ICS65.020.01

CCSB16

15

內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標準

DB15/T4106—2025

馬鈴薯黑脛病室內(nèi)抗性鑒定技術規(guī)程

Codeofpracticetechnicalforindoorevaluationofpotato

resistancetoblacklegdisease

2025-07-10發(fā)布2025-08-10實施

內(nèi)蒙古自治區(qū)市場監(jiān)督管理局發(fā)布

DB15/T4106—2025

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結構和起草規(guī)則》的規(guī)定

起草。

請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構不承擔識別專利的責任。

本文件由內(nèi)蒙古自治區(qū)果蔬標準化技術委員會（SAM/TC25）歸口。

本文件起草單位：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學、內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學院、準格爾旗農(nóng)牧局。

本文件主要起草人：孫平平、李正男、張磊、席先梅、雷雪峰、黃秀梅、楊永青、廉勇、付崇毅、

霍宏麗、張溪、王金泉、牟英男、吳若晨。

I

DB15/T4106—2025

馬鈴薯黑脛病室內(nèi)抗性鑒定技術規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了馬鈴薯黑脛病室內(nèi)抗性鑒定的術語和定義、培養(yǎng)基制備、接種體制備、接種、病情調(diào)

查和抗病性評價等內(nèi)容。

本文件適用于馬鈴薯品種在室內(nèi)條件下對黑脛病抗性水平的鑒定。

2規(guī)范性引用文件

本文件沒有規(guī)范性引用文件。

3術語和定義

本文件沒有需要界定的術語和定義。

4培養(yǎng)基制備

LBA培養(yǎng)基（病原細菌生長固體培養(yǎng)基）：5g酵母提取物，10g胰蛋白胨，10g氯化鈉，15g瓊脂

粉，1000mL去離子水，121℃滅菌15min。

LB液體培養(yǎng)基（病原細菌生長液體培養(yǎng)基）：不加瓊脂粉，其余同LBA的制作方法。

5接種體制備

病原物分離

取馬鈴薯黑脛病感病植株，采用組織分離結合單孢分離法從發(fā)病部位分離病原物，柯赫氏法則確定

致病菌，形態(tài)學、生理生化特性和分子序列對致病菌株進行鑒定，確定為馬鈴薯黑脛病病原菌

Pectobacteriumatrosepticum，保存?zhèn)溆谩?/p>

菌懸液的制備

取100μL在-80℃保存的分離病原菌涂抹于LBA培養(yǎng)基上，28℃培養(yǎng)48h。挑取菌落于100mLLB

液體培養(yǎng)基中，置于28℃、180r/min培養(yǎng)48h，用無菌水調(diào)節(jié)菌懸液濃度至106cfu/mL。

鑒定材料準備

選擇形態(tài)完好、無明顯傷病的馬鈴薯種薯，種植在裝有無菌的細沙與腐殖土等量混勻的盆中，出苗

后在溫室環(huán)境下生長。采用隨機排列盆栽，待馬鈴薯植株高約10cm用于接種。

6接種

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DB15/T4106—2025

用無菌牙簽在距土壤表面約5cm處戳傷植株的莖部，吸取10μL菌懸液，注射于馬鈴薯植株莖部傷

口中，以接種等量LB培養(yǎng)基的處理作為對照，每個品種處理10株，重復3次，將接種植株置于25℃～

28℃和90%以上濕度環(huán)境條件下培養(yǎng)。

7病情調(diào)查

接種7天后，以接種點為中心測定上下各5cm范圍內(nèi)的發(fā)病面積占調(diào)查面積的比率進行分級和抗性

評價。

8抗病性評價

計算抗病等級平均值，以抗病等級平均值評價抗病性：

——調(diào)查范圍內(nèi)無病狀發(fā)生，抗病等級為高抗（HR）；

——發(fā)病面積占調(diào)查面積25%以下，抗病等級為抗病（R）；

——發(fā)病面積占調(diào)查面積25%～50%，抗病等級為中抗（MR）；

——發(fā)病面積占調(diào)查面積50%～75%，抗病等級為中感（M