靈芝多糖的生產(chǎn)工藝總述第一節(jié)生產(chǎn)方法固體培養(yǎng)法是以前應(yīng)用廣泛的可獲得靈芝有關(guān)產(chǎn)品的方法，不僅能培養(yǎng)出子實(shí)體，還有著便于獲得原材料，投入成本較低的優(yōu)點(diǎn)。但固體培養(yǎng)法的缺點(diǎn)是培養(yǎng)周期較長(zhǎng)，在培養(yǎng)過(guò)程中過(guò)多的要條件要嚴(yán)格把控，且不易有效的確定培養(yǎng)終點(diǎn)，不能夠嚴(yán)格控制產(chǎn)物的含量和質(zhì)量，生產(chǎn)力太低。相比較來(lái)說(shuō)，深層發(fā)酵法能夠規(guī)模化的培育大量菌絲體，可以在一年四季進(jìn)行生產(chǎn)，有著許多明顯的優(yōu)勢(shì)：培養(yǎng)菌絲體的周期短，在增殖繁殖方面效率更高，生產(chǎn)成本更低，發(fā)酵過(guò)程中便于控制發(fā)酵方向、進(jìn)程，有更高的生產(chǎn)效率，現(xiàn)今階段，人們?cè)缫呀?jīng)將液態(tài)發(fā)酵法應(yīng)用到實(shí)際的工業(yè)化生產(chǎn)中。發(fā)酵法生產(chǎn)靈芝多糖可分為兩個(gè)流程：菌絲體發(fā)酵、提取精制。菌絲體發(fā)酵：將活化及復(fù)壯后，經(jīng)培養(yǎng)一段時(shí)間的斜面母種，在無(wú)菌條件下將其轉(zhuǎn)移到種子培養(yǎng)基。各項(xiàng)培養(yǎng)指標(biāo)為：28℃、培育7天、搖床轉(zhuǎn)速160r/min；接下來(lái)進(jìn)行鏡檢，將沒(méi)有雜菌污染的且生長(zhǎng)狀況良好的靈芝液體菌種按10%的比例將其接種至發(fā)酵罐，發(fā)酵時(shí)間為5-6天，結(jié)束培養(yǎng)時(shí)使發(fā)酵液殘?zhí)呛繛?%左右。提取精制：（1）取經(jīng)過(guò)深層發(fā)酵的菌絲體作為原料，在常溫條件下，將其與重2-4倍的水進(jìn)行混合，將該溶液的PH調(diào)為4。（2）將溶液升溫到40℃-50℃，在此刻加入復(fù)合酶進(jìn)行1h的酶解反應(yīng)，（復(fù)合酶包含三種組分，分別是木瓜蛋白酶、果膠酶、纖維素酶）。（3）酶解后，給溶液加溫達(dá)到60℃-70℃，氫氧化鈉調(diào)PH到7-8，設(shè)置8-10r/min的轉(zhuǎn)速進(jìn)行攪拌，為獲得高濃度浸提液進(jìn)行2-4次浸提，并保證2-3h/次。（4）對(duì)浸提液進(jìn)行多項(xiàng)操作，使其合并、過(guò)濾、減壓濃縮至總體積的30%，接下來(lái)用酒精對(duì)濃縮液進(jìn)行沉淀操作，再過(guò)濾獲取得上清液；上清液經(jīng)過(guò)丙酮洗滌，就可以獲得靈芝粗多糖。（5）靈芝多糖粗多糖經(jīng)除蛋白操作，現(xiàn)用的較好的獲取脫蛋白多糖的方法為酶解-Sevage法聯(lián)合脫蛋白，未經(jīng)過(guò)脫蛋白的靈芝多糖在藥理活性上會(huì)受到較大的影響；再通過(guò)冷凍干燥或噴霧干燥的方式，將10%水提干粉加入其中進(jìn)行混合，最終獲得的靈芝多糖純品粉末的純度測(cè)量可以至97%以上。第二節(jié)工藝流程圖圖1靈芝多糖生產(chǎn)工藝流程圖第三節(jié)發(fā)酵工藝特點(diǎn)一、種子制備該過(guò)程是指接種進(jìn)種子罐內(nèi)的斜面母種，繁殖產(chǎn)生大批的靈芝多糖菌絲體，為了以后可以接種進(jìn)發(fā)酵罐里，在這個(gè)過(guò)程要經(jīng)歷孢子發(fā)芽、增殖繁殖、獲得充足數(shù)量菌絲體三個(gè)階段。在該過(guò)程中使用到的培養(yǎng)基和其它工藝技術(shù)指標(biāo)，均要對(duì)孢子發(fā)芽和菌絲體繁殖起到有利作用。二、發(fā)酵培養(yǎng)基介紹將多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)按特定的比例進(jìn)行混合，配制成混合物，它可以提供微生物在生長(zhǎng)繁殖過(guò)程中所必需的營(yíng)養(yǎng)，并且使之可以合成多種代謝產(chǎn)物，那么該混合物就稱(chēng)為培養(yǎng)基。菌絲體的生長(zhǎng)狀況、生產(chǎn)情況、產(chǎn)品品質(zhì)及產(chǎn)量等指標(biāo)會(huì)受到培養(yǎng)基成分的直接影響，包括它的組成成分和配比是否符合該菌體。在本設(shè)計(jì)中，碳源、氮源、無(wú)機(jī)鹽等幾部分組成了靈芝多糖的發(fā)酵培養(yǎng)基。三、滅菌在發(fā)酵法生產(chǎn)靈芝多糖的設(shè)計(jì)中，滅菌是必不可少的一部分。采納的措施有兩種：濕熱蒸汽滅菌和空氣過(guò)濾除菌，它們主要被應(yīng)用于培養(yǎng)基和發(fā)酵罐的滅菌。四、發(fā)酵在這個(gè)過(guò)程，使菌絲體可以大規(guī)模的生長(zhǎng)繁殖并達(dá)到預(yù)期的目標(biāo)。在發(fā)酵前，首先要將相關(guān)的設(shè)備、培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)滅菌處理以后，才能接種子進(jìn)發(fā)酵罐。根據(jù)不同的菌體類(lèi)別的接種量是不同的，但大多數(shù)接種量定在5-15%，對(duì)于發(fā)酵周期也是根據(jù)類(lèi)別而定，發(fā)酵法產(chǎn)靈芝多糖一般選擇4-8天。在發(fā)酵過(guò)程，須要不停的通入氣體并進(jìn)行攪拌，保持穩(wěn)定的罐溫、罐壓；另外，要定期接取樣品對(duì)其做生化分析，觀察菌絲體的代謝情況、生長(zhǎng)繁殖狀態(tài)，并做鏡檢或無(wú)菌實(shí)驗(yàn)檢測(cè)其是否受到雜菌污染。五、酶解-Sevage法聯(lián)合脫蛋白目前，酶解-Sevage法聯(lián)合脫蛋白工藝是眾多脫蛋白工藝中較為高效的方法，靈芝多糖脫蛋白率的高低主要受兩方面的影響，分別是酶解作用的時(shí)間、胰蛋白酶的濃度。經(jīng)過(guò)多次的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行數(shù)據(jù)比對(duì)，確定了最優(yōu)的工藝參數(shù)（以濃度計(jì)）：0.8％木瓜蛋白酶、0.8％胰蛋白酶、1.0％鏈霉蛋白酶。用其對(duì)靈芝多糖進(jìn)行酶解反應(yīng)，各自的時(shí)間均為4小時(shí)；并進(jìn)行3次脫蛋白，那么最終的多糖