再生醫(yī)學(xué)堿基編輯技術(shù)員崗位考試試卷及答案單項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.堿基編輯器可實(shí)現(xiàn)哪種類型的堿基轉(zhuǎn)換？A.A到TB.C到GC.G到AD.T到C2.以下哪種技術(shù)常用于堿基編輯驗(yàn)證？A.熒光定量PCRB.WesternblotC.凝膠成像D.測(cè)序3.堿基編輯中sgRNA的作用是？A.切割DNAB.識(shí)別靶位點(diǎn)C.修飾堿基D.連接片段4.進(jìn)行堿基編輯實(shí)驗(yàn)時(shí)，細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率一般要求達(dá)到？A.30%以上B.50%以上C.70%以上D.90%以上5.以下哪種堿基編輯器效率較高？A.BE3B.BE4C.xBE3D.ABE6.堿基編輯過(guò)程中，脫靶效應(yīng)主要是指？A.編輯了錯(cuò)誤的堿基B.編輯了非目標(biāo)位點(diǎn)C.編輯效率低D.細(xì)胞死亡7.常用的堿基編輯載體是？A.質(zhì)粒B.噬菌體C.病毒載體D.人工染色體8.堿基編輯實(shí)驗(yàn)時(shí)，培養(yǎng)細(xì)胞的常用溫度是？A.30℃B.37℃C.40℃D.42℃9.用于堿基編輯的Cas蛋白通常來(lái)自？A.大腸桿菌B.嗜熱菌C.釀膿鏈球菌D.金黃色葡萄球菌10.以下哪種堿基編輯技術(shù)可實(shí)現(xiàn)C到T的轉(zhuǎn)換？A.ABEB.CBEC.PED.HBE多項(xiàng)選擇題（每題2分，共10題）1.堿基編輯技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)包括（）A.高精度編輯B.操作簡(jiǎn)單C.無(wú)需雙鏈DNA斷裂D.可在多種細(xì)胞中應(yīng)用2.以下屬于堿基編輯器組成部分的有（）A.Cas蛋白B.脫氨酶C.連接酶D.引導(dǎo)RNA3.檢測(cè)堿基編輯效果的方法有（）A.深度測(cè)序B.T7E1酶切C.Sanger測(cè)序D.熒光定量檢測(cè)4.提高堿基編輯效率的方法有（）A.優(yōu)化sgRNA設(shè)計(jì)B.調(diào)整轉(zhuǎn)染條件C.選擇合適的細(xì)胞系D.增加Cas蛋白表達(dá)量5.堿基編輯可能面臨的問(wèn)題有（）A.脫靶效應(yīng)B.編輯效率不穩(wěn)定C.細(xì)胞毒性D.難以在原代細(xì)胞應(yīng)用6.常用的堿基編輯系統(tǒng)有（）A.BE系統(tǒng)B.ABE系統(tǒng)C.PE系統(tǒng)D.CRISPR系統(tǒng)7.在進(jìn)行堿基編輯實(shí)驗(yàn)前，需要準(zhǔn)備的材料有（）A.表達(dá)載體B.細(xì)胞株C.轉(zhuǎn)染試劑D.培養(yǎng)基8.影響堿基編輯特異性的因素有（）A.sgRNA與靶序列的錯(cuò)配B.Cas蛋白的濃度C.細(xì)胞內(nèi)環(huán)境D.脫氨酶的活性9.堿基編輯技術(shù)在以下哪些領(lǐng)域有應(yīng)用前景（）A.基因治療B.藥物研發(fā)C.作物育種D.生物制藥10.優(yōu)化堿基編輯實(shí)驗(yàn)時(shí)，可以調(diào)整的參數(shù)有（）A.轉(zhuǎn)染時(shí)間B.載體濃度C.細(xì)胞密度D.培養(yǎng)時(shí)間判斷題（每題2分，共10題）1.堿基編輯技術(shù)可以隨意改變?nèi)魏螇A基。（）2.sgRNA設(shè)計(jì)的好壞不影響堿基編輯效率。（）3.所有細(xì)胞都適合進(jìn)行堿基編輯實(shí)驗(yàn)。（）4.堿基編輯一定會(huì)產(chǎn)生脫靶效應(yīng)。（）5.提高Cas蛋白濃度一定能提高堿基編輯效率。（）6.堿基編輯技術(shù)只能用于動(dòng)物細(xì)胞。（）7.深度測(cè)序是檢測(cè)堿基編輯效果最準(zhǔn)確的方法。（）8.不同的堿基編輯器作用機(jī)制完全相同。（）9.轉(zhuǎn)染試劑對(duì)堿基編輯實(shí)驗(yàn)結(jié)果沒(méi)有影響。（）10.堿基編輯技術(shù)可用于修復(fù)基因突變。（）簡(jiǎn)答題（每題5分，共4題）1.簡(jiǎn)述堿基編輯技術(shù)的基本原理。通過(guò)Cas蛋白與引導(dǎo)RNA結(jié)合定位到目標(biāo)DNA位點(diǎn)，脫氨酶對(duì)特定堿基進(jìn)行化學(xué)修飾，從而實(shí)現(xiàn)堿基轉(zhuǎn)換，在不產(chǎn)生雙鏈DNA斷裂的情況下精準(zhǔn)編輯堿基。2.如何降低堿基編輯的脫靶效應(yīng)？?jī)?yōu)化sgRNA設(shè)計(jì)，提高其與靶位點(diǎn)的特異性結(jié)合；選擇高保真的Cas蛋白；控制Cas蛋白和sgRNA的濃度；利用生物信息學(xué)預(yù)測(cè)潛在脫靶位點(diǎn)并檢測(cè)驗(yàn)證。3.舉例說(shuō)明堿基編輯技術(shù)在基因治療中的應(yīng)用。比如鐮狀細(xì)胞貧血，是由特定基因突變導(dǎo)致?？衫脡A基編輯技術(shù)將突變的堿基恢復(fù)為正常堿基，糾正致病基因，為治療該疾病提供新途徑。4.簡(jiǎn)述堿基編輯實(shí)驗(yàn)的基本流程。構(gòu)建含堿基編輯器和sgRNA的表達(dá)載體，培養(yǎng)合適細(xì)胞系，將載體通過(guò)轉(zhuǎn)染試劑導(dǎo)入細(xì)胞，培養(yǎng)一段時(shí)間后，采用測(cè)序等方法檢測(cè)堿基編輯效果。討論題（每題5分，共4題）1.討論堿基編輯技術(shù)與傳統(tǒng)基因編輯技術(shù)的優(yōu)勢(shì)與局限。優(yōu)勢(shì)在于高精度、無(wú)需雙鏈斷裂等；局限是可能存在脫靶、編輯效率不穩(wěn)定，且目前對(duì)復(fù)雜基因調(diào)控的編輯效果有待提升，技術(shù)成本較高。傳統(tǒng)技術(shù)如ZFN、TALEN操作復(fù)雜，而CRISPR/Cas9易有雙鏈斷裂風(fēng)險(xiǎn)。2.闡述堿基編輯技術(shù)在作物育種中的潛在應(yīng)用及挑戰(zhàn)。潛在應(yīng)用包括精準(zhǔn)改良作物性狀，如提高抗逆性、改善品質(zhì)等。挑戰(zhàn)在于作物基因組復(fù)雜，可能出現(xiàn)更多脫靶效應(yīng)；技術(shù)轉(zhuǎn)化到作物應(yīng)用需克服轉(zhuǎn)化效率低、遺傳穩(wěn)定性等問(wèn)題，且存在公眾對(duì)轉(zhuǎn)基因作物的接受度問(wèn)題。3.當(dāng)堿基編輯實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想時(shí)，從哪些方面進(jìn)行分析和改進(jìn)？從載體構(gòu)建方面，檢查sgRNA設(shè)計(jì)是否合理、載體表達(dá)效率；轉(zhuǎn)染環(huán)節(jié)看轉(zhuǎn)染試劑、條件是否合適；細(xì)胞方面考慮細(xì)胞狀態(tài)、類型是否適合；檢測(cè)方法是否準(zhǔn)確有效，然后針對(duì)性優(yōu)化改進(jìn)。4.談?wù)剦A基編輯技術(shù)在未來(lái)生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域可能的發(fā)展方向?？赡茉诤币?jiàn)病基因治療上取得突破，實(shí)現(xiàn)更多單基因病的精準(zhǔn)治療；與其他技術(shù)如干細(xì)胞技術(shù)結(jié)合，用于組織器官再生修復(fù)；開(kāi)發(fā)更高效、安全的堿基編輯工具，拓展其在疾病診斷和預(yù)防等方面的應(yīng)用。答案單項(xiàng)選擇題1.C2.D3.B4.C5.D6.B