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1豬鏈球菌研究進展2豬鏈球菌(Streptococcussuis)豬鏈球菌是鏈球菌屬的一個種,有35個血清型,最常見的對人和動物致病的為2型,屬于動物源性病原體,呈世界性分布,自上世紀(jì)50年代以來,荷蘭、英國、加拿大、澳大利亞、新西蘭、比利時、巴西、丹麥、西班牙、德國、日本和中國臺灣省等先后均有報道,不僅給世界養(yǎng)豬業(yè)造成很大的威脅,還嚴(yán)重危害人的生命安全豬
腦膜炎,敗血癥,
關(guān)節(jié)炎,心內(nèi)膜炎肺炎
(不常見)人:
?
職業(yè)病
?腦膜炎,敗血癥,中毒性休克新近在中國暴發(fā)豬鏈球菌引起的疾病FromSegura,M.,G.andM.Gottschalk.4豬鏈球菌感染自1968年首次報道豬鏈球菌的人間病例后,國外共報告了200余例人間感染。我國1998年~1999年,在江蘇和浙江省部分縣市先后發(fā)生了人間感染。并從病人和病豬中分離出豬鏈球菌2型菌株。5豬帶菌情況分析豬鏈球菌2型廣泛存在于豬的呼吸道中,豬活體扁桃體棉試子檢查檢出率可達50%以上。一般認(rèn)為,豬群是否會發(fā)生豬鏈球菌病與其帶菌率的高低并無直接的關(guān)系。究其原因可能與不同的2型菌株的致病力存在明顯差異有關(guān),而這種差異與各菌株的毒力因子是直接相關(guān)的。我們應(yīng)該把高致病性的豬鏈球菌、低致病性或非致病性的豬鏈球菌區(qū)別開來。2005年農(nóng)業(yè)部報導(dǎo),11萬頭豬發(fā)病。6豬鏈球菌的毒力基因莢膜多糖Capsularpolysaccharide(CPS):
溶菌酶釋放相關(guān)蛋白(muramidase-releasedprotein,MRP)細(xì)胞外蛋白因子(extracellularfactor,EF)豬溶血素(suilysin)黏附蛋白7關(guān)于毒力的爭論上述毒力基因去掉任何一個,菌株毒力下降。去掉或改變?nèi)魏我欢位颍涠玖赡芟陆?。歐洲菌株:認(rèn)為毒力基因編碼毒素北美菌株:從病豬分離出無毒力基因菌株現(xiàn)未從健康人分離到豬鏈2型菌株,在其它動物也不常見。在豬間,主要是腦膜炎型,少數(shù)是中毒休克型。8監(jiān)測工作感染途徑:腸道呼吸道血液(直接入血)不能只考慮2型,不能忽略無毒力基因毒株,要特別注意種豬場的母豬,8000x5000xAdhesionofS.suis
tomacrophagesFromSegura,M.,G.andM.Gottschalk.0510152025303540455030min1h2h3hIncubationtime%of
toxicity**P=0.001豬鏈2型的巨噬細(xì)胞毒性FromSegura,M.,G.andM.Gottschalk.S.suissuilysin-S.suissuilysin+Suilysin-mediatedtoxicitytophagocytesFromSegura,M.,G.andM.Gottschalk.腦脊液血BBB豬鏈球菌腦膜炎的發(fā)病機理sly-sly+sly+
滲透性高濃度豬鏈球菌入侵13MA1A2B1B2C9903MA1A2B1B2C9903cps2Agenegenus-specific16s注:A1為5號豬脾的培養(yǎng)物,A2為5號豬脾的菌懸液;
B1為4號豬血固體培養(yǎng)物,B2為4號豬血液體培養(yǎng)物,C為人尸解脾臟液體培養(yǎng)物14MA1A2B1B2C空白圖二mrp基因檢測結(jié)果A1為5號豬脾的培養(yǎng)物,A2為5號豬脾的菌懸液;B1為4號豬血固體培養(yǎng)物,B2為4號豬血液體培養(yǎng)物,C為人尸解脾臟液體培養(yǎng)物15圖四、人脾臟樣品二次PCR結(jié)果2,16SrRNA,3,cps2A,4,mrp16上圖:1從左向右:CPA2A,2-7,分別是從尸解標(biāo)本肺組織分離的6個單個菌落;2、11-14,尸解脾臟標(biāo)本的單個菌落下圖:2-5尸解肝臟標(biāo)本的4個單個菌落,6為陽性對照;11,13-14,6床患者全血標(biāo)本的4個單個菌落。17Multilocussequencetyping(MLST)方法分析7個保守基因:cpn60,recA,dpr,aroA,thrA,gki,andmutS
上述基因分別編碼a60-kDachaperonin,aputativeperoxideresistanceprotein,ahomologousrecombinationfactor,a5-enolpyruvylshikimate3-phosphatesynthase,anaspartokinase/homoserinedehydrogenase,aglucosekinase,andaDNAmismatchrepairenzyme.
King,etal.JClinMicrobiol.2002;40:3671–80.
18
King,etal.JClinMicrobiol.2002;40:3671–80.
擴增MLST分析基因的引物序列19
King,etal.JClinMicrobiol.2002;40:3671–80.
將PCR產(chǎn)物測序,比較后得到的編碼20患者分離菌株的ST型包括ST1,ST6,ST7,andST84(ST1complex)orST25(ST29complex)
ST1包括10株.豬鏈
2
從病人分離法國(n=4),英國(n=1),香港
(n=5),
ST25從加拿大病人分離,僅有3個血清型,有未被認(rèn)識的毒力基因。ST6從荷蘭病
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