生物研發(fā)專員崗位招聘考試試卷及答案一、填空題（每題1分，共10分）1.PCR技術(shù)的關(guān)鍵酶是______。2.原核表達(dá)載體中，IPTG誘導(dǎo)的啟動(dòng)子常用______。3.細(xì)胞培養(yǎng)常用的血清是______血清。4.蛋白質(zhì)電泳常用的凝膠是______膠。5.連接目的基因和載體的酶是______。6.哺乳動(dòng)物細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法除脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染外，還有______。7.酶的Km值越小，對(duì)底物親和力越______。8.細(xì)菌感受態(tài)細(xì)胞制備常用試劑是______。9.WesternBlot檢測(cè)目標(biāo)蛋白的探針是______。10.發(fā)酵工程常用碳源除葡萄糖外，還有______。二、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.可用于真核細(xì)胞表達(dá)的載體是（）A.pUC18B.pET-28aC.pcDNA3.1D.pBR3222.PCR退火溫度比引物Tm值低（）A.2-5℃B.5-10℃C.10-15℃D.15-20℃3.細(xì)胞培養(yǎng)防污染常用抗生素是（）A.青霉素+鏈霉素B.慶大霉素C.紅霉素D.四環(huán)素4.蛋白質(zhì)分子量測(cè)定常用（）A.瓊脂糖電泳B.SDSC.紙層析D.離子交換層析5.CRISPR/Cas9中sgRNA的作用是（）A.切割DNAB.結(jié)合目標(biāo)DNAC.激活Cas9D.修復(fù)DNA6.發(fā)酵溶氧濃度（DO）單位通常是（）A.mg/LB.%C.mmol/LD.μg/L7.屬于免疫細(xì)胞的是（）A.HEK293B.CHOC.JurkatD.Vero8.蛋白質(zhì)純化常用親和標(biāo)簽不包括（）A.His標(biāo)簽B.GFP標(biāo)簽C.FLAG標(biāo)簽D.以上都是9.細(xì)菌生長(zhǎng)對(duì)數(shù)期特點(diǎn)是（）A.生長(zhǎng)緩慢B.生長(zhǎng)速率恒定C.死亡＞生長(zhǎng)D.適應(yīng)環(huán)境10.基因表達(dá)定量常用（）A.普通PCRB.實(shí)時(shí)熒光定量PCRC.瓊脂糖電泳D.酶切鑒定三、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.常用DNA提取方法有（）A.酚-氯仿抽提法B.試劑盒法C.堿裂解法D.鹽析法2.蛋白質(zhì)表達(dá)系統(tǒng)包括（）A.E.coli原核系統(tǒng)B.酵母真核系統(tǒng)C.昆蟲(chóng)細(xì)胞系統(tǒng)D.哺乳動(dòng)物細(xì)胞系統(tǒng)3.PCR反應(yīng)組成成分包括（）A.模板DNAB.引物C.dNTPD.Taq酶4.細(xì)胞培養(yǎng)基本條件包括（）A.37℃溫度B.5%CO?C.無(wú)菌環(huán)境D.適宜pH5.基因克隆步驟包括（）A.目的基因獲取B.載體構(gòu)建C.轉(zhuǎn)化/轉(zhuǎn)染D.鑒定6.酶抑制劑類型包括（）A.競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑B.非競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑C.不可逆抑制劑D.激活劑7.發(fā)酵工程步驟包括（）A.菌種選育B.培養(yǎng)基配制C.發(fā)酵控制D.產(chǎn)物純化8.WesternBlot步驟包括（）A.電泳B.轉(zhuǎn)膜C.封閉D.抗體孵育9.細(xì)胞凍存液成分包括（）A.血清B.DMSOC.培養(yǎng)基D.抗生素10.屬于生物制品的是（）A.疫苗B.單抗C.重組蛋白藥物D.抗生素四、判斷題（每題2分，共20分）1.Taq酶具有3'-5'外切酶活性。（）2.細(xì)胞培養(yǎng)中血清可提供生長(zhǎng)因子。（）3.質(zhì)粒是細(xì)菌染色體外環(huán)狀雙鏈DNA。（）4.實(shí)時(shí)熒光定量PCR可同時(shí)擴(kuò)增和定量。（）5.酶的最適溫度是特征常數(shù)，不隨時(shí)間變化。（）6.原核表達(dá)系統(tǒng)可對(duì)蛋白進(jìn)行糖基化修飾。（）7.電穿孔轉(zhuǎn)染適用于原核和真核細(xì)胞。（）8.瓊脂糖電泳可分離不同大小DNA片段。（）9.發(fā)酵pH下降可通過(guò)添加NaOH調(diào)節(jié)。（）10.CRISPR/Cas9只能敲除不能敲入基因。（）五、簡(jiǎn)答題（每題5分，共20分）1.簡(jiǎn)述PCR反應(yīng)的基本原理。2.簡(jiǎn)述重組蛋白表達(dá)的基本流程。3.簡(jiǎn)述細(xì)胞培養(yǎng)防污染的關(guān)鍵措施。4.簡(jiǎn)述WesternBlot的基本步驟。六、討論題（每題5分，共10分）1.原核（E.coli）和真核（CHO）表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)缺點(diǎn)對(duì)比。2.發(fā)酵過(guò)程中如何優(yōu)化溶氧濃度提高產(chǎn)物產(chǎn)量？答案部分一、填空題答案1.TaqDNA聚合酶2.lac啟動(dòng)子3.胎牛4.聚丙烯酰胺（SDS）5.DNA連接酶6.電穿孔7.高8.CaCl?9.特異性抗體10.淀粉二、單項(xiàng)選擇題答案1.C2.B3.A4.B5.B6.B7.C8.D9.B10.B三、多項(xiàng)選擇題答案1.ABC2.ABCD3.ABCD4.ABCD5.ABCD6.ABC7.ABCD8.ABCD9.ABCD10.ABC四、判斷題答案1.×2.√3.√4.√5.×6.×7.√8.√9.√10.×五、簡(jiǎn)答題答案1.PCR原理：利用DNA雙鏈復(fù)制特性，經(jīng)變性（94℃解旋）、退火（引物結(jié)合模板）、延伸（Taq酶合成子鏈）三步循環(huán)，實(shí)現(xiàn)目的片段指數(shù)級(jí)擴(kuò)增。20-30次循環(huán)后可獲得大量目標(biāo)DNA。2.重組蛋白表達(dá)流程：①獲取目的基因；②構(gòu)建重組載體（插入載體啟動(dòng)子下游）；③轉(zhuǎn)化/轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞；④誘導(dǎo)表達(dá)（如IPTG）；⑤細(xì)胞裂解；⑥蛋白純化（親和層析）；⑦活性鑒定（ELISA/酶活檢測(cè)）。3.防污染措施：①無(wú)菌操作（超凈臺(tái)+口罩手套）；②培養(yǎng)基過(guò)濾除菌；③添加青霉素+鏈霉素；④定期觀察細(xì)胞狀態(tài)；⑤器材高壓滅菌；⑥不同細(xì)胞系分開(kāi)操作，試劑專用。4.WesternBlot步驟：①樣品制備（提取總蛋白）；②SDS電泳；③轉(zhuǎn)膜（NC/PVDF膜）；④封閉（5%脫脂牛奶）；⑤一抗孵育；⑥二抗孵育；⑦顯色（ECL）；⑧條帶分析（蛋白表達(dá)量）。六、討論題答案1.優(yōu)缺點(diǎn)對(duì)比：-原核（E.coli）：優(yōu)點(diǎn)→表達(dá)快、成本低、易操作；缺點(diǎn)→無(wú)真核修飾（糖基化）、易形成包涵體。-真核（CHO）：優(yōu)點(diǎn)→正確折疊/修飾、分泌表達(dá)易純化；缺點(diǎn)→周期長(zhǎng)、成本高、操作復(fù)雜。選擇依據(jù)：簡(jiǎn)單酶選原核，治療性單