(10)授權(quán)公告號(hào)CN110283048B(21)申請(qǐng)?zhí)?0191057711(65)同一申請(qǐng)的已公布的文獻(xiàn)號(hào)(43)申請(qǐng)公布日2019.09.27審查員富佳玉(73)專利權(quán)人云南翰谷生物科技有限公司地址655700云南省曲靖市師宗縣大同工業(yè)園區(qū)鳳翔輕工業(yè)園區(qū)(72)發(fā)明人李琳婧肖豐坤雷鵬陳黎飛施豪(74)專利代理機(jī)構(gòu)北京東方億思知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司11258代理人張兵兵(54)發(fā)明名稱大麻二酚晶體的制備方法(57)摘要本發(fā)明涉及大麻二酚晶體的制備方法。本發(fā)明的方法包括以下步驟：(1)將工業(yè)大麻的花葉經(jīng)脫羧的提取物與第一溶劑混合，在低溫下靜置沉淀，分離去除沉淀物，并將含大麻二酚的溶劑濃縮，得到濃縮的提取物；(3)將濃縮的提取物與第二溶劑混合并過(guò)濾，將濾液進(jìn)行高壓制備液相色譜，收集含大麻二酚的餾分，然后去除餾分中的溶劑，得到大麻二酚粗品；(4)將大麻二酚粗品與結(jié)晶溶劑混合，在低溫下進(jìn)行結(jié)晶，得到大麻二酚晶體。本發(fā)明的方法能夠以高的總提取率獲21.大麻二酚晶體的制備方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：(1)將工業(yè)大麻的花葉粉進(jìn)行脫羧和提取，獲得經(jīng)脫羧的提取物，其中脫羧步驟在80至130℃的溫度下進(jìn)行；(2)將經(jīng)脫羧的提取物與第一溶劑混合，在低于20℃的溫度下靜置沉淀，分離去除沉淀(3)將濃縮的提取物與第二溶劑混合并過(guò)濾，將濾液進(jìn)行高壓制備液相色譜，收集含大麻二酚的餾分，然后去除餾分中的溶劑，得到大(4)將大麻二酚粗品與結(jié)晶溶劑混合，在低于室溫的溫度下進(jìn)行結(jié)晶，得到大麻二酚晶其中在步驟(1)中，用于提取的溶劑是正己烷、石油醚、丙酮或其任意組合；在步驟(2)且石油醚與丙酮的體積比在15:1至10:1的范圍內(nèi)；并且其中在高壓制備液相色譜中，采用的制備柱直徑在200mm至1500mm范圍內(nèi)；采用石油醚和丙酮作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫；在初始的洗脫階段中，采用體積比12:1的石油醚和丙酮作為洗脫溶劑；在中間的洗脫階段中，采用體積比6:1的石油醚和丙酮作為洗脫溶劑；在最后的洗脫階段中，采用體積比1:1的石油醚和丙酮作為洗脫溶劑。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，在步驟(1)中，所述提取步驟在40至65℃的溫度下進(jìn)行。4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，在高壓制備液相色譜中采用的制備柱直徑為200mm,并且流動(dòng)相的流速在200至350ml/min范圍內(nèi)；或者在高壓制備液相色譜中采用的制備柱直徑為1200mm,并且流動(dòng)相的流速在15至25L/min范圍內(nèi)。5.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，在步驟(4)中，采用活性炭、硅膠、氧化鋁中的一種或幾種作為脫色劑進(jìn)行脫色。6.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，步驟(4)中獲得的大麻二酚晶體含至少99.3%的大麻二酚。3技術(shù)領(lǐng)域[0001]本發(fā)明涉及大麻素類晶體的工業(yè)制備領(lǐng)域，具體地涉及高純度大麻二酚晶體的制備方法。背景技術(shù)[0002]大麻(CannabissativaL.)是一種具有重要經(jīng)濟(jì)價(jià)值和藥用價(jià)值的一年生草本化合物，其主要包括四氫大麻酚(THC)、大麻二酚(CBD)、大麻酚(CBN)及其羧基化合物等。[0003]在大麻素類化合物中，CBD是大麻中非成癮性成分，能抑制某些多酚對(duì)人體神經(jīng)系統(tǒng)的不利影響，并且具有阻斷乳腺癌轉(zhuǎn)移、治療癲癇、抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等一系列生理活性功[0004]目前，工業(yè)上通常采用以下方法來(lái)生產(chǎn)大麻二酚晶體：柱層析、超臨界流體或亞臨境污染較大，而且采用的大孔吸附樹(shù)脂與聚酰胺層析柱使用壽命較短。更重要的是，柱層析的效果嚴(yán)重依賴于每次操作的條件、操作人員的熟練程度，使得所得產(chǎn)品的品質(zhì)(純度、雜[0006]超臨界流體或亞臨界流體萃取技術(shù)具有設(shè)備要求高、生產(chǎn)成本高、操作復(fù)雜等問(wèn)題，而且，其獲得的大麻二酚純度仍然較低，不適宜用于醫(yī)藥領(lǐng)域。現(xiàn)有的溶劑萃取通常需要對(duì)原料進(jìn)行酶解預(yù)處理，溶劑消耗量巨大，提取率非常低，且后續(xù)分離過(guò)程復(fù)雜繁瑣。[0007]生物合成和化學(xué)合成目前的生產(chǎn)效率都很低。而且，由于CBD存在多個(gè)手性中心和順?lè)串悩?gòu)的雙鍵，因此分離提純步驟復(fù)雜，成本較高。因此，生物合成和化學(xué)合成僅僅適于合成少量樣品，目前不適宜進(jìn)行工業(yè)大規(guī)模應(yīng)用。[0008]此外，現(xiàn)有的方法均難以有效且穩(wěn)定地控制致幻成癮的THC的含量<0.3%,難以滿足安全監(jiān)管部門的要求，不利于大麻二酚產(chǎn)品的運(yùn)輸、[0010]本發(fā)明的目的在于提供一種大麻二酚晶體的制備方法，其不僅能夠極大地提高工業(yè)大麻中大麻二酚的提取率和提取純度，而且能夠有效地降低產(chǎn)品中THC的含量，以滿足安全性要求。[0011]為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供大麻二酚晶體的制備方法，該方法包括以下步驟：[0012](1)將工業(yè)大麻的花葉粉進(jìn)行脫羧和提取，獲得經(jīng)脫羧的提取物；[0013](2)將經(jīng)脫羧的提取物與第一溶劑混合，在低溫下靜置沉淀，分離去除沉淀物，并將含大麻二酚的溶劑濃縮，得到濃縮的提取物；[0014](3)將濃縮的提取物與第二溶劑混合并過(guò)濾，將濾液進(jìn)行高壓制備液相色譜，收集4含大麻二酚的餾分，然后去除餾分中的溶劑，得到大麻二酚粗品；[0016]發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，巧妙地將脫羧、提取、沉淀、高壓制備液相和合，能夠以高提取率獲得高純度的大麻二酚晶體。尤其是，通過(guò)采用特定的提取溶劑、沉淀溶劑、高壓制備液相和/或特定的工藝參數(shù)，能夠進(jìn)一步提高提取率和產(chǎn)品純度。采用本發(fā)明的方法，能夠獲得80%以上、甚至高達(dá)92%以上的總提取率，同時(shí)獲得99%以上、甚至高達(dá)99.8%的純度。[0017]通過(guò)本發(fā)明的方法獲得的晶體幾乎不含THC,例如包含小于0.3%、優(yōu)選含小于0.1%、更優(yōu)選小于0.05%的THC、最優(yōu)選地小于0.01%的THC。[0018]更重要的是，本發(fā)明的方法尤其適合用于工業(yè)大規(guī)模生產(chǎn)。即便在大規(guī)模生產(chǎn)中，本發(fā)明的方法仍然能夠保持較高的純度。而且，本發(fā)明的方法還可以具有操作相對(duì)簡(jiǎn)單、成附圖說(shuō)明[0019]圖1是大麻二酚(CBD)和四氫大麻酚(THC)標(biāo)準(zhǔn)品的液相色譜圖。[0020]圖2是實(shí)施例3中由高壓制備液相色譜獲得的CBD粗品的液相色譜圖。[0021]圖3是實(shí)施例3制備的CBD純品晶體的液相色譜圖。具體實(shí)施方式[0024]“四氫大麻酚”(tetrahy人產(chǎn)生幻覺(jué)、上癮，是目前已知的決定大麻毒品性質(zhì)的物質(zhì)，所以聯(lián)合國(guó)公約和許多國(guó)家的植的大麻基本上都屬于工業(yè)大麻。異構(gòu)體。這也使得采用常規(guī)的方法難以將THC與CBD完全區(qū)分開(kāi)，很難完全去除CBD產(chǎn)品中的程中花葉粉原料的量在1噸以上，更優(yōu)選地至少1.5噸。相比之下，一般來(lái)說(shuō)，小規(guī)模生產(chǎn)主要采用500kg以下或50kg以上的投料量，實(shí)驗(yàn)室主要采用10kg以下的投料量。然而，在相同或其他情況下，其他實(shí)施方案也可能是優(yōu)選的。另外，一個(gè)或多個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案的敘述不意味著其他實(shí)施方案是不可用的，并且不旨在將其他實(shí)施方案排除在本發(fā)明[0028]在下文中，通過(guò)一些實(shí)施方式來(lái)具體地說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案，但這些實(shí)施方式僅僅是說(shuō)明性的，不應(yīng)理解為對(duì)本發(fā)明的限制。5[0029]具體來(lái)說(shuō)，本發(fā)明提供一種大麻二酚晶體的制備方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：[0030](1)將工業(yè)大麻的花葉粉進(jìn)行脫羧和提取，獲得經(jīng)脫羧的提取物；[0031](2)將經(jīng)脫羧的提取物與第一溶劑混合，在低于20℃的溫度下靜置沉淀，分離去除沉淀物，并將含大麻二酚的溶劑濃縮，得到濃縮的提取物；[0032](3)將濃縮的提取物與第二溶劑混合并過(guò)濾，將濾液進(jìn)行高壓制備液相色譜，收集含大麻二酚的餾分，然后去除餾分中的溶劑，得到大麻二酚粗品；[0033](4)將大麻二酚粗品與結(jié)晶溶劑混合，在低于室溫的溫度下進(jìn)行結(jié)晶，得到大麻二酚晶體。[0034]在本發(fā)明的方法中，采用工業(yè)大麻的花葉粉作為原料。該原料可以直接商業(yè)購(gòu)得，也可以從工業(yè)大麻的植物經(jīng)干燥、研磨、篩分等步驟來(lái)獲得。在一些實(shí)施方式中，工業(yè)大麻花葉粉的平均粒徑為50-100目。優(yōu)選地，工業(yè)大麻花葉粉的粒徑為60-80目。過(guò)大的粉末顆粒需要較長(zhǎng)的時(shí)間進(jìn)行處理；而過(guò)小的粉末顆粒則容易吸濕、粘結(jié)，漂浮到環(huán)境中，且表面能過(guò)高，安全性風(fēng)險(xiǎn)較高。[0035]在步驟(1)中，脫羧步驟可以將花葉粉中的大部分酸性物質(zhì)轉(zhuǎn)化成中性物質(zhì)。需要選擇脫羧的時(shí)間和溫度，以獲得適于后續(xù)處理的物質(zhì)。過(guò)高的溫度會(huì)使某些活性物質(zhì)分解、蒸發(fā)、甚至碳化；而過(guò)低的溫度難以使酸性物質(zhì)脫羧，或者脫羧不完全，延長(zhǎng)脫羧所花費(fèi)的時(shí)間。優(yōu)選地，進(jìn)行脫羧步驟，以使至少97%的酸性大麻類物質(zhì)轉(zhuǎn)化成其中性形式同時(shí)確保小于5%的活性物質(zhì)分解或蒸發(fā)。在一些實(shí)施方式中，脫羧步驟可以在80至130℃的溫度下進(jìn)行。優(yōu)選地，脫羧步驟在90至120℃的溫度下進(jìn)行。在一些實(shí)施方式中，脫羧步驟進(jìn)行1.5至4h,優(yōu)選地進(jìn)行2至3h。[0036]在步驟(1)中，通過(guò)提取步驟，將花葉粉中的大麻二酚等活性物質(zhì)提取到有機(jī)溶劑中，然后將含大麻二酚的有機(jī)溶劑濃縮，得到提取物(浸膏)。可以通過(guò)常規(guī)的方法對(duì)有機(jī)溶劑進(jìn)行濃縮，例如常壓蒸發(fā)、減壓蒸發(fā)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)等?？梢赃M(jìn)行至少一次提取，優(yōu)選地進(jìn)行至少兩次提取。進(jìn)行多次提取時(shí)，將每次提取獲得的含大麻二酚的有機(jī)溶劑合并進(jìn)行濃縮。通常，為了操作簡(jiǎn)便并提高安全性，在常壓下進(jìn)行提取步驟。[0037]用于提取的溶劑是能夠較好地溶解大麻二酚的有機(jī)溶劑，同時(shí)其能夠容易地蒸發(fā)濃縮，以獲得含大麻二酚的提取物浸膏。在一些優(yōu)選的實(shí)施方式中，用于提取的溶劑是正己烷、石油醚、丙酮或其任意組合。更優(yōu)選地，采用正己烷作為用于提取的溶劑。[0038]根據(jù)原料的量或原料中大麻二酚的含量，可以選擇合適的用于提取的溶劑的量。優(yōu)選地，花葉粉的重量與每次用于提取的溶劑的量的重量比在1:4至1:10的范圍內(nèi)。更優(yōu)選地，花葉粉的重量與每次用于提取的溶劑的量的重量比在1:5至1:8的范圍內(nèi)。[0039]可以根據(jù)大麻二酚的溶解速率和在溶劑中的溶解度以及用于提取的溶劑等因素，來(lái)選擇合適的提取的溫度和時(shí)間。而且，在提取溫度下，溶劑和活性物質(zhì)不會(huì)大量蒸發(fā)。優(yōu)選地，提取步驟在高于室溫的溫度下進(jìn)行，以使大麻二酚表現(xiàn)出較高的溶解速率和在溶劑中的溶解度。在一些實(shí)施方式中，提取步驟在40至65℃的溫度下進(jìn)行。優(yōu)選地，可以在45至60℃下進(jìn)行提取。在一些的實(shí)施方式中，每次提取進(jìn)行1至3小時(shí)。優(yōu)選地，每次提取進(jìn)行1.5至2.5小時(shí)。[0040]在步驟(1)中，可以在脫羧步驟之前或者之后，進(jìn)行提取步驟。6[0041]在一些實(shí)施方式中，在步驟(1)中，在脫羧之后進(jìn)行提取。先對(duì)工業(yè)大麻的花葉粉進(jìn)行脫羧，再將經(jīng)脫羧的花葉粉進(jìn)行提取，獲得經(jīng)脫羧的提取物。[0042]在另一些實(shí)施方式中，在步驟(1)中，在脫羧之前進(jìn)行提取。先對(duì)工業(yè)大麻的花葉粉進(jìn)行提取，獲得含大麻二酚的提取物，再將含大麻二酚的提取物進(jìn)行脫羧，獲得經(jīng)脫羧的提取物。[0043]發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，在相同的條件(包括相同量的提取溶劑)下，采用不同的脫羧步驟和提取步驟的順序，獲得了基本上相同的總提取率；但是，在采用先提取后脫羧的方法時(shí)，脫羧步驟的原料明顯比采用先脫羧后提取的方法時(shí)少，這大大降低了脫羧步驟的能量消耗和處理時(shí)間。因此，在一些實(shí)施方式中，先提取后脫羧的方法是非常有利的，尤其對(duì)工業(yè)規(guī)模應(yīng)用來(lái)說(shuō)。[0044]在步驟(2)中，將經(jīng)脫羧的提取物與第一溶劑混合，在低溫下靜置沉淀，分離去除[0045]在沉淀法精制工藝中，所采用的第一溶劑(也稱為“沉淀精制溶劑”)可以是無(wú)水乙醇、丙酮、二氯甲烷或其任意組合。優(yōu)選地，采用無(wú)水乙醇、丙酮或及任意組合作為第一溶[0046]發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，通過(guò)特定地采用丙酮作為沉淀精制溶劑，獲得了比其他有機(jī)溶劑明應(yīng)用中，仍然能夠保持較高的總提取率，同時(shí)純度不顯著降低。[0047]這是非常出人預(yù)料的，因?yàn)楸绢I(lǐng)域技術(shù)人員在將生產(chǎn)規(guī)模進(jìn)行放大(例如擴(kuò)大100倍、200倍或500倍)時(shí)，總提取率、純度、生產(chǎn)效率等通常會(huì)受到不同總提取率明顯降低。而且，本領(lǐng)域中已知的溶劑種類繁多、性質(zhì)多樣，各溶劑的組合數(shù)量更加龐大。[0048]在靜置沉淀過(guò)程中，第一溶劑的量為提取物浸膏重量的5至15倍，優(yōu)選地8至12倍。更優(yōu)選地，第一溶劑的量為提取物浸膏重量的10倍。[0049]靜置沉淀過(guò)程優(yōu)選地在低于20℃的溫度下進(jìn)行，更優(yōu)選地在-20℃至15℃的溫度下進(jìn)行，甚至更優(yōu)選地在-10℃至10℃的溫度下進(jìn)行。最優(yōu)選地在4℃±1℃下進(jìn)行。[0050]靜置沉淀過(guò)程優(yōu)選地進(jìn)行2至8h,更優(yōu)選地3-5h。在一些優(yōu)選的實(shí)施方式中，靜置沉淀過(guò)程進(jìn)行4h。[0051]發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，采用上述優(yōu)選方案進(jìn)行靜置沉淀，能夠很好地使其他活性物質(zhì)在第一溶劑中沉淀，同時(shí)絕大部分的大麻二酚保持在第一溶劑中。知的離心機(jī)來(lái)進(jìn)行離心，例如由上海始恒儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)的DL-6000B型低速冷凍離心機(jī)和張家港市超群離心機(jī)有限公司生產(chǎn)型號(hào)為L(zhǎng)LW450臥式螺旋離心機(jī)。[0053]在步驟(3)中，將濃縮的提取物與第二溶劑混合。優(yōu)選地，濃縮的提取物與第二溶劑的重量比在1:2至1:6范圍內(nèi)，更優(yōu)選地在1:3至1:5范圍內(nèi)。[0054]在一些優(yōu)選的實(shí)施方式中，第二溶劑是石油醚和丙酮的混合溶液。更優(yōu)選地，石油醚與丙酮的體積比在15:1至10:1的范圍內(nèi)。在一些實(shí)施方式中，石油醚與丙酮的體積比為7[0055]濃縮的提取物溶解在第二溶劑中后，可以進(jìn)行過(guò)濾。在一些實(shí)施方式中，采用0.45微米的尼龍濾膜來(lái)進(jìn)行過(guò)濾，去除固體不溶物。[0056]在步驟(3)中，將濾液進(jìn)行高壓制備液相色譜。收集含大麻二酚的餾分，然后去除[0057]采用高壓制備液相色譜，可以大大提高純化效率，同時(shí)獲得穩(wěn)定的純化效果，明顯減小人為操作造成的偏差和引入的額外雜質(zhì)。獲得的含大麻二酚的餾分以及隨后的大麻二酚粗品均具有較高的可重復(fù)性，滿足質(zhì)量管理體系的要求，因此尤其適合用于工業(yè)生產(chǎn)。而常規(guī)的柱層析工藝等其他色譜分離方法無(wú)法滿足大規(guī)模應(yīng)用的要求。[0058]在高壓制備液相色譜中，可以采用直徑在200mm至1500mm范圍內(nèi)的制備柱。例如，的提取物的上樣量分別在180g-220g、200g-1200g、1.0kg-3.0kg、2.0kg-8.0kg、6kg-20kg或12kg-30kg的范圍內(nèi)。優(yōu)選地，相應(yīng)地，濃縮的提取物的上樣量分別在180g-220g、300g-[0060]在高壓制備液相色譜中，制備柱的長(zhǎng)度不受特別限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠合理地確定合適的制備柱長(zhǎng)度。例如，制備柱的長(zhǎng)度可以是20cm至100cm范圍內(nèi)。在一個(gè)示例性[0061]在高壓制備液相色譜中，優(yōu)選地，采用石油醚和丙酮作為流動(dòng)相。在用體積比12:1的石油醚和丙酮作為洗脫溶劑；在中間的洗脫階段中，采用體積比6:1的石油醚和丙酮作為洗脫溶劑；在最后的洗脫階段中，采用體積比1:1的石油醚和丙酮作為洗脫溶[0062]根據(jù)不同的制備直徑，選擇合適的流動(dòng)相的流速。優(yōu)選地，采用直徑為200mm的制備柱時(shí)，流速200-350ml/min;采用直徑為500mm的制備柱時(shí)，流速800-1000ml/min;采用直徑為1000mm的制備柱時(shí)，流速15-20L/min;或者，采用直徑為1200mm的制備柱時(shí)，流速16-的制備柱時(shí)，流速850-950ml/min;采用直徑為1000mm的制備柱時(shí)，流速16-17L/min;或者，采用直徑為1200mm的制備柱時(shí)，流速18-22L/min。發(fā)明柱直徑參數(shù)時(shí)，不僅盡可能提高了純化的效率，明顯縮短總提取時(shí)長(zhǎng)，而且獲得了較高的提[0063]在一些實(shí)施方式中，在制備柱中，色譜填料為SephadexLH-20羥丙基葡萄糖凝膠，平均粒徑20微米，孔徑100?至150?。[0064]在高壓制備液相色譜中，可以采用紫外檢測(cè)器來(lái)檢測(cè)餾分。在一些優(yōu)選的實(shí)施方[0065]在分析檢測(cè)部分，也可以采用高效液相色譜法檢測(cè)餾分。在一些優(yōu)選的實(shí)施方式中，采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱。柱長(zhǎng)可以為25cm,內(nèi)徑為4.6mm,粒徑為5.0μm。在用于檢測(cè)的色譜中，采用乙腈作為流動(dòng)相A,磷酸鹽緩沖液(pH=4)作為流動(dòng)相B。優(yōu)選地，可以按照A:B=85:15的體積比進(jìn)行洗脫。在一些優(yōu)選的實(shí)施方式中，洗脫液的流速可以是1ml/min。8[0066]除另有說(shuō)明外，在本發(fā)明的方法中，在高壓制備液相色譜中，將不符合純度要求的餾分合并，以回收樣品和溶劑。將回收的樣品和溶劑加入到濃縮的提取物，混合均勻，然后再進(jìn)行高壓制備液相色譜。[0067]在步驟(4)中，將大麻二酚粗品與結(jié)晶溶劑混合溶解。將溶液在低溫下進(jìn)行結(jié)晶，得到大麻二酚晶體。在步驟(4)的結(jié)晶中，結(jié)晶完成后使用結(jié)晶溶劑進(jìn)行反復(fù)淋洗，得到高純度且不含有致幻或成癮成分THC的大麻二酚晶體。[0068]優(yōu)選地，結(jié)晶在低于20℃的溫度下進(jìn)行，更優(yōu)選地在-20℃至15℃的溫度下進(jìn)行，甚至更優(yōu)選地在-10℃至10℃的溫度下進(jìn)行。最優(yōu)選地在4℃±1℃下進(jìn)行。[0069]結(jié)晶溶劑可以是石油醚、正己烷、乙醇中的一種或幾粗品重量的5至15倍，優(yōu)選地8至12倍。更優(yōu)選地，結(jié)晶溶劑的量為大麻二酚粗品重量的10[0070]結(jié)晶過(guò)程優(yōu)選地進(jìn)行8至24h,更優(yōu)選地10-20h。在一些優(yōu)選的實(shí)施方式中，結(jié)晶過(guò)程進(jìn)行12-15h。[0071]發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，采用上述優(yōu)選的范圍時(shí)，獲得了明顯更優(yōu)的結(jié)晶效果。獲得的大麻二酚晶體不僅具有較完整的形貌，而且晶體尺寸分布較窄，密度較高，顆粒流動(dòng)性好，有利于長(zhǎng)期貯存和運(yùn)輸。以采用活性炭、硅膠、氧化鋁中的一種或幾種作為脫色劑。脫色劑的用量為大麻二酚粗品重量的5%-20%,優(yōu)選地10%-15%。脫色時(shí)間不受特別的限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)實(shí)際需要和樣品狀態(tài)，能夠合理地確定脫色的時(shí)間。在一些實(shí)施方式中，脫色進(jìn)行10-30min。優(yōu)選[0073]步驟(4)中獲得的大麻二酚晶體包含至少99.3%的大麻二酚。在進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方式中，步驟(4)中獲得的大麻二酚晶體包含至少99.5%、甚至高達(dá)99.8%的的大麻二[0074]在本發(fā)明的方法中，除另有說(shuō)明外，步驟(1)-(4)中所用到的有機(jī)溶劑均可以回能夠提高產(chǎn)品的總提取率和純度。[0075]發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明的方法能夠以80%以上的總提取率，從花葉粉中獲得高純度大麻二酚晶體。在一些優(yōu)選的實(shí)施方式中，總提取率能夠達(dá)到85%以上，甚至達(dá)到90%以上。這在工業(yè)規(guī)模應(yīng)用中是極其有利。發(fā)明人調(diào)研并嘗試了多種現(xiàn)有技術(shù)的方案，總提取率均不太滿意，通常在70%左右、低于80%,無(wú)法滿足大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)的需求。[0076]此外，通過(guò)本發(fā)明的方法，能夠采用工業(yè)級(jí)的溶劑進(jìn)行大麻二酚晶體的制備，而無(wú)需采用純度更高的溶劑(例如，色譜純等級(jí))。這進(jìn)一步大大降低了本發(fā)明方法的成本，降低了對(duì)操作人員、設(shè)備的嚴(yán)格要求，簡(jiǎn)化了操作步驟，同時(shí)仍然能夠獲得較高的提取率和高純度的大麻二酚晶體。[0078]通過(guò)以下非限制性實(shí)施例和對(duì)比實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。除非另有聲明，以下實(shí)施例中所報(bào)道的所有份、百分比、倍數(shù)和比值都是基于重量計(jì)。而且，實(shí)施例中使用的所有試劑都可商購(gòu)并且可直接使用而無(wú)需進(jìn)一步處理。9[0079]材料和儀器[0080]供應(yīng)商工業(yè)大麻花葉粉云南牧亞農(nóng)業(yè)科技有限公司正己烷，工業(yè)級(jí)昆明權(quán)銘經(jīng)貿(mào)有限公司無(wú)水乙醇，工業(yè)級(jí)昆明權(quán)銘經(jīng)貿(mào)有限公司石油醚，工業(yè)級(jí)昆明權(quán)銘經(jīng)貿(mào)有限公司丙酮，工業(yè)級(jí)昆明權(quán)銘經(jīng)貿(mào)有限公司CBD和THC標(biāo)準(zhǔn)品北京芬格爾安科技有限責(zé)任公司由張家港市超群離心機(jī)有限公司生產(chǎn)的LLW450型臥式螺旋離心機(jī)。[0082]工業(yè)級(jí)高壓制備液相色譜系統(tǒng)：由江蘇漢邦科技有限公司生產(chǎn)，型號(hào)分別為溫設(shè)定為30℃。[0083]制備色譜柱填料為SephadexLH-20羥丙基葡萄糖凝膠，粒徑20μm,孔徑[0084]分析色譜柱填料為十八烷基硅烷鍵合硅膠，柱長(zhǎng)為25cm,內(nèi)徑為4.6mm,粒徑為5.0μm。采用乙腈作為流動(dòng)相A,采用磷酸鹽[0086]稱取10kg粒徑60目的CBD含量為0.94%的工業(yè)大麻花葉粉，在100℃下高溫脫羧[0087]然后，在加熱以保持在60℃溫度下，將脫羧的粉末與正己烷以1:6的重量比混合，在攪拌下進(jìn)行提取2h,回收含CBD的正己烷。再重復(fù)2次提取步驟。將回收的正己烷合并、蒸發(fā)濃縮，得到690g提取物浸膏，CBD含量為13.4%。[0088]將提取物浸膏與無(wú)水乙醇以1:10的重量比混合，并在4℃下靜置沉淀4h,然后DL-6000B型低速冷凍離心機(jī)在1000rpm轉(zhuǎn)速下離心分離去除沉降物。將含CBD的無(wú)水乙醇濃縮，得到580g處理后的浸膏，CBD含量為15.3%。[0089]稱取200g處理后的浸膏，并以1:3的重量比與石油醚和丙酮(石油醚和丙酮的體積比為12:1)的混合溶劑混合。將混合物在0.45微米的尼龍濾膜上過(guò)濾。將濾液進(jìn)樣到型號(hào)為DAC200的高壓制備液相色譜系統(tǒng)中，采用石油醚和丙酮為洗脫溶劑梯度洗脫(第0-2小時(shí)的初始洗脫過(guò)程中，采用12:1的的體積比；第3-4小時(shí)采用6:1的體積比；第5-6小時(shí)采用1:1的量為95.4%。[0090]將CBD粗品與正己烷以1:10的重量比混合。在攪拌下向混合物中加入CBD粗品重量的10%的活性炭，脫色20min后過(guò)濾。將濾液在4℃下放置結(jié)晶12h。然后進(jìn)行過(guò)濾，得到高純度白色CBD晶體27.3g,CBD含量為99.5%。[0091]經(jīng)計(jì)算，CBD總提取率為83[0093]稱取10kg粒徑60目的CBD含量為0.94%的工業(yè)大麻花葉粉，在100℃下高溫脫羧[0094]然后，在加熱以保持在60℃溫度下，將脫羧的粉末與95%乙醇以1:6的重量比混濃縮，得到1780g提取物浸膏，CBD含量為5.1[0095]將提取物浸膏與無(wú)水乙醇以1:10的重量比混合，并在4℃下靜置沉淀4h,然后低速冷凍離心機(jī)在1000rpm轉(zhuǎn)速下離心分離去除沉降物。將含CBD的無(wú)水乙醇濃縮，得到760g處理后的浸膏，CBD含量為11.6%。[0096]稱取200g處理后的浸膏，并以1:3的重量比與石油醚和丙酮(石油醚和丙酮的體積比為12:1)的混合溶劑混合。將混合物在0.45微米的尼龍濾膜上過(guò)濾。將濾液進(jìn)樣到型號(hào)為DAC200的高壓制備液相色譜系統(tǒng)中，采用石油醚和丙酮為洗脫溶劑梯度洗脫，流速300ml/[0097]將CBD粗品與正己烷以1:10的重量比混合。在攪拌下向混合物中加入活性炭，脫色20min后過(guò)濾。將濾液在4℃下放置結(jié)晶12h。然后進(jìn)行過(guò)濾，得到高純度白色CBD晶體19.8g,CBD含量為99.2%。[0098]經(jīng)計(jì)算，CBD總提取率為7[0099]實(shí)施例3[0100]稱取10kg粒徑60目的CBD含量為0.94%的工業(yè)大麻花葉粉，在100℃下高溫脫羧[0101]然后，在加熱以保持在60℃溫度下，將脫羧的粉末與正己烷以1:6的重量比混合，在攪拌下進(jìn)行提取2h,回收含CBD的正己烷。再重復(fù)2次提取步驟。將回收的正己烷合并、蒸發(fā)濃縮，得到690g提取物浸膏，CBD[0102]將提取物浸膏與丙酮以1:10的重量比混合，并在4℃下靜置沉淀4h,然后低速冷凍離心機(jī)在1000rpm轉(zhuǎn)速下離心分離去除沉降物。將含CBD的丙酮濃縮，得到405g處理后的浸膏，CBD含量為22.8%。[0103]稱取200g處理后的浸膏，并以1:3的重量比與石油醚和丙酮(石油醚和丙酮的體積比為12:1)的混合溶劑混合。將混合物在0.45微米的尼龍濾膜上過(guò)濾。將濾液進(jìn)樣到型號(hào)為DAC200的高壓制備液相色譜系統(tǒng)中，采用石油醚和丙酮為洗脫溶劑梯度洗脫，流速300ml/min。合并含CBD的溶劑，并蒸發(fā)去除溶劑，得到45.4gCBD粗品。通過(guò)HPLC對(duì)CBD粗品進(jìn)行分[0104]將CBD粗品與正己烷以1:10的重量比混合。在攪拌下向混合物中加入活性炭，脫色20min后過(guò)濾。將濾液在4℃下放置結(jié)晶12h。然[0105]經(jīng)計(jì)算，CBD總提取率[0106]實(shí)施例4[0107]稱取10kg粒徑60目的CBD含量為0.94%的工業(yè)大麻花葉粉，在100℃下高溫脫羧[0108]然后，在加熱以保持在60℃溫度下，將脫羧的粉末與正己烷以1:6的重量比混合，在攪拌下進(jìn)行提取2h,回收含CBD的正己烷。再重復(fù)2次提取步驟。將回收的正己烷合并、蒸11發(fā)濃縮，得到690g提取物浸膏，CBD[0109]將提取物浸膏與丙酮以1:10的重量比混合，并在4℃下靜置沉淀4h,然后低速冷凍離心機(jī)在1000rpm轉(zhuǎn)速下離心分離去除沉降物。將含CBD的丙酮濃縮，得到405g處理后的浸[0110]稱取250g處理后的浸膏，并以1:3的重量比與石油醚和丙酮(石油醚和丙酮的體積比為12:1)的混合溶劑混合。將混合物在0.45微米的尼龍濾膜上過(guò)濾。將濾液進(jìn)樣到型號(hào)為DAC200的高壓制備液相色譜系統(tǒng)中，采用石油醚和丙酮為洗脫溶劑梯度洗脫，流速300ml/[0111]將CBD粗品與正己烷以1:10的重量比混合。在攪拌下向混合物中加入活性炭，脫色20min后過(guò)濾。將濾液在4℃下放置結(jié)晶12h。然后進(jìn)行過(guò)濾，得到高純度白色CBD晶體45.1g,CBD含量為99.1%。[0112]經(jīng)計(jì)算，CBD總提取率為77.03%。[0114]稱取10kg粒徑60目的CBD含量為0.94%的工業(yè)大麻花葉粉，在100℃下高溫脫羧[0115]然后，在加熱以保持在60℃溫度下，將脫羧的粉末與正己烷以1:6的重量比混合，在攪拌下進(jìn)行提取2h,回收含CBD的正己烷。再重復(fù)2次提取步驟。將回收的正己烷合并、蒸發(fā)濃縮，得到690g提取物浸膏，CBD[0116]將提取物浸膏與丙酮以1:10的重量比混合，并在4℃下靜置沉淀4h,然后低速冷凍離心機(jī)在1000rpm轉(zhuǎn)速下離心分離去除沉降物。將含CBD的丙酮濃縮，得到405g處理后的浸膏，CBD含量為22.8%。[0117]稱取200g處理后的浸膏，并以1:3的重量比與石油醚和丙酮(石油醚和丙酮的體積比為12:1)的混合溶劑混合。將混合物在0.45微米的尼龍濾膜上過(guò)濾。將濾液進(jìn)樣到型號(hào)為DAC200的高壓制備液相色譜系統(tǒng)中，采用石油醚和丙酮為洗脫溶劑梯度洗脫，流速400ml/[0118]將CBD粗品與正己烷以1:10的重量比混合。在攪拌下向混合物中加入活性炭，脫色20min后過(guò)濾。將濾液在4℃下放置結(jié)晶12h。然后進(jìn)行過(guò)濾，得到高純度白色CBD晶體37.1g,CBD含量為98.9%。[0119]經(jīng)計(jì)算，CBD總提取率為79.04%。[0121]稱取10kg粒徑60目的CBD含量為0.94%的工業(yè)大麻花葉粉，在100℃下高溫脫羧[0122]然后，在加熱以保持在60℃溫度下，將脫羧的粉末與正己烷以1:6的重量比混合，在攪拌下進(jìn)行提取2h,回收含CBD的正己烷。再重復(fù)2次提取步驟。將回收的正己烷合并、蒸發(fā)濃縮，得到690g提取物浸膏，CBD含量為13.4%。[0123]將提取物浸膏與二氯甲烷以1:10的重量比混合，并在4℃下靜置沉淀4h,然后低速冷凍離心機(jī)在1000rpm轉(zhuǎn)速下離心分離去除沉降物。將含CBD的無(wú)水乙醇濃縮，得到672g處理后的浸膏，CBD含量為13.5%。[0124]稱取200g處理后的浸膏，并以1:3的重量比與石油醚和丙酮(石油醚和丙酮的體積比為12:1)的混合溶劑混合。將混合物在0.45微米的尼龍濾膜上過(guò)濾。將濾液進(jìn)樣到型號(hào)為DAC200的高壓制備液相色譜系統(tǒng)中，采用石油醚和丙酮為洗脫溶劑梯度洗脫，流速300ml/[0125]將CBD粗品與正己烷以1:10的重量比混合。在攪拌下向混合物中加入活性炭，脫色20min后過(guò)濾。將濾液在4℃下放置結(jié)晶12h。然后進(jìn)行過(guò)濾，得到高純度白色CBD晶體23.2g,CBD含量為95.8%。[0127]實(shí)施例7-參考實(shí)施例1的工業(yè)級(jí)規(guī)模應(yīng)用[0128]稱取1.5噸粒徑60目的CBD含量為0.94%的工業(yè)大麻花葉粉，在100℃下高溫脫羧2h。然后，在加熱以保持在60℃溫度下，將脫羧的粉末下進(jìn)行提取2h,回收含CBD的正己烷。再重復(fù)2得到99.3g提取物浸膏，CBD含量為13.3%。[0129]將提取物浸膏與無(wú)水乙醇以1:10的重量比混合，并在4℃下靜置沉淀4h,然后LLW450型臥式螺旋離心機(jī)在1000rpm轉(zhuǎn)速下離心分離去除沉降物。將含CBD的無(wú)水乙醇濃[0130]稱取15kg處理后的浸膏，并以1:3的重量比與石油醚和丙酮(石油醚和丙酮的體積比為12:1)的混合溶劑混合。將混合物在0.45微米的尼龍濾膜上過(guò)濾。將濾液進(jìn)樣到型號(hào)為DAC1200的高壓制備液相色譜系統(tǒng)中，采用石油醚和丙酮為洗脫溶劑梯度洗脫，流速20L/[0131]將CBD粗品與正己烷以1:10的重量比混合。在攪拌下向混合物中加入活性炭，脫色20min后過(guò)濾。將濾液在4℃下放置結(jié)晶12h。然后進(jìn)行過(guò)濾，得到高純度白色CBD晶體1.95kg,CBD含量為99.3%。[0132]經(jīng)計(jì)算，CBD總提取率為75[0133]實(shí)施例8-參考實(shí)施例3的工業(yè)級(jí)規(guī)模應(yīng)用[0134]稱取1.5噸粒徑60目的CBD含量為0.94%的工業(yè)大麻花葉粉，在100℃下高溫脫羧[0135]然后，在加熱以保持在60℃溫度下，將脫羧的粉末與正己烷以1:6的重量比混合，在攪拌下進(jìn)行提取2h,回收含CBD的正己烷。再重復(fù)2次提取步驟。將回收的正己烷合并、蒸[0136]將提取物浸膏與丙酮以1:10的重量比混合，并在4℃下靜置沉淀4h,然后LLW450型臥式螺旋離心機(jī)在1000rpm轉(zhuǎn)速下離心分離去除沉降物。將含CBD的丙酮濃縮，得到58.2kg處理后的浸膏，CBD含量為22.8%。[0137]稱取15kg處理后的浸膏，并以1:3的重量比與石油醚和丙酮(石油醚和丙酮的體積比為12:1)的混合溶劑混合。將混合物在0.45微米的尼龍濾膜上過(guò)濾。將濾液進(jìn)樣到型號(hào)為DAC1200的高壓制備液相色譜系統(tǒng)中，采用石油醚和丙酮為洗脫溶劑梯度洗脫，流速20L/[0138]將CBD粗品與正己烷以1:10的重量比混合。在攪拌下向混合物中加入活性炭，脫色20min后過(guò)濾。將濾液在4℃下放置結(jié)晶12h。然后進(jìn)行過(guò)濾，得到高純度白色CBD晶體3.2kg,CBD含量為99.6%。[0139]經(jīng)計(jì)算，CBD總提取率為87.7[0140]實(shí)施例9-在脫羧之前進(jìn)行提取[0141]在工藝條件和物料用量不變的情況下，將實(shí)施例3中提取步驟