ICS67.050

X04

DB22

吉林省地方標(biāo)準(zhǔn)

DB22/T1232—2011

人參中噻蟲嗪殘留量的測(cè)定-高效液相色譜

法

Determinationofthiamethoxamresidueinginseng-methodofhighperformance

liquidchromatograghy

2011-12-01發(fā)布2011-12-15實(shí)施

吉林省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局發(fā)布

DB22/T1232—2011

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1-2009給出的規(guī)則起草。

本標(biāo)準(zhǔn)由吉林省農(nóng)業(yè)委員會(huì)提出并歸口。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)（農(nóng)業(yè)部參茸產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心）。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人：李月茹、許煊煒、陳丹、孟欣欣、張敏、陳穎、馬浴繽。

I

DB22/T1232—2011

人參中噻蟲嗪殘留量的測(cè)定-高效液相色譜法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了液相色譜儀測(cè)定人參(PanaxginsengC.A.Mey.)中噻蟲嗪殘留量的方法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于鮮人參、生曬參、紅參中噻蟲嗪殘留量的測(cè)定。

本標(biāo)準(zhǔn)方法的定量限為0.1mg/kg。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅注日期的版本適用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。

GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法。

《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版。

3原理

人參中噻蟲嗪殘留量的測(cè)定采用丙酮和石油醚提取，氟羅里硅土柱層析凈化，高效液相色譜紫外檢

測(cè)器進(jìn)行測(cè)定，外標(biāo)法定量。

4試劑與材料

除非另有說明，所有試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。

4.1丙酮（C3H6O）：用前重蒸。

4.2石油醚（60℃～90℃）：用前重蒸。

4.3丙酮+石油醚（v/v）=1+4。

4.4丙酮+石油醚（v/v）=3+7。

4.5乙腈（C2H3N）：色譜純（HPLC）。

4.6冰乙酸(C2H4O2)：色譜純（HPLC）。

4.7無水硫酸鈉（Na2SO4）：300℃干燥2h，冷卻后裝入磨口玻璃瓶中，干燥器內(nèi)保存。

4.8固相萃取小柱：氟羅里硅土柱（Florisil）1000mg/6mL。

4.9濾膜：0.22μm濾膜。

4.10噻蟲嗪標(biāo)準(zhǔn)品見表1。

1

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表1噻蟲嗪標(biāo)準(zhǔn)品

中文名英文名CAS號(hào)純度

噻蟲嗪Thiamethoxam153719-23-4≥99.7

4.11噻蟲嗪標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制：準(zhǔn)確稱取一定量（精確至0.1mg）噻蟲嗪標(biāo)準(zhǔn)品,用乙腈做溶劑，配成

1000μg/mL噻蟲嗪標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，貯存在-18℃冰箱中。準(zhǔn)確吸取適量的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，用乙腈稀釋配制成

0.1、0.2、0.5、1、2、5μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液，需現(xiàn)用現(xiàn)配。

5儀器設(shè)備

5.1液相色譜儀：配有紫外檢測(cè)器。

5.2旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。

5.3粉碎機(jī)。

5.4全玻璃蒸餾裝置。

5.5恒溫水浴鍋。

5.6氮吹儀。

6試樣的制備

6.1試樣制備

取不少于100g的人參干樣(鮮樣組織攪碎機(jī)攪碎后60℃烘干)用粉碎機(jī)粉碎，過60目篩，充分混勻

后裝瓶密封，-18℃保存，備用。

7分析步驟

7.1提取

稱取1g（精確至0.0001g）人參試樣，用濾紙包裹，置于索氏提取器中。用丙酮+石油醚（見4.3）

浸泡過夜，80℃恒溫水浴鍋回流提取8h。將提取液轉(zhuǎn)移至250mL分液漏斗中，用15mL石油醚分三

次洗滌索氏提取器與殘?jiān)?，合并濾液置分液漏斗中，待處理。

7.2凈化

7.2.1濃縮

向分液漏斗中加入2％硫酸鈉水溶液20mL，振搖，靜置分層后，棄去水層，有機(jī)層過無水硫酸鈉

層析柱轉(zhuǎn)至250mL棃形瓶中，并用15mL石油醚分三次洗滌硫酸鈉合并洗液至棃形瓶中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀

減壓濃縮至近干，2mL丙酮+石油醚（見4.4）定容，蓋上瓶塞，待凈化。

7.2.2凈化

氟羅里硅土小柱先用5mL石油醚預(yù)淋洗，當(dāng)溶劑液面達(dá)上層篩板表面時(shí)，再倒入上述（見7.2.1）

2

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待凈化溶液，用10mL丙酮+石油醚（見4.4）分兩次(5mL、5mL)沖洗棃形瓶，沖洗液淋洗氟羅里硅

土小柱，接收淋洗液并棄去，再用10mL乙腈洗脫小柱，收集洗脫液于刻度試管中。將刻度試管置于

氮吹儀上，水浴溫度80℃，氮吹蒸發(fā)至近干，用乙腈準(zhǔn)確定容至2mL，過0.22μm濾膜，待測(cè)。

7.2.3參考色譜條件

7.2.3.1檢測(cè)器:紫外檢測(cè)器。

7.2.3.2檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm。

7.2.3.3色譜柱：XDB-C18250mm×4.6mm×5μm或相當(dāng)者。

7.2.3.4流動(dòng)相：乙腈+水（0.2%乙酸）=20+80。

7.2.3.5流速：1.0mL/min。

7.2.3.6柱溫箱：30℃。

7.2.3.7進(jìn)樣體積：10μL。

7.2.4測(cè)定

分別吸取10μL標(biāo)準(zhǔn)工作液和凈化后樣品溶液（見7.2.2）注入液相色譜儀中，外標(biāo)法定量，噻蟲嗪

標(biāo)準(zhǔn)溶液譜圖參見附錄A。

7.2.5空白試驗(yàn)

除不加試樣外采用完全相同的試劑、設(shè)備和分析步驟進(jìn)行平行測(cè)定。

8分析結(jié)果計(jì)算

8.1定性分析

測(cè)得的樣品溶液（見7.2.2）中保留時(shí)間（RT）分別與標(biāo)準(zhǔn)溶液噻蟲嗪的保留時(shí)間（RT）相比較，

如果樣品溶液中保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)溶液噻蟲嗪的保留時(shí)間相差都在±5%內(nèi)均可認(rèn)定為噻蟲嗪。對(duì)于有檢

出的樣品用第二根極性不同色譜柱或LC-MS-MS定性，避免產(chǎn)生假陽性。

8.2定量結(jié)果計(jì)算

人參樣品中噻蟲嗪殘留量（以原樣計(jì)）計(jì)算如(1)式：

c′A′V′V

ω=11′2......................(1)

m′A2′V2

式中：

ω——人參樣品的噻蟲嗪殘留量,單位為毫克每千克（mg/kg）；

c——標(biāo)準(zhǔn)溶液中噻蟲嗪的濃度，單位為微克每毫升（μg/mL）；

A1——樣品測(cè)定液中噻蟲嗪的峰面積；

A2——標(biāo)準(zhǔn)溶液中噻蟲嗪的峰面積；

V——樣品提取液的體積，單位為毫升（mL）；

V1——標(biāo)準(zhǔn)溶液的進(jìn)樣體積，單位為微升（μL）；

3

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V2——樣品溶液的進(jìn)樣體積，單位為微升（μL）；

m——試料的質(zhì)量，單位為克（g）。

9精密度

在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)試結(jié)果的絕對(duì)差值不大于這兩個(gè)測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值的

15%。

4

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AA

附錄A

（資料性附錄）

噻蟲嗪標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖

A.1噻蟲嗪標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖