2025年食品檢測微生物檢驗認證考試試卷及答案一、單項選擇題（每題1分，共30分。每題只有一個正確答案，請將正確選項字母填入括號內(nèi)）1.依據(jù)GB4789.22022，測定乳粉中菌落總數(shù)時，若檢樣初始稀釋度為1:10，取1mL接種于平板后計數(shù)結(jié)果為320CFU，則樣品中菌落總數(shù)報告值為（）A.3.2×103CFU/gB.3.2×10?CFU/gC.3.2×10?CFU/gD.3.2×10?CFU/g答案：B2.在GB4789.382012中，阪崎克羅諾桿菌選擇性分離培養(yǎng)基ESIA的指示系統(tǒng)為（）A.5溴4氯3吲哚αD葡萄糖苷B.5溴4氯3吲哚βD葡萄糖醛酸苷C.5溴4氯3吲哚αD半乳糖苷D.5溴4氯3吲哚βD半乳糖苷答案：A3.采用MPN法檢測即食海產(chǎn)品中副溶血性弧菌，若接種3管3×1g、3×0.1g、3×0.01g，陽性管數(shù)分別為320，查2022版MPN表得MPN值為（）A.93MPN/gB.150MPN/gC.240MPN/gD.460MPN/g答案：A4.關(guān)于嗜熱脂肪芽孢桿菌抑制法測定牛乳中抗生素殘留，下列哪項操作會導致假陰性（）A.培養(yǎng)基pH調(diào)至7.2±0.1B.滅菌后培養(yǎng)基冷卻至55℃加入菌懸液C.待檢乳樣經(jīng)134℃4s超高溫處理D.對照管加入0.008IU青霉素G答案：C5.在GB4789.152016霉菌酵母計數(shù)中，加入氯霉素的作用是（）A.抑制革蘭氏陰性菌B.抑制革蘭氏陽性菌C.抑制放線菌D.抑制所有細菌答案：D6.采用實時熒光PCR檢測沙門氏菌invA基因，下列哪種熒光探針類型屬于TaqMan水解探針（）A.FRET探針B.MolecularBeaconC.Scorpion探針D.雙標記TaqManMGB探針答案：D7.依據(jù)ISO16654:2001，檢測大腸桿菌O157:H7的免疫磁珠分離（IMS）步驟中，磁珠與目標菌最佳結(jié)合溫度為（）A.4℃B.25℃C.37℃D.42℃答案：B8.在GB4789.42024沙門氏菌檢驗中，TTB增菌液需加入碘液，碘液的主要作用是（）A.提供氧化還原電位B.抑制變形桿菌C.抑制糞鏈球菌D.提供碳源答案：B9.采用Petrifilm?快速霉菌酵母測試片，培養(yǎng)48h后觀察到藍綠色菌落，其最可能為（）A.青霉B.曲霉C.酵母D.毛霉答案：A10.關(guān)于李斯特菌溶血素O（LLO）的描述，錯誤的是（）A.屬于巰基激活的穿孔毒素B.可在血瓊脂上產(chǎn)生β溶血C.其編碼基因hly位于LIPI1毒力島D.對紅細胞無溶解活性答案：D11.在GB4789.302020單核細胞增生李斯特菌檢驗中，PALCAM瓊脂中氯化鋰的最終濃度為（）A.5g/LB.10g/LC.15g/LD.20g/L答案：C12.采用VITEK?2Compact鑒定革蘭氏陰性菌，若系統(tǒng)提示“低分辨率”，實驗室下一步應（）A.直接報告結(jié)果B.補充API20E手工鑒定C.重復上機一次D.改用MALDITOFMS答案：B13.關(guān)于β葡萄糖醛酸酶（GUS）試驗，下列哪種細菌通常為陽性（）A.大腸埃希氏菌B.肺炎克雷伯菌C.沙門氏菌D.志賀氏菌答案：A14.在GB4789.102020金黃色葡萄球菌檢驗中，BairdParker瓊脂中卵黃亞碲酸鉀的作用為（）A.抑制革蘭氏陰性菌并指示卵磷脂酶B.促進葡萄球菌生長C.抑制霉菌D.指示凝固酶答案：A15.采用MALDITOFMS鑒定微生物，下列哪項屬于樣品前處理“直接涂布法”的適用范圍（）A.血培養(yǎng)陽性瓶B.含莢膜的酵母C.絲狀真菌D.非選擇性平板單個菌落答案：D16.關(guān)于副溶血性弧菌神奈川現(xiàn)象，下列描述正確的是（）A.在Wagatsuma血瓊脂上出現(xiàn)β溶血B.與tdh基因無關(guān)C.所有環(huán)境株均陽性D.與trh基因無關(guān)答案：A17.在GB4789.392013克羅諾桿菌檢驗中，mLSTVm肉湯中萬古霉素濃度為（）A.5mg/LB.10mg/LC.20mg/LD.30mg/L答案：B18.采用環(huán)介導等溫擴增（LAMP）檢測志賀氏菌，其引物設(shè)計靶基因通常為（）A.ipaHB.invAC.hlyD.nuc答案：A19.關(guān)于微生物檢驗室生物安全等級，下列操作應在BSL3實驗室進行的是（）A.活菌計數(shù)沙門氏菌B.質(zhì)譜鑒定布魯氏菌C.核酸提取O157:H7D.噬菌體分型金黃色葡萄球菌答案：B20.在GB4789.62016致瀉大腸埃希氏菌檢驗中，用于檢測STh腸毒素的基因探針為（）A.dnaKB.ltC.stx1D.estA答案：D21.采用微量肉湯稀釋法測定MIC，若質(zhì)控菌株大腸桿菌ATCC25922對氨芐西林MIC為2mg/L，而本次測定為8mg/L，應首先（）A.重復試驗B.更換藥敏板C.檢查菌株純度D.報告結(jié)果答案：C22.關(guān)于微生物檢驗用培養(yǎng)基性能驗證，下列哪項屬于“生長率”指標可接受范圍（）A.≥10%B.≥30%C.≥50%D.≥70%答案：C23.在GB4789.142014蠟樣芽孢桿菌檢驗中，MYP瓊脂中甘露醇的作用為（）A.可發(fā)酵產(chǎn)酸指示劑變色B.抑制革蘭氏陰性菌C.提供氮源D.促進芽孢形成答案：A24.采用全自動螺旋接種儀，若設(shè)定接種量為50μL，則其對應稀釋度為（）A.10?1B.10?2C.10?3D.10??答案：B25.關(guān)于微生物檢驗用標準菌株，下列哪項為凍干株復溶后第一代（）A.F1B.F2C.F0D.F3答案：C26.在GB4789.352020乳酸菌計數(shù)中，MRS瓊脂培養(yǎng)基pH應調(diào)節(jié)至（）A.5.4±0.2B.6.2±0.2C.7.0±0.2D.7.4±0.2答案：B27.采用流式細胞術(shù)檢測果汁中酵母活菌數(shù)，其熒光染料CFDAAM的作用機制為（）A.標記細胞膜破損B.標記酯酶活性C.標記線粒體膜電位D.標記DNA答案：B28.關(guān)于微生物檢驗用三級水，電導率（25℃）應≤（）A.1μS/cmB.5μS/cmC.10μS/cmD.15μS/cm答案：B29.在GB4789.82024小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗中，CIN瓊脂中頭孢磺啶的最終濃度為（）A.2mg/LB.4mg/LC.8mg/LD.16mg/L答案：B30.采用ATP生物熒光法檢測餐飲具表面清潔度，其RLU與微生物數(shù)量的相關(guān)系數(shù)r通常要求（）A.≥0.3B.≥0.5C.≥0.7D.≥0.9答案：C二、多項選擇題（每題2分，共20分。每題有兩個或兩個以上正確答案，多選、少選、錯選均不得分）31.下列哪些屬于GB4789系列規(guī)定的“指示菌”（）A.菌落總數(shù)B.大腸菌群C.霉菌D.酵母E.腸桿菌科答案：ABE32.關(guān)于副溶血性弧菌tdh基因檢測，以下哪些方法可用于確證（）A.普通PCRB.實時熒光PCRC.基因芯片D.LAMPE.血清凝集答案：ABCD33.在GB4789.42024沙門氏菌血清分型中，下列哪些屬于H抗原（）A.iB.dC.rD.1,2E.1,5答案：ACDE34.下列哪些因素可導致VITEK?2鑒定結(jié)果“低置信度”（）A.菌懸液濁度超標B.培養(yǎng)基含血C.卡片過期D.選用錯誤數(shù)據(jù)庫E.培養(yǎng)溫度28℃答案：ABCD35.關(guān)于克羅諾桿菌的生化特征，下列哪些為陽性（）A.氧化酶B.賴氨酸脫羧酶C.精氨酸雙水解酶D.檸檬酸利用E.蔗糖發(fā)酵答案：CDE36.在GB4789.152016霉菌酵母計數(shù)中，下列哪些培養(yǎng)基可用于確證（）A.PDAB.DRBCC.DG18D.MEAE.NA答案：ABCD37.下列哪些屬于金黃色葡萄球菌腸毒素分型（）A.SEAB.SEBC.SECD.SEDE.SEE答案：ABCDE38.關(guān)于微生物檢驗用質(zhì)控圖，下列哪些屬于“警告限”（）A.均值±1sB.均值±2sC.均值±3sD.10點連續(xù)上升E.22點交替上下答案：BD39.下列哪些屬于GB4789.302020李斯特菌檢驗選擇性增菌液（）A.LB1B.LB2C.FraserD.HalfFraserE.BLEB答案：ABE40.關(guān)于微生物檢驗用標準物質(zhì)，下列哪些屬于有證標準物質(zhì)（CRM）（）A.NISTSRM1547B.GBW(E)100518C.ATCC25922D.CIP53.126E.BCRCRM528答案：ABE三、判斷題（每題1分，共10分。正確打“√”，錯誤打“×”）41.GB4789.22022規(guī)定，若所有稀釋度平板菌落數(shù)均>300CFU，則以最高稀釋度平板計數(shù)結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)報告。（）答案：×42.實時熒光PCR檢測stx2基因時，引物stx2F/R序列在基因保守區(qū)，故可檢測所有產(chǎn)志賀毒素大腸埃希氏菌。（）答案：√43.在PALCAM瓊脂上，單核細胞增生李斯特菌因產(chǎn)生卵磷脂酶可形成白色沉淀暈圈。（）答案：×44.采用微量肉湯稀釋法，若質(zhì)控菌株MIC超出CLSI規(guī)定范圍，則當日所有結(jié)果無效。（）答案：√45.霉菌酵母計數(shù)時，若平板出現(xiàn)蔓延性霉菌覆蓋>50%面積，則該平板可記錄為“過多不可計”。（）答案：√46.MALDITOFMS鑒定真菌時，直接使用甲酸提取法可提高孢子檢出率。（）答案：√47.在GB4789.392013中，克羅諾桿菌確證試驗包括氧化酶、蔗糖、賴氨酸脫羧酶三項。（）答案：×48.采用ATP生物熒光法，RLU值與微生物數(shù)量呈線性關(guān)系，可替代傳統(tǒng)平板計數(shù)。（）答案：×49.在BSL2實驗室操作布魯氏菌時，必須在Ⅱ級生物安全柜內(nèi)進行。（）答案：√50.根據(jù)GB4789.142014，蠟樣芽孢桿菌計數(shù)結(jié)果需報告“CFU/g（mL）”，并保留兩位有效數(shù)字。（）答案：√四、填空題（每空1分，共20分）51.GB4789.42024沙門氏菌血清分型中，O抗原多價A包含O2、O4、O7，其中O4對應的單因子血清為________。答案：O452.在GB4789.302020中，單核細胞增生李斯特菌確證試驗包括________酶、________發(fā)酵、________水解三項。答案：β溶血、鼠李糖、木糖53.實時熒光PCR反應體系通常包含模板DNA、引物、探針、dNTP、________酶、________離子及緩沖液。答案：Taq、Mg2?54.依據(jù)CLSIM100Ed33，大腸桿菌ATCC25922對環(huán)丙沙星MIC質(zhì)控范圍為________mg/L。答案：0.004–0.01655.在GB4789.152016中，霉菌酵母計數(shù)培養(yǎng)溫度為________℃，培養(yǎng)時間為________d。答案：28±1、556.采用MPN法檢測大腸菌群，若接種量1mL、0.1mL、0.01mL，陽性管數(shù)310，查表得MPN值為________MPN/mL。答案：4357.在PALCAM瓊脂中，氯化鋰與________共同作為選擇性抑制劑。答案：多粘菌素B58.依據(jù)ISO7218:2021，微生物檢驗用培養(yǎng)基性能驗證包括________、________、________、________四項指標。答案：生長率、選擇性、特異性、生化反應59.采用VITEK?2鑒定革蘭氏陽性球菌，若結(jié)果提示“低分辨率”，應補充________手工鑒定系統(tǒng)。答案：APIStaph60.在GB4789.352020乳酸菌計數(shù)中，若樣品含雙歧桿菌，需使用________瓊脂并做________環(huán)境培養(yǎng)。答案：TPY、厭氧五、簡答題（每題5分，共30分）61.簡述GB4789.22022中菌落總數(shù)計數(shù)“可接受范圍”平板的選擇原則。答案：選取菌落數(shù)在30–300CFU之間的平板；若僅一個稀釋度符合則取該平板；若兩個稀釋度均符合且比值<2則取平均；若>2則取較低稀釋度；若所有平板均<30CFU則取最低稀釋度；若均>300CFU則取最高稀釋度；若均無合適平板則按“過多不可計”處理并調(diào)整稀釋度重做。62.說明實時熒光PCR檢測沙門氏菌invA基因時，內(nèi)標系統(tǒng)的作用及常見內(nèi)標基因。答案：內(nèi)標系統(tǒng)用于監(jiān)控提取及擴增過程是否受抑制，避免假陰性；常見內(nèi)標為外源質(zhì)?；蛩拗魍ㄓ没蛉?8SrRNA、βactin，也可使用invA基因人工合成片段作為競爭性內(nèi)標，通過不同熒光通道檢測，確保Ct值差異在±1.5以內(nèi)。63.列舉GB4789.302020中單核細胞增生李斯特菌確證試驗的三種生化反應及陽性判定標準。答案：①β溶血試驗：在5%羊血瓊脂上穿刺接種，35℃24h后出現(xiàn)狹窄透明β溶血環(huán)；②鼠李糖發(fā)酵：接種于含0.5%鼠李糖的發(fā)酵管，35℃24h變黃為陽性；③木糖發(fā)酵：同上，變黃為陽性；單增李斯特菌為β溶血+、鼠李糖+、木糖?。64.簡述MALDITOFMS鑒定絲狀真菌的前處理步驟。答案：取新鮮菌落置于靶板，加入70%甲酸1μL裂解30s，再加入等量乙腈混勻，室溫干燥后覆蓋α氰基4羥基肉桂酸基質(zhì)，干燥后立即檢測；若孢子壁厚可預先用玻璃珠震蕩破壁，或采用提取法：用乙醇甲酸乙腈三步提取，離心后取上清點靶。65.說明GB4789.152016中霉菌酵母計數(shù)“蔓延性霉菌”記錄方式及對結(jié)果的影響。答案：若蔓延覆蓋<1/4面積，可計數(shù)未受影響區(qū)域并估算全板；若>1/4但<1/2，記錄“蔓延（P）”并選取另一稀釋度；若>1/2，記錄“過多不可計（TNTC）”并采用更高稀釋度重做；蔓延導致無法準確計數(shù)時需重新檢驗，并在報告注明“蔓延”。66.簡述微量肉湯稀釋法測定MIC時，如何設(shè)置質(zhì)控及判定標準。答案：每批次需加入質(zhì)控菌株如大腸桿菌ATCC25922、金黃色葡萄球菌ATCC29213，按CLSI規(guī)定濃度范圍判定；若MIC超出允許范圍，則當日結(jié)果無效；同時設(shè)陽性生長對照（無抗生素）和陰性對照（僅肉湯）；質(zhì)控圖采用Westgard多規(guī)則，12s、13s、22s、R4s、10x規(guī)則聯(lián)合判斷。六、案例分析題（每題10分，共40分）67.某品牌嬰幼兒配方奶粉檢出疑似克羅諾桿菌，初篩ESIA平板出現(xiàn)典型藍綠色菌落，革蘭氏陰性桿菌，氧化酶陰性，蔗糖陽性，賴氨酸脫羧酶陰性。請寫出后續(xù)確證流程及報告方式。答案：①取可疑菌落接種于TSA25℃48h，觀察黃色素；②做vp試驗（VP+）、吲哚（?）、檸檬酸（+）、山梨醇（?）、肌醇（+）、精氨酸（+）；③實時熒光PCR檢測16SrRNA特異性片段；④若以上均符合，則報告“檢出克羅諾桿菌（Cronobacterspp.）”，并依據(jù)GB4789.392013計算MPN，報告值為>100MPN/100g。68.某即食雞胸肉樣品，客戶要求檢測金黃色葡萄球菌腸毒素SET。實驗室采用ELISA試劑盒檢測，結(jié)果A450值為0.42，陰