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文檔簡介

微生物檢驗作業(yè)指導書編制一、概述

微生物檢驗作業(yè)指導書是規(guī)范微生物檢驗操作流程、確保檢驗結果準確性和可靠性的重要文件。本指導書旨在為檢驗人員提供標準化的操作步驟、質量控制措施和注意事項,以保障微生物檢驗工作的規(guī)范化和高效化。

二、編制目的

(一)統(tǒng)一檢驗標準

(二)提高檢驗效率

優(yōu)化檢驗步驟,減少不必要的操作,縮短檢驗周期。

(三)確保檢驗質量

三、適用范圍

本指導書適用于食品、藥品、環(huán)境、水質等各類樣品的微生物檢驗工作。

四、檢驗前的準備

(一)人員準備

1.檢驗人員需經過專業(yè)培訓,熟悉微生物檢驗的基本原理和操作規(guī)范。

2.操作前需洗手消毒,穿戴潔凈的工作服、口罩和手套。

(二)設備準備

1.確保微生物培養(yǎng)箱、超凈工作臺、高壓滅菌鍋等設備運行正常。

2.檢查培養(yǎng)基、試劑、稀釋液等耗材是否在有效期內,并按標準配制。

(三)樣品準備

1.樣品采集需遵循無菌操作,避免污染。

2.樣品應盡快處理,若無法立即檢驗,需冷藏保存(溫度4℃±2℃)。

3.根據樣品類型選擇合適的稀釋方法,例如:

(1)固體樣品:研磨法或均質法。

(2)液體樣品:直接稀釋或系列稀釋法。

五、檢驗操作流程

(一)樣品處理

1.**稱量樣品**:精確稱取10g(或10mL)樣品置于無菌均質杯中。

2.**稀釋樣品**:加入90mL無菌生理鹽水,充分混勻。

3.**系列稀釋**:按10倍梯度進行系列稀釋,直至獲得適當濃度的樣品液。

(二)平板培養(yǎng)

1.**傾注平板**:取1mL稀釋液加入無菌平皿,加入已熔化的培養(yǎng)基(溫度45℃±1℃),快速混勻并傾倒。

2.**涂布平板**:待培養(yǎng)基凝固后,用涂布棒將樣品液均勻涂布在平板表面。

3.**培養(yǎng)**:將平板倒置放入培養(yǎng)箱,恒溫培養(yǎng)(如35℃±2℃,72±2小時)。

(三)菌落計數(shù)

1.**計數(shù)標準**:選擇菌落生長均勻的平板,每皿計數(shù)3個區(qū)域(直徑3cm)。

2.**計算公式**:

\[\text{菌落形成單位(CFU/g或CFU/mL)}=\frac{\text{平均菌落數(shù)}\times\text{稀釋倍數(shù)}}{\text{樣品量(g或mL)}}\]

3.**記錄結果**:以對數(shù)形式記錄(如≥2.0×10?CFU/g)。

六、質量控制措施

(一)陽性對照

每次檢驗需設置陽性對照,確保培養(yǎng)基和操作過程無問題。

(二)陰性對照

使用無菌生理鹽水進行陰性對照,檢測操作過程中的污染情況。

(三)重復性檢驗

對可疑結果進行重復檢驗,確保結果一致性。

七、結果報告

(一)報告內容

1.樣品信息:名稱、編號、檢驗日期等。

2.檢驗方法:采用的標準和方法。

3.檢驗結果:菌落計數(shù)、合格判定等。

4.結論:是否符合相關標準要求。

(二)報告格式

采用統(tǒng)一格式,包括文字描述和圖表(如菌落照片)。

八、注意事項

(一)無菌操作

所有操作需在超凈工作臺進行,避免交叉污染。

(二)避免污染

使用無菌吸管、接種環(huán)等工具,并定期更換。

(三)安全防護

處理有毒培養(yǎng)基時需佩戴防護手套和護目鏡。

九、附錄

(一)培養(yǎng)基配制表

(二)常用稀釋液配制方法

(三)檢驗設備維護記錄表

本指導書由檢驗部門負責解釋和修訂,每年至少更新一次。

**一、概述**

微生物檢驗作業(yè)指導書是規(guī)范微生物檢驗操作流程、確保檢驗結果準確性和可靠性的重要文件。本指導書旨在為檢驗人員提供標準化的操作步驟、質量控制措施和注意事項,以保障微生物檢驗工作的規(guī)范化和高效化。檢驗結果的準確性直接關系到產品質量、安全性和有效性,因此,嚴格執(zhí)行本指導書至關重要。本指導書涵蓋了從樣品接收到結果報告的全過程,旨在減少人為誤差,提高檢驗工作的可重復性。

**二、編制目的**

(一)統(tǒng)一檢驗標準

確保所有檢驗人員在相同條件下進行操作,使用統(tǒng)一的檢驗方法、培養(yǎng)基和判定標準,從而保證檢驗結果的可比性和一致性。標準化的操作流程有助于減少操作差異帶來的誤差。

(二)提高檢驗效率

(三)確保檢驗質量

建立嚴格的質量控制體系,包括陽性對照、陰性對照、設備校準、人員培訓等,從各個環(huán)節(jié)保障檢驗結果的準確性和可靠性,降低假陽性或假陰性的風險。

**三、適用范圍**

本指導書適用于食品、藥品、化妝品、環(huán)境、水質等各類樣品的微生物檢驗工作。不同類型的樣品在處理方法、培養(yǎng)基選擇、檢驗指標等方面可能存在差異,檢驗人員應根據具體樣品類型和檢驗目的,選擇相應的檢驗方法和本指導書中的相關操作步驟。

**四、檢驗前的準備**

(一)人員準備

1.檢驗人員需經過專業(yè)培訓,熟悉微生物檢驗的基本原理、操作規(guī)范和相關標準。培訓內容應包括無菌操作技術、培養(yǎng)基制備、微生物接種、培養(yǎng)、計數(shù)、結果判定等。

2.操作前需進行手部衛(wèi)生處理,包括洗手并使用70-80%酒精進行手部消毒,穿戴潔凈的工作服、口罩和手套。長發(fā)需束起,避免頭發(fā)掉落污染樣品。

3.檢驗人員應定期進行健康檢查,患有傳染性疾病的人員不得從事微生物檢驗工作。

(二)設備準備

1.**微生物培養(yǎng)箱**:檢查培養(yǎng)箱的溫度和濕度是否在設定范圍內(通常溫度為35℃±2℃,濕度為50%-60%),定期校準溫度控制器。

2.**超凈工作臺**:確保超凈工作臺潔凈度達到ISO5級或以上,定期進行清潔和消毒(如使用70-80%酒精擦拭),檢查紫外燈是否正常工作。

3.**高壓滅菌鍋**:檢查滅菌鍋的壓力和溫度是否達到設定值,定期進行生物指示劑測試,確保滅菌效果。

4.**顯微鏡**:檢查顯微鏡的照明系統(tǒng)和聚焦是否正常,確保能夠清晰觀察微生物形態(tài)。

5.**天平**:檢查天平的精度是否滿足稱量要求(通常為0.1mg),定期進行校準。

6.**移液器**:檢查移液器的準確性,定期進行校準,確保移取體積的準確性。

7.**高壓滅菌鍋**:檢查滅菌鍋的壓力和溫度是否達到設定值,定期進行生物指示劑測試,確保滅菌效果。

(三)樣品準備

1.**樣品采集**:樣品采集需遵循無菌操作,避免污染。采集工具(如取樣勺、注射器)應使用前滅菌,使用后及時清洗并重新滅菌。

2.**樣品保存**:樣品應盡快處理,若無法立即檢驗,需冷藏保存(溫度4℃±2℃),并注明樣品采集日期和時間。

3.**樣品處理**:根據樣品類型選擇合適的處理方法:

(1)**固體樣品**:對于塊狀樣品,需先進行破碎處理,然后通過研磨或均質化使其成為均勻的粉末狀。對于粉末狀樣品,可直接進行稱量。

(2)**液體樣品**:對于均勻的液體樣品,可直接進行稀釋。對于不均勻的液體樣品,需進行充分混勻后取樣。

(3)**半固體樣品**:需先進行融化處理,然后進行稀釋。

(4)**表面樣品**:使用無菌棉簽擦拭樣品表面,然后將棉簽放入無菌生理鹽水中進行稀釋。

4.**樣品稀釋**:根據樣品污染程度選擇合適的稀釋方法,例如:

(1)**10倍系列稀釋**:將樣品依次用無菌生理鹽水稀釋10倍,直至獲得適當濃度的樣品液。

(2)**直接接種**:對于污染較重的樣品,可直接接種到選擇性培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。

**五、檢驗操作流程**

(一)樣品處理

1.**稱量樣品**:精確稱取10g(或10mL)樣品置于無菌均質杯中。稱量時需使用無菌天平,避免樣品灑落。

2.**稀釋樣品**:加入90mL無菌生理鹽水,使用無菌移液器精確加入,充分混勻?;靹蚍绞娇梢允鞘褂镁|器高速攪拌1分鐘,或使用渦旋混合器混合1分鐘。

3.**系列稀釋**:按10倍梯度進行系列稀釋,例如:取1mL稀釋液加入新的無菌均質杯中,加入9mL無菌生理鹽水,混勻;再取1mL該稀釋液加入新的無菌均質杯中,加入9mL無菌生理鹽水,混勻。重復此步驟,直至獲得適當濃度的樣品液(通常為10?1至10??稀釋液)。

(二)平板培養(yǎng)

1.**傾注平板**:取1mL稀釋液加入無菌平皿中,使用無菌移液器精確加入。然后加入已熔化的培養(yǎng)基(通常為45℃±1℃),快速混勻并傾倒。傾倒時需避免培養(yǎng)基濺出,并確保培養(yǎng)基均勻覆蓋整個平皿底部。

2.**涂布平板**:待培養(yǎng)基凝固后(通常需30-60分鐘),用無菌涂布棒將樣品液均勻涂布在平板表面。涂布時需將涂布棒在樣品液中浸濕,然后輕輕拍打涂布棒,使樣品液均勻分布。對于固體樣品,可先在平板表面放置少量樣品,然后加入適量培養(yǎng)基,混勻后凝固。

3.**培養(yǎng)**:將平板倒置放入培養(yǎng)箱,恒溫培養(yǎng)(如35℃±2℃,72±2小時)。倒置的目的是防止冷凝水滴落污染菌落。培養(yǎng)過程中需避免頻繁打開培養(yǎng)箱,以維持穩(wěn)定的溫度和濕度。

(三)菌落計數(shù)

1.**計數(shù)標準**:選擇菌落生長均勻的平板,每皿計數(shù)3個區(qū)域(直徑3cm)。計數(shù)區(qū)域應分布均勻,避免邊緣效應。

2.**計算公式**:

\[\text{菌落形成單位(CFU/g或CFU/mL)}=\frac{\text{平均菌落數(shù)}\times\text{稀釋倍數(shù)}}{\text{樣品量(g或mL)}}\]

例如,某樣品10g,稀釋了100倍,在直徑3cm的平板上三個區(qū)域的平均菌落數(shù)為150,則:

\[\text{菌落形成單位(CFU/g)}=\frac{150\times100}{10}=1.5\times10^4\text{CFU/g}\]

3.**記錄結果**:以對數(shù)形式記錄(如≥2.0×10?CFU/g)。計數(shù)結果應保留兩位有效數(shù)字。

**六、質量控制措施**

(一)陽性對照

每次檢驗需設置陽性對照,確保培養(yǎng)基和操作過程無問題。陽性對照通常使用已知濃度的標準菌株,接種后同樣進行培養(yǎng)和計數(shù)。陽性對照的菌落數(shù)應在預期范圍內,否則說明檢驗過程存在問題,需重新檢驗。

(二)陰性對照

使用無菌生理鹽水進行陰性對照,檢測操作過程中的污染情況。陰性對照不應生長任何菌落,若出現(xiàn)菌落生長,說明操作過程中存在污染,需查找原因并重新檢驗。

(三)重復性檢驗

對可疑結果或接近臨界值的結果進行重復檢驗,確保結果一致性。若重復檢驗結果仍與原結果不一致,需進一步查找原因。

**七、結果報告**

(一)報告內容

1.樣品信息:包括樣品名稱、編號、采集日期、檢驗日期、檢驗人員等。

2.檢驗方法:采用的標準和方法,例如GB/T4789.2-2016食品微生物學檢驗菌落總數(shù)測定。

3.檢驗結果:菌落計數(shù)、合格判定等。例如,菌落總數(shù)≤2.0×10?CFU/g。

4.結論:是否符合相關標準要求。例如,該樣品菌落總數(shù)符合GB2762-2012食品安全國家標準食品中污染物限量要求。

(二)報告格式

采用統(tǒng)一格式,包括文字描述和圖表(如菌落照片)。報告應清晰、簡潔、準確,便于閱讀和理解。

**八、注意事項**

(一)無菌操作

所有操作需在超凈工作臺進行,避免交叉污染。操作前需洗手消毒,穿戴潔凈的工作服、口罩和手套。使用無菌器材,避免觸碰非無菌區(qū)域。

(二)避免污染

使用無菌吸管、接種環(huán)等工具,并定期更換。培養(yǎng)基和試劑應妥善保存,避免受潮或污染。

(三)安全防護

處理有毒培養(yǎng)基時需佩戴防護手套和護目鏡。廢棄培養(yǎng)基和樣品應按相關規(guī)定進行處理,避免環(huán)境污染。

**九、附錄**

(一)培養(yǎng)基配制表

|培養(yǎng)基名稱|成分(g/L)|pH值|注釋|

|--------------|----------------------------|----|--------|

|營養(yǎng)瓊脂|蛋白胨10g,牛肉浸膏3g,氯化鈉5g,瓊脂15g|7.2-7.4|常用于通用菌的培養(yǎng)|

|TSB|蛋白胨10g,牛肉浸膏5g,氯化鈉5g,甘油1g|7.2-7.4|用于增菌|

|(二)常用稀釋液配制方法

|稀釋液名稱|配制方法|注釋|

|--------------|----------------------------|--------|

|無菌生理鹽水|取氯化鈉8.0g,加蒸餾水至1000mL,滅菌|用于樣品稀釋|

|(三)檢驗設備維護記錄表

|設備名稱|維護日期|維護內容|維護人員|

|--------------|----------|--------|--------|

|超凈工作臺|2023-01-01|清潔消毒|張三|

本指導書由檢驗部門負責解釋和修訂,每年至少更新一次。

一、概述

微生物檢驗作業(yè)指導書是規(guī)范微生物檢驗操作流程、確保檢驗結果準確性和可靠性的重要文件。本指導書旨在為檢驗人員提供標準化的操作步驟、質量控制措施和注意事項,以保障微生物檢驗工作的規(guī)范化和高效化。

二、編制目的

(一)統(tǒng)一檢驗標準

(二)提高檢驗效率

優(yōu)化檢驗步驟,減少不必要的操作,縮短檢驗周期。

(三)確保檢驗質量

三、適用范圍

本指導書適用于食品、藥品、環(huán)境、水質等各類樣品的微生物檢驗工作。

四、檢驗前的準備

(一)人員準備

1.檢驗人員需經過專業(yè)培訓,熟悉微生物檢驗的基本原理和操作規(guī)范。

2.操作前需洗手消毒,穿戴潔凈的工作服、口罩和手套。

(二)設備準備

1.確保微生物培養(yǎng)箱、超凈工作臺、高壓滅菌鍋等設備運行正常。

2.檢查培養(yǎng)基、試劑、稀釋液等耗材是否在有效期內,并按標準配制。

(三)樣品準備

1.樣品采集需遵循無菌操作,避免污染。

2.樣品應盡快處理,若無法立即檢驗,需冷藏保存(溫度4℃±2℃)。

3.根據樣品類型選擇合適的稀釋方法,例如:

(1)固體樣品:研磨法或均質法。

(2)液體樣品:直接稀釋或系列稀釋法。

五、檢驗操作流程

(一)樣品處理

1.**稱量樣品**:精確稱取10g(或10mL)樣品置于無菌均質杯中。

2.**稀釋樣品**:加入90mL無菌生理鹽水,充分混勻。

3.**系列稀釋**:按10倍梯度進行系列稀釋,直至獲得適當濃度的樣品液。

(二)平板培養(yǎng)

1.**傾注平板**:取1mL稀釋液加入無菌平皿,加入已熔化的培養(yǎng)基(溫度45℃±1℃),快速混勻并傾倒。

2.**涂布平板**:待培養(yǎng)基凝固后,用涂布棒將樣品液均勻涂布在平板表面。

3.**培養(yǎng)**:將平板倒置放入培養(yǎng)箱,恒溫培養(yǎng)(如35℃±2℃,72±2小時)。

(三)菌落計數(shù)

1.**計數(shù)標準**:選擇菌落生長均勻的平板,每皿計數(shù)3個區(qū)域(直徑3cm)。

2.**計算公式**:

\[\text{菌落形成單位(CFU/g或CFU/mL)}=\frac{\text{平均菌落數(shù)}\times\text{稀釋倍數(shù)}}{\text{樣品量(g或mL)}}\]

3.**記錄結果**:以對數(shù)形式記錄(如≥2.0×10?CFU/g)。

六、質量控制措施

(一)陽性對照

每次檢驗需設置陽性對照,確保培養(yǎng)基和操作過程無問題。

(二)陰性對照

使用無菌生理鹽水進行陰性對照,檢測操作過程中的污染情況。

(三)重復性檢驗

對可疑結果進行重復檢驗,確保結果一致性。

七、結果報告

(一)報告內容

1.樣品信息:名稱、編號、檢驗日期等。

2.檢驗方法:采用的標準和方法。

3.檢驗結果:菌落計數(shù)、合格判定等。

4.結論:是否符合相關標準要求。

(二)報告格式

采用統(tǒng)一格式,包括文字描述和圖表(如菌落照片)。

八、注意事項

(一)無菌操作

所有操作需在超凈工作臺進行,避免交叉污染。

(二)避免污染

使用無菌吸管、接種環(huán)等工具,并定期更換。

(三)安全防護

處理有毒培養(yǎng)基時需佩戴防護手套和護目鏡。

九、附錄

(一)培養(yǎng)基配制表

(二)常用稀釋液配制方法

(三)檢驗設備維護記錄表

本指導書由檢驗部門負責解釋和修訂,每年至少更新一次。

**一、概述**

微生物檢驗作業(yè)指導書是規(guī)范微生物檢驗操作流程、確保檢驗結果準確性和可靠性的重要文件。本指導書旨在為檢驗人員提供標準化的操作步驟、質量控制措施和注意事項,以保障微生物檢驗工作的規(guī)范化和高效化。檢驗結果的準確性直接關系到產品質量、安全性和有效性,因此,嚴格執(zhí)行本指導書至關重要。本指導書涵蓋了從樣品接收到結果報告的全過程,旨在減少人為誤差,提高檢驗工作的可重復性。

**二、編制目的**

(一)統(tǒng)一檢驗標準

確保所有檢驗人員在相同條件下進行操作,使用統(tǒng)一的檢驗方法、培養(yǎng)基和判定標準,從而保證檢驗結果的可比性和一致性。標準化的操作流程有助于減少操作差異帶來的誤差。

(二)提高檢驗效率

(三)確保檢驗質量

建立嚴格的質量控制體系,包括陽性對照、陰性對照、設備校準、人員培訓等,從各個環(huán)節(jié)保障檢驗結果的準確性和可靠性,降低假陽性或假陰性的風險。

**三、適用范圍**

本指導書適用于食品、藥品、化妝品、環(huán)境、水質等各類樣品的微生物檢驗工作。不同類型的樣品在處理方法、培養(yǎng)基選擇、檢驗指標等方面可能存在差異,檢驗人員應根據具體樣品類型和檢驗目的,選擇相應的檢驗方法和本指導書中的相關操作步驟。

**四、檢驗前的準備**

(一)人員準備

1.檢驗人員需經過專業(yè)培訓,熟悉微生物檢驗的基本原理、操作規(guī)范和相關標準。培訓內容應包括無菌操作技術、培養(yǎng)基制備、微生物接種、培養(yǎng)、計數(shù)、結果判定等。

2.操作前需進行手部衛(wèi)生處理,包括洗手并使用70-80%酒精進行手部消毒,穿戴潔凈的工作服、口罩和手套。長發(fā)需束起,避免頭發(fā)掉落污染樣品。

3.檢驗人員應定期進行健康檢查,患有傳染性疾病的人員不得從事微生物檢驗工作。

(二)設備準備

1.**微生物培養(yǎng)箱**:檢查培養(yǎng)箱的溫度和濕度是否在設定范圍內(通常溫度為35℃±2℃,濕度為50%-60%),定期校準溫度控制器。

2.**超凈工作臺**:確保超凈工作臺潔凈度達到ISO5級或以上,定期進行清潔和消毒(如使用70-80%酒精擦拭),檢查紫外燈是否正常工作。

3.**高壓滅菌鍋**:檢查滅菌鍋的壓力和溫度是否達到設定值,定期進行生物指示劑測試,確保滅菌效果。

4.**顯微鏡**:檢查顯微鏡的照明系統(tǒng)和聚焦是否正常,確保能夠清晰觀察微生物形態(tài)。

5.**天平**:檢查天平的精度是否滿足稱量要求(通常為0.1mg),定期進行校準。

6.**移液器**:檢查移液器的準確性,定期進行校準,確保移取體積的準確性。

7.**高壓滅菌鍋**:檢查滅菌鍋的壓力和溫度是否達到設定值,定期進行生物指示劑測試,確保滅菌效果。

(三)樣品準備

1.**樣品采集**:樣品采集需遵循無菌操作,避免污染。采集工具(如取樣勺、注射器)應使用前滅菌,使用后及時清洗并重新滅菌。

2.**樣品保存**:樣品應盡快處理,若無法立即檢驗,需冷藏保存(溫度4℃±2℃),并注明樣品采集日期和時間。

3.**樣品處理**:根據樣品類型選擇合適的處理方法:

(1)**固體樣品**:對于塊狀樣品,需先進行破碎處理,然后通過研磨或均質化使其成為均勻的粉末狀。對于粉末狀樣品,可直接進行稱量。

(2)**液體樣品**:對于均勻的液體樣品,可直接進行稀釋。對于不均勻的液體樣品,需進行充分混勻后取樣。

(3)**半固體樣品**:需先進行融化處理,然后進行稀釋。

(4)**表面樣品**:使用無菌棉簽擦拭樣品表面,然后將棉簽放入無菌生理鹽水中進行稀釋。

4.**樣品稀釋**:根據樣品污染程度選擇合適的稀釋方法,例如:

(1)**10倍系列稀釋**:將樣品依次用無菌生理鹽水稀釋10倍,直至獲得適當濃度的樣品液。

(2)**直接接種**:對于污染較重的樣品,可直接接種到選擇性培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。

**五、檢驗操作流程**

(一)樣品處理

1.**稱量樣品**:精確稱取10g(或10mL)樣品置于無菌均質杯中。稱量時需使用無菌天平,避免樣品灑落。

2.**稀釋樣品**:加入90mL無菌生理鹽水,使用無菌移液器精確加入,充分混勻?;靹蚍绞娇梢允鞘褂镁|器高速攪拌1分鐘,或使用渦旋混合器混合1分鐘。

3.**系列稀釋**:按10倍梯度進行系列稀釋,例如:取1mL稀釋液加入新的無菌均質杯中,加入9mL無菌生理鹽水,混勻;再取1mL該稀釋液加入新的無菌均質杯中,加入9mL無菌生理鹽水,混勻。重復此步驟,直至獲得適當濃度的樣品液(通常為10?1至10??稀釋液)。

(二)平板培養(yǎng)

1.**傾注平板**:取1mL稀釋液加入無菌平皿中,使用無菌移液器精確加入。然后加入已熔化的培養(yǎng)基(通常為45℃±1℃),快速混勻并傾倒。傾倒時需避免培養(yǎng)基濺出,并確保培養(yǎng)基均勻覆蓋整個平皿底部。

2.**涂布平板**:待培養(yǎng)基凝固后(通常需30-60分鐘),用無菌涂布棒將樣品液均勻涂布在平板表面。涂布時需將涂布棒在樣品液中浸濕,然后輕輕拍打涂布棒,使樣品液均勻分布。對于固體樣品,可先在平板表面放置少量樣品,然后加入適量培養(yǎng)基,混勻后凝固。

3.**培養(yǎng)**:將平板倒置放入培養(yǎng)箱,恒溫培養(yǎng)(如35℃±2℃,72±2小時)。倒置的目的是防止冷凝水滴落污染菌落。培養(yǎng)過程中需避免頻繁打開培養(yǎng)箱,以維持穩(wěn)定的溫度和濕度。

(三)菌落計數(shù)

1.**計數(shù)標準**:選擇菌落生長均勻的平板,每皿計數(shù)3個區(qū)域(直徑3cm)。計數(shù)區(qū)域應分布均勻,避免邊緣效應。

2.**計算公式**:

\[\text{菌落形成單位(CFU/g或CFU/mL)}=\frac{\text{平均菌落數(shù)}\times\text{稀釋倍數(shù)}}{\text{樣品量(g或mL)}}\]

例如,某樣品10g,稀釋了100倍,在直徑3cm的平板上三個區(qū)域的平均菌落數(shù)為150,則:

\[\text{菌落形成單位(CFU/g)}=\frac{150\times100}{10}=1.5\times10^4\text{CFU/g}\]

3.**記錄結果**:以對數(shù)形式記錄(如≥2.0×10?CFU/g)。計數(shù)結果應保留兩位有效數(shù)字。

**六、質量控制措施**

(一)陽性對照

每次檢驗需設置陽性對照,確保培養(yǎng)基和操作過程無問題。陽性對照通常使用已知濃度的標準菌株,接種后同樣進行培養(yǎng)和計數(shù)。陽性對照的菌落數(shù)應在預期范圍內,否則說明檢驗過程存在問題,需重新檢驗。

(二)陰性對照

使用無菌生理鹽水進行陰性對照,檢測操作過程中的污染情況。陰性對照不應生長任何菌落,若出現(xiàn)菌落生長,說明操作過程中存在污染,需查找原因并重新檢驗。

(三)重復性檢驗

對可疑結果或接近臨界值的結果進行重復檢驗,確保結果一致性。若重復檢驗結果仍與原結果不一致,需進一步查找原因。

**七、結果報告**

(一)報告內容

1.樣品信息:包括樣品名稱、編號、采集日期、檢驗日期、檢驗人員等。

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