檢驗科生化檢驗操作細則演講人：日期:06安全與維護目錄01準備工作規(guī)范02標本處理流程03檢驗操作步驟04質量控制措施05結果分析與報告01準備工作規(guī)范標本接收與登記要求標本完整性檢查接收標本時需核對患者信息、標本類型及容器標識是否完整，確保無漏液、破損或污染。溶血、脂血或黃疸標本需備注并評估是否影響檢測結果。信息錄入與追溯采用雙人核對制度錄入標本信息至LIS系統(tǒng)，生成唯一標識條碼。異常標本（如量不足、抗凝不當）需記錄拒收原因并通知臨床重新采集。保存與轉運規(guī)范根據(jù)不同檢測項目要求分類存放（如冷藏、避光），并記錄接收時間。需離心標本應在規(guī)定轉速和時間下處理，避免細胞成分干擾。試劑與儀器準備標準試劑質量控制每日檢查試劑庫存、有效期及外觀（沉淀、變色等），新批號試劑需進行校準和比對試驗。開瓶后標注啟用日期，避免交叉污染。質控品檢測每日運行高、低值質控品，結果需在允許范圍內(nèi)方可開展檢測。若失控需排查原因（如試劑失效、溫度偏差）并填寫糾正措施報告。執(zhí)行開機自檢、光度計校準及空白測試，記錄光電信號穩(wěn)定性。每周清潔比色杯、管道及采樣針，定期更換易損耗部件（如密封圈）。儀器校準與維護環(huán)境條件控制步驟溫濕度監(jiān)控實驗室需維持溫度20-25℃、濕度30-70%，使用校準后的溫濕度計實時記錄數(shù)據(jù)。超限時啟動空調(diào)或除濕設備調(diào)整。生物安全防護干擾因素排除操作臺每日紫外線消毒30分鐘，生物廢棄物分類存放于專用容器。離心機需配平衡管，避免氣溶膠擴散。避免強電磁設備鄰近放置，儀器接地良好。檢測期間關閉門窗減少空氣流動對微量加樣的影響。02標本處理流程標本離心與分離方法離心速度與時間控制根據(jù)不同檢測項目要求，嚴格設定離心轉速（如3000rpm）和時長（如10分鐘），確保血清或血漿與血細胞有效分離，避免溶血或纖維蛋白干擾。使用無菌移液槍或吸管吸取上清液時，避免觸碰沉淀層，防止細胞成分混入；分離后的標本需立即轉移至標記清晰的專用樣本管，避免交叉污染。脂血或溶血標本需記錄并備注，必要時采用高速離心或過濾法預處理，確保檢測結果準確性。分離操作規(guī)范特殊標本處理標本保存與轉運細則溫度與時效要求生化標本需根據(jù)檢測項目特性選擇冷藏（2-8℃）或冷凍（-20℃以下）保存，如血糖標本需2小時內(nèi)檢測，而血脂類可冷藏保存24小時。轉運容器標準化信息核對與交接使用防漏、防震的專用轉運箱，內(nèi)置冰袋或干冰維持低溫環(huán)境，轉運過程中避免劇烈震蕩或倒置，防止標本性狀改變。轉運前需雙人核對標本編號、患者信息及檢測項目，填寫轉運記錄單，確保全程可追溯。123不合格標本判定標準如遇黃疸、乳糜或藥物干擾標本，需采用空白校正、稀釋法或特殊試劑消除干擾，并在報告中備注說明。干擾因素處理危急值復檢流程對檢測結果異常（如血鉀>6.5mmol/L）的標本，需立即復檢并追溯原始標本狀態(tài)，確認無誤后啟動危急值報告程序。對凝血不全、量不足、容器錯誤或標識模糊的標本，需登記為“拒收標本”，并立即通知臨床科室重新采集。異常標本處理原則03檢驗操作步驟試劑儲存條件控制確保生化試劑嚴格按說明書要求存放于避光、恒溫環(huán)境中，避免反復凍融導致活性降低或變質。定量移液精度要求使用校準后的移液器精確量取試劑，誤差需控制在±1%范圍內(nèi)，避免因體積偏差影響反應體系平衡。添加順序與混勻方法遵循“緩沖液→底物→樣本”的添加順序，采用渦旋振蕩或輕柔顛倒混勻，防止氣泡產(chǎn)生干擾吸光度檢測。交叉污染防控措施不同項目試劑瓶及移液吸頭需獨立使用，操作間隔需用去離子水清洗移液器三次以上。生化試劑添加規(guī)范根據(jù)檢測項目特性設置37℃±0.5℃恒溫反應槽，酶促反應時間精確至秒級，避免非特異性反應干擾。反應溫度與時間設定按檢測頻率優(yōu)化樣本/試劑位點分配，高頻項目試劑置于優(yōu)先讀取區(qū)，縮短探針移動路徑提升效率。樣本盤與試劑盤布局01020304每日開機后執(zhí)行光電校正、波長校準及空白基線校準，確保分光光度計光路系統(tǒng)穩(wěn)定性。開機自檢與校準流程設置吸光度突變、反應延遲等異常參數(shù)的實時監(jiān)測閾值，觸發(fā)報警后自動暫停檢測并提示人工復核。異常報警閾值配置儀器操作與參數(shù)設置監(jiān)測反應進程中的OD值變化趨勢，識別非線性反應、底物耗盡等異常曲線，必要時終止檢測重新上樣。每20個檢測樣本插入1組質控品，通過Westgard規(guī)則判斷批內(nèi)精密度，超出2SD范圍立即追溯原因。在340nm波長下監(jiān)測反應液透光率，發(fā)現(xiàn)絮狀沉淀或懸浮物時啟動離心程序，排除脂血/溶血樣本干擾。對雙試劑終點法項目，需確認第二試劑加入后反應平臺期持續(xù)時間≥30秒，否則延長讀數(shù)時間或調(diào)整判讀點。反應過程監(jiān)控要點動力學曲線實時分析質控樣本插入頻率反應體系濁度評估終點法判定標準驗證04質量控制措施質控品使用與校準優(yōu)先選擇與待測樣本基質匹配的質控品，嚴格遵循說明書要求的儲存條件（如避光、低溫等），避免反復凍融導致穩(wěn)定性下降。質控品選擇與儲存每日開機后需進行儀器校準，并使用至少兩個濃度水平的校準品驗證標準曲線線性，確保檢測系統(tǒng)處于最佳狀態(tài)。校準頻率與標準曲線驗證每批次樣本檢測前后均需運行質控品，高頻率檢測項目（如急診項目）應增加質控檢測次數(shù)，防止儀器漂移。質控品檢測頻次010203誤差分析與校正方法系統(tǒng)誤差識別通過Levey-Jennings質控圖觀察趨勢性偏移或持續(xù)偏高/偏低現(xiàn)象，排查試劑批號更換、光源老化或校準失效等潛在原因。隨機誤差處理針對確認的誤差來源，采取更換試劑、重新校準或維護儀器部件等措施，并記錄完整的故障排查與處理流程。對超出±2SD的離散點需立即復測質控品，若仍異常則暫停檢測，檢查加樣針堵塞、比色杯污染或環(huán)境溫濕度波動等問題。糾正措施實施日常質控記錄要求電子化記錄規(guī)范使用LIS系統(tǒng)實時錄入質控數(shù)據(jù)，包括檢測時間（避免具體日期）、操作者、質控值、SD及CV結果，確保數(shù)據(jù)不可篡改且可追溯。異常值報告制度對連續(xù)3次質控超標的項目需填寫《質控偏差報告表》，提交技術主管審核并啟動糾正預防措施（CAPA）。紙質備份存檔每月匯總打印質控圖表并簽字確認，按項目分類保存，存檔期限需符合實驗室認證標準。05結果分析與報告數(shù)據(jù)解讀與驗證標準確保檢驗儀器輸出的原始數(shù)據(jù)完整且無異常波動，需核對吸光度、反應曲線等關鍵參數(shù)是否符合預設標準范圍。儀器原始數(shù)據(jù)核查將當日質控樣本的檢測結果與實驗室累積質控數(shù)據(jù)進行對比，驗證精密度和準確度是否在允許偏差范圍內(nèi)。針對年齡、性別等特定人群調(diào)整參考區(qū)間，避免因標準不匹配導致的誤判，如兒童堿性磷酸酶水平通常高于成人。質控結果比對結合患者病史、用藥情況及其他檢驗指標，評估生化結果是否符合生理或病理邏輯，避免孤立解讀單項數(shù)據(jù)。臨床相關性分析01020403參考區(qū)間適用性報告生成與審核流程自動化報告模板配置通過LIS系統(tǒng)預設標準化報告模板，自動填充檢測項目、結果、單位及參考值，減少人工輸入錯誤風險。初級檢驗人員完成初核后，由資深技師進行技術復核，最終由科室負責人或授權醫(yī)師簽發(fā)，確保報告權威性。對超出危急值范圍的指標（如血鉀>6.5mmol/L）進行醒目標注，并觸發(fā)系統(tǒng)自動通知臨床科室的應急流程。采用數(shù)字簽名技術記錄審核人員操作軌跡，支持報告全生命周期追溯，滿足合規(guī)性要求。三級審核制度危急值標注與預警電子簽名與追溯異常結果處理機制復檢規(guī)則觸發(fā)根據(jù)預設規(guī)則（如DeltaCheck、極值報警）自動提示復檢，對同一項目進行重復檢測或更換方法學驗證。01020304樣本質量評估排查溶血、脂血或凝血等干擾因素，必要時要求重新采集樣本，并在報告中備注可能影響結果的樣本缺陷。多學科會診協(xié)作對難以解釋的異常結果（如無法歸因的高血鈣），聯(lián)合臨床醫(yī)生、藥師等開展跨學科討論，明確后續(xù)處理方案。記錄與改進閉環(huán)詳細記錄異常結果的處理過程及根本原因分析，定期匯總案例更新SOP，優(yōu)化檢驗流程降低同類問題發(fā)生率。06安全與維護生物安全防護規(guī)則個人防護裝備要求操作人員必須穿戴一次性手套、口罩、防護服及護目鏡，接觸高危樣本時需升級至生物安全柜內(nèi)操作，確保體液或氣溶膠無暴露風險。所有待檢樣本需視為潛在傳染源，禁止直接用手接觸破損容器，離心前必須檢查試管密封性，避免氣溶膠擴散污染環(huán)境。發(fā)生樣本泄漏時立即啟動消毒程序，使用含氯消毒劑覆蓋污染區(qū)域，靜置后清除，并上報生物安全委員會備案。樣本處理規(guī)范應急處理流程每日基礎維護生化分析儀每日運行前后需執(zhí)行外部清潔，使用無絨布蘸取75%乙醇擦拭進樣區(qū)、觸摸屏及機械臂，防止交叉污染。周期性深度校準每周對分光光度計進行波長校準，每月檢查比色杯透光率，每季度由工程師校驗加樣精度，確保檢測結果重復性誤差＜1%。故障預警機制設備內(nèi)置傳感器實時監(jiān)測電壓、溫度等參數(shù)，異常數(shù)據(jù)自動觸發(fā)報警并暫停運行，需工程師介入排查后方可重啟