度回收管血清2.0ml+4mmol/L鈣標(biāo)準(zhǔn)液0.1ml3號(hào)：高濃度回收管血清2.0ml+25mmol/L鈣標(biāo)準(zhǔn)液0.1ml結(jié)果與計(jì)算：

2號(hào)管加入濃度：40.1/（2.0+0.1）=0.19mmol/L3號(hào)管加入濃度：250.1/（2.0+0.1）=1.19mmol/L基礎(chǔ)樣品低濃度高濃度鈣回收試驗(yàn)結(jié)果(單位mmol/L)樣品管測(cè)定濃度加入濃度回收濃度回收率1號(hào)管2號(hào)管3號(hào)管平均1.701.882.850.191.190.181.1594.75%96.6%95.7%理想回收率為100%。該試驗(yàn)比例誤差為4.3%。注意事項(xiàng)：①操作要規(guī)范,準(zhǔn)確吸量,儀器性能和試劑要好；②加入標(biāo)準(zhǔn)液后最好使試驗(yàn)樣品的被測(cè)濃度達(dá)到醫(yī)學(xué)決定水平濃度；③加入標(biāo)準(zhǔn)液體積要小，一般在10%以內(nèi)，濃度要高;④重復(fù)次數(shù)要適當(dāng),樣品中加入標(biāo)準(zhǔn)液后計(jì)算平均回收率。第40頁（三）干擾試驗(yàn)干擾是指在測(cè)定某分析物時(shí)，受其他非分析物的影響而導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果增高（正干擾）或降低（負(fù)干擾）。根據(jù)干擾的產(chǎn)生原因分為：基質(zhì)效應(yīng)、非特異反應(yīng)、外部干擾物等。干擾試驗(yàn)的設(shè)計(jì)同回收試驗(yàn)，即將不同濃度的干擾物代替純標(biāo)準(zhǔn)品。一般規(guī)定只對(duì)膽紅素、血紅蛋白、脂類做干擾試驗(yàn)。干擾值＝加入干擾物后的測(cè)定值－基礎(chǔ)測(cè)定值

目的:也是衡量候選方法的準(zhǔn)確度，在加入一定濃度的干擾物的條件下，形成的是恒定系統(tǒng)誤差干擾物:被試驗(yàn)的物質(zhì)具有臨床意義,常分析膽紅素、血脂、蛋白、防腐劑、抗凝劑等干擾物濃度:接近正常水平，具有臨床意義干擾試驗(yàn)方法：似回收試驗(yàn)基礎(chǔ)管干擾管XX+b結(jié)果：計(jì)算干擾值和干擾率：干擾值=干擾管濃度-基礎(chǔ)管濃度干擾率=干擾值/基礎(chǔ)管濃度

100%注意事項(xiàng)：①準(zhǔn)確吸量；②加入干擾物的濃度應(yīng)達(dá)到病理標(biāo)本最高濃度；③加入干擾物的體積要小，一般在10%以內(nèi)；④醫(yī)學(xué)決定水平濃度。目的：檢測(cè)系統(tǒng)分析誤差，包括比例系統(tǒng)誤差和恒定系統(tǒng)誤差方法：侯選和比較法同時(shí)進(jìn)行，比較方法的選擇要科學(xué)注意事項(xiàng)：試驗(yàn)樣品數(shù)；重復(fù)分析；有時(shí)間間隔，每次測(cè)定2-5個(gè)樣品，約測(cè)定20天；統(tǒng)計(jì)處理：（四）方法比較試驗(yàn)第45頁（五）線性試驗(yàn)線性試驗(yàn)用來評(píng)價(jià)劑量和反應(yīng)之間的線性關(guān)系，并把呈直線部分確定為線性范圍（linearrange）。線性范圍指檢測(cè)信號(hào)與被測(cè)物濃度呈線性時(shí)的被測(cè)物濃度范圍。1.樣品濃度線性評(píng)價(jià)至少應(yīng)有5個(gè)不同濃度，可選擇低值和高值樣品各一份，低值樣品和高值樣品分別按體積3：1混勻、等份混勻、1:3混勻，形成5個(gè)不同濃度。2..試驗(yàn)方法將不同濃度的樣品（X），隨機(jī)排列，每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定4次（Y），并要求在當(dāng)天完成所有分析。

分析測(cè)量范圍和線性

線性（linearity）是指在分析測(cè)量范圍內(nèi)，測(cè)量值與預(yù)期的分析物濃度（或活性）在數(shù)學(xué)上有明確的直線關(guān)系。

線性范圍（linearrange）是指測(cè)量值與預(yù)期的分析物濃度（或活性）呈直線關(guān)系的范圍。線性范圍、可報(bào)告范圍和分析測(cè)量范圍是不同組織或?qū)I(yè)團(tuán)體對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)或方法在一定范圍內(nèi)給出可靠檢測(cè)結(jié)果能力的描述，表述方式不同但內(nèi)在含義一致。分析測(cè)量范圍和線性分析測(cè)量范圍（analyticalmeasurementrange）又稱為測(cè)量區(qū)間或可報(bào)告范圍，是指在不進(jìn)行任何稀釋、濃縮或其它預(yù)處理等情況下，測(cè)量程序直接測(cè)量樣本，測(cè)量結(jié)果不精密度和偏倚在允許范圍內(nèi)的分析物的濃度（或活性）范圍。

臨床可報(bào)告范圍（clinicallyreportablerange)是指對(duì)樣本進(jìn)行稀釋、濃縮或其他預(yù)處理，以擴(kuò)展直接分析測(cè)量下的分析物濃度（或活性）范圍。分析測(cè)量范圍和線性線性評(píng)價(jià)方法線性評(píng)價(jià)是將樣本進(jìn)行系列稀釋，或使用（具有已知值/已知關(guān)系的）線性評(píng)價(jià)材料，對(duì)測(cè)定值與指定值或稀釋值進(jìn)行回歸分析，評(píng)價(jià)該方法能準(zhǔn)確報(bào)告的最低、最高的濃度范圍，即建立定量測(cè)定方法的分析測(cè)量范圍（線性范圍）。

1.方法學(xué)性能標(biāo)準(zhǔn)及其制定（1）性能指標(biāo)：應(yīng)根據(jù)不同的應(yīng)用目的（篩選、診斷、預(yù)后、監(jiān)測(cè)）而異。由允許分析誤差EA和醫(yī)學(xué)決定水平Xc這兩項(xiàng)內(nèi)容決定。方法性能判斷允許分析誤差（allowableanalyticalerrorEA

）：指95%樣品的允許誤差限度；醫(yī)學(xué)決定水平（medicaldecisionlevel）：用Xc表示，是臨床判斷結(jié)果具有意義的被分析物濃度。（2）性能標(biāo)準(zhǔn)：制定的性能標(biāo)準(zhǔn)，既應(yīng)反映臨床應(yīng)用與解釋結(jié)果的要求[稱為醫(yī)學(xué)效用限度（medicalusefulnesslimits）]，又應(yīng)基本符合實(shí)驗(yàn)室所能達(dá)到的技能狀態(tài)（stateofart）。第52頁系統(tǒng)誤差誤差分類評(píng)價(jià)試驗(yàn)評(píng)價(jià)指標(biāo)理想結(jié)果比例系統(tǒng)誤差回收試驗(yàn)Ea<1/2TEa恒定系統(tǒng)誤差干擾試驗(yàn)干擾值<1/2TEa比例系統(tǒng)誤差方法對(duì)比試驗(yàn)Y=a+bXXc-Yc

<±1/2TEa隨機(jī)誤差重復(fù)性試驗(yàn)（批內(nèi)、批間、日間）、總不精密度總隨機(jī)誤差<1/3TEa三、方法學(xué)性能判斷第53頁表2-3臨床生化檢驗(yàn)方法的誤差及評(píng)價(jià)方法系統(tǒng)誤差誤差分類評(píng)價(jià)試驗(yàn)評(píng)價(jià)指標(biāo)理想結(jié)果比例系統(tǒng)誤差回收試驗(yàn)回收率95-105%恒定系統(tǒng)誤差干擾試驗(yàn)干擾值接近0比例系統(tǒng)誤差方法對(duì)比試驗(yàn)Y=a+bXb接近1.0恒定系統(tǒng)誤差a接近0隨機(jī)誤差重復(fù)性試驗(yàn)（批內(nèi)、批間、日間）、總不精密度CV<3%二方法學(xué)性能評(píng)價(jià)內(nèi)容第三節(jié)校準(zhǔn)和溯源性參考區(qū)間1.概念建立參考區(qū)間的流程從參考個(gè)體組成的參考人群中，選擇一定數(shù)量的參考個(gè)體組成參考樣本組↓通過測(cè)定某個(gè)指標(biāo)獲得該組所有個(gè)體的檢測(cè)結(jié)果（即參考值

）↓經(jīng)過統(tǒng)計(jì)處理獲得參考值的分布狀態(tài)（正態(tài)或偏態(tài)）并計(jì)算參考限參考區(qū)間↓根據(jù)參考限確定參考區(qū)間。

參考限：通常設(shè)定為包含中間95%的參考值。大多數(shù)項(xiàng)目以參考值分布的2.5%為下限，97.5%為上限；如果只有單側(cè)參考限具有臨床意義，可以確定5%或95%為參考限。參考區(qū)間1.概念

參考區(qū)間（referenceinterval）即參考上限和參考下限之間的參考值分布范圍。對(duì)于單側(cè)參考限有臨床意義的項(xiàng)目，如參考上限，則參考區(qū)間為0~參考上限。

基本概念1.校準(zhǔn)

概念：在規(guī)定條件下，為確定測(cè)量?jī)x器或測(cè)量系統(tǒng)所指示的量值，或?qū)嵨锪烤?包括參考物質(zhì)等)所代表的值，與對(duì)應(yīng)的由標(biāo)準(zhǔn)所復(fù)現(xiàn)的量值之間關(guān)系的一組操作。臨床檢驗(yàn)中的校準(zhǔn)：在規(guī)定條件下，通過測(cè)定已知濃度/活性的分析物（即校準(zhǔn)品/標(biāo)準(zhǔn)品），建立試劑/儀器系統(tǒng)與分析物濃度/活性之間關(guān)系的過程。校準(zhǔn)函數(shù)測(cè)量函數(shù)基本概念2.溯源性

概念：

指測(cè)量結(jié)果或標(biāo)準(zhǔn)量值的屬性，它使測(cè)量結(jié)果或標(biāo)準(zhǔn)量值通過一條不間斷的比較鏈與給定的參考標(biāo)準(zhǔn)聯(lián)系起來。基本概念國(guó)際單位制(SI)單位(基本或?qū)С鰡挝唬﹪?guó)際通用，是溯源鏈最高等級(jí)僅25～30種化學(xué)定義明確的小分子化合物有國(guó)際約定的參考測(cè)量程序和國(guó)際約定的參考物質(zhì)有國(guó)際約定的參考測(cè)量程序，但無參考物質(zhì)有國(guó)際約定的參考物質(zhì)及定值方案，但無參考測(cè)量程序既無國(guó)際約定的參考測(cè)量程序，也無參考物質(zhì)。不能溯源至SI單位溯源至SI單位3.溯源性類型

參考測(cè)量系統(tǒng)2.參考測(cè)量程序

概念：是經(jīng)過充分研究的測(cè)量程序，給出的值的測(cè)量不確定度適合其預(yù)期用途，尤其是評(píng)價(jià)測(cè)量相同量的其他測(cè)量程序的正確度和描述參考物質(zhì)特性的用途。

分級(jí)：一級(jí)參考測(cè)量程序(primaryreferencemeasurementprocedure)是具有最高計(jì)量學(xué)特性的參考測(cè)量程序，其操作能夠被充分描述和理解，可用國(guó)際單位制單位表示完整的不確定度，結(jié)果無需參考相同量的測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)而被接受。適合一級(jí)參考物質(zhì)(純物質(zhì))的鑒定，不適合生物基質(zhì)樣本的分析

二級(jí)參考測(cè)量程序(secondaryreferencemeasurementprocedure)是經(jīng)充分論證，由一或多個(gè)一級(jí)參考物質(zhì)校準(zhǔn)的測(cè)量程序，其不確定度能滿足特定要求，能用于低一級(jí)測(cè)量程序評(píng)價(jià)和參考物質(zhì)定值?！m合復(fù)雜生物樣品分析——“參考方法”參考測(cè)量系統(tǒng)3.參考實(shí)驗(yàn)室

參考測(cè)量實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)稱參考實(shí)驗(yàn)室，是運(yùn)行參考測(cè)量程序、提供有給定不確定度的測(cè)量結(jié)果的實(shí)驗(yàn)室。參考實(shí)驗(yàn)室有很高的技術(shù)和管理要求，需要通過特定的程序才能成為參考實(shí)驗(yàn)室。對(duì)于同一檢驗(yàn)項(xiàng)目，參考實(shí)驗(yàn)室形成網(wǎng)絡(luò)并定期進(jìn)行測(cè)量比對(duì)，以保證參考測(cè)量的有效性。質(zhì)量目標(biāo)的設(shè)定方式評(píng)估分析性能對(duì)具體醫(yī)學(xué)決定的影響評(píng)估分析性能對(duì)一般醫(yī)學(xué)決定的影響專業(yè)建議或指南提出國(guó)家法規(guī)或室間質(zhì)量評(píng)價(jià)組織提出根據(jù)當(dāng)前技術(shù)水平設(shè)定與臨床需要相關(guān)的密切程度下降質(zhì)量目標(biāo)的設(shè)定方式溯源鏈的結(jié)構(gòu)與工作原理

1.ISO/DIS

17511溯源鏈

計(jì)量機(jī)構(gòu)參考實(shí)驗(yàn)室制造商終末用戶參考物質(zhì)的互換性和基質(zhì)效應(yīng)

1.參考物質(zhì)的互換性

概念：指用常規(guī)方法和參考方法測(cè)量參考物質(zhì)所得結(jié)果的數(shù)字關(guān)系，與上述方法測(cè)量實(shí)際臨床樣品所得結(jié)果的數(shù)字關(guān)系的一致程度，直接影響量值傳遞的正確性。2.產(chǎn)生參考物質(zhì)互換性問題的原因

(1)分析物的存在形式不同——制備參考物質(zhì)時(shí)使用動(dòng)物來源的樣本或添加外源性分析物——互換性隨著分析物濃度增大而變差

（2）基質(zhì)效應(yīng)指被測(cè)量以外的某種樣品特性（簡(jiǎn)稱影響量）對(duì)測(cè)量及被測(cè)量的值的影響。——分析干擾：影響量本身不產(chǎn)生測(cè)量信號(hào)，但它增大或減小被測(cè)量的測(cè)量值?！獪y(cè)量過程的非特異性：影響量本身產(chǎn)生測(cè)量信號(hào)。參考物質(zhì)的互換性和基質(zhì)效應(yīng)產(chǎn)生參考物質(zhì)互換性問題參考物質(zhì)互換性問題的處理（1）選擇基質(zhì)與實(shí)際樣品盡量接近的參考物

（2）選擇分析特異性較好、對(duì)基質(zhì)不過分敏感的常規(guī)測(cè)量方法。（3）進(jìn)行量值溯源的確認(rèn)，以判斷參考物質(zhì)的互換性是否影響量值傳遞的正確性。（4）參考物質(zhì)的互換性不可接受時(shí)，需進(jìn)行修正或選擇其他參考物質(zhì)。

分析物的存在形式不同基質(zhì)效應(yīng)（1）參考物質(zhì)的加工處理（2）參考方法與常規(guī)方法的檢測(cè)原理不同第四節(jié)測(cè)量不確定度基本概念

測(cè)量不確定度是一個(gè)與測(cè)量結(jié)果有關(guān)的非負(fù)參數(shù)，能夠合理地表征賦予被測(cè)量量值的分散性。標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量測(cè)量結(jié)果的不確定度往往有多個(gè)來源，對(duì)每個(gè)不確定度來源評(píng)定的標(biāo)準(zhǔn)差，稱為標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量。合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度當(dāng)測(cè)量結(jié)果是由若干個(gè)輸入量求得時(shí)，測(cè)量結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)不確定度由各輸入量的標(biāo)準(zhǔn)不確定度用方差和/或協(xié)方差方法合并得到，稱為合成標(biāo)準(zhǔn)不確定度。擴(kuò)展不確定度又稱“總不確定度”，是確定測(cè)量結(jié)果區(qū)間的量，合理賦予被測(cè)量值在一定概率下包含于此區(qū)間。

基本概念

測(cè)量不確定度的評(píng)定：

（1）A類評(píng)定對(duì)在規(guī)定測(cè)量條件下測(cè)得的量值用統(tǒng)計(jì)分析的方法進(jìn)行的測(cè)量不確定度分量的評(píng)定，其結(jié)果可以用標(biāo)準(zhǔn)差表征。該類評(píng)定需要在規(guī)定條件下進(jìn)行多次重復(fù)性或復(fù)現(xiàn)性試驗(yàn)，從而得到一組或多組觀測(cè)列并對(duì)觀測(cè)列進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，其結(jié)果較客觀、可信。

（2）B類評(píng)定并非由統(tǒng)計(jì)方法評(píng)定，而是根據(jù)經(jīng)驗(yàn)或其他信息假設(shè)的概率分布估算的標(biāo)準(zhǔn)不確定度分量，也可用標(biāo)準(zhǔn)差表征。該類評(píng)定需要有可靠的數(shù)據(jù)來源，或有充分的經(jīng)驗(yàn)、專業(yè)知識(shí)以及理論分析能力，方法簡(jiǎn)單，但主觀性、經(jīng)驗(yàn)性較強(qiáng)。A類評(píng)定不可用時(shí)，可考慮采用B類評(píng)定。無論A類評(píng)定還是B類評(píng)定都應(yīng)注意不能遺漏分量，也不能重復(fù)計(jì)算分量。測(cè)量不確定度的評(píng)定方法