制藥行業(yè)生物制藥研發(fā)專員崗位招聘考試試卷及答案一、填空題（每題1分，共10分）1.生物制藥中常用的原核表達(dá)系統(tǒng)是______。答案：大腸桿菌（E.coli）2.單克隆抗體制備的關(guān)鍵技術(shù)是______。答案：細(xì)胞融合（或雜交瘤技術(shù)）3.生物制品穩(wěn)定性試驗(yàn)中，長(zhǎng)期試驗(yàn)的溫度條件通常為_(kāi)_____。答案：2-8℃4.基因治療中，常用的非病毒載體是______（舉例一種）。答案：脂質(zhì)體（或納米顆粒）5.上游工藝中，細(xì)胞培養(yǎng)的主要目的是______。答案：獲得目標(biāo)蛋白（或目的產(chǎn)物）6.生物藥質(zhì)量控制中，宿主細(xì)胞蛋白（HCP）檢測(cè)常用方法是______。答案：ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）7.質(zhì)粒DNA提取時(shí)，常用______試劑裂解細(xì)菌。答案：SDS（十二烷基硫酸鈉）8.生物反應(yīng)器中，用于控制溶氧的參數(shù)是______。答案：通氣量（或攪拌轉(zhuǎn)速）9.ICH指導(dǎo)原則中，與生物制品質(zhì)量相關(guān)的是______系列。答案：Q（如Q6B）10.疫苗生產(chǎn)中，滅活病毒常用的化學(xué)試劑是______。答案：甲醛（或β-丙內(nèi)酯）二、單項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分）1.以下哪項(xiàng)是生物制藥下游工藝的核心步驟？A.細(xì)胞株構(gòu)建B.發(fā)酵培養(yǎng)C.親和層析D.細(xì)胞轉(zhuǎn)染答案：C2.單克隆抗體制備中，細(xì)胞融合的目的是獲得：A.無(wú)限增殖能力的B細(xì)胞B.分泌特異性抗體的骨髓瘤細(xì)胞C.既能無(wú)限增殖又能分泌抗體的雜交瘤細(xì)胞D.原代B淋巴細(xì)胞答案：C3.生物藥申報(bào)IND（臨床研究申請(qǐng)）時(shí)，核心文件不包括：A.工藝開(kāi)發(fā)報(bào)告B.非臨床毒理數(shù)據(jù)C.市場(chǎng)調(diào)研報(bào)告D.質(zhì)量研究資料答案：C4.實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）的原理是通過(guò)檢測(cè)：A.雙鏈DNA的解鏈溫度B.熒光信號(hào)的累積量C.引物二聚體的形成D.RNA的逆轉(zhuǎn)錄效率答案：B5.以下哪種細(xì)胞系常用于治療性抗體生產(chǎn)？A.293T（人胚腎細(xì)胞）B.CHO（中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞）C.HeLa（宮頸癌細(xì)胞）D.3T3（小鼠成纖維細(xì)胞）答案：B6.生物制品的“批簽發(fā)”制度主要針對(duì)：A.研發(fā)階段的實(shí)驗(yàn)樣品B.上市后的商業(yè)化產(chǎn)品C.臨床前研究的中間產(chǎn)物D.實(shí)驗(yàn)室自制的科研試劑答案：B7.蛋白質(zhì)純化中，離子交換層析的分離依據(jù)是：A.分子大小B.電荷差異C.疏水性D.親和力答案：B8.細(xì)胞培養(yǎng)中，胎牛血清（FBS）的主要作用是：A.調(diào)節(jié)pHB.提供生長(zhǎng)因子C.抑制細(xì)菌污染D.控制滲透壓答案：B9.以下哪項(xiàng)不屬于生物藥的關(guān)鍵質(zhì)量屬性（CQA）？A.糖型分布B.分子量C.生產(chǎn)設(shè)備型號(hào)D.聚合體含量答案：C10.基因工程疫苗中，重組亞單位疫苗的關(guān)鍵成分是：A.病毒全顆粒B.病毒表面抗原蛋白C.減毒活病毒D.滅活病毒答案：B三、多項(xiàng)選擇題（每題2分，共20分。至少2個(gè)正確選項(xiàng)，多選、錯(cuò)選不得分）1.以下屬于生物制藥上游工藝的是：A.細(xì)胞株構(gòu)建B.發(fā)酵培養(yǎng)C.超濾濃縮D.病毒滅活答案：AB2.生物藥穩(wěn)定性研究需考察的指標(biāo)包括：A.效價(jià)B.外觀C.宿主細(xì)胞DNA殘留D.包裝材料相容性答案：ABCD3.單克隆抗體的質(zhì)量屬性包括：A.重鏈/輕鏈比例B.電荷異質(zhì)性C.內(nèi)毒素含量D.微生物限度答案：AB4.以下可用于蛋白質(zhì)濃度測(cè)定的方法有：A.Bradford法B.Lowry法C.HPLC-UVD.熒光定量PCR答案：ABC5.生物反應(yīng)器的控制參數(shù)包括：A.pHB.溶氧（DO）C.溫度D.光照強(qiáng)度答案：ABC6.基因治療載體的特點(diǎn)包括：A.病毒載體轉(zhuǎn)染效率高B.非病毒載體免疫原性低C.病毒載體可能整合至宿主基因組D.非病毒載體靶向性強(qiáng)答案：ABC7.疫苗的分類包括：A.滅活疫苗B.重組蛋白疫苗C.核酸疫苗D.化學(xué)合成小分子疫苗答案：ABC8.生物制藥中常用的除菌方法有：A.高壓蒸汽滅菌B.0.22μm濾膜過(guò)濾C.γ射線輻照D.紫外線照射答案：BC9.以下屬于ICH指導(dǎo)原則的有：A.ICHQ1（穩(wěn)定性試驗(yàn)）B.ICHM7（遺傳毒性雜質(zhì)）C.ICHS6（生物技術(shù)藥物毒理）D.GMP（藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范）答案：ABC10.細(xì)胞培養(yǎng)中，無(wú)血清培養(yǎng)基的優(yōu)勢(shì)包括：A.降低成本B.減少批間差異C.便于下游純化D.提高細(xì)胞活性答案：BC四、判斷題（每題2分，共20分。正確填“√”，錯(cuò)誤填“×”）1.生物制藥中，上游工藝主要關(guān)注產(chǎn)物的分離純化。（）答案：×2.單克隆抗體是由單一B淋巴細(xì)胞克隆分泌的抗體。（）答案：√3.基因治療中，腺相關(guān)病毒（AAV）載體屬于非病毒載體。（）答案：×4.生物制品的效期確定需基于加速穩(wěn)定性試驗(yàn)數(shù)據(jù)。（）答案：×（需長(zhǎng)期試驗(yàn)數(shù)據(jù)）5.蛋白質(zhì)純化中，凝膠過(guò)濾層析（分子篩）按電荷差異分離蛋白。（）答案：×（按分子大?。?.細(xì)胞凍存時(shí)，常用DMSO作為冷凍保護(hù)劑。（）答案：√7.疫苗生產(chǎn)中，減毒活疫苗的安全性高于滅活疫苗。（）答案：×（滅活疫苗更安全）8.實(shí)時(shí)熒光定量PCR可用于基因表達(dá)量的相對(duì)定量分析。（）答案：√9.生物藥的“三批驗(yàn)證”是指工藝驗(yàn)證的三批商業(yè)化生產(chǎn)。（）答案：√10.宿主細(xì)胞蛋白（HCP）殘留是生物藥的關(guān)鍵質(zhì)量屬性之一。（）答案：√五、簡(jiǎn)答題（每題5分，共20分）1.簡(jiǎn)述單克隆抗體生產(chǎn)中CHO細(xì)胞株開(kāi)發(fā)的關(guān)鍵步驟。答案：主要步驟包括：①目的基因（抗體輕/重鏈基因）的克隆與載體構(gòu)建；②載體轉(zhuǎn)染CHO宿主細(xì)胞（如電轉(zhuǎn)、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染）；③通過(guò)抗生素篩選（如G418、潮霉素）獲得陽(yáng)性克??；④有限稀釋法單克隆化，確保細(xì)胞來(lái)源于單個(gè)克隆；⑤克隆篩選（基于產(chǎn)量、表達(dá)穩(wěn)定性、質(zhì)量屬性）；⑥細(xì)胞庫(kù)建立（主細(xì)胞庫(kù)、工作細(xì)胞庫(kù)）及穩(wěn)定性驗(yàn)證（傳代后的表達(dá)量、質(zhì)量一致性）。2.生物藥工藝開(kāi)發(fā)中，上游與下游工藝的主要目標(biāo)分別是什么？答案：上游工藝目標(biāo)：通過(guò)優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)條件（如培養(yǎng)基、pH、溶氧）、細(xì)胞株改造（如基因工程提高表達(dá)量），實(shí)現(xiàn)目標(biāo)蛋白的高產(chǎn)量、高活性表達(dá)，并控制關(guān)鍵質(zhì)量屬性（如糖型、聚合體）；下游工藝目標(biāo)：通過(guò)純化步驟（如親和層析、離子交換）去除宿主細(xì)胞蛋白、DNA、病毒等雜質(zhì)，獲得高純度（通常＞95%）、高均一性的目標(biāo)產(chǎn)物，同時(shí)保持其生物活性和穩(wěn)定性。3.簡(jiǎn)述生物制品穩(wěn)定性試驗(yàn)的基本要求（至少3點(diǎn)）。答案：①試驗(yàn)條件：長(zhǎng)期試驗(yàn)（2-8℃，持續(xù)至效期末）、加速試驗(yàn)（25℃/60%RH或30℃/65%RH，6個(gè)月）；②考察指標(biāo)：外觀、效價(jià)、純度、有關(guān)物質(zhì)（如聚合體）、宿主細(xì)胞蛋白/DNA殘留等；③樣品要求：使用與商業(yè)化生產(chǎn)一致的包裝材料，至少3批代表性批次；④數(shù)據(jù)判定：以長(zhǎng)期試驗(yàn)數(shù)據(jù)為主，加速試驗(yàn)用于預(yù)測(cè)可能的降解趨勢(shì)。4.基因治療中，病毒載體（如AAV）與非病毒載體（如脂質(zhì)體）的主要優(yōu)缺點(diǎn)對(duì)比。答案：病毒載體（如AAV）優(yōu)點(diǎn)：轉(zhuǎn)染效率高、靶向性強(qiáng)（可改造衣殼蛋白）、長(zhǎng)期表達(dá)；缺點(diǎn)：免疫原性較高（可能引發(fā)抗體反應(yīng)）、載藥容量有限（AAV約4.7kb）、潛在整合風(fēng)險(xiǎn)（部分病毒）。非病毒載體（如脂質(zhì)體）優(yōu)點(diǎn)：免疫原性低、載藥容量大、制備簡(jiǎn)單；缺點(diǎn)：轉(zhuǎn)染效率低、表達(dá)時(shí)間短（易被降解）、靶向性差（需額外修飾）。六、討論題（每題5分，共10分）1.討論在生物藥工藝放大（從實(shí)驗(yàn)室規(guī)模到中試/商業(yè)化生產(chǎn)）過(guò)程中，需重點(diǎn)關(guān)注的問(wèn)題及應(yīng)對(duì)策略。答案：工藝放大需關(guān)注：①參數(shù)一致性：實(shí)驗(yàn)室小體積（如搖瓶）與反應(yīng)器（如500L）的傳質(zhì)（溶氧、CO?）、傳熱（溫度）差異，需通過(guò)計(jì)算體積比功率（P/V）、雷諾數(shù)等保持關(guān)鍵參數(shù)（如kLa）一致；②細(xì)胞性能：放大后剪切力增加可能影響細(xì)胞活性，可通過(guò)優(yōu)化攪拌槳類型（如斜葉槳）、降低轉(zhuǎn)速緩解；③質(zhì)量一致性：放大可能導(dǎo)致糖型、聚合體等質(zhì)量屬性變化，需在放大前后對(duì)比關(guān)鍵質(zhì)量屬性（CQA），必要時(shí)調(diào)整培養(yǎng)基（如添加糖基化前體）或培養(yǎng)條件；④工藝穩(wěn)健性：通過(guò)DOE（實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)）評(píng)估關(guān)鍵工藝參數(shù)（CPP）的波動(dòng)范圍，制定工藝控制策略（如pH控制范圍）。2.結(jié)合當(dāng)前生物制藥行業(yè)趨勢(shì)，討論研發(fā)專員需具備的核心能力（至少3點(diǎn)）。答案：核心能力包括：①技術(shù)扎實(shí)：掌握分子克隆、細(xì)胞培養(yǎng)、蛋白質(zhì)純化等基礎(chǔ)技術(shù)，熟悉qPCR、HPLC、ELISA等檢測(cè)方法，能解決實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題（如細(xì)胞死亡、純化收率低）；②法